人類疾病動物模型概述

1、關(guān)于人類疾病動物模型概述第1頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四培訓(xùn)目標(biāo)1、熟悉人類疾病動物模型的概念、意義、復(fù)制原則。2、掌握自發(fā)性疾病動物模型和誘發(fā)性疾病動物模型的概念、復(fù)制方法和特點。3、了解人類疾病動物模型的分類；中醫(yī)證候動物模型研究內(nèi)容、概況、方法；轉(zhuǎn)基因動物的基本原理、基本方法，轉(zhuǎn)基因動物在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用第2頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四第一節(jié) 概述一、定義 人類疾病動物模型(Animal models of human diseases）是指為闡明人類疾病的發(fā)生機理及建立預(yù)防、診斷和治療方法而制作的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的實驗動物

2、第3頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四二、建立人類疾病動物模型的意義第4頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四意義：1、人類的替難者，避免了在人身上進行實驗所帶來的風(fēng)險2、可提供發(fā)病率較低的疾病材料3、在方法學(xué)上可增加實驗材料的可比性，可控制各種實驗條件，結(jié)果可比性強，重復(fù)性好4、簡化實驗操作和樣品收集 5、有助于更全面地認(rèn)識疾病本質(zhì) 第5頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 三、人類疾病動物模型的復(fù)制原則： 一個好的動物模型應(yīng)具有以下特點1、相似性：動物模型應(yīng)與相應(yīng)的人類疾病有類似之處，盡可能再現(xiàn)所要研究的人類疾病的病理變化。

3、2、重復(fù)性：理想的模型應(yīng)是可重復(fù)、可標(biāo)準(zhǔn)化的。標(biāo)準(zhǔn)的動物、標(biāo)準(zhǔn)的環(huán)境、標(biāo)準(zhǔn)的飼養(yǎng)管理、標(biāo)準(zhǔn)的實驗器材、標(biāo)準(zhǔn)的實驗操作。3、可靠性：復(fù)制模型應(yīng)特異地、可靠地反映該種疾病或某種機能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，同時應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經(jīng)受一系列檢測得以證實。第6頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 4、適用性：復(fù)制模型應(yīng)盡量考慮今后臨床能應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，動物背景資料要完整，生命史能滿足實驗需要。5、易行性和經(jīng)濟性：動物經(jīng)濟而來源充足，便于轉(zhuǎn)運，易于關(guān)養(yǎng)。在同等條件下，優(yōu)先使用標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物。6、安全性：動物模型應(yīng)不對實驗人員和其它人員的生命安全產(chǎn)生威脅。第7頁

4、，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 第二節(jié) 動物模型分類按產(chǎn)生原因分類1、誘發(fā)性動物模型（experimental animal model）2、自發(fā)性動物模型（spontaneous animal model）3、抗疾病型動物模型（negative animal model）4、生物醫(yī)學(xué)動物模型（Biomedical animal model）第8頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 按產(chǎn)生原因分類1、誘發(fā)性動物模型（experimental animal model） 又稱為實驗性動物模型，指通過使用物理、化學(xué)、生物等致病手段，人為制造的疾病模型

5、。 優(yōu)點：制作方法簡便，實驗條件比較簡單，其他因素容易控制，短時間內(nèi)可大量復(fù)制。 缺點：誘發(fā)的疾病模型與自然產(chǎn)生的疾病在某些方面有所不同。而且有些人類疾病不能用人工方法誘發(fā)出來。第9頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四物理因素誘發(fā)：如手術(shù)致骨折、放射線致免疫抑制化學(xué)因素誘發(fā)：如高油脂飼料致兔動脈粥樣硬化、化學(xué)毒物中毒生物因素誘發(fā)：如微生物感染復(fù)合因素誘發(fā)：如豚鼠慢支用致病菌加寒冷或加SO2生物技術(shù)制作的動物模型：如嵌合體動物、轉(zhuǎn)基因動物、克隆動物等第10頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四2、自發(fā)性動物模型（spontaneous animal mo

6、del） 指不加任何人工誘發(fā)，在自然條件下動物自然產(chǎn)生的疾病，或者由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動物疾病模型。以腫瘤遺傳性疾病居多。優(yōu)點：是在一定程度上減少了人為的因素，更接近自然的人類疾病。缺點：種類有限，疾病動物飼養(yǎng)條件要求高，發(fā)病率低，發(fā)病時間長。自發(fā)腫瘤模型因動物種系、品種不同，其腫瘤所發(fā)生的類型和發(fā)病機制有差異。第11頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 自發(fā)性動物模型應(yīng)用價值很高，特別是在遺傳性疾病、免疫缺陷病、腫瘤等的研究上得到了廣泛應(yīng)用。近幾十年來科學(xué)界十分重視自發(fā)性動物模型的開發(fā)。 如與人類疾病相似的心臟病的加拿大犬；與兒童碳水化合物、氨基

7、酸代謝失調(diào)相似的貓；自發(fā)性高血壓和腦中風(fēng)大鼠；青光眼兔；自發(fā)性糖尿病地鼠；肥胖癥小鼠；裸鼠：肺癌、淋巴肉瘤、白血病等等。第12頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 3、抗疾病型動物模型（negative animal model） 是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生。因此可借以探討為何該種動物對該疾病有天然的抵抗力。 如哺乳類動物均感染血吸蟲病，而洞庭湖流域的東方地鼠卻不能復(fù)制血吸蟲病，故可用于血吸蟲感染和抗病的研究。第13頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 4、生物醫(yī)學(xué)動物模型（biomedical animal model） 是指利用健康正常

8、的動物生物學(xué)特征來提供人類疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。 如沙鼠缺乏完整的腦基底Willis動脈環(huán)，動脈環(huán)后交通支，可用來結(jié)扎一側(cè)頸動脈制備腦梗塞、腦缺血模型 鹿的正常紅細(xì)胞是鐮刀形的，多年來一直用于鐮刀形紅細(xì)胞貧血研究。第14頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四（三）按模型種類分：整體動物模型、離體組織器官模型、細(xì)胞株模型、數(shù)學(xué)模型（四）按中醫(yī)藥體系分 中醫(yī)證候動物模型：陰虛、陽虛、氣虛、血虛、脾虛、腎虛動物模型，厥脫癥動物模型第15頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四第二節(jié) 醫(yī)學(xué)實驗中常用自發(fā)性疾病動物模型1、自發(fā)性高血壓動物模型2、自發(fā)性糖尿病動物模

9、型 3、自發(fā)性腫瘤動物模型 4、免疫缺陷動物5、自發(fā)性小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型第16頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四一、自發(fā)性高血壓動物模型 有8個品系的遺傳性高血壓大鼠:遺傳性高血壓品系（GH）自發(fā)性高血壓品系（SHR）中風(fēng)型高血壓品系（SHR/SP）鹽敏感品系（DS）米蘭種高血壓品系（MHS）Munster品系（SHM）Sabra高血壓品系（SBH）Lyon高血壓品系（LH） 第17頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四此類動物模型與人類高血壓的相似之處：由遺傳因素產(chǎn)生；高血壓早期無明顯器官病變；血壓隨鼠齡增長而增加；血管總外周阻力明顯升高；隨著

10、疾病發(fā)展可出現(xiàn)心、腦、腎等并發(fā)癥，使用降壓藥等治療措施可以預(yù)防和減輕疾病進展和并發(fā)癥的發(fā)生；應(yīng)激和高鹽飲食等因素可加速高血壓的發(fā)展并加重并發(fā)癥。 第18頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四主要差異在于：1、它是通過選擇性繁殖得到的，與人類發(fā)病有一定區(qū)別；2、甲狀腺和免疫功能存在異常。3、目前國內(nèi)品系不全，使用多SHR、DS和MHS已有多家單位進行飼養(yǎng)繁殖。 第19頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四糖尿病 專家估計，中國大陸的糖尿病患者已有二千五百萬名。若加上潛在人群，受糖尿病威脅的總數(shù)達到四千萬人，并且每年以百分之一的速度增長。每年消耗的社會資源約

11、五百億元人民幣。 糖尿病是一種常見的慢性疾病，由于遺傳因素和多種環(huán)境因素聯(lián)合作用使胰島素分泌絕對或相對分泌不足，引起糖類，蛋白質(zhì)，脂肪的代謝紊亂，臨床表現(xiàn)為高血糖的一組全身性代謝紊亂的疾病。第20頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四1型糖尿病與2型糖尿病的區(qū)別 項 目 1型糖尿病 2型糖尿病 胰島素依賴 Yes No 發(fā)病年齡 30歲 中老年 起病 急 緩慢 癥狀 中、重 輕、中 體重減輕，消瘦不減，肥胖多見 酮癥酸中毒易發(fā)生 不易發(fā)生胰島素釋放曲線低平 大致正常，高峰后移， 高胰島素血癥第21頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四二、自發(fā)性糖尿病動物

12、模型 自發(fā)性糖尿病模型NOD小鼠: 1型BB大鼠：1型ob/ob小鼠：2型KK糖尿病小鼠：2型db小鼠：2型GK大鼠： 2型第22頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四1、BB大鼠：是I型糖尿病的良好模型。其發(fā)病與自身免疫性毀壞胰島細(xì)胞引發(fā)胰腺炎和胰島素缺乏有關(guān)。大鼠通常在60120日齡時發(fā)病，數(shù)天后就出現(xiàn)嚴(yán)重的高血糖、低胰島素和酮血癥。給予免疫抑制劑、切除新生鼠胸腺等方法可預(yù)防糖尿病的發(fā)生，說明自身免疫參與發(fā)病過程。 2、NOD小鼠：小鼠是I型糖尿病的良好模型。發(fā)病初期就表現(xiàn)出高血糖、尿糖，多飲、多尿，消瘦，胰島素低下等癥狀。如果沒有外源胰島素治療，12個月死亡，通常死于

13、酮血癥。免疫系統(tǒng)在糖尿病的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用，細(xì)胞損傷繼發(fā)于自身免疫過程，引起低胰島素血癥。雌性NOD小鼠的發(fā)病率顯著高于雄性，且發(fā)病早。第23頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四1、KK小鼠：是糖尿病典型的多基因疾病動物模型。表現(xiàn)型糖尿病特征。具有高血糖癥、高胰島素血癥、胰島素抵抗等癥狀。如果將黃色肥胖基因?qū)隟K小鼠，其肥胖和糖尿病癥狀更為明顯。2、db小鼠：是近交系C57BL/KS小鼠單隱性基因突變后培育出來。具有肥胖、胰島素抵抗、高血糖、高胰島素血癥、高甘油三酯血癥等特征，其表現(xiàn)類似于人類的型糖尿病。 第24頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，

14、星期四3、ob/ob小鼠：為型糖尿病模型。純合子動物表現(xiàn)肥胖、高血糖和高胰島素血癥。該小鼠因Leptin(ob基因產(chǎn)物)缺乏而引起肝脂肪生成和肝糖原異生，高血糖又刺激胰島素分泌，引起胰島素抵抗的惡性循環(huán)。4、GK大鼠：該鼠由Goto等1975年通過對Wistar進行口服葡萄糖耐量試驗并篩選高血糖的個體進行培育而來。表現(xiàn)為胰島素分泌不全、胰島素抵抗、胰島纖維化、非肥胖等典型型糖尿病特征。大鼠在長期糖尿病后會出現(xiàn)各種并發(fā)癥，如腎病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病第25頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四三、自發(fā)性腫瘤動物模型1、自發(fā)性乳腺腫瘤：在各品系小鼠中，C3H系雌性小鼠乳腺腫瘤發(fā)生率最高

15、，達99100；A系經(jīng)產(chǎn)雌鼠乳腺腫瘤發(fā)生率約為6080參照Dunn分類，小鼠乳腺腫瘤分為A、B 、C三型：A型為典型乳腺腺瘤。B型包括乳頭狀囊腺瘤、單純瘤及導(dǎo)管內(nèi)瘤等。C型又稱纖維瘤和腺纖維瘤。第26頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四2、自發(fā)性肺腫瘤：小鼠自發(fā)性肺腫瘤主要見于18月齡以上的A系、SWR系小鼠其肺自發(fā)瘤發(fā)生率分別達90和80。經(jīng)產(chǎn)PRA小鼠發(fā)生率也很高（77）。病理學(xué)類型主要是腺瘤，有良性和惡性之分。第27頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四3、自發(fā)性肝腫瘤 ：自發(fā)性肝腫瘤多見于小鼠小鼠自發(fā)性肝腫瘤常見于肝細(xì)胞，膽管細(xì)胞腫瘤罕見。14

16、月齡以上雄性C3Hf系、C3H系及C3H/He小鼠發(fā)生率分別為72%、85%和80%左右，CBA/J雄鼠發(fā)病率為65%，而C57BL/6J、A/J等品系則為肝臟腫瘤低發(fā)病系。 4、小鼠白血病：C58、AKR 、Afb等品系小鼠的白血病多發(fā)，89月齡的AKR小鼠白血病發(fā)生率高達8090。形成的白血病以淋巴細(xì)胞性白血病為主。5、自發(fā)性卵巢腫瘤 ：BALB/c、C3H系小鼠均為卵巢瘤高發(fā)品系，其中BALB/c生產(chǎn)雌鼠發(fā)病率為75.8%；C3H系中 C3HeB/Fe 19月齡生產(chǎn)雌鼠發(fā)病率為64%，育成雌鼠為22%；C3HeB/De亞系24月齡未生育雌鼠發(fā)病率為47%，21月齡生育雌鼠為37%，多產(chǎn)者

17、為29%。第28頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四（2）其它動物自發(fā)瘤1、大鼠內(nèi)分泌腫瘤和惡性淋巴瘤，跟品系和年齡有關(guān)。2、金黃倉鼠是實驗性腫瘤研究中常用的一種動物，自發(fā)瘤發(fā)生率的（0.517），主要發(fā)生于神經(jīng)系統(tǒng)和膀胱以外的組織和器官。3、兔類自發(fā)瘤發(fā)生率很低，僅為0.82.6，以乳頭狀瘤和子宮腺瘤最為常見。第29頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四4、兩棲類自發(fā)瘤：以蛙的實驗性腫瘤最常用。如豹蛙腎腫瘤（發(fā)生率約2.7）5、鳥類的自發(fā)性腫瘤也比較常見，特別是雞腫瘤最常見，發(fā)身率約1020，且多屬惡性，以肌原性肉瘤和白血病為多。如發(fā)生上皮源性腫瘤，

18、則幾乎均為鱗狀上皮瘤。第30頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四四、免疫缺陷動物 1、T淋巴細(xì)胞缺陷動物模型：該模型胸腺缺陷、細(xì)胞免疫功能喪失。表現(xiàn)為無毛、裸體，用“nu”表示裸基因符號。代表動物主要有裸小鼠、裸大鼠。 2、B淋巴細(xì)胞缺陷動物模型：該模型代表動物為XID小鼠，特點是B淋巴細(xì)胞功能減退，為X-鏈隱性突變系，基因符號為“Xid”。純合型雌鼠（Xid/Xid）和雜合型雄鼠（Xid/Y）對型抗原（非胸腺依賴性抗原）如葡聚糖、肺炎球菌脂多糖以及雙鏈DNA等沒有反應(yīng)。 3、NK細(xì)胞缺陷動物模型 ：Beige（bg）小鼠為NK細(xì)胞活性缺陷的突變系小鼠，bg是隱性突變基因

19、，位于13號染色體上。其內(nèi)源性NK細(xì)胞功能缺乏，是由于細(xì)胞溶解作用的識別過程受損傷所致。 第31頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四4、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠 （1）SCID小鼠：SCID小鼠的所有T和B淋巴細(xì)胞功能測試均為陰性，對外源性抗原無細(xì)胞免疫及抗體反應(yīng)，體內(nèi)缺乏攜帶前B細(xì)胞、B細(xì)胞和T細(xì)胞表面標(biāo)志的細(xì)胞。但是，其非淋巴性造血細(xì)胞分化不受突變基因的影響，巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、紅細(xì)胞等呈正常狀態(tài)。自然殺傷（NK）細(xì)胞及淋巴因子激活（LAK）細(xì)胞也呈正常狀態(tài)。值得注意的是少數(shù)SCID小鼠可出現(xiàn)極小程度的免疫功能恢復(fù)，此即為SCID小鼠的滲漏現(xiàn)象。（2）Mothea

20、ten小鼠 ： Motheaten小鼠突變基因（me）位于第6對染色體上，出生后2 h內(nèi)即可出現(xiàn)皮膚膿腫，有嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷，表現(xiàn)為對胸腺依賴和不依賴抗原均無反應(yīng)。對T、B細(xì)胞分裂素的增殖反應(yīng)嚴(yán)重受損，細(xì)胞毒和NK細(xì)胞活性減低。 第32頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四5T、B、NK細(xì)胞功能三聯(lián)免疫缺陷小鼠：國外將分布于3種小鼠的3個隱性突變基因即NK細(xì)胞缺陷的beige基因、T細(xì)胞缺陷的nu基因以及B細(xì)胞缺陷的xid基因經(jīng)過雜交、篩選并導(dǎo)入，育成了T、 B、NK細(xì)胞三聯(lián)免疫缺陷的beige-nude-xid小鼠（BNX小鼠）。 第33頁，共56頁，2022年，5月20

21、日，18點43分，星期四五、自發(fā)性小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）模型現(xiàn)國內(nèi)常用的自發(fā)性小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）有NZB/W（雜交1代）小鼠、BXSB小鼠及MRL/lpr小鼠三個品系。1、NZB/W小鼠是由黑色的NZB小鼠與白色NZW小鼠雜交產(chǎn)生的雜交1代鼠，NZB/W小鼠雌性發(fā)生SLE樣表現(xiàn)較早，半數(shù)病死率月齡為8個月，雄性發(fā)病晚，為15個月。2、BXSB小鼠是由米黃色雄性SB/Le小鼠與黑色雌性C57BL/6J小鼠雜交而來，因為Y染色體上有加重自身免疫的基因位點，故雄鼠發(fā)病早且重，其半數(shù)病死率為5.5個月，雌鼠發(fā)病晚，半數(shù)病死率為20個月。3、MRL/lpr小鼠的遺傳背景較復(fù)雜，其基因組成

22、75%來源于LG小鼠，13%來源于AKP小鼠，12%來源于 C3H小鼠，0.3%來源于C57BL/6小鼠，lpr為淋巴細(xì)胞增殖（1ymphoid proliferation）基因的縮寫，本品系小鼠無論雌雄，均發(fā)病較早，半數(shù)病死率為4.5個月。這些自發(fā)性小鼠SLE模型不足之處在于SlE發(fā)病均較晚，周期長，不容易控制實驗過程 第34頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四第三節(jié) 醫(yī)學(xué)實驗中常用誘發(fā)性疾病動物模型一、心血管系統(tǒng)疾病動物模型二、消化系統(tǒng)疾動物模型性三、呼吸系統(tǒng)疾病動物模型四、泌尿系統(tǒng)疾病動物模型五、內(nèi)分泌疾病動物模型六、血液系統(tǒng)疾病動物模型 七、神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型八

23、、誘發(fā)性腫瘤動物模型 第35頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四一、心血管系統(tǒng)疾病動物模型 1、心肌炎動物模型：柯薩奇病毒感染引起的小鼠心肌炎模型 2、心肌梗死動物模型：結(jié)扎冠狀動脈左前降支所致的急性心肌梗塞模型3、高血壓動物模型 （1）結(jié)扎腎動脈腎血管性高血壓模型 （2）應(yīng)激性高血壓模型 4、動脈粥樣硬化動物模型 （1）高脂高膽固醇飼料致兔動脈粥樣硬化動物模型（2）高脂+內(nèi)皮損傷致小型豬頸動脈粥樣硬化模型 第36頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四二、消化系統(tǒng)疾動物模型性1、急性胃潰瘍動物模型 2、脂肪肝動物模型（1）高脂飼料誘發(fā)脂肪肝模型 （2）

24、乙醇性肝病動物模型3、肝纖維化動物模型（1）四氯化碳誘發(fā)肝纖維化動物模型 （2）硫代乙酰胺（TAA）誘發(fā)肝纖維化模型4、肝硬化動物模型第37頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四三、呼吸系統(tǒng)疾病動物模型1、哮喘動物模型（1） 卵白蛋白激發(fā)豚鼠哮喘動物模型（2）卵白蛋白激發(fā)大鼠哮喘動物模型 2、慢性阻塞性肺病動物模型3、肺纖維化動物模型 第38頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四四、泌尿系統(tǒng)疾病動物模型1、腎小球腎炎動物模型2、腎代謝紊亂動物模型（1）高血肌酐動物模型（2）糖尿病腎病動物模型3、腎功能衰竭動物模型 第39頁，共56頁，2022年，5月20

25、日，18點43分，星期四五、內(nèi)分泌疾病動物模型1誘發(fā)性糖尿病動物模型（1）脂肪乳加四氧嘧啶誘發(fā)大鼠糖尿病模型（2）鏈脲佐菌素誘發(fā)大鼠糖尿病模型 ：1型為主，采用微量加高脂可誘發(fā)2型2甲狀腺疾病動物模型3銀屑病動物模型第40頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四六、血液系統(tǒng)疾病動物模型1再生障礙性貧血動物模型免疫介導(dǎo)法 、射線損傷法等2急性白血病動物模型第41頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四七、神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1腦缺血動物模型（1）大鼠局灶性腦缺血動物模型：線栓法 （2）全腦缺血動物模型 2老年癡呆癥動物模型：D-半乳糖損害模型 3癲癇動物模型4

26、帕金森病動物模型第42頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四八、誘發(fā)性腫瘤模型 誘發(fā)性腫瘤模型是使用致癌因素(Carcinogens)在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型，原理是利用外源性致癌因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性，形成腫瘤。 外源性致痛因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致癌物，其中化學(xué)性致癌物(Chemical carcinogens)，最常見化學(xué)性致癌物(Chemical carcinogens) 苯并芘（benzpy rene） 甲基膽蒽（MC） 聯(lián)苯胺（benzidine ） 亞硝胺類（nitrosamine ） 黃曲霉素類（aflat

27、oxin第43頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四 物理性方法主要是放射性物質(zhì)致瘤，用放射線照射或局部注射放射性同位素。 生物學(xué)方法是用能誘發(fā)動物腫瘤的病毒致癌，如：小鼠白血病病毒（Murine leukovirus，MLV），Rous雞肉瘤病毒，SV40病毒。以及用轉(zhuǎn)基因的方法誘發(fā)動物產(chǎn)生腫瘤，可根據(jù)啟動子類型的不同選擇不同的發(fā)瘤器官，如用乳球蛋白啟動子的SV40T抗原的轉(zhuǎn)基因小鼠，可誘發(fā)乳腺癌或胰腺癌。MMTV-Wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠高發(fā)乳腺癌第44頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四用于誘發(fā)實驗性腫瘤的動物種類很多，以嚙齒動物的使用最多、應(yīng)用最廣

28、，包括各種大鼠、小鼠、豚鼠等第45頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四誘發(fā)方法 誘發(fā)性動物腫瘤的誘發(fā)方式包括原位誘發(fā)和異位誘發(fā)。 原位誘發(fā)是指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤。 異位誘發(fā)是將與致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或另一正常動物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。1.涂抹法（皮膚癌）2.經(jīng)口給藥法（消化道或消化腺)3.注射法4.氣管灌注法（肺癌）5.穿線法6.埋藏法第46頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四（二） 常見的誘發(fā)性腫瘤動物模型1食管癌模型 2肝癌模型 3胃癌模型 4大腸癌模型 5肺癌模型 6鼻咽

29、癌模型 7腦腫癌模型 8胰腺癌模型 9白血病模型 第47頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四第四節(jié) 中醫(yī)證候動物模型 1、中醫(yī)證候動物模型的研究內(nèi)容2、中醫(yī)證候動物模型的分類3、建立中醫(yī)證候動物模型的目的和意義4、中醫(yī)證候動物模型研制概況5、中醫(yī)證候動物模型的研制方法 第48頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四第五節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物模型一、轉(zhuǎn)基因動物的基本原理 二、轉(zhuǎn)基因動物的基本方法 三、轉(zhuǎn)基因動物在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用 第49頁，共56頁，2022年，5月20日，18點43分，星期四一、轉(zhuǎn)基因動物的基本原理 轉(zhuǎn)基因動物的基本原理是將改建后的目的基因（或基因組片段）用顯微注射等方法注入實驗動物的受精卵（Ferrtillzed eggs）或著床前胚胎細(xì)胞，然后將此受精卵或著床前胚胎細(xì)胞再植入受體動物的輸卵管（Oviduct）或子宮中，使其發(fā)育成攜帶有外源基因的轉(zhuǎn)基因動物，人們可以通過分析轉(zhuǎn)入基因和動物表型的關(guān)系，從而揭示外源基因的功能，也可以通過轉(zhuǎn)入外源基因培育優(yōu)良品種的工程動