酵母細(xì)胞的固定化課件3

1、酵母細(xì)胞的固定化課件3酵母細(xì)胞的固定化課件3酵母細(xì)胞的固定化課件3知識(shí)回憶：1、洗衣粉中添加_，可以更有效地去除頑漬。常用的酶制劑有_四類。2、影響酶活性的因素有_、_和_。3、影響洗衣粉洗滌效果的因素有 _ 。2021/1/122第一頁(yè)，共54頁(yè)。酵母細(xì)胞的固定化課件3酵母細(xì)胞的固定化課件3酵母細(xì)胞的固定化知識(shí)回憶：1、洗衣粉中添加_，可以更有效地去除頑漬。常用的酶制劑有_四類。2、影響酶活性的因素有_、_和_。3、影響洗衣粉洗滌效果的因素有 _ 。2021/1/122第二頁(yè)，共54頁(yè)。知識(shí)回憶：1、洗衣粉中添加_，可以更有效地去除在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領(lǐng)域大規(guī)模使用酶制劑，說(shuō)明酶制劑使

2、用有很多優(yōu)點(diǎn)，你能舉出一些例子嗎？催化效率高、低能耗、低污染等。酶制劑的使用有缺點(diǎn)嗎？你能舉出一些例子嗎？2021/1/123第三頁(yè)，共54頁(yè)。在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領(lǐng)域大規(guī)模使用酶制劑，說(shuō)明酶制劑使酶制劑存在的缺陷： 1、通常對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑等條件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，進(jìn)步了消費(fèi)本錢； 3、反響后會(huì)混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。2021/1/124第四頁(yè)，共54頁(yè)。酶制劑存在的缺陷： 2021/1/124第四頁(yè)，共54頁(yè) 假如你是工程技術(shù)人員，你如何解決這個(gè)問(wèn)題？2021/1/125第五頁(yè)，共54頁(yè)。 假如你是工程技術(shù)人員，你如何解決這

3、個(gè)問(wèn)題？202 閱讀P49-50，并考慮：1、解決酶應(yīng)用中存在問(wèn)題的方法是？2、這種方法的優(yōu)點(diǎn)是什么？3、什么是高果糖漿？使用它有何好處？4、消費(fèi)高果糖漿需要什么酶？其作用是什么？這種酶有何特點(diǎn)？5、理解高果糖漿消費(fèi)過(guò)程。一、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例2021/1/126第六頁(yè)，共54頁(yè)。 閱讀P49-50，并考慮：一、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例20211、固定化酶技術(shù)。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)如固定在不溶于水的載體上。2、固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：1使酶既能與反響物接觸，又能與產(chǎn)物別離；2固定在載體上的酶可以被反復(fù)利用。2021/1/127第七頁(yè)，共54頁(yè)。1、固定化酶技術(shù)。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)如固定

4、在不溶3、高果糖漿是果糖含量為42%左右的糖漿。作為蔗糖的替代品，高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病，對(duì)人的安康有利。你能寫出果糖的分子式嗎?它屬于什么糖?2021/1/128第八頁(yè)，共54頁(yè)。3、高果糖漿是果糖含量為42%左右的糖漿。作為蔗糖的替代品，4、消費(fèi)高果糖漿需要葡萄糖異構(gòu)酶；其作用是將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖；這種酶穩(wěn)定性好，可持續(xù)發(fā)揮作用。2021/1/129第九頁(yè)，共54頁(yè)。2021/1/129第九頁(yè)，共54頁(yè)。5、固定化酶技術(shù)消費(fèi)高果糖漿的圖示：注意反響柱的各部分名稱。你能說(shuō)出反響柱的優(yōu)點(diǎn)嗎？2021/1/1210第十頁(yè)，共54頁(yè)。5、固定化酶技術(shù)消費(fèi)高果糖漿的圖

5、示：注意反響柱的各部分名稱。消費(fèi)流程含淀粉的漿液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖異構(gòu)酶葡萄糖的異構(gòu)化42%45%轉(zhuǎn)化成果糖果葡糖漿果糖和葡萄糖分離葡萄糖再次異構(gòu)化反復(fù)多次果糖含量70%90%高果糖漿2021/1/1211第十一頁(yè)，共54頁(yè)。消費(fèi)流程含淀粉的漿液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖異構(gòu)酶葡反響柱能連續(xù)使用半年，大大降低了消費(fèi)本錢，進(jìn)步果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。優(yōu)點(diǎn)：2021/1/1212第十二頁(yè)，共54頁(yè)。反響柱能連續(xù)使用半年，大大降低了消費(fèi)本錢，進(jìn)步果糖的產(chǎn)量和質(zhì)練習(xí)：1、以下說(shuō)法不正確的選項(xiàng)是 A、葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成的是果糖B、從固定化酶反響柱下端流出的是果糖C、高果糖漿

6、不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以從糖漿中回收2021/1/1213第十三頁(yè)，共54頁(yè)。練習(xí)：1、以下說(shuō)法不正確的選項(xiàng)是 2021/1/2、研究認(rèn)為，用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來(lái)降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的 A、溫度 B、PHC、水分 D、營(yíng)養(yǎng)2021/1/1214第十四頁(yè)，共54頁(yè)。2、研究認(rèn)為，用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大3、目前，日用化工廠大量消費(fèi)的酶制劑，其中的酶大都來(lái)自A、化學(xué)合成 B、動(dòng)物體內(nèi) C、植物體內(nèi) D、微

7、生物體內(nèi) 2021/1/1215第十五頁(yè)，共54頁(yè)。3、目前，日用化工廠大量消費(fèi)的酶制劑，其中的酶大都來(lái)自202 在消費(fèi)實(shí)際中使用固定化酶技術(shù)有無(wú)缺乏?如有缺乏,怎么辦?有。一種酶只能催化一種化學(xué)反響，而在消費(fèi)實(shí)際中很多產(chǎn)物的形成都通過(guò)一系列的酶促反響才能進(jìn)展，所以操作比較費(fèi)事?？刹捎霉潭ɑ?xì)胞技術(shù)。2021/1/1216第十六頁(yè)，共54頁(yè)。 在消費(fèi)實(shí)際中使用固定化酶技術(shù)有無(wú)缺乏?如有缺二、固定化細(xì)胞技術(shù)1、概念：利用物理或化學(xué)方法將細(xì)胞固定在一定空間的技術(shù)。細(xì)胞中含有一系列酶，在細(xì)胞正常生命活動(dòng)的過(guò)程中，通過(guò)代謝產(chǎn)生所需要的代謝產(chǎn)物。閱讀P50：考慮第二段的問(wèn)題2021/1/1217第十七頁(yè)

8、，共54頁(yè)。二、固定化細(xì)胞技術(shù)1、概念：利用物理或化學(xué)方法將細(xì)胞固定在一將酶或細(xì)胞包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶或細(xì)胞互相連接起來(lái)將酶或細(xì)胞吸附在載體外表上包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法2021/1/1218第十八頁(yè)，共54頁(yè)。將酶或細(xì)胞包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶或細(xì)胞互相連接起來(lái)將酶方法原 理適用對(duì)象包埋法將聚合物的單體與酶溶液混合，再借助于聚合助進(jìn)劑(包括交聯(lián)劑)的作用進(jìn)行聚合，酶被包埋在聚合物中以達(dá)到固定化酶或細(xì)胞2021/1/1219第十九頁(yè)，共54頁(yè)。方法原 理適用對(duì)象包埋法將聚合物的單體與酶溶液混合，再方法原 理適用對(duì)象化學(xué)結(jié)合法酶蛋白的側(cè)鏈基團(tuán)和載休表面上的功能基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵而固定的方法酶物理吸附法

9、通過(guò)氫鍵、疏水作用和電子親和力等物理作用，將酶固定于水不溶載體上。從而制成固定化酶酶2021/1/1220第二十頁(yè)，共54頁(yè)。方法原 理適用對(duì)象化學(xué)結(jié)合法酶蛋白的側(cè)鏈基團(tuán)和載休表面酶和細(xì)胞固定方法的選擇酶合適采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定細(xì)胞合適采用包埋法固定1、方法2、原因細(xì)胞個(gè)大，酶分子很小個(gè)體大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合而個(gè)小的酶容易從包埋的材料中漏出2021/1/1221第二十一頁(yè)，共54頁(yè)。酶和細(xì)胞固定方法的選擇酶合適采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定3、固定化細(xì)胞常用的載體常用的不溶于水的多孔性載體有哪些？明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺等 2021/1/1222第二十二頁(yè)，共5

10、4頁(yè)。3、固定化細(xì)胞常用的載體常用的不溶于水的多孔性載體有哪些？明 假如反響底物是大分子物質(zhì)，能否用固定化細(xì)胞技術(shù)? 為什么？ 那應(yīng)該采用何種技術(shù)?2021/1/1223第二十三頁(yè)，共54頁(yè)。 假如反響底物是大分子物質(zhì)，能否用固定化細(xì)胞技術(shù)?20練習(xí)：1.使用固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是( )。A.能催化大分子物質(zhì)的水解 C.與反響物易接近 2021/1/1224第二十四頁(yè)，共54頁(yè)。練習(xí)：2021/1/1224第二十四頁(yè)，共54頁(yè)。2.酶的固定方法不包括( )。A.將酶吸附在固體外表上 B將酶互相連接起來(lái)C將酶包埋在細(xì)微網(wǎng)格里 D將酶制成固體酶制劑，如加酶洗衣粉中的酶2021/1/1225第二十五頁(yè)，

11、共54頁(yè)。2.酶的固定方法不包括( )。2021/1/1225第二十3、假如反響物是大分子物質(zhì)，采用那種方法催化受限制( )。A直接使用酶 B使用化學(xué)方法結(jié)合的酶C使用固定化細(xì)胞 D使用物理吸附法固定的酶2021/1/1226第二十六頁(yè)，共54頁(yè)。3、假如反響物是大分子物質(zhì)，采用那種方法催化受限制( 4、以下關(guān)于酶和細(xì)胞的固定表達(dá)不正確的選項(xiàng)是( )。A 酶分子很小，易采用包埋法 B酶分子很小，易采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定的酶C細(xì)胞個(gè)大，難被吸附或結(jié)合 D細(xì)胞易采用包埋法固定2021/1/1227第二十七頁(yè)，共54頁(yè)。4、以下關(guān)于酶和細(xì)胞的固定表達(dá)不正確的選項(xiàng)是( )。2025. 關(guān)于固定化

12、酶的表達(dá)不正確的選項(xiàng)是 ( )。A 既能與反響物接觸，又能與反響物別離 B固定在載體上的酶可被反復(fù)利用C可催化一系列反響 D酶的活性和穩(wěn)定性受到限制2021/1/1228第二十八頁(yè)，共54頁(yè)。5. 關(guān)于固定化酶的表達(dá)不正確的選項(xiàng)是 ( )。2021/6、固定化細(xì)胞對(duì)酶的活性影響最小，根本原因是( )。A防止了細(xì)胞破碎、酶的提取純化過(guò)程 B固定化細(xì)胞在多種酶促反響中連續(xù)發(fā)揮作用C促化反響完畢后，能被吸收和重復(fù)利用D細(xì)胞構(gòu)造保證了各種酶在細(xì)胞內(nèi)化學(xué)反響中有效的發(fā)揮作用2021/1/1229第二十九頁(yè)，共54頁(yè)。6、固定化細(xì)胞對(duì)酶的活性影響最小，根本原因是( )。202三、實(shí)驗(yàn)操作一制備固定化酵母細(xì)

13、胞閱讀P5051考慮以下問(wèn)題：1制備過(guò)程包括哪幾個(gè)步驟？2你認(rèn)為哪個(gè)步驟的操作是最重要的一環(huán)？3各步驟應(yīng)當(dāng)分別注意什么問(wèn)題？2021/1/1230第三十頁(yè)，共54頁(yè)。三、實(shí)驗(yàn)操作一制備固定化酵母細(xì)胞閱讀P5051考慮以下1、酵母細(xì)胞的活化考慮： 關(guān)于酵母菌你有哪些知識(shí)？ 什么是活化？ 怎樣活化？ 應(yīng)注意什么？2021/1/1231第三十一頁(yè)，共54頁(yè)。1、酵母細(xì)胞的活化考慮：2021/1/1231第三十一頁(yè)，共2021/1/1232第三十二頁(yè)，共54頁(yè)。2021/1/1232第三十二頁(yè)，共54頁(yè)?；罨?讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)；本質(zhì)： 加快新陳代謝；方法： 參加適量的水。

14、 你能說(shuō)出理由嗎？2021/1/1233第三十三頁(yè)，共54頁(yè)?；罨?021/1/1233第三十三頁(yè)，共54頁(yè)。取1g干酵母，放入50ml的小燒杯中，參加蒸餾水10ml，用玻璃棒攪拌，使酵母細(xì)胞混合均勻，成糊狀，放置1h左右使其活化2021/1/1234第三十四頁(yè)，共54頁(yè)。取1g干酵母，放入50ml的小燒杯中，參加蒸餾水10ml，用考慮： 你認(rèn)為酵母的活化操作有哪些本卷須知？1、所用容器要大一些；2、要保證酵母菌的活性；3、物種要單一；4、注意水的用量。2021/1/1235第三十五頁(yè)，共54頁(yè)?？紤]：2021/1/1235第三十五頁(yè)，共54頁(yè)。2溶液稱取無(wú)水Cacl2 0.83g。放入20

15、0mL的燒杯中，參加150mL的蒸餾水，使其充分溶解，待用。2021/1/1236第三十六頁(yè)，共54頁(yè)。2溶液稱取無(wú)水Cacl2 0.83g。放入200mL的燒杯中3、配制海藻酸鈉溶液2021/1/1237第三十七頁(yè)，共54頁(yè)。3、配制海藻酸鈉溶液2021/1/1237第三十七頁(yè)，共54操作： 稱取0.7g海藻酸鈉，放入50mL小燒杯中.加人10mL水，用酒精燈加熱，邊加熱邊攪拌，將海藻酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸餾水定容至10mL。注意，加熱時(shí)要用小火，或者連續(xù)加熱，反復(fù)幾次，直到海藻酸鈉溶化為止2021/1/1238第三十八頁(yè)，共54頁(yè)。操作：2021/1/1238第三十八頁(yè)，共54頁(yè)

16、。 加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)，涉及到實(shí)驗(yàn)的成敗，一定要按照教材的提示進(jìn)展操作。海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量。假如海藻酸鈉濃度過(guò)高，將很難形成凝膠珠；假如濃度過(guò)低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。應(yīng)當(dāng)注意什么問(wèn)題？2021/1/1239第三十九頁(yè)，共54頁(yè)。 加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)，涉及4、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合 將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，參加已活化的醉母細(xì)胞，進(jìn)展充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，再轉(zhuǎn)移至注射器中。為什么海藻酸鈉溶液要冷卻？2021/1/1240第四十頁(yè)，共54頁(yè)。4、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合 將溶化好的海藻酸鈉溶液

17、2021/1/1241第四十一頁(yè)，共54頁(yè)。2021/1/1241第四十一頁(yè)，共54頁(yè)。5、固定化酵母細(xì)胞 以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的Cacl2溶液中，觀察液滴在Cacl2溶液中形成凝膠珠的情形。將這些凝膠珠在Cacl2溶液中浸泡30 min左右。 你知道還有什么地方可以用到氯化鈣？2021/1/1242第四十二頁(yè)，共54頁(yè)。5、固定化酵母細(xì)胞 以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液2021/1/1243第四十三頁(yè)，共54頁(yè)。2021/1/1243第四十三頁(yè)，共54頁(yè)。 剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便形成穩(wěn)定的構(gòu)造。 檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用以

18、下方法： 一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓，假如凝膠珠不容易破裂，沒(méi)有液體流出，就說(shuō)明凝膠珠的制作成功。 二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠，假如凝膠珠很容易彈起，也能說(shuō)明制備的凝膠珠是成功的。2021/1/1244第四十四頁(yè)，共54頁(yè)。 剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便這一階段成功與否呢？怎樣評(píng)價(jià)？觀察凝膠珠的顏色和形狀:假如制作的凝膠珠顏色過(guò)淺、呈白色，說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少；假如形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，那么說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。2021/1/1245第四十五頁(yè)，共54頁(yè)。這一階段成功與否呢？怎樣評(píng)價(jià)？觀察凝

19、膠珠的顏色和形狀:202二用固定化細(xì)胞發(fā)酵1、將固定好的酵母細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗2-3次。 2、 將150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL的錐形瓶中，再參加固定好的酵母細(xì)胞，置于25下發(fā)酵24h。2021/1/1246第四十六頁(yè)，共54頁(yè)。二用固定化細(xì)胞發(fā)酵1、將固定好的酵母細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾2021/1/1247第四十七頁(yè)，共54頁(yè)。2021/1/1247第四十七頁(yè)，共54頁(yè)。這一階段成功與否呢？怎樣評(píng)價(jià)？觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液；利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精，可以看到產(chǎn)生了很多氣泡，同時(shí)會(huì)聞到酒味。還有其他方法嗎？2021/1/1248第四十八頁(yè)，共54頁(yè)。這一階段成功與否呢？怎樣評(píng)價(jià)？觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液；2021請(qǐng)考慮課后練習(xí) P522021/1/1249第四十九頁(yè)，共54頁(yè)。請(qǐng)考慮課后練習(xí)2021/1/1249第四十九頁(yè)，共54頁(yè)。類型優(yōu)點(diǎn)不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等。對(duì)