遺傳病的中醫(yī)治療培訓課件

1、遺傳病的中醫(yī)治療遺傳病的中醫(yī)治療教學要求1掌握：遺傳病治療的基本方法；基因治療的基本概念、策略、途徑和方法。飲食治療、藥物治療的一般原則。2了解：遺傳病的手術治療、藥物治療；基因治療目前存在的問題和基因治療的臨床應用。遺傳病的中醫(yī)治療2教學要求1掌握：遺傳病治療的基本方法；基因治療的基本概 手術治療 1 藥物治療 2 飲食治療 3 基因治療 4遺傳病的中醫(yī)治療3 手術治療 1 藥物治療 2 飲食治療 3 基因治療 第1節(jié) 手術治療遺傳病的中醫(yī)治療4第1節(jié) 手術治療遺傳病的中醫(yī)治療4遺傳病組織器官已出現(xiàn)損傷，用外科手術對病損器官進行修復、切除或組織器官移植，可以有效改善某些癥狀。一、手術修復二、

2、手術去除三、組織器官移植遺傳病的中醫(yī)治療5遺傳病組織器官已出現(xiàn)損傷，用外科手術對病損器官進行修復、切除Wilson病致病機制p104銅 銅藍蛋白 P型銅轉運ATP酶 從膽汁排出 儲存于血漿、組織 銅肝細胞聚集 銅入血，沉積于腦、腎、角膜等組織致病 肝細胞壞死 遺傳病的中醫(yī)治療6Wilson病致病機制p104銅 銅藍蛋白 P型銅第2節(jié) 藥物治療遺傳病的中醫(yī)治療7第2節(jié) 藥物治療遺傳病的中醫(yī)治療7對癥治療原則：補其所缺、去其所余1、補其所缺（補充療法）針對病因，補充其所缺乏的物質(zhì)。如：補充代謝物、輔助因子、激素、酶等。遺傳病的中醫(yī)治療8對癥治療遺傳病的中醫(yī)治療8甲型血友病抗血友病球蛋白垂體性侏儒癥

3、者生長激素家族性甲狀腺腫甲狀腺制劑免疫缺陷病人免疫球蛋白先天性睪丸發(fā)育不全睪酮先天性性腺不全患者雌激素遺傳病的中醫(yī)治療9甲型血友病抗血友病球蛋白遺傳病的中醫(yī)治療9對癥治療原則：補其所缺、去其所余1、補其所缺（補充療法）針對病因，補充其所缺乏的物質(zhì)。如：補充代謝物、輔助因子、激素、酶等。2、去其所余（排除療法）針對病因，排除其所堆積的物質(zhì)。遺傳病的中醫(yī)治療10對癥治療遺傳病的中醫(yī)治療10用理化方法將多余物質(zhì)清除或排除：如：用青霉胺或鋅劑加速銅離子的清除來改善肝豆狀核變性的癥狀；血漿置換和血漿過濾治療家族性高膽固醇血癥。用代謝抑制劑降低代謝缺陷病的代謝率：如：別嘌呤醇可抑制黃嘌呤氧化酶，減少尿酸形

4、成，治療原發(fā)性痛風和自毀容貌綜合征。減少對所忌物質(zhì)的吸收：如：苯酮尿癥患者口服苯丙氨酸氨酶膠囊，使苯丙氨酸轉化成苯丙烯酸而減少吸收。 遺傳病的中醫(yī)治療11用理化方法將多余物質(zhì)清除或排除：遺傳病的中醫(yī)治療11第3節(jié) 飲食治療遺傳病的中醫(yī)治療12第3節(jié) 飲食治療遺傳病的中醫(yī)治療12一、飲食控制的一般原則 禁其所忌（1）制定特殊食譜半乳糖血癥患兒（避免乳類食品的攝入）家庭性高膽固醇血癥患者（低膽固醇飲食治療）苯丙酮尿癥患兒（低苯丙氨酸奶粉及飲食）（2）減少患者對所忌物質(zhì)的吸收家族性高膽固醇血癥患者（服用糠麩）遺傳病的中醫(yī)治療13一、飲食控制的一般原則 禁其所忌遺傳病的中醫(yī)治療13二、把握時機 （一）

5、飲食治療越早越好應盡量在損害發(fā)生前進行治療。（二）飲食治療適應病情飲食治療應隨病情的發(fā)展而有所改變以有效的控制疾病。遺傳病的中醫(yī)治療14二、把握時機 （一）飲食治療越早越好遺傳病的中醫(yī)治療14第4節(jié) 基因治療遺傳病的中醫(yī)治療15第4節(jié) 基因治療遺傳病的中醫(yī)治療15基因治療（gene therapy）：是運用DNA重組技術修復患者細胞中有缺陷的基因，使細胞恢復正常功能而達到治療遺傳病的目的。遺傳病的中醫(yī)治療16基因治療（gene therapy）：是運用DNA重組技術修一、基因治療的策略和途徑（一）基因治療的策略2基因置換 3基因增補4基因干預1基因修正遺傳病的中醫(yī)治療17一、基因治療的策略和途

6、徑（一）基因治療的策略2341遺傳病的一、基因治療的策略和途徑（二）基因治療的途徑1生殖細胞基因治療 2體細胞 基因治療遺傳病的中醫(yī)治療18一、基因治療的策略和途徑（二）基因治療的途徑1生殖細胞基因治二、基因治療的方法直接體內(nèi)療法：將目的基因直接導入體內(nèi)有關的組織或器官，使其進入相應的細胞并進行表達。（未廣泛運用）間接體內(nèi)療法：將目的基因?qū)牒线m的靶細胞，經(jīng)過篩選并增殖，回輸給患者，使該基因在患者體內(nèi)有效表達相應產(chǎn)物。（常用方式）遺傳病的中醫(yī)治療19二、基因治療的方法直接體內(nèi)療法：將目的基因直接導入體內(nèi)有關的間接體內(nèi)療法的基本過程（一）克隆正常基因 （二）靶細胞的選擇 （三）目的基因的轉移 （

7、四）基因轉染細胞的篩選（五）基因轉染細胞的鑒定（六）回輸體內(nèi) 遺傳病的中醫(yī)治療20間接體內(nèi)療法的基本過程（一）克隆正?；?（二）靶細胞的選擇方法：人工合成、從基因組或通過RNA反轉錄等方法獲得。間接體內(nèi)療法（一）克隆正?；?遺傳病的中醫(yī)治療21方法：間接體內(nèi)療法（一）克隆正?；?遺傳病的中醫(yī)治療21靶細胞（target cell）是指接受轉移基因的體細胞。靶細胞應滿足下列條件：易于取材；具有增殖優(yōu)勢，生命周期長，便于體外培養(yǎng)；便于進行遺傳技術操作，易受外源DNA轉化；安全回輸；靶向性。目前使用得較多的是造血干細胞、皮膚成纖維細胞、肝細胞、血管內(nèi)皮細胞和肌細胞等。 （二）靶細胞的選擇 間接

8、體內(nèi)療法遺傳病的中醫(yī)治療22靶細胞（target cell）是指接受轉移基因的體細胞。（ 基因轉移是指將外源基因?qū)氚屑毎麅?nèi)。1、化學法應用磷酸鈣沉淀法改變細胞膜通透性，以加強細胞從培養(yǎng)液中攝取DNA的能力。轉移效率低，成功率約為1/102103。（三）目的基因的轉移 間接體內(nèi)療法遺傳病的中醫(yī)治療23 基因轉移是指將外源基因?qū)氚屑毎麅?nèi)。（三）目的基因的轉2、物理法（1）電穿孔法借助電流穿擊靶細胞膜使其對DNA通透性增加。有可能使細胞受到損傷。（2）顯微注射法用顯微技術向細胞核內(nèi)直接注射外源基因。主要應用于轉基因動物。間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療242、物理法間接體內(nèi)療法

9、（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（3）微粒子轟擊法利用亞微粒鎢或金吸附DNA，包裹形成微粒，利用基因槍技術使微粒高速進入靶細胞。間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療252、物理法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（1）化學法（2）顯微注射法（3）微粒子轟擊法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療262、物理法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療3、載體介導基因轉移載體能將外源基因特異的轉移至靶細胞。分為：病毒載體非病毒載體間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉移 遺傳病的中醫(yī)治療273、載體介導基因轉移病毒載體非病毒載體

10、間接體內(nèi)療法（三）目的病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。 病毒介導基因轉移(virus mediated gene transfer)是指以病毒為載體，將外源性目的基因通過基因重組技術，組裝到病毒載體上，并使重組病毒感染受體宿主細胞，完成基因轉移。病毒載體間接體內(nèi)療法遺傳病的中醫(yī)治療28病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。 病毒載體間接體內(nèi)療法種類：（1）反轉錄病毒載體（2）腺 病 毒（3）腺病毒相關病毒（腺伴隨病毒）遺傳病的中醫(yī)治療

11、29病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。 病毒載體間接體內(nèi)療法優(yōu)點：轉染效率高缺點：存在疫原性、細胞毒作用、攜帶外源基因的大小受限、病毒滴度不易提高。遺傳病的中醫(yī)治療30病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目非病毒載體間接體內(nèi)療法缺點：轉染效率較低優(yōu)點：安全、制備簡單和攜帶外源基因較大。 種類：（1）脂質(zhì)體（2）真核細胞表達質(zhì)粒載體（3）非生物性聚合載體（4）人工染色體遺傳病的中醫(yī)治療31非病毒載體間接體內(nèi)療法缺點：種類：遺傳病的中醫(yī)治療31間接體內(nèi)療法1、克隆正

12、?；?2、靶細胞的選擇 3、目的基因的轉移 4、基因轉染細胞的篩選5、基因轉染細胞的鑒定6、回輸體內(nèi) 遺傳病的中醫(yī)治療32間接體內(nèi)療法1、克隆正?；?2、靶細胞的選擇 3、目的基因四、基因治療的臨床運用1.腺苷脫氨酶缺乏嚴重聯(lián)合免疫缺陷?。╝denosine deaminase-deficient severe combined immunodeficiency ， ADA-SCID）遺傳病的中醫(yī)治療33四、基因治療的臨床運用1.腺苷脫氨酶缺乏嚴重聯(lián)合免疫缺陷?。ㄖ匕Y聯(lián)合免疫缺陷（Severe combined immunodeficiency disease，簡稱SCID），患者缺乏正常

13、人體免疫功能，其染色體上編碼腺苷脫氨酶（簡稱ADA）的基因發(fā)生突變所致。由于ADA是嘌呤代謝中的一種酶，該基因缺陷將導致患者身體細胞中脫氧腺苷的累積，達到高濃度時脫氧腺苷將對免疫系統(tǒng)細胞（如T-細胞和B-細胞）產(chǎn)生毒性。Ashanti DiSilva, the first person to be treated by gene therapy. 遺傳病的中醫(yī)治療34重癥聯(lián)合免疫缺陷（Severe combined immun將正常ADA基因與反轉錄病毒載體相連，構建重組病毒表達載體。從患體體內(nèi)分離有免疫缺陷的T淋巴細胞。用重組病毒感染體外培養(yǎng)的T淋巴細胞，使正常ADA基因插入到T淋巴細胞基因

14、組中。培養(yǎng)細胞并確認該基因正常表達。將含有正常基因的T淋巴細胞回輸?shù)交颊叩墓撬杞M織中。經(jīng)5-6個月治療，患者體內(nèi)T淋巴細胞的數(shù)量恢復到正常水平，體內(nèi)ADA酶幾乎達到正常水平，免疫功能得到恢復。1990年，美國第一次對SCID病人作基因治療，其步驟為：遺傳病的中醫(yī)治療35將正常ADA基因與反轉錄病毒載體相連，構建重組病毒表達載體。四、基因治療的臨床運用2、血友病B 血漿中缺乏凝血因子所致我國人體基因治療第一成功的個例子。1991,薛京倫 (復旦大學)攜帶人F因子cDNA 的逆轉錄病毒載體(HBSF - F)皮膚成纖維細胞Factor IX: 5%遺傳病的中醫(yī)治療36四、基因治療的臨床運用2、血友

15、病B 1991,薛京倫 (復旦細胞因子19841987年，淋巴激活的殺傷細胞(LAK)3、腫瘤的基因治療1986年，腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)結合IL-21991年，腫瘤壞死因子(TNF)治療黑色素瘤四、基因治療的臨床運用遺傳病的中醫(yī)治療37細胞因子19841987年，淋巴激活的殺傷細胞(LAK)3細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用1992年，單純庖疹病毒（HSV）-胸腺嘧啶激酶（TK） 和 GCV（Ganciclovir藥物）“自殺基因”遺傳病的中醫(yī)治療38細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用1992年，單純細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用“自殺基因”腫瘤抑制基

16、因pRB, p53, p16, p21, p27遺傳病的中醫(yī)治療39細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用“自殺基因”腫瘤細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用“自殺基因”腫瘤抑制基因應用納米顆粒傳遞基因阻斷腫瘤新生血管生成 2002年，美國Hood等人應用陽離子納米顆粒轉導目的基因，阻斷腫瘤組織新生血管生成。遺傳病的中醫(yī)治療40細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用“自殺基因”腫瘤123存在的問題導入基因的持續(xù)表達導入基因的高效表達安全性問題遺傳病的中醫(yī)治療41123存在的問題導入基導入基安全性遺傳病的中醫(yī)治療41小 結掌握：基因治療的定義、策略和途徑基因治療的基本方法：克

17、隆正?；蚍椒?、基因轉移方法和載體、靶細胞選擇。藥物治療和飲食治療的基本原則了解：目前基因治療存在的問題遺傳病的中醫(yī)治療42小 結掌握：遺傳病的中醫(yī)治療42復習思考題1、傳統(tǒng)的遺傳病治療包括哪幾個方面，各有什么優(yōu)缺點？2、何謂基因治療？目的基因轉移有哪幾種方法？各有何優(yōu)缺點？3、反轉錄病毒和腺病毒作為基因治療的載體各有何優(yōu)缺點？遺傳病的中醫(yī)治療43復習思考題1、傳統(tǒng)的遺傳病治療包括哪幾個方面，各有什么優(yōu)缺點遺傳病的中醫(yī)治療培訓課件唇 裂手術前手術后遺傳病的中醫(yī)治療45唇 裂手術前手術后遺傳病的中醫(yī)治療45多 指并指合并多指 遺傳病的中醫(yī)治療46多 指并指合并多指 遺傳病的中醫(yī)治療46 基因修正

18、（gene correction）： 指通過特定方法，將致病基因的突變堿基序列糾正,對突變DNA進行原位修復。操作困難。遺傳病的中醫(yī)治療47 基因修正（gene correction）： 指通過特定方基因置換：在原位定點導入外源正常基因，代替突變基因的直接療法。目的：糾正突變基因，進行精確的原位修復而不涉及基因組其他任何的改變。是理想的基因治療策略，已用于的動物實驗，但尚未應用于臨床，基因治療的遠期目標。 遺傳病的中醫(yī)治療48基因置換：在原位定點導入外源正常基因，代替突變基因的直接療法基因增補（基因添加）：非定點導入外源正?；颍鴽]有真正去除或修復突變基因。外源正?；?qū)塍w內(nèi)后，可代替突變

19、基因表達具有正常功能的蛋白而發(fā)揮治療作用，屬于間接治療。增：向靶細胞中導入其原本不表達的基因；補：導入突變基因的正常基因。目前應用最為廣泛和深入的一種方法，并已付諸臨床實踐。 遺傳病的中醫(yī)治療49基因增補（基因添加）：非定點導入外源正?；?，而沒有真正去除基因干預：用特定的方式抑制某個基因的表達或破壞某個基因使之不能表達，以達到治療疾病的目的。常用方法：應用反義核苷酸、核酶或RNA干擾技術抑制體內(nèi)過度表達的基因。靶基因一般都是過度表達的癌基因或是病毒基因。 遺傳病的中醫(yī)治療50基因干預：用特定的方式抑制某個基因的表達或破壞某個基因使之不生殖細胞基因治療 (germ cell gene ther

20、apy)將正常基因轉移到患者的精子、卵子或受精卵校正遺傳缺陷，使其發(fā)育成正常個體。特點：能將新的正?；騻鹘o下一代，從而使遺傳病得到根治，有害基因不再在人群中散布。 理想，但目前尚難在人類實現(xiàn)。遺傳病的中醫(yī)治療51生殖細胞基因治療 (germ cell gene thera體細胞基因治療 (somatic cell gene therapy)將基因轉移到個體體細胞基因組上的隨機座位，使該基因有效表達其，達到治療的目的。特點：能使患者癥狀消失或緩解，但有害基因仍能傳給后代。 是目前人類基因治療的基本方案遺傳病的中醫(yī)治療52體細胞基因治療 (somatic cell gene the脂質(zhì)體法用人工脂質(zhì)體包裝外源基因，通過脂質(zhì)體與靶細胞融合或直接注射到病灶區(qū)，將外源基因?qū)?。?yōu)點：無毒性和免疫原性，不在體內(nèi)堆積，大小適合，可適應不同的細胞膜和生理要求。 缺點：轉染效率低，瞬時表達。遺傳病的中醫(yī)治療53遺傳病的中醫(yī)治療53真核細胞表達質(zhì)粒載體主要用于直接體內(nèi)治療，