生化儀臨床應用課件

1、全自動生化分析儀的1全自動生化分析儀的1內容了解生化分析儀的分類常用的分析方法生化儀的參數設置生化儀的校準質量控制使用常見問題維護與保養(yǎng)2內容了解生化分析儀的分類2生化分析儀的分類按反映裝置的結構連續(xù)流動式（空氣分段系統(tǒng)與非分段系統(tǒng)離心式分離式：目前最廣泛的應用于臨床干化學法干片式按自動化程度分全自動與半自動按檢測項目可分單通道與多通道按儀器的復雜程度可分小型、中型、大型3生化分析儀的分類按反映裝置的結構3連續(xù)流動式【結構】樣品盤、比例表、混合器、透析器【工作原理】 通過電腦來控制比例泵，將樣本和實際注入到連續(xù)的管道系統(tǒng)中，在一定溫度下完成混合、去干擾、保溫、比色測定，經信號放大、運算處理最后

2、顯示結果并打印【儀器特點】 在檢測過程中，樣品與樣品之間需要用空氣進行隔離，或是用空白試劑緩沖液/惰性液來隔離空氣分段系統(tǒng)：防止交叉污染非空氣分段系統(tǒng)試劑分段系統(tǒng)，每一次進樣必須在前一樣品檢測完畢才能開始，不能連續(xù)一次進樣。4連續(xù)流動式【結構】4離心式【結構】加樣：樣品盤、吸樣臂、試劑臂和電子控制部分分析單元：離心轉盤、溫控器、光學系統(tǒng)、信息處理與顯示系統(tǒng)。【工作原理】 先將樣品和試劑分別置于轉盤相應的凹槽內，在離心力的作用下，樣品和試劑被甩到轉盤外的比色槽內并相互混合繁盛反應，一定時間后進行比色?！緝x器特點】 反應器就是轉盤，整個分析過程的每一步驟幾乎同時完成，分析速度快，適合同一項目的批量

3、檢測。5離心式【結構】5分立式【結構】 樣品處理系統(tǒng)：模仿人工操作，識別樣品與試劑加入到反應器中，有試劑盤，樣品架、加液器、和攪拌器等光學系統(tǒng)：光源、分光、比色、和信號揀流溫控系統(tǒng)：保持反應體系的溫度恒定，有水浴、空氣浴和液相流動恒溫系統(tǒng)清洗：吸、注、擦：吸走廢液-注入洗滌液或水、擦干杯內壁計算機處理系統(tǒng)：識別樣品與試劑并完成樣品與試劑的加入與混合，最終處理計算數據并打印?！竟ぷ髟怼?以人工操作的工作模式，用機械臂代替人工手臂的工作，按設定的程序完成各項操作【特點】 樣品與試劑有固有的試劑或樣本反映盤，個項目在各自的反應杯中獨立進行。6分立式【結構】6分離式模式圖7分離式模式圖7干片式【儀器

4、類型】反射光度法：對試紙條上反應區(qū)通過反射光光度法進行判別。膠片涂層分析：把試劑片置于多層涂膜的反應片上進行檢測，可檢測一個到幾十個項目項目袋式分析儀：將時間與樣本同時置于反應袋中反映完畢將袋中物做成比色物質來檢測【特點】 液相反應在固相載體上進進行，化學、光學、酶學、計算、于一身，操作簡單檢測速度快，適于急診或床前檢測。8干片式【儀器類型】8性能評價【自動化程度：根據實驗室的規(guī)模來制定【分析效率】根據工作量及樣本的多少來確定選擇儀器的反應速度?！緫梅秶扛鶕z測項目來選擇【準確度與精密度】越高越好【試劑的開放程度】開放程度越高靈活性越大，但是系統(tǒng)的穩(wěn)定性稍差9性能評價【自動化程度：根據實驗

5、室的規(guī)模來制定9常用的分析方法終點法連續(xù)監(jiān)測法比濁法均相酶免疫分析10常用的分析方法終點法10終點法單點檢測：使用一種或是兩種試劑，檢測反應到達終點時的吸光度如-ALB、TP等兩點法：又稱固定時間法，使用雙試劑或単試劑，如苦味酸測肌酐雙波長的作用：消除背景干擾11終點法單點檢測：使用一種或是兩種試劑，檢測反應到達終點時的吸連續(xù)監(jiān)測法1.一步法：酶的檢測底物就是所檢測的物質 Ea Ei2.酶偶聯反應：s1+s2p1+p2p3+p4Ea：輔酶Ei：指示酶12連續(xù)監(jiān)測法1.一步法：酶的檢測底物就是所檢測的物質12比濁法 檢測物質對光的散射或透射強度，測定的是濁度而非比色，可用于終點分析，也可用于動態(tài)

6、分析?；瘜W比濁：血清中K、Na離子的檢測免疫比濁：透射比濁/散射比濁，透射比濁采用終點法，自動生化儀最常用，一般用作特定蛋白的檢測，如：載脂蛋白、急時相蛋白、藥物，而散射比濁用的儀器是特制的。13比濁法 檢測物質對光的散射或透射強度，測定全自動生化儀參數樣品與試劑量的設置檢測方法波長溫度分析時間校正方法14全自動生化儀參數樣品與試劑量的設置14樣品與試劑的量與方法【樣品與試劑量】以手工法按比例縮減根據儀器的特性確定加樣量范圍，最小反應體積等情況自行設計 考慮到檢測的靈敏度與線性范圍，試劑與樣本量需要的多少是衡量一臺儀器品質的重要指標【檢測方法】 根據所做的項目及儀器的方法來設定終點法、動力學法

7、（上升或下降）15樣品與試劑的量與方法【樣品與試劑量】15波長吸收曲線的低谷是空白波長，吸光度大而且平的波長為分析波長；若使用光柵或單色光器，光路采用后分光，波長更準確。單波長：測定體系中含有一種組分或待測組分的吸收波長與其他共存的物質的吸收波長無重疊，有幾個吸收峰的物質一般選擇最大吸收峰或是吸收峰處吸光度隨波長變化較小的的波長雙波長：干擾物的光吸收會出現光散射或是非特異性光吸收主波長：待測物特定的吸收波長副波長：干擾物在主波長的吸收與副波長的吸光率越接近越好如：己糖激酶法檢測GLU，為了消除Hb的干擾選擇340/380nm16波長吸收曲線的低谷是空白波長，吸光度大而且平的波長為分析波長溫度與

8、分析時間【分析溫度】 一般設定在體溫（370C)【分析時間】1終點法：一般是選擇開始的時間（即選擇實際與樣本的混合瞬間，這樣可以除去實際與樣本的空白）結束時間一般以反應達終點時的時間來計算A=A2-A1A2：終末吸光度A1：初始吸光度2.動態(tài)分析時間：選定讀數的起始點。也就是說延遲時間按后開始，結束時間一定要在線性反應期內。計算按下公式：A/min=(A末-A始)/(T末-T始)17溫度與分析時間【分析溫度】17分析儀的校準儀器校準：波長、溫度、加樣量、空白吸光度（一般由廠家來完成）項目校準：是常規(guī)工作進行的，也就是我們所說的調標。基質效應：樣本校準物處于相同的條件下進行校準物的選擇：應該溯源

9、的國際或國家的參考方法附：不允許用定值質控品代替校準物質。18分析儀的校準儀器校準：波長、溫度、加樣量、空白吸光度（一般由分析儀的校準【校準頻率】系統(tǒng)校準：若是封閉系統(tǒng)則校準周期可以長一些，若是開放系統(tǒng)校準頻率應該高一點。更換試劑或是批號不同時應該校準后再用。室內質量控制出現異常波動或 偏移好時，此項目應該重新校正。儀器更換部件或是大修過以后所有項目均應該矯正一次。19分析儀的校準【校準頻率】19分析儀的校準【校準方法】校準物的選擇：1.兩點法校準：多數非酶類的檢測使用兩點校準，其曲線應該是過原點的一條直線。2.多點校準:應用一定梯度的校準液進行校準，多數是免疫透射比濁檢測使用，由于其線性較差

10、，所以選擇多點校準。3.因數校準：酶類檢測應用較多，近年來推出的酶類標準品也可以采用兩點校準。20分析儀的校準【校準方法】20質量控制準備：人員培訓、建立sop文件、做好儀器的檢定與校準。選擇質控品：一般選擇兩個水平的含量，其中之一要有一個正常水平的，另一個可以是臨床水平或是超臨床水平的。測定頻率質控規(guī)則的選擇畫質控圖失控結果的分析與處理21質量控制準備：人員培訓、建立sop文件、做好儀器的檢定與校準質控品的選擇與準備與待檢樣品的性質相同或是相似均勻恒定，最少使用半年瓶間變異應該小于分析系統(tǒng)的變異可采用商品的，也可使用實驗室自制其濃度與含量應該可以反映臨床意義的范圍不能作為校準物使用22質控品

11、的選擇與準備與待檢樣品的性質相同或是相似22質控品的檢測頻率在每一個項目的分析批次內必須做一次質控檢測儀器或試劑廠家應該對質控項目的檢測頻率作出相應的指導用戶可以根據不同的情況增加或減少頻率23質控品的檢測頻率在每一個項目的分析批次內必須做一次質控檢測2質量控制規(guī)則通過檢查質控數據作出有效的判斷指控界限的使用一般是均值與不同倍數的標準差。如：2倍內認可，1-3倍超控.3倍外失控24質量控制規(guī)則通過檢查質控數據作出有效的判斷24標準質控圖25標準質控圖25失控的處理與分析通過原始數據初步估計失控的原因對具體的檢測過程做回顧分析通過有選擇性的復查進一步判斷失控的原因并找出處理的辦法26失控的處理與

12、分析通過原始數據初步估計失控的原因26全自動生化分析儀使用過程中常見的問題攜帶和交叉污染多數一起存在的問題常規(guī)工作中容易被忽視引起不確定性的因素比較多27全自動生化分析儀使用過程中常見的問題攜帶和交叉污染27攜帶和交叉污染產生的原因公有化：一臺儀器檢測多個項目共有一個探針、樣品針、攪拌器和管道隨著生化儀處理能力的提高一臺儀器上所做的項目與方法學也很多使用不當：操作人員使用生化儀或進行的保養(yǎng)時方法不當，導致儀器及管道污染。儀器老化：使用時間過長，部件老化沖洗站功能下降清洗液使用不當檢測項目排列不合理：由于試劑組成成分會影響千貨檢測項目的結果。28攜帶和交叉污染產生的原因公有化：一臺儀器檢測多個項

13、目共有一個攜帶污染的檢測與計算高值水平生理鹽水1:1000稀釋的樣本共檢測29次鹽水的均值為A，稀釋后樣本為B交叉污染率=（A/B*1000）*100%判斷標準，0.3%為正常29攜帶污染的檢測與計算攜帶和污染常見的組合IALT(IFCC)AST(IFCC)試劑中含有高活力的LDH成分，對LDH的檢測可能帶來干擾ALP (IFCC) CK(NAC)CK-MB(NAC)CO2(PEPC)AMY(EPS)等試劑中含有Mg2+，對Mg2+的檢測帶來影響30攜帶和污染常見的組合IALT(IFCC)AST(IFCC)攜帶和污染常見的組合II磷酸鹽緩沖液可能對CHE CHO GLU UA HBDH帶來污染

14、CK試劑中含有GLU的成分，若是下一測試是glu就會有影響膽固醇試劑中含膽酸鹽，會對總膽汁酸的檢測帶來影響淀粉酶試劑含有鈣離子會影響離子鈣的檢測31攜帶和污染常見的組合II磷酸鹽緩沖液可能對CHE CHO G攜帶和污染常見的組合III釩氧化法檢測膽紅素不能排在富有堿性試劑測定的項目之后，如：ALB ALP Ca Mg Cr等過氧化物酶反應系統(tǒng)的測定項目不要排在一起，因為基于Trinder反應的高含量測定項目和低含量的測定項目之間有交叉污染。32攜帶和污染常見的組合III釩氧化法檢測膽紅素不能排在富有堿性解決方案正確的安裝操作規(guī)程維護和保養(yǎng)儀器，并定期評估熟知各種試劑的組成成分正確排列順序把容易

15、受到干擾的排在最前面規(guī)定解決方法：如變換試劑位、選擇特殊的清洗劑，則加洗滌次數。33解決方案正確的安裝操作規(guī)程維護和保養(yǎng)儀器，并定期評估33常用的排列順序 ALT AST ALP GGT CHE TP ALB TBil DBil UA CR CK CK-MB HBDH LDH GLU TG CHO HDL apoA1 apoB AMY CO2 P Ca Mg2+ CL34常用的排列順序 ALT AST ALP GGT CH保養(yǎng)日、周、月、季、年。35保養(yǎng)日、周、月、季、年。35硬件設施純水機Ups電源外接電腦廢液排放管道實驗室環(huán)境：溫度、濕度最重要，要有每天的工作記錄36硬件設施純水機36日維護室內環(huán)境因素要符合儀器要求正常開關機日常清洗儀器及管道檢測試劑量表面清理（以上均應