芳酸及其酯類藥物的分析演示文稿

1、芳酸及其酯類藥物的分析演示文稿第一頁，共三十九頁。優(yōu)選芳酸及其酯類藥物的分析第二頁，共三十九頁。苯甲酸（鈉）一、苯甲酸類甲芬那酸丙磺舒典型藥物分類與理化性質羥苯乙酯第三頁，共三十九頁。阿司匹林水楊酸雙水楊酯對氨基水楊酸鈉貝諾酯二、水楊酸類第四頁，共三十九頁。三、其他芳酸類 氯貝丁酯布洛芬酸性較弱第五頁，共三十九頁。主要理化性質1. 溶解性: 游離型芳酸或酯類不溶于水。2. UV和IR特性：具有苯環(huán)，用于鑒別或含量測定。3. 酸性：pH 3-6，受取代基的影響。其它芳酸類酸性較弱pKa=2.95 pKa=3.49 pKa=4.26第六頁，共三十九頁。一、與鐵鹽反應二、重氮化-偶合反應三、氧化反應

2、四、水解反應五、分解反應六、紫外分光光度法七、紅外分光光度法八、TLC和HPLC 第二節(jié) 鑒別試驗第七頁，共三十九頁。 與三氯化鐵反應1.水楊酸類：2.苯甲酸類：第八頁，共三十九頁。3.其它芳酸類：a）氯貝丁酯b）布洛芬第九頁，共三十九頁。藥物類型反應條件鑒別要點水楊酸（鹽）中性、弱酸性（pH 4-6）紫色配合物苯甲酸鹽中性或堿性赭色沉淀丙磺舒少量NaOH，溶解米黃色沉淀布洛芬高氯酸羥胺+DDC，加熱20 min紫色羥肟酸鐵配合物氯貝丁酯鹽酸羥胺+KOH，加熱，+HCl紫色羥肟酸鐵配合物第十頁，共三十九頁。 凡是分子結構中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的 藥物均可反應。重氮化-偶合反應第十一頁，共

3、三十九頁。1.直接反應：對氨基水楊酸鈉2.水解后反應：貝諾酯具有潛在芳伯氨基，酸水解后再重氮化第十二頁，共三十九頁。 + K2Cr2O7 深藍色 棕綠色 甲芬那酸 + H2SO4 黃色 綠色熒光氧化反應第十三頁，共三十九頁。 1. ASA酸水解生成SA和CH3COOH：SA的mp為156161 。 2. 雙水楊酯水解生成SA：SA的mp為158。水解反應第十四頁，共三十九頁。 1. 苯甲酸鹽加熱分解生成苯甲酸升華物，可用于鑒別。 2. 丙磺舒與NaOH熔融分解成Na2SO3, 經硝酸氧化成 Na2SO4。 3. 丙磺舒加熱分解，生成SO2氣體，有臭味分解產物反應第十五頁，共三十九頁。 1. 測

4、定max ；min。 例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制備0.25mg/ml； max: 265nm, 273nm; min: 245nm, 271nm。 2. 在max 處測定一定濃度供試液的吸收度A。 例如：羥苯乙酯，5g/ml max =295 nm; A = 0.48 3. 在max 處測定供試液的百分吸收系數。 例如：貝諾酯在max =240nm; E1%1cm = 730760 紫外吸收光譜法第十六頁，共三十九頁。 4. 在規(guī)定的波長測定吸收度比值（即雙波長吸收度 比值法） 例如：對氨基水楊酸鈉10g/ml; A265/A299 = 1.561.56 再例如：甲芬那酸14g/ml

5、; A278280/A348352 = 1.151.30 第十七頁，共三十九頁。七、紅外吸收光譜法水楊酸的紅外吸收圖譜33002300cm-1N-H、 O-H1660cm-1C=O1610,15701480,1440C=C775cm-1Ar-H第十八頁，共三十九頁。370029001640N-H1580cm-11500cm-1C=C1300cm-1C-N1188cm-1C-O對氨基水楊酸鈉的紅外吸收圖譜第十九頁，共三十九頁。一、阿司匹林中特殊雜質的檢查第三節(jié) 特殊雜質檢查1.合成工藝第二十頁，共三十九頁。2. 水楊酸反應中間體與水解產物，利用SA可與高鐵鹽呈紫堇色，而乙酰水楊酸不含游離酚羥基，

6、不與高鐵離子反應。取一定量樣品和水楊酸對照品與硫酸鐵銨反應，用比色法檢查。3. 易炭化物檢查 主要檢查ASA中能被硫酸炭化顯色的低分子有機雜質。采用與標準比色液比色的方法檢查。1. 溶液的澄清度檢查原料（苯酚）和副產物（苯酯），利用這些物質不溶于Na2CO3的性質。2. 檢查第二十一頁，共三十九頁。1. 間氨基酚反應中間體和降解產物，并且容易進一步氧化，顏色加深。二、對氨基水楊酸鈉中特殊雜質的檢查2. 檢查方法：1）雙相滴定法：（Ch. P）間氨基酚溶于乙醚，對氨基水楊酸鈉不溶乙醚；乙醚提取加適量水和指示劑，鹽酸滴定，生成物在乙醚中不溶于是轉移到水相中。2）HPLC法：采用內標法，以磺胺作內標

7、（USP） 第二十二頁，共三十九頁。 甲芬那酸是以鄰-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下 縮合而成，因此成品藥物中要檢查銅鹽及有關物質。 分光光度法：利用Cu 2+與Na-DDC呈色后測定A 1. 銅鹽檢查法 原子吸收分光光度法：BP（2000） 2. 有關物質的檢查 主要檢查的是酰胺、二甲基苯胺和鄰氯苯甲 酸各國藥典均采用TLC法中的自身高低濃度對照法。三、甲芬那酸中特殊雜質的檢查第二十三頁，共三十九頁。四、氯貝丁酯中特殊雜質的檢查主要檢查成品藥物中殘留的對氯酚原料和揮發(fā)性雜質GC-FID法HPLC法：以對-羥乙基酚作內標，用正相HPLC2. 揮發(fā)性雜質的檢查方法 GC法1. 對氯酚

8、檢查返 回第二十四頁，共三十九頁。（一）直接滴定法基于此藥物酸性較強酸堿滴定法：水楊酸類1. 原理：2. 條件：在中性乙醇中，以酚酞作指示劑；。摩爾比為1:1。3. 注意事項：1）乙醇對酚酞顯酸性使結果偏高，所以乙醇在使用之前需用NaOH中和至對酚酞顯中性；2）滴定時振搖要快，防止局部堿液濃度過高使酯鍵水解；3）專屬性差，易受降解產物水楊酸和醋酸的干擾，所以不適合降解產物含量較高的樣品測定。一、阿司匹林第二十五頁，共三十九頁。（二）水解后剩余滴定法 （USP、JP）原理：條件：水溶液第二十六頁，共三十九頁。（三）兩步滴定法 （Ch.P用于阿司匹林片的測定）原因：片劑中有穩(wěn)定劑酒石酸或枸櫞酸，此

9、外工藝中可能產生水楊酸和醋酸，不能采用直接滴定或水解后剩余滴定。第一步：用NaOH中和所有的游離酸，不計量 第二步：水解與測定，采用剩余滴定法 第二十七頁，共三十九頁。 對氨基水楊酸鈉有芳伯氨基,在HCl中與NaNO2發(fā)生重氮化反應Ar-NH2 + NaNO2 + 2HClAr-N2Cl + NaCl + 2H2O 因此可用亞硝酸鈉滴定法測定其含量，此法在下章重點討論。（二）亞硝酸鈉滴定法第二十八頁，共三十九頁。 （三）雙相滴定法：（苯甲酸鈉） 這是有機酸堿金屬鹽類的常用測定方法，在水和與水不相混溶的有機溶劑（乙醚）中用標準酸進行滴定。 生成的苯甲酸不溶于水，終點pH突躍不明顯，不易觀察。苯甲

10、酸在乙醚中易溶，在水相中加入乙醚將滴定中產生的苯甲酸萃取入醚層。因此用雙相滴定可使反應完全終點明顯。第二十九頁，共三十九頁。 （一）直接紫外分光光度法 貝諾酯的含量= CxD/m = 紫外分光光度法第三十頁，共三十九頁。（二）離子交換-紫外分光光度法氯貝丁酯及其制劑 USP(2005)采用酸堿滴定法。含有酸性雜質對氯酚時，可采用強堿性陰離子交換樹脂吸附酸性雜質后紫外測定（USP（29）陰離子交換樹脂是在分子中含有堿性基團的離子交換樹脂。在水或極性溶劑中能溶脹,在水中具有堿性,能以其氫氧根離子或非金屬離子交換溶液中的陰離子。含有氫氧根離子的樹脂,根據電離常數的大小,可分為強堿性、中等堿性和弱堿性

11、三類。強堿性陰離子交換樹脂,主要是分子中含有季銨基-N(CH)3OH的樹脂。弱堿性陰離子交換樹脂,有間苯二胺-甲醛樹脂、三聚氰胺-胍甲醛樹脂等。第三十一頁，共三十九頁。第三十二頁，共三十九頁。（三）柱分配色譜-紫外分光光度法 USP(29)采用此法同時測定ASA膠囊中 ASA和SA。 1. SA的限量測定 色譜柱的制備；對照品溶液的制備；供試 品溶液的制備。第三十三頁，共三十九頁。供試品液：CHCl3液洗脫液1：CHCl3洗脫液2：HAC- 乙醚硅藻土，FeCl3-尿素 玻璃棉硅藻土，Na2CO3供試品液：CHCl3-HCl液洗脫液1：HAC-CHCl3 (1:10) 10ml洗脫液2：HAC

12、- CHCl3 (1:100) 85ml 1-雜質先洗脫2-SA后洗脫max=306nm AuAs1-雜質先洗脫2-ASA后洗脫 max=280nmASA(mg)=C(Au/As)第三十四頁，共三十九頁。 2. ASA的含量測定 色譜柱的制備；對照品溶液的制備；供試品溶液的制備。第三十五頁，共三十九頁。 Ch.P(2005)ASA的膠囊劑的含量測定采用此法。 USP（24）ASA片、對氨基水楊酸鈉、甲芬那酸、布洛芬、丙磺舒等及其制劑，采用此法。五、HPLC法第三十六頁，共三十九頁。 一、血清中ASA和SA濃度的HPLC法 色譜條件：色譜柱為ODS-C18(150mm 4.6mm, 5m) 流動

13、相為甲醇-水-正丁醇(30 :20 :1) 檢測波長為237nm；內標物為苯甲酸。 血清樣品預處理 血清100 l + HClO450 l + 不同濃度ASA和SA + 內標液 渦旋混合2min 離心5min 取上清液20 l進樣。 第五節(jié) 體內藥物分析第三十七頁，共三十九頁。 回歸方程：以峰高比（H標/H內）對濃度回歸 ASA的回歸方程：Y = 5.810-3 + 5.2910-2X r = 0.9996 SA的回歸方程：Y = 6.010-3 + 8.3310-2X r = 0.9981 ASA和SA的線性范圍分別為：120 g/ml; 230 g/ml回收率：空白血清 + 五種不同濃度測定，ASA為96.0%106.0%; SA為92.0%119.5%;（五種不同濃度均應在線性范圍內）第三十八頁，共三十九頁。色譜條件：色譜柱為LiChrospher100RP(125mm4mm, 5m) 流動相為25%乙腈溶液-醋酸緩沖