生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)臭氧消毒法再驗(yàn)證方案

1、題目衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)臭氧消毒法再驗(yàn)證方案共9頁第9頁編號Q/SOP-VMXXX醫(yī)藥集團(tuán)有限公司驗(yàn)證文件警示：公司所有驗(yàn)證文件，由企業(yè)質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人（質(zhì)量管理中心主任）最終批準(zhǔn)。驗(yàn)證總計(jì)劃、驗(yàn)證方案（包括小試方案、中試方案）、驗(yàn)證報(bào)告（包括小試報(bào)告、中試報(bào)告）只供驗(yàn)證使用，不得代替正式生產(chǎn)需要的文件。驗(yàn)證完成，驗(yàn)證方案（包括小試方案、中試方案、驗(yàn)證記錄及其他文件草案）必須全部收回，不得在工作現(xiàn)場出現(xiàn)。方 案題目衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)臭氧消毒法再驗(yàn)證方案編號生效日期共8頁第1頁頒發(fā)部門質(zhì)量管理中心分發(fā)部門質(zhì)保部、衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)臭氧消毒法再驗(yàn)證小組收件人簽名責(zé)任人簽名簽名日期主要起草人年月日審核人

2、年月日批準(zhǔn)人年月日目 次 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc199729590 目 次 PAGEREF _Toc199729590 h 2 HYPERLINK l _Toc199729591 1驗(yàn)證對象 PAGEREF _Toc199729591 h 3 HYPERLINK l _Toc199729592 2概述 PAGEREF _Toc199729592 h 3 HYPERLINK l _Toc199729593 3目的 PAGEREF _Toc199729593 h 3 HYPERLINK l _Toc199729594 4范圍 PAGEREF _Toc199

3、729594 h 3 HYPERLINK l _Toc199729595 5 規(guī)范性引用外部文件 PAGEREF _Toc199729595 h 3 HYPERLINK l _Toc199729596 6 驗(yàn)證小組 PAGEREF _Toc199729596 h 4 HYPERLINK l _Toc199729597 6.1驗(yàn)證小組成員 PAGEREF _Toc199729597 h 4 HYPERLINK l _Toc199729598 表1 驗(yàn)證小組成員及驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人 PAGEREF _Toc199729598 h 4 HYPERLINK l _Toc199729599 6.2 驗(yàn)證小組

4、職責(zé) PAGEREF _Toc199729599 h 4 HYPERLINK l _Toc199729600 7驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃 PAGEREF _Toc199729600 h 4 HYPERLINK l _Toc199729601 表2 驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃 PAGEREF _Toc199729601 h 4 HYPERLINK l _Toc199729602 8再驗(yàn)證準(zhǔn)備 PAGEREF _Toc199729602 h 4 HYPERLINK l _Toc199729603 8.1 臭氧消毒器計(jì)時(shí)功能校正 PAGEREF _Toc199729603 h 4 HYPERLINK l _Toc199729

5、604 8.2 臭氧消毒器絕緣電阻測試 PAGEREF _Toc199729604 h 5 HYPERLINK l _Toc199729605 9臭氧濃度測定 PAGEREF _Toc199729605 h 5 HYPERLINK l _Toc199729606 10微生物殺滅試驗(yàn) PAGEREF _Toc199729606 h 6 HYPERLINK l _Toc199729607 11驗(yàn)證報(bào)告的結(jié)論評價(jià) PAGEREF _Toc199729607 h 8 HYPERLINK l _Toc199729608 12附件 PAGEREF _Toc199729608 h 8驗(yàn)證對象設(shè)置在衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)

6、室潔凈區(qū)的KCF-T30移動(dòng)式臭氧滅菌器及采用該設(shè)備對潔凈區(qū)進(jìn)行消毒的方法。概述公司質(zhì)檢樓衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)設(shè)置在質(zhì)檢樓六層，包括一更間、二更間、緩沖間、陽性菌檢定室、微生物限度檢查室，潔凈區(qū)面積28 m2、層高2.2m，夾層高度1.1m，總體積92.4m3。其空氣凈化系統(tǒng)和潔凈區(qū)最近于2008年5月進(jìn)行了再驗(yàn)證，結(jié)果符合2005年版中國藥典和新修訂的藥品GMP認(rèn)證檢查評定標(biāo)準(zhǔn)（2007年版）要求。KCF-T30移動(dòng)式臭氧滅菌器于2003年8月購置，放置在微生物限度檢查室內(nèi)，臭氧產(chǎn)量2733g/h，由鎮(zhèn)江康爾臭氧有限公司生產(chǎn)，采用定時(shí)器控制臭氧發(fā)生時(shí)間，可自動(dòng)定時(shí)開機(jī)、關(guān)機(jī)。為了確認(rèn)臭氧消毒器

7、的性能是否依然適合衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)消毒需要及采用臭氧消毒器對潔凈區(qū)進(jìn)行消毒的方法是否仍然有效，在衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室空氣凈化系統(tǒng)和潔凈區(qū)驗(yàn)證合格后，制訂了本次的再驗(yàn)證方案。目的通過再驗(yàn)證，確認(rèn)臭氧消毒器的性能是否依然適合衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)消毒需要。通過再驗(yàn)證，確認(rèn)采用臭氧消毒器對潔凈區(qū)進(jìn)行消毒的方法是否仍然有效。范圍本方案除明確了驗(yàn)證對象和目的外，還規(guī)定了驗(yàn)證小組、進(jìn)度計(jì)劃、再驗(yàn)證準(zhǔn)備、臭氧濃度測定、微生物殺滅試驗(yàn)、驗(yàn)證報(bào)告的結(jié)論評價(jià)等內(nèi)容，其中附件均為規(guī)范性附件，適用于設(shè)置在衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)的KCF-T30移動(dòng)式臭氧滅菌器及采用該設(shè)備對潔凈區(qū)進(jìn)行消毒方法的再驗(yàn)證。5 規(guī)范性引用外部文件下列文件中

8、的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期或版本號或命令號的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。中國藥典 2005年版一部衛(wèi)生部消毒技術(shù)規(guī)范 2002年版6 驗(yàn)證小組6.1驗(yàn)證小組成員驗(yàn)證小組成員及驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人按表1規(guī)定。表1 驗(yàn)證小組成員及驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人職 務(wù)所在部門姓 名崗位驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人質(zhì)檢部部長驗(yàn)證小組組員質(zhì)檢部生測員6.2 驗(yàn)證小組職責(zé)根據(jù)驗(yàn)證對象提出驗(yàn)證項(xiàng)目、起草驗(yàn)證方案。負(fù)責(zé)實(shí)施批準(zhǔn)了的驗(yàn)證方案。負(fù)責(zé)實(shí)施過程的記錄、

9、報(bào)告。參加驗(yàn)證結(jié)果的評價(jià)。驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃按表2規(guī)定。表2 驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃項(xiàng) 目時(shí) 間 安 排再驗(yàn)證準(zhǔn)備臭氧濃度測定和微生物殺滅試驗(yàn)再驗(yàn)證準(zhǔn)備8.1 臭氧消毒器計(jì)時(shí)功能校正方法：在臭氧消毒器不接電源的情況下，用時(shí)鐘（可用手表代替）比較臭氧消毒器的計(jì)時(shí)器的準(zhǔn)確度?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：連測三次，三小時(shí)內(nèi)時(shí)鐘與計(jì)時(shí)器的記時(shí)誤差均不得超過5分鐘。偏差處理：8.2 臭氧消毒器絕緣電阻測試方法：在臭氧消毒器不接電源的情況下，由電工用電工萬用表檢查臭氧消毒器變壓器的絕緣電阻?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：不低于20M。偏差處理：如低于20M，則予以檢修至合格。臭氧濃度測定9.1 取樣工具：真空式采樣器（規(guī)格100ml）。9.2

10、 檢測儀器：（臭氧）氣體檢測管。9.3 取樣地點(diǎn)：緩沖間。9.4 設(shè)備運(yùn)行方法及取樣要求關(guān)閉新風(fēng)機(jī)、分體式空調(diào)器，打開陽性菌檢定室與緩沖間之間的門，關(guān)閉其他各門，開啟各高效自凈器，開啟臭氧消毒器（定時(shí)60分鐘）。臭氧消毒器開啟60分鐘后，取樣人員立即佩戴活性炭防毒口罩進(jìn)入緩沖間取樣，用真空式采樣器取樣，進(jìn)氣時(shí)間為23分鐘，取樣應(yīng)在5分鐘內(nèi)完成。臭氧消毒器運(yùn)行時(shí)，除取樣人員外，其他人員不得入內(nèi)，取樣人員要戴活性炭防毒口罩，以防止臭氧中毒。9.5 取樣及檢查方法取（臭氧）氣體檢測管1支，割斷檢測管兩端封頭。將檢測管插在采樣器進(jìn)氣口上（箭頭在外，檢測管前不加預(yù)處理管）。將采樣器手柄拉至第2檔位，前后

11、拉一次，共采樣100ml，進(jìn)氣時(shí)間23分鐘。待檢測管中指示劑顏色終止，即可從白色柱所到刻度讀出臭氧濃度數(shù)據(jù)。9.6 可接受標(biāo)準(zhǔn)：在臭氧消毒器開啟60分鐘后，潔凈室內(nèi)臭氧濃度應(yīng)達(dá)到10ppm以上。9.7 偏差處理如臭氧消毒器開啟60分鐘后，潔凈室內(nèi)臭氧濃度未達(dá)到10ppm以上，應(yīng)延長臭氧消毒器運(yùn)行時(shí)間再次測試，測試出潔凈室內(nèi)臭氧濃度達(dá)到10ppm時(shí)的時(shí)間。再次測試應(yīng)在臭氧消毒器停止運(yùn)行、自凈器運(yùn)行3小時(shí)后進(jìn)行。如臭氧消毒器開啟90分鐘后，潔凈室內(nèi)臭氧濃度仍然未達(dá)到10ppm以上，則臭氧消毒器驗(yàn)證不合格，需更換臭氧管，再測試至達(dá)到可接受標(biāo)準(zhǔn)。微生物殺滅試驗(yàn)10.1 菌懸液與菌片的制備10.1.1菌

12、種：金黃色葡萄球菌ATCC6538或CMCC(B)26003、大腸桿菌（8099）或大腸埃希菌CMCC(B)44102、白色念珠菌ATCC10231或CMCC(F)98001。稀釋液、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基，按2005年版中國藥典方法制備。其他：刻度吸管（1.0ml、5.0ml、10.0ml）、毛細(xì)吸管、移液器等。10.1.2取凍干菌種管，在無菌操作下打開，以毛細(xì)吸管加入適量營養(yǎng)肉湯，輕柔吹吸數(shù)次，使菌種融化分散。取含5.0ml10.0ml營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置37培養(yǎng)18h24h，作為第一代菌懸液。用接種環(huán)取第一代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂

13、培養(yǎng)基平板上，置37培養(yǎng)18h24h，作為第二代菌懸液。挑取第二代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，置37培養(yǎng)18h24h，即為第三代培養(yǎng)物。細(xì)菌繁殖體懸浮液保存在4冰箱中備用，應(yīng)當(dāng)天使用，不得過夜。懷疑有污染時(shí)，應(yīng)以菌落形態(tài)、革蘭染色、生化試驗(yàn)等法鑒定。10.1.3用新華定量濾紙，裁剪為方形，大小10mm10mm，于121壓力滅菌20分鐘，備用。將經(jīng)滅菌的載體片平鋪于無菌平皿內(nèi)，取菌懸液，逐片滴加菌液，每片10l，用接種環(huán)涂勻載體表面，置室溫下自然陰干備用。每個(gè)菌片的回收菌數(shù)，按活菌培養(yǎng)所得結(jié)果，應(yīng)為5105個(gè)/片5106個(gè)/片。制得的菌懸液和菌片，應(yīng)隨時(shí)放入冰箱內(nèi)，盡量減少在室溫的放置

14、時(shí)間。10.2 活菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)按2005年版中國藥典附錄規(guī)定。10.3 微生物殺滅試驗(yàn)10.3.1 消毒方法關(guān)閉新風(fēng)機(jī)、分體式空調(diào)器，打開陽性菌檢定室與緩沖間之間的門，關(guān)閉其他各門，開啟各高效自凈器，開啟臭氧消毒器（定時(shí)180分鐘），運(yùn)行180分鐘。消毒至規(guī)定時(shí)間（180分鐘）后，自凈器繼續(xù)運(yùn)行1小時(shí)。10.3.2 試驗(yàn)組取樣方法微生物限度檢查室、陽性菌檢定室、緩沖間分別取一點(diǎn)（在室內(nèi)中心地面），兩個(gè)潔凈工作臺(tái)各取一點(diǎn)（臺(tái)面中心）。每點(diǎn)以2片菌片為一組，置一無菌平皿中，不要重疊。試驗(yàn)時(shí)，打開平皿蓋，消毒180分鐘并在自凈器繼續(xù)運(yùn)行1小時(shí)后，取出菌片，進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。陽性對照組取樣方法：將未消毒

15、的菌片2片，置于潔凈區(qū)外的室溫下，待試驗(yàn)組消毒和取樣完畢后，同時(shí)進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)檢測，作為陽性對照。陰性對照組取樣方法：取本批次試驗(yàn)同批的稀釋液接種培養(yǎng)基培養(yǎng)，作為陰性對照。其他要求微生物殺滅試驗(yàn)重復(fù)三次。對白色念珠菌，用改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度2025；細(xì)菌用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度3537。活菌計(jì)數(shù)方法事先應(yīng)按2005年版中國藥典微生物限度檢查法中“細(xì)菌、霉菌與酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證”進(jìn)行驗(yàn)證。10.4 評價(jià)及可接受標(biāo)準(zhǔn)在三次試驗(yàn)中，所設(shè)陽性對照菌的回收菌量在5105個(gè)/片5106個(gè)/片，陰性對照無菌生長，試驗(yàn)組每次殺滅對數(shù)值均3 。殺滅對數(shù)值(KL)=對照組平均活菌濃度的對數(shù)值（N0）

16、-試驗(yàn)組活菌濃度對數(shù)值（NX）如陽性或陰性對照組的結(jié)果與上述要求不符，試驗(yàn)作廢，重新進(jìn)行。10.5 注意事項(xiàng)試驗(yàn)前，應(yīng)先啟動(dòng)空氣凈化系統(tǒng)和潔凈工作臺(tái)30分鐘后，進(jìn)行接種操作，接種完畢，迅速放置樣品并立即開始消毒試驗(yàn)。如對試驗(yàn)結(jié)果由懷疑，可在試驗(yàn)時(shí)同步進(jìn)行臭氧濃度測定，以作進(jìn)一步分析。再次測試應(yīng)在臭氧消毒器停止運(yùn)行、自凈器運(yùn)行3小時(shí)后進(jìn)行。溫濕度控制最好一致。10.6 偏差處理：如按上述方法消毒180分鐘不能達(dá)到可接受標(biāo)準(zhǔn)，可追加消毒時(shí)間至240分鐘，如仍然不能達(dá)標(biāo)，則消毒方法不成立，需要作專案研究處理。驗(yàn)證報(bào)告的結(jié)論評價(jià)質(zhì)保部負(fù)責(zé)在驗(yàn)證工作完成后組織評價(jià)和寫出驗(yàn)證報(bào)告、建議，驗(yàn)證報(bào)告由質(zhì)保部負(fù)責(zé)人審核。評價(jià)、審核驗(yàn)證報(bào)告時(shí)應(yīng)按照驗(yàn)證方案的內(nèi)容加以核對與審查，驗(yàn)證報(bào)告的審核要求包括：驗(yàn)證應(yīng)按規(guī)定的方法與步驟完成。驗(yàn)證記錄應(yīng)及時(shí)、清晰、完整、真實(shí)。驗(yàn)證方案在實(shí)施過程中如有修改或補(bǔ)充，則修改或補(bǔ)充應(yīng)經(jīng)過批準(zhǔn)，理由應(yīng)充分(見附件四)。驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)符合設(shè)定的要求，對偏離要求的結(jié)果應(yīng)做過調(diào)查，并應(yīng)有適當(dāng)?shù)慕忉?。?yàn)證報(bào)告由質(zhì)量管理中心負(fù)責(zé)人最終批準(zhǔn)，最終批準(zhǔn)前應(yīng)對驗(yàn)