中藥臨床藥動(dòng)講稿

1、關(guān)于中藥臨床藥動(dòng)第1頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第一節(jié) 中藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)概念一、以臨床病人為研究對象二、研究內(nèi)容 治療藥物監(jiān)測（TDM）-肝腎功能損害者，防 止藥物無效或中毒 藥物相互作用對藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響 第2頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四臨床藥物動(dòng)力學(xué)是隨著藥物動(dòng)力學(xué)的發(fā)展而興起和發(fā)展的。隨著實(shí)踐的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識到藥物的療效與毒性不僅與藥物的:化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、配方、劑型、制備工藝、給藥途徑等劑型因素有關(guān)，而且與病人的各種生物因素有著密切關(guān)系。第3頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四許多藥物的體內(nèi)

2、過程存在著:種族差異、性別差異、年齡差異、生理和病理?xiàng)l件的差異、以及遺傳因素的差異等，因此給藥后不僅個(gè)體間存在血藥濃度的差異，即使同一個(gè)體，在不同的情況下服用同一藥物，其血藥濃度水平也會(huì)產(chǎn)生很大的波動(dòng)，從而造成藥物的療效與毒副作用波動(dòng)。第4頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四目前中藥藥理學(xué)和治療學(xué)參考書上推薦的藥物劑量，大都是平均劑量。事實(shí)上，只有安全低毒的藥物按照既定的平均劑量給藥后，才能使用藥者獲得滿意的療效。一些治療指數(shù)比較窄的藥物按平均劑量給藥后，往往使一部分病人療效滿意，另一部分病人因?yàn)閯┝坎蛔愣熜Р患?，還有一部分病人因劑量過大而發(fā)生中毒。特別是當(dāng)某些病人體

3、內(nèi)器官病變?nèi)绺文I功能障礙時(shí)，藥物無效或中毒現(xiàn)象更易發(fā)生。第5頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四因此必需通過中藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究，把握藥物在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，進(jìn)行血藥濃度監(jiān)測或藥理效應(yīng)監(jiān)測，使給藥方案個(gè)體化，從而提高藥物療效、降低藥物毒副反應(yīng)。藥學(xué)工作人員必須和臨床工作人員密切配合，臨床藥物動(dòng)力學(xué)也是現(xiàn)代藥學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)密切結(jié)合的產(chǎn)物。第6頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四中藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)是以臨床病人為研究對象，探討中藥通過各種途徑進(jìn)入人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄等過程的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律及其影響因素，并指導(dǎo)臨床合理用藥的科學(xué)。它是臨床藥學(xué)的一

4、個(gè)重要研究內(nèi)容，包括:治療藥物監(jiān)測（therapeutic drug monitoring，TDM）、藥物相互作用對藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響等方面的內(nèi)容，對制定合理的給藥方案，以最大限度發(fā)揮藥物的療效，確保病人的用藥安全具有重要意義。第7頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四三、 需進(jìn)行臨床藥動(dòng)學(xué)研究的藥物：（1）同一劑量下，病人間藥動(dòng)學(xué)行為差異很大的藥物，如三環(huán)類抗抑郁藥。（2）具有非線性動(dòng)力學(xué)特征的藥物，尤其是非線性發(fā)生在治療劑量范圍內(nèi)，如苯妥英鈉。（3）治療指數(shù)小，毒副作用反應(yīng)強(qiáng)的藥物，如強(qiáng)心苷類、茶堿、馬錢子、雷公藤等。 第8頁，共118頁，2022年，5月20日，1

5、6點(diǎn)46分，星期四（4）患者存在胃腸道、肝腎疾病，影響藥物體內(nèi)過程。（5）常規(guī)劑量下未見療效或出現(xiàn)毒副反應(yīng)，以臨床藥動(dòng)學(xué)手段分析原因。（6）懷疑合并用藥而出現(xiàn)的異常反應(yīng)。（7）診斷或處理藥物過量或中毒。（8）為確定中藥新藥的群體給藥方案。 第9頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第二節(jié) 研究內(nèi)容與方法一、方法與步驟（一） 建立體液樣本中藥物的分析方法 （二） 體液樣本（主要是血液）的采集（三） 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析 （四） 根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，用所得到的藥物?dòng) 力學(xué)參數(shù)，解決臨床具體問題第10頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四（一）建立體液樣本中藥物的

6、分析方法由于血藥濃度一般在g甚至ng級水平，故必須依靠現(xiàn)代分析儀器檢測，如HPLC、GC、GC-MS等方法。滿意的分析方法，常常不易獲得，可以事先查閱有關(guān)文獻(xiàn)，先體外，后體內(nèi)，逐步實(shí)驗(yàn)。若某藥物的分析方法前人已做過，可以引用借鑒。不管是引用還是創(chuàng)新的方法都應(yīng)進(jìn)行方法學(xué)研究，包括線性、靈敏度、回收率、專屬性等，以期了解自已的實(shí)驗(yàn)條件及實(shí)驗(yàn)操作能否滿足對所分析樣品的要求。分析方法盡可能操作簡便，分析時(shí)間較短，以適應(yīng)臨床需要。第11頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四(二)體液樣本（主要是血液）的采集根據(jù)藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)選擇適宜的時(shí)間間隔取樣，進(jìn)行分析，得出一套藥時(shí)數(shù)據(jù)，力求能

7、全面反映藥-時(shí)曲線的全貌，即應(yīng)包括吸收相、分布相和消除相。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，一般:吸收相及分布相各采樣23次，消除相采樣410次，總數(shù)為1015次。第12頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四一般來說，采樣期最好: 大于5個(gè)消除半衰期， 不小于3個(gè)消除半衰期。如果藥物的半衰期未知: 采樣需持續(xù)到血藥濃度為峰值濃度1/101/20以后， 同時(shí)取樣間隔也不宜過短，尤其是在吸收相。但這在實(shí)驗(yàn)中有時(shí)往往難以做到，對于那些t1/2長的藥物更是如此。對于這些問題可應(yīng)用文獻(xiàn)報(bào)道的一點(diǎn)法或重點(diǎn)一點(diǎn)法解決，也可應(yīng)用群體藥物動(dòng)力學(xué)理論及方法，即著名的NONMEM程序法，測定次數(shù)僅需23次即可。

8、第13頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四(三)數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析 對上述血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)擬合房室模型，求出血藥濃度與時(shí)間關(guān)系的數(shù)學(xué)表達(dá)式，并進(jìn)一步求出有關(guān)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。第14頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四(四)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?yīng)用所得到的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，解決臨床具體問題設(shè)計(jì)最佳給藥方案：確定每個(gè)患者的給藥方案（用量、用法、給藥間隔、給藥途徑、給藥劑型）。對不良反應(yīng)或毒性反應(yīng)做出定量的解釋。對同一藥物不同劑型進(jìn)行生物等效性評價(jià)、或分析藥物配伍的相互作用。第15頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 二、中藥治療藥物監(jiān)

9、測（TDM） 中醫(yī)院的TDM工作內(nèi)容1、西藥 血液濃度測定分析，制定個(gè)體化用藥方案 如對兒科病房進(jìn)行茶堿、苯妥英鈉的常規(guī)血液濃度測定，并對合并用藥的過敏反應(yīng)及藥物相互作用后對血藥濃度影響進(jìn)行了分析，解決臨床實(shí)際問題。 第16頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四2、中西醫(yī)合并用藥，測定西藥血藥濃度， 分析中西藥配伍時(shí)規(guī)律在中西醫(yī)合并運(yùn)用的治療過程中，應(yīng)測定有關(guān)西藥的血藥濃度，分析中西藥配伍時(shí)血藥濃度狀態(tài)，總結(jié)規(guī)律，建立配伍治療病例分析檔案。 第17頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四3、中藥毒、峻、劇方藥，如大承氣湯等，臨床失陰 亡陽的虛癥、急癥、

10、重癥 辨證擬定給藥方案 以中醫(yī)的“證”為基礎(chǔ) 辨證炮制 辨證服藥 服藥監(jiān)護(hù)第18頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第三節(jié) 中藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)注意的問題將藥理效應(yīng)法引入到中醫(yī)臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究領(lǐng)域，很有意義:這不僅因?yàn)橹兴帍?fù)方組成極為復(fù)雜，難以用某些成分的血藥濃度法藥動(dòng)學(xué)參數(shù)去表述，更因?yàn)閺哪撤N意義上講，藥物療效（而不是濃度）才是我們藥物治療所關(guān)心的真正內(nèi)容。 中藥的臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究，應(yīng)遵循中醫(yī)藥理論，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)方法，制定具有中醫(yī)藥特點(diǎn)的試驗(yàn)計(jì)劃，根據(jù)中藥的功能主治，選用或建立與中醫(yī)“證”或“病”相符的病例和試驗(yàn)方法，尤其要注意下述幾個(gè)問題。 第19頁，共11

11、8頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四一、 受試者的選擇 以患者為對象所進(jìn)行的臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究，首先要解決受試者納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)的問題。原則：與中醫(yī)“證”或“病”相符國家標(biāo)準(zhǔn)：中醫(yī)病例診斷療效標(biāo)準(zhǔn) 中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則 該套技術(shù)文件共收載了中西醫(yī)病癥221個(gè)，可作為病例入選的標(biāo)準(zhǔn)。 第20頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1. 診斷標(biāo)準(zhǔn)常見的幾種值得注意的情況 （1）中醫(yī)病名診斷下無辨證分型。 例如，中醫(yī)治療外感有風(fēng)寒、風(fēng)熱等幾個(gè)證型，但有些治療外感的試驗(yàn)藥物，臨床研究的診斷、辨證標(biāo)準(zhǔn)中各種外感證型都選用了，而有的則什么辨證分型也沒有，這不符合中醫(yī)

12、的辨證論治，組方與辨證分型應(yīng)是有機(jī)的整體。 （2）疾病需要明確病情、病型、病程，而在診斷標(biāo)準(zhǔn)中都含糊不清，如燒燙傷的分度，糖尿病的分型等。第21頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四2. 排除標(biāo)準(zhǔn) 排除標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)考慮以下幾個(gè)方面：（1）兒童或老年（專門用于兒童或老年的藥物除外）、哺乳、妊娠或正準(zhǔn)備妊娠的婦女（保胎、產(chǎn)后或治療不孕證的藥物除外）等。（2）兼雜病癥，例如合并心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病、精神性病患（用于以上疾病的藥物除外）等。（3）近期曾采用同類藥物治療或服用過相關(guān)、相拮抗作用的藥物者。第22頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四

13、二、試驗(yàn)設(shè)計(jì)及觀測指標(biāo)1.試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)考慮中醫(yī)藥特點(diǎn)。 同樣的病，辨證分型可有不同，或同樣的證，涉及的病種可有不同，因而臨床試驗(yàn)的指標(biāo)也不盡相同或同中有異。在試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)根據(jù)具體情況，合理選擇。 2.中藥常具有多方面的療效，應(yīng)選擇合適方法證實(shí)其療效。 療效不夠明顯的不宜選做檢測指標(biāo)。第23頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四3.臨床觀測指標(biāo)應(yīng)特異性強(qiáng)，敏感性高，重現(xiàn)性好。 以定量或半定量的指標(biāo)進(jìn)行觀測。對試驗(yàn)方法應(yīng)做詳細(xì)敘述。在臨床觀測指標(biāo)制定方面常見的問題：（1）檢測指標(biāo)定得過于簡單，或缺乏特異性的檢測指標(biāo)。（2）檢測指標(biāo)定得超過臨床實(shí)際，使臨床難以實(shí)施。 第24頁，

14、共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四三、對研究人員的技術(shù)要求應(yīng)當(dāng)指出，承擔(dān)臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究工作的主要人員:應(yīng)具有本專業(yè)扎實(shí)的理論基礎(chǔ)和豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，并應(yīng)受過臨床藥理學(xué)或臨床科研方法學(xué)的培訓(xùn)。第25頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四實(shí)例 天麻鉤藤飲對肝陽上亢證患者腦血流作用的臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究中醫(yī)復(fù)方藥物動(dòng)力學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)開展，但臨床研究鮮見報(bào)道。藥理效應(yīng)法如何與中醫(yī)臨床辨證施治相結(jié)合，藉以解決中醫(yī)臨床復(fù)方給藥的量化問題，是一個(gè)急待探討和解決的難題。本研究通過經(jīng)顱多普勒(TCD)觀察:天麻鉤藤飲對肝陽上亢證患者: 腦血液流速 血阻的作用， 探討

15、該復(fù)方在人體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)過程。第26頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1. 資料與方法1.1 臨床資料1.1.1 一般資料：共測定年齡在3545歲間的門診肝陽上亢證患者20例，其中對照組10例，對照組中男性5例，女性5例，主要表現(xiàn)為頭痛者4例，睡眠障礙4例，高血壓病1例，美尼爾病1例。治療組10例。治療組中男性4例，女性6例，主要表現(xiàn)為頭痛者5例，睡眠障礙2例，高血壓病2例，美尼爾病6例；所有患者在給藥與檢測前兩周內(nèi)禁服其它任何藥物。第27頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.1.2 病證及診斷標(biāo)準(zhǔn)：中醫(yī)病證為頭痛、眩暈和不寐，辨證屬于肝陽

16、上亢、化風(fēng)上潛證，診斷與辨證按:中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)(國家中醫(yī)藥管理局1994年6月28日發(fā)布)、中醫(yī)內(nèi)科學(xué)(高等醫(yī)藥院校1版教材，張伯臾等主編)進(jìn)行；西醫(yī)診斷按實(shí)用內(nèi)科學(xué)(第九版，上海醫(yī)科大學(xué)編，人民衛(wèi)生出版社出版)第28頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四涉及四個(gè)基本病種：（1）高血壓(、期，舒張壓在12.67kPa15.20kPa之間者)；（2）頭痛(包括偏頭痛，高血壓頭痛和緊張性頭痛)；（3）睡眠障礙；（4）美尼爾病第29頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.2 方法1.2.1 藥材和處方（天麻鉤藤飲）：天 麻9g，鉤 藤12g，石決明

17、18g，山 梔9g，黃 芩9g，川牛膝12g，杜 仲9g， 益母草9g，桑寄生9g，夜交藤 9g，朱茯神9g。第30頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.2.2 檢測儀器：采用以色列雷蒙公司產(chǎn)9900型經(jīng)顱多普勒血流分析儀，探頭為2MHz，經(jīng)雙側(cè)顳窗，同時(shí)探測左、右大腦前、中、后動(dòng)脈的收縮峰血流速率、舒張期末血流速率、平均血流速率，并計(jì)算相應(yīng)的腦血管阻力系數(shù)。從中擇用左側(cè)大腦中動(dòng)脈的平均流速與腦血管阻力系數(shù)變化進(jìn)行分析，公式為：第31頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 第32頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.2.

18、3 測定量效關(guān)系的劑量 擬定在l/4、1/2、1、2倍常用臨床量范圍，在藥后3小時(shí)進(jìn)行測定；測定時(shí)效關(guān)系選用臨床常用量，在藥后不同時(shí)間測定。 第33頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四結(jié)果由圖12-1可知，天麻鉤藤飲具有增加大腦中動(dòng)脈血液流速與降低其血管阻力的作用，并呈量效關(guān)系。由表12-1可知，用天麻鉤藤飲給藥，不同效應(yīng)器的起效劑量與量效關(guān)系各不相同。 表12-1 天麻鉤藤飲作用的量-效方程 檢測項(xiàng)目 量-效方程(對數(shù)劑 最低起效劑量 量:增加或下降率) (g/kg) 平均流速 Y=16.99+27.72X 0.16 血管阻力 Y= 8.68+16.92X 0.19

19、第34頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第35頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第36頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 表12-2 天麻鉤藤飲作用的時(shí)-效消除方程檢測項(xiàng)目 給藥量(g/kg) 時(shí)-效消除方程 作用期(h)平均流速 1.9 Y2.57-0.28t 6.08血管阻力 1.9 Y1.63-0.15t 8.61 表12-2表明，天麻鉤藤飲在體內(nèi)增加血液流速的作用維持時(shí)間較短，降低血管阻力作用的維持時(shí)間相對較長。第37頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四結(jié)果 表12-3 天麻鉤藤飲作用

20、的體內(nèi)生物相當(dāng)藥量消除方程及參數(shù)檢測項(xiàng)目 時(shí)間相當(dāng)藥 消除速率 效量半衰期 t1/2(ED) 量消除方程 常數(shù)(K) (h) 平均流速 X0.75-0.18t 0.40 1.72 血管阻力 X0.53-0.11t 0.26 2.62 圖12-2表明，天麻鉤藤飲作用的高峰期約在給藥后24.5小時(shí)之間。由表12-3消除速率常數(shù)與效量半衰期可知，天麻鉤藤飲:提高血液流速的作用消失較快，降低血管阻力的作用消失較慢。第38頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四討論3.1 進(jìn)行中醫(yī)復(fù)方藥物動(dòng)力學(xué)的臨床研究，避免了人與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生理、病理、解剖等方面的差異，所得研究結(jié)果更具真實(shí)性、可靠

21、性與應(yīng)用價(jià)值性。如何開展相應(yīng)臨床研究，找準(zhǔn)傳統(tǒng)中醫(yī)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與藥理學(xué)三者間的結(jié)合點(diǎn)及相應(yīng)觀測指標(biāo)是非常重要的。在指標(biāo)的選定上，既要保證其直觀性、靈敏性、可逆性、可代表性及可定量性，更應(yīng)注意現(xiàn)實(shí)可行性，即如何避免創(chuàng)傷與痛苦，最大限度地爭取患者的自覺配合，是保證研究能否順利進(jìn)行，并達(dá)到預(yù)期目的之關(guān)鍵。第39頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四3.2 肝陽上亢、化風(fēng)上潛證是下述疾病的一個(gè)常見證候:高血壓、睡眠障礙、頭痛、美尼爾病，而這類疾病的發(fā)生又多與腦部血液循環(huán)障礙有關(guān)，天麻鉤藤飲治療該類疾病或許與改善腦部血液循環(huán)有關(guān)。 第40頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)

22、46分，星期四由于血管的生理、病理、解剖隸屬及對藥物的反應(yīng)差異，所檢六根血管的十八項(xiàng)血液流速指標(biāo)表現(xiàn)不一，或升高、或降低、或變化不顯。大腦中動(dòng)脈是源于頸內(nèi)動(dòng)脈系，供應(yīng)額葉、頂葉、額葉、枕葉等的一支重要分支血管，而平均血液流速是描述腦血管多普勒血流速率時(shí)較有價(jià)值的一個(gè)參數(shù)，且由收縮峰血流速率、舒張期末血流速率尚可推算相應(yīng)的腦血管阻力系數(shù)，故本研究擬采用左側(cè)大腦中動(dòng)脈的血液流速及血管阻力系數(shù)進(jìn)行分析。 第41頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四3.3 從所測結(jié)果來看，所擇指標(biāo)對天麻鉤藤飲具有良好的反應(yīng)性，天麻鉤藤飲有加快大腦中動(dòng)脈血液流速與降低其血管阻力的作用，且起效速、作

23、用快，但維持時(shí)間短、藥物易于排泄、作用消失也快，這與該方在其它藥效實(shí)驗(yàn)方面的表現(xiàn)基本一致。臨床給藥仍須縮短間隔時(shí)間以維持有效血液濃度。至于該方在血液流速與血管阻力方面所表現(xiàn)出的差異，如對血液流速的作用相對強(qiáng)而消失快，對血管阻力的作用相對緩而消失慢，這可能與效應(yīng)器及復(fù)方中不同作用成分的差異性有關(guān)。第42頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四實(shí)例12-2 用尿藥濃度法測定黃芩苷片劑和注射劑的生物利用度此例為血管外給藥尿藥速率法測定人體生物利用度之研究，請注意兩個(gè)曲線尾段回歸方程，Y為尿藥速率（X/t）的對數(shù)， X則為每一集尿時(shí)間段的中點(diǎn)時(shí)間（tc）。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，黃芩苷的代謝

24、率很高，那么其代謝產(chǎn)物在波長280nm處有無吸收呢？這是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中首先要考慮的問題。第43頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四口服吸收測定1.1方法：選健康受試者，于晚間排空尿，飲水500ml，1小時(shí)后收空白尿，然后口服黃芩苷片劑，分別收集服藥后4、8、10、12、16、18、20、22、24h的尿液，記錄尿量。每次收集的尿液用HCl調(diào)pH3.54.0后，取50ml上聚酰胺柱，緩緩滴出，吸附后用pH3.54.0的酸水洗滌，至洗出液用280nm測定吸收度0.009時(shí)，再用pH7.5的95%乙醇洗脫，于280nm測吸收度。第44頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)

25、46分，星期四計(jì)算（1）口服8片（2000mg），所得數(shù)據(jù)見表12-4。 表12-4 口服8片片劑體內(nèi)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)（4人平均值）服藥后收尿 中點(diǎn)時(shí)間 中隔時(shí)間 尿藥量 尿藥速率 lg（X/t）時(shí)間t（h） tc（h） t（h） X（mg）（X/t） 4 2 4 5.776 1.444 0.160 8 6 4 14.136 3.534 0.548 10 9 2 13.199 6.600 0.820 12 11 2 11.285 5.643 0.751 14 13 2 7.079 3.540 0.549 16 15 2 5.552 2.776 0.443 18 17 2 3.614 1.807 0.

26、257 20 19 2 3.786 1.893 0.277 22 21 2 3.713 1.857 0.269 24 23 2 2.031 1.016 0.007 第45頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 以中點(diǎn)時(shí)間為橫坐標(biāo)，尿藥速率的對數(shù)為縱坐標(biāo)作圖，圖略，曲線尾段回歸直線方程為：Y = 1.2885 - 0.05418X （X = tc；Y = lg（X/t） 尾段直線斜率：b= 0.05418 消除速率常數(shù)：K= 2.303（0.05418） = 0.1248（h-1） 生物半衰期： t 1/2=0.693/K =0.693 / 0.1248 =5.6（h） 2

27、4小時(shí)前總尿藥量=70.171（mg）第46頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四（mg）第47頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四（2）口服2片（500mg），所得數(shù)據(jù)見表12-5。 表12-5 口服2片片劑體內(nèi)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)（3人平均值）服藥后收尿 中點(diǎn)時(shí)間 中隔時(shí)間 尿藥量 尿藥速率 lg（X/t）時(shí)間t（h） tc（h） t（h） X（mg） （X/t） 4 2 4 4.126 1.0315 0.013 8 6 4 7.336 1.834 0.263 10 9 2 4.384 2.192 0.341 12 11 2 3.599 1.800 0.

28、255 16 15 2 3.907 1.953 0.291 18 17 2 2.527 1.263 0.101 20 19 2 1.405 0.701 -0.154 22 21 2 1.743 0.871 -0.060 24 23 2 1.431 0.715 -0.145 第48頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 以中點(diǎn)時(shí)間為橫坐標(biāo)，尿藥速率的對數(shù)為縱坐標(biāo)作圖（圖略），曲線尾段回歸直線方程為：Y=0.7768-0.0416X （X=tc； Y=lg（X/t） 尾段直線斜率：b=- 0.0416 消除速率常數(shù)： K=-2.303（-0.0416 ） =0.0958（h-

29、1） 生物半衰期： t 1/2=0.693/K=0.693/0.0958 =7.2（h） 24小時(shí)前總尿藥量=34.134（mg）第49頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四肌注吸收測定2.1 方法：選健康受試者注射。于早上排空尿，飲水2杯，1小時(shí)后收空白尿，將注射劑肌注于臀部。收集注射后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5h尿液，用HCl調(diào)pH3.54.0后，取50ml上聚酰胺柱，操作同前。第50頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四計(jì)算（1）注射液4支（共含精制品黃芩苷500mg）注射于兩側(cè)臀部。所得數(shù)據(jù)見表12-6。 表12-6 肌注50

30、0mg黃芩苷后體內(nèi)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)（4人平均值）肌注后收尿 中點(diǎn)時(shí)間 中隔時(shí)間 尿藥量 尿藥速率 lg（X/t）時(shí)間t（h） tc（h） t（h） X（mg） （X/t） 0.5 0.25 0.5 11.500 23.000 1.362 1 0.75 0.5 11.441 28.882 1.461 1.5 1.25 0.5 7.587 15.174 1.181 2 1.75 0.5 6.218 12.436 1.095 2.5 2.25 0.5 4.248 8.496 0.929 3 2.75 0.5 3.279 6.558 0.817 4 3.5 1 4.715 4.715 0.673 5 4.5

31、 1 3.081 3.081 0.489 第51頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四作圖（圖略），曲線尾段回歸直線方程為： Y = 1.5384 - 0.2462 X （X = tc；Y = lg（X/t） 尾段直線斜率：b=- 0.2462 消除速率常數(shù)：K=-2.303（-0.2462 ）=0.567 （h-1） 生物半衰期： t 1/2=0.693/K=0.693 / 0.567 =1.2（h） 5 小時(shí)前總尿藥量=55.06 （mg）第52頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四（mg） 第53頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)4

32、6分，星期四 （mg） 第54頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四（2）肌注2支（含黃芩苷120mg）注射液于臀部，所得數(shù)據(jù)見表12-7。 表12-7 肌注120mg黃芩苷后體內(nèi)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)（4人平均值）肌注后收尿 中點(diǎn)時(shí)間 中隔時(shí)間 尿藥量 尿藥速率 lg（x/t）時(shí)間t（h） tc（h） t（h） x（mg） （x/t） 0.5 0.25 0.5 3.707 7.414 0.870 1 0.75 0.5 4.506 9.011 0.955 1.5 1.25 0.5 2.773 5.546 0.744 2 1.75 0.5 1.605 3.210 0.507 2.5 2

33、.25 0.5 1.324 2.648 0.423 3 2.75 0.5 0.769 1.539 0.187 4 3.5 1 1.158 1.158 0.064 5 4.5 1 1.167 1.167 0.067 第55頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 作圖（圖略），曲線尾段回歸直線方程為： Y=1.0118 - 0.2469 X （X=tc；Y=lg（X/t） 尾段直線斜率：b= -0.2469 消除速率常數(shù)：K=-2.303（-0.2469 ）=0.5686（h-1） 生物半衰期： t 1/2 =0.693/K=0.693/0.5686 =1.22（h） 5 小

34、時(shí)前總尿藥量=17.009（mg）第56頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 （mg） 第57頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四通過尿藥數(shù)據(jù)處理，比較了黃芩苷兩種給藥途徑（口服、肌注）的吸收情況，見表12-8。從表中初步得出：（1）按藥廠制定的片劑給藥方法；每日3次，每次2片的劑量和用法是合適的。（2）按常用注射劑（藥房）劑量為：每日1次，每次2針（含0.12g）的用藥方法，由于t1/2太短，僅1.22h，故并不合理。 第58頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四（3）按服用片劑9小時(shí)后尿排泄速率即達(dá)高峰的情況，臨床上若用

35、于治療急、慢性肝炎，可應(yīng)用片劑有效，不必先肌注，因?yàn)榧毙愿窝撞煌谄渌毙圆?。?）從口服和肌注的腎排泄百分率，初步反映出黃芩苷的“首過作用”相當(dāng)大，代謝率也很高，肌注后腎排泄率也僅12.2%15%，這可能是由于黃芩苷經(jīng)過肝臟時(shí)對肝臟直接產(chǎn)生作用而發(fā)揮了療效。 第59頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 表12-8 黃芩苷兩種給藥途徑（口服、肌注）的吸收 給藥途徑 劑型 實(shí)際給藥劑量 （g） 尿排泄速率峰時(shí)tp（h） 尿排泄速率峰值 Cp（ug/h） 腎排泄率 （%） t1/2 （h） 口服片劑 1.95496.6045.60.48892.1987.2肌注注射劑0.47

36、90.7528.8812.21.20.120.759.01151.22第60頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 綠原酸與氨芐青霉素小兒尿藥動(dòng)力學(xué)相互影響 這是一例中西藥合用的臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究。雙黃連粉針劑（shuanghuanglian pulv，SHLP）是具有抗病毒、抗菌和增強(qiáng)免疫功能的中藥制劑，由金銀花、黃芩、連翹3味中藥組成，臨床廣泛用于呼吸系統(tǒng)的病毒類感染疾病治療，尤其在小兒感染患者中應(yīng)用更為普遍，經(jīng)常與青霉素或頭孢菌素類合用，臨床反映效果很好。第61頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四本文用高效液相色譜法測定呼吸系統(tǒng)感染小兒靜脈滴

37、注:氨芐青霉素(ampicillin，AMP)SHLP的代表成分綠原酸(chiorogenic acid，CHA)尿含量，觀察其藥物動(dòng)力學(xué)變化，為臨床合理應(yīng)用兩種藥物提供依據(jù)。第62頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.1 藥劑與儀器 SHLP（哈爾濱中藥二廠，980120），注射用AMP鈉（齊魯制藥廠，980510），CHA與AMP標(biāo)準(zhǔn)對照品（中國藥品與生物制品檢定所）510-U6K-490E-Baseline 810高效液相色譜系統(tǒng)（Waters公司），色譜柱及預(yù)柱（中科院大連化學(xué)物理研究所），2101-PC紫外分光光度儀（Shimadzu公司）；AT-130色譜

38、柱保溫裝置（天津科學(xué)儀器公司）。第63頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.2 對象 住院小兒患者共26例（男14例，女12例），年齡38歲，平均（5.82.5）歲，體重1031kg，平均(22.9)kg，均為呼吸系統(tǒng)感染，肝、腎等主要臟器功能正常，用藥前未服用除解熱鎮(zhèn)痛以外的藥物。第64頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.3 給藥與取樣方法 患者按實(shí)際治療需要給藥，靜脈滴注SHLP 60mg/kg或(和)AMP150mg/kg，溶于注射用水、生理鹽水或5葡萄糖注射液約150m1中，滴速為(305)滴/min。自開始滴注計(jì)算，收集患者02h

39、、25h、58h、812h和1224h的尿液，記錄體積后，取適量存于低溫冰箱內(nèi)。第65頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.4 高效液相測定方法1.4.1色譜條件 柱填料Sepherisorb C18 (5m，4mm150mm，45) ，預(yù)柱填料YWG C18；用序貫單純形法確定流動(dòng)相各組分比：目標(biāo)函數(shù)為色譜圖分離度，決策變量數(shù)n=3，甲醇為變量1，磷酸二氫鉀為變量2，pH為變量3，最后加水（因變量）至1L，由四個(gè)點(diǎn)組成單純形。經(jīng)過24次壓縮收縮找到最佳配比點(diǎn)：流動(dòng)相為50%甲醇水溶液，內(nèi)含0.68g/L磷酸二氫鉀，并用磷酸調(diào)pH至3.0，流速1.2ml/min；檢測

40、波長276nm（190600nm紫外掃描確定），檢測靈敏度0.005Aufs。第66頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第67頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱取CHA對照品5mg，AMP對照品10mg，用甲醇定容至10ml，精密量取此液0.1ml，再用乙腈定容至10ml，作為對照品貯備液；分別精取貯備液適量，45時(shí)氮?dú)饬鞔蹈?，分別加入正常人尿0.5ml，制成含CHA 0.5，1，2,5，8，12，16mg/L和AMP1，2，4，10，16，24，32mg/L的系列濃度尿溶液，用乙腈稀釋10倍，3000r/min

41、離心3min，離心后取上清液10l進(jìn)樣。用Baseline810色譜處理系統(tǒng)對濃度C和峰高H進(jìn)行線性回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。1.4.3 方法質(zhì)量控制 進(jìn)行加樣回收率、日內(nèi)和日間誤差以及最低檢測限的測定。第68頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1.5 樣品檢測 分別精取貯存的尿樣0.5ml，用乙腈稀釋10倍，3000 r/min離心3min后取上清夜10l進(jìn)樣，用Baseline 810色譜處理系統(tǒng)計(jì)算濃度根據(jù)時(shí)間-尿藥濃度結(jié)果用Wagner-Nelson法計(jì)算主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，組間（s）比較用成組t檢驗(yàn)。第69頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四

42、結(jié)果7人單用SHLP， 8人單用AMP， 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析, 3組間的 11人合用兩藥 有關(guān)指標(biāo)無明顯差異。經(jīng)測定，發(fā)現(xiàn)兩藥合用后的24h排出率較單用時(shí)有明顯下降（P0.05），CHA由（51.7 15.6）%下降至(42.1 12.2)%AMP由（76.3 20.5）%下降至(62.3 19.3）%，但在各時(shí)間段下降程度并不成比例。尿藥濃度和排出率結(jié)果見表12-16。第70頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四 表12-16 CHA和AMP尿濃度（mg/L）和排出率（%）測定結(jié)果（s）組別藥物02h25h58h812h1212hSHLP 7CHA濃度9.53.410.44.

43、015.74.811.23.63.81.115.44.7排出率5.62.67.53.112.74.912.93.913.04.751.715.6AMP 8AMP濃度20.54.627.65.742.369.825.37.412.83.937.410.4排出率9.53.711.24.416.05.317.55.720.16.676.320.5聯(lián)合組11CHA濃度9.03.98.43.713.65.312.03.43.21.613.44.3排出率5.82.56.22.79.73.39.13.510.04.242.112.2*AMP濃度17.75.024.56.337.411.425.48.213.

44、14.431.78.6排出率8.63.48.93.513.75.814.75.018.56.362.319.3第71頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四2.3 動(dòng)力學(xué)參數(shù) 根據(jù)時(shí)間-尿藥濃度計(jì)算主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，發(fā)現(xiàn)兩種藥物在合用后:消除半衰期明顯延長、排出速率明顯下降（經(jīng)組間檢驗(yàn)，P0.05。第95頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四2.5 精子計(jì)數(shù)的動(dòng)態(tài)觀察圖12-6描述了11例志愿者服藥8個(gè)月內(nèi)精子的動(dòng)態(tài)變化。從圖中可見:服藥45天內(nèi)，精子計(jì)數(shù)仍在正常范圍內(nèi)波動(dòng)兩個(gè)月末精子計(jì)數(shù)顯著下降，平均為0.2106/ml，其中兩例已無精子。服藥34

45、個(gè)月期間，11例精液均無精子。四個(gè)月后部分服藥者精子計(jì)數(shù)有輕度回升。第96頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四第97頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四3. 討論 目前臨床上的棉酚給藥方案是我國臨床學(xué)家經(jīng)過反復(fù)探索后得到的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，其中必有合理成分。通過了解常規(guī)給藥方案下體內(nèi)血藥濃度的變化:將為闡明棉酚作用性質(zhì)提供重要線索；另一方面，通過深入研究棉酚的臨床藥物動(dòng)力學(xué)，又有可能使原有的經(jīng)驗(yàn)式給藥方案進(jìn)一步科學(xué)化、合理化。第98頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四棉酚系多羥基化合物，易被氧化代謝。有文獻(xiàn)指出()棉酚在中性水溶液

46、中的半衰期小于18h，而本次試驗(yàn)結(jié)果表明，()棉酚在人體內(nèi)的消除相半衰期可長達(dá)116.947.6h，這提示體內(nèi)有某種保護(hù)性因素存在。從單劑量()棉酚的t1/2（）推算多次給藥的情況，到達(dá)穩(wěn)態(tài)血藥濃度的時(shí)間應(yīng)為一個(gè)月左右。而根據(jù)多次服藥后實(shí)測的數(shù)據(jù)，約需二個(gè)月左右才能達(dá)穩(wěn)態(tài)，產(chǎn)生差異的原因待查。 第99頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四自從我國化學(xué)工作者成功地將消旋棉酚拆分為()及(-)棉酚，并能提供一定量的異構(gòu)體純品作動(dòng)物及臨床試驗(yàn)以來。已經(jīng)進(jìn)行了一些有關(guān)()、(-)棉酚生物學(xué)效應(yīng)及毒性的比較研究。 第100頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四

47、例如王超功等以抗生育、死亡及體重下降為指標(biāo)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明。(-)棉酚有效有毒，()棉酚無效低毒;鄧惠玲等將()、(-)棉酚給大鼠作單劑睪丸內(nèi)注射，發(fā)現(xiàn)僅(-)棉酚有顯著的抗生精作用。但另一方面，吳大方發(fā)現(xiàn)()、(-)棉酚在肝微粒體-NADPH系統(tǒng)中產(chǎn)生超氧自由基的能力相同，兩者同樣都能引起一過性的SGPT增高。()棉酚引起志愿者低血鉀的可能性還不能被排除。吳大方首先比較了()、(-)棉酚在犬的藥物動(dòng)力學(xué)。 本試驗(yàn)結(jié)果表明，人口服(-)棉酚后的AUC和半衰期都明顯小于()棉酚。從藥時(shí)曲線上可以清楚地看出、()棉酚在體內(nèi)的命運(yùn)和()棉酚相似。兩者t1/2（）值也很相近(分別為141.7h和116.

48、9h)。第101頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四用電化學(xué)檢測高效照相色譜法測定志愿者服多劑()棉酚的中期血漿藥濃度，證實(shí)在“起效期”的兩個(gè)月內(nèi)，藥物在體內(nèi)逐步蓄積。用化學(xué)衍生化-高效液相色譜法分別測定()及(-)棉酚血漿濃度，重點(diǎn)復(fù)查了臨床“起效期”內(nèi)的部份樣品，進(jìn)一步證明了圖12-5中逐步蓄積的血藥濃度主要是無抗生育活性的()棉酚。 第102頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四值得注意的是，志愿者必須連續(xù)服藥兩個(gè)月后才出現(xiàn)明顯的抗生育作用，但在此期內(nèi)，并未見到(-)棉酚的明顯蓄積。再者，根據(jù)服單劑(-)棉酚后測得的消除半衰期(2.8h)推論

49、，采用日服一劑()棉酚的多次用藥方案，也不可能有明顯的(-)棉酚的蓄積；換言之，此時(shí)血漿(-)棉酚濃度應(yīng)呈脈沖式的。這一方面說明具有抗生育活性的(-)棉酚，并非通過蓄積，而是通過效應(yīng)的積累而起作用的，從而提示該藥作用的細(xì)胞毒性質(zhì)。另一方面，能在體內(nèi)蓄積的(+)棉酚雖無抗生育作用，但很可能與某些不良反應(yīng)有關(guān)。因此，如果臨床采用半量(-)棉酚代替全量()棉酚進(jìn)行抗生育治療，有可能保持同等療效而減輕一些不良反應(yīng)。第103頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四作者提出的結(jié)論棉酚抗生育作用不能用血藥濃度蓄積或維持一定的血藥濃度水平等概念來解釋。棉酚抗生育作用屬于不可逆或緩慢可逆型，

50、靶組織在接受初期多劑棉酚的打擊后變得比較脆弱，故在“維持期”，盡管給藥間隔時(shí)延長，給藥總量減少，平均血藥濃度明顯下降，但仍能維持療效。因建議臨床志愿者服用()棉酚時(shí)，從一開始就適當(dāng)加大每次服用量，延長給藥間隔時(shí)間，從而減少(+)棉酚在體內(nèi)的蓄積，這可能是另一種保持棉酚療效，減輕毒副反應(yīng)的措施。第104頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四正常人及缺血性腦血管病病人的鹽酸川芎嗪臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究鹽酸川芎嗪（tetramethylpyrazine hydrochloride，TMPH）是70年代中期以來在我國廣泛應(yīng)用于治療缺血性腦血管病的藥物。藥理研究表明，川芎嗪具有擴(kuò)張血管

51、，增加冠脈血流及腦血流的作用，并能抑制血小板聚集，降低血小板活性。本研究中，無論是正常人組還是缺血性腦管病人組，在房室模型的擬合上，均出現(xiàn)了兩種結(jié)果，說明房室的劃分必須依據(jù)科學(xué)數(shù)據(jù)來確定，而它又與實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)方法及數(shù)據(jù)處理方法密切相關(guān)。從臨床意義上來說，隔室是否分得合理：一看它是否與實(shí)際情況相符（如“藥-時(shí)”曲線的擬合程度），二看它能否有效地指導(dǎo)臨床用藥（如所制定的給藥方案能否達(dá)到預(yù)期目的），以及數(shù)據(jù)處理是否簡單易行。 第105頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1、實(shí)驗(yàn)材料 川芎嗪標(biāo)準(zhǔn)品由東北制藥廠提供；安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品由北京醫(yī)科大學(xué)中國藥物依賴性研究所贈(zèng)送；二氯甲烷（

52、AR）為北京化工廠產(chǎn)品經(jīng)經(jīng)重新蒸餾后使用（沸程39.541.0)；其它試劑均為北京化工廠產(chǎn)品（AR）。標(biāo)準(zhǔn)半透膜（Part N 933-0236-01） Tech ricon Chemicals Co，U.S.A；高效液相色譜儀為日本W(wǎng)aters公司產(chǎn)品，采用M490型UV/VIS可變波長檢測器，-Bondapuk C18化學(xué)鍵合相柱及u6k 進(jìn)樣閥。 第106頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四1 實(shí)驗(yàn)方法健康志愿者12人（女6，男6），年齡25.46.8歲，體重59.17.7kg。無肝腎疾病史，近一周內(nèi)無服藥史。在取空白血樣后，每個(gè)受試者一次im 40mg TMPH

53、，于給藥后不同時(shí)間取血，分離血清后，放置在20冰箱中待測。急性缺血性腦血管病病人7例（男5，女2），年齡69.39.2歲，體重68.16.5kg，無肝腎疾病史均為首次應(yīng)用TMPH治療者，取空白血樣后，每個(gè)病人靜脈點(diǎn)滴80mgTMPH（溶于5%G.S 500ml）34h滴完，于給藥過程中與停藥后不同時(shí)間取血。分離血清，置于20冰箱中凍存待測。第107頁，共118頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)46分，星期四應(yīng)用HPLC方法測定川芎嗪血中藥物含量，在空白人血清中加入不同量川芎嗪標(biāo)準(zhǔn)液（800g/ml）配成62.5，125，250，500，1000，2000，4000ngml系列濃度，以安眠酮（1.2g）為內(nèi)標(biāo)物，用3.5 ml二氯甲烷萃取，取有機(jī)層，加入1mol/L鹽酸100l，混勻，蒸干。用甲醇溶解其殘?jiān)M(jìn)樣分析。檢測波長為280nm，流動(dòng)相為甲醇:水53:42，流速1.5m1/min。以測得的川芎嗪峰高（HT）與內(nèi)標(biāo)物峰高（HIS）之比與川芎嗪標(biāo)準(zhǔn)濃度作圖，線性關(guān)系良好，r0.9998。在測定濃度范圍內(nèi)，日間變異系數(shù)（CV）在1.128.88%之間，絕對回收率平均為99.14%（91.1