依諾沙星片血藥濃度的測定及在健康志愿者體內(nèi)的藥動學(xué)研究

1、依諾沙星片血藥濃度的測定及在康健志愿者體內(nèi)的藥動學(xué)研究【摘要】目的:創(chuàng)立人血漿中依諾沙星濃度的高效液相色譜HPL要領(lǐng)，研究口服單劑量依諾沙星片后康健志愿者體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)歷程。要領(lǐng):康健志愿者20名，單劑量口服依諾沙星片0.4g，別離于服藥后24h內(nèi)多點抽取靜脈血。以HPL法測定血漿中依諾沙星的濃度。以DAS藥代動力學(xué)步伐盤算藥動學(xué)參數(shù)，闡發(fā)體內(nèi)的藥動學(xué)歷程。結(jié)果:依諾沙星片在(0.056.0)gL-1范疇內(nèi)線性干系精良(r=0.9999)，相對接納率均在85%115%范疇內(nèi)，絕對接納率大于75%；日內(nèi)和白天變異均小于15%。依諾沙星濃度重要藥代動力學(xué)參數(shù)為：Tax為(1.3500.580

2、)h；ax為(3.0290.671)gL-1；T1/2為(5.8350.908)h；AU(0-24)、AU(0-inf)別離為(17.6782.899)ghL-1和18.6853.172ghL-1。結(jié)論:本要領(lǐng)敏捷度高，選擇性好，重現(xiàn)性佳，可正確測定人血漿中依諾沙星的濃度，得當(dāng)藥動學(xué)研究，為臨床用藥提供引導(dǎo)根據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】依諾沙星高效液相色譜法藥代動力學(xué)依諾沙星Enxain，化學(xué)名為1-乙基-6-氟-1，4-二氫-4-氧代-7-1-哌嗪基-1，8-萘啶-3-羧酸倍半水合物，為三氟喹諾酮類抗菌藥，能通過按捺細(xì)菌的DNA盤旋酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶IV，按捺DNA的合成和復(fù)制而導(dǎo)致細(xì)菌殞命。其具有廣譜抗菌作

3、用，對大多數(shù)革蘭陽性菌和革蘭陰性菌具有精良的抗菌活性，對沙眼衣原體、支原體、軍團(tuán)菌具精良的抗微生物作用，對結(jié)核桿菌和非典范分枝桿菌也有抗菌活性1。本實行旨在創(chuàng)立簡樸快捷的檢測要領(lǐng)，研究依諾沙星片在中國康健志愿者體內(nèi)的藥代動力學(xué)，為臨床用藥提供參考根據(jù)。1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1藥品、試劑和儀器依諾沙星片規(guī)格：0.1g/片、氟羅沙星由湖北百科亨迪藥業(yè)提供。依諾沙星比較品由中國藥品生物成品檢定所提供。甲醇和乙腈為色譜純，由天津市科密歐化學(xué)試劑開拓中央提供。三氟乙酸為Siga公司產(chǎn)物064K3647。70%高氯酸、冰乙酸為闡發(fā)純，由天津市化學(xué)試劑三廠消費(fèi)。實行用水為本實行室廉價重蒸水。1.2受試者選擇按照藥

4、物制劑人體生物使用度和生物等效性試驗引導(dǎo)原那么2，拔取20名康健男性志愿者，年事2124歲，體重5577kg。受試者無煙酒嗜好，無神經(jīng)體系、精力非常及代謝非常等病史，血尿通例、肝腎成效及心電圖等查抄均正常。受試前2周至整個試驗期間禁煙、酒和禁服其他任何藥物。試驗方案經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會容許，受試者均簽訂知情同意書。1.3給藥要領(lǐng)和樣品網(wǎng)羅20名受試者禁食12h后，于越日清早空腹口服單劑量依諾沙星片0.4g，200l溫開水送服，服藥2h前方可飲水，4h后進(jìn)同一餐。服藥前取空缺血，服藥后別離于0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、24h取靜脈血3.0l，注入肝素化的試管，

5、離心3000rin-110in，取血漿，-65冰凍保存?zhèn)錅y。1.4血漿樣品處置懲罰及血藥濃度測定1.5血漿尺度曲線的制備和定量下限1.6要領(lǐng)學(xué)觀察1.7統(tǒng)計學(xué)處置懲罰要領(lǐng)用DASDrugAndStatistis，versin2.0步伐處置懲罰，非房室模子盤算藥動學(xué)參數(shù)。ax和Tax均為實測值；AU為DAS盤算所得。2結(jié)果2.1要領(lǐng)學(xué)依諾沙星的色譜舉動見圖1。表現(xiàn)其保存時間為2.9in，內(nèi)標(biāo)氟羅沙星的保存時間為3.5in。兩峰分散完全。正確度、接納率、不變性實行結(jié)果如表14。依諾沙星血漿樣品的日內(nèi)白天細(xì)密度尺度缺點均在10%以內(nèi)，相對接納率尺度缺點在5%以內(nèi)，絕對接納率在75%以上。在室溫安排1

6、2h以內(nèi)測定，結(jié)果沒有顯著變革；-65冰箱冰凍條件下冷藏1個月內(nèi)測定，結(jié)果同樣無顯著變革。以上說明血漿樣品具有較好的細(xì)密度和正確性，在室溫安排和冰凍保存條件下表示出精良的不變性。3討論伊諾沙星血藥濃度的HPL檢測法，文獻(xiàn)3-5報道多以檸檬酸-甲醇-乙腈作活動相為主。本研究曾參照該條件舉行闡發(fā)，但未獲得精良的分散結(jié)果。由于伊諾沙星分子布局中的胺基和羧基能在水溶液中解離，故思量單獨以乙腈-水或甲醇-水為活動相，會出現(xiàn)色譜峰拖尾、對稱性差、分散度低和保存值不不變等題目，而接納離子按捺或離子對色譜能降服這些缺點6。三氟乙酸是離子對試劑常見的本領(lǐng)?；顒酉嘀械娜宜嵬ㄟ^與疏水鍵合相和殘留的極性外貌以多種

7、形式彼此作用，來改進(jìn)峰形、降服峰展寬和拖尾題目。別的，三氟乙酸的紫外最大汲取峰低于200n，檢測滋擾校其添加在活動相中的濃度一樣平常為0.1%，在該濃度下，大部門反相色譜柱都可以產(chǎn)生精良的峰形，故本研究以乙腈-0.1%三氟乙酸-水20：20：60，V/V/V為活動相，并獲得了精良的分散結(jié)果。如圖1所示，可見出峰對稱，無雜質(zhì)滋擾，專屬性高。且闡發(fā)時間僅為4in，得當(dāng)臨床血藥濃度的闡發(fā)監(jiān)測，有利于個別化用藥的開展。依諾沙星在整個紫外區(qū)均有汲取，210n、270n和342n處有汲取峰，由于270n為最大汲取，故文獻(xiàn)3-7報道多以270n擺布作為檢測波長，但本研究思量到342n處血漿內(nèi)源性物質(zhì)少，為制止滋擾，接納342n作檢測波長，得到干凈利落的檢測峰形。對血漿樣品的處置懲罰我們接納35%高氯酸卵白沉淀法，較萃取法4，5操縱輕便，本錢低廉，且專屬性高，分散完全，有較高的接納率和細(xì)密度，實用于依諾沙星人體藥代動力學(xué)和血藥濃度闡發(fā)。本研究所得血藥濃度數(shù)據(jù)及重要藥物動力學(xué)參數(shù)與文獻(xiàn)報道4，5根本同等。其達(dá)峰時間較短，Tax為1.3500.580h，T1/2為5.8350.908h，AU(0-24)、AU(0-inf)別離為17.6782.899ghL-1和18.6853.17