動物細胞融合與單克隆抗體

1、優(yōu)選動物細胞融合與單克隆抗體第一頁，共三十三頁。雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生出細胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細胞AB去 壁去 壁人工誘導方法？促進融合的方法？融合完成的標志植物細胞B植物體細胞雜交技術過程第二頁，共三十三頁。成果和未解決的問題 成果：克服不同生物遠緣雜交的障礙，出 現(xiàn)自然界沒有的新品種。未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們 的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。第三頁，共三十三頁。如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！動物細胞也能融合嗎？第四頁，共三十三頁。一、動物細胞融合細胞A細胞B雜

2、交細胞滅活的病毒物理法化學法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒第五頁，共三十三頁。不同DNA的兩個細胞滅活病毒誘導細胞融合融合后的細胞進行有絲分裂1、動物細胞融合過程第六頁，共三十三頁。思考題1、植物體細胞雜交前做何處理？怎么處理？去壁 酶解法，如纖維素酶或果膠酶2、動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？無需，因為動物細胞無細胞壁3、植物體細胞雜交誘導原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？離心、振動、電激等物理方法；PEG等化學方法第七頁，共三十三頁。4、動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法？能 還可以利用滅活的病毒進行誘導5、植物體細胞雜交過程應先進行原生質(zhì)體融合再進行組織培養(yǎng)形成完整的個體

3、，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？不能6、你能歸納出什么叫做動物細胞融合嗎？思考題第八頁，共三十三頁。2、動物細胞融合的概念 動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞形成一個細胞的過程。第九頁，共三十三頁。7、你推測一下動物細胞融合有哪些方面的應用嗎？思考題 利用動物細胞融合技術誘導形成雜交瘤細胞8、在生產(chǎn)實際中雜交瘤細胞有怎樣的應用？ 生產(chǎn)單克隆抗體第十頁，共三十三頁。細胞融合與融合誘導細胞融合物質(zhì)：誘導劑：仙臺病毒、聚乙二醇誘導細胞融合的仙臺病毒必須滅活。思考討論：為什么細胞融合過程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？ 因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細

4、胞膜打開，細胞發(fā)生融合，不滅活的話會感染細胞，而不能誘導細胞融合。 細胞融合技術應用于哪些方面？ 細胞學、遺傳學、免疫學及制備單克隆抗體。第十一頁，共三十三頁。1.抗體是由何種細胞產(chǎn)生的？2. 如何得到抗體？提問？二、單克隆抗體第十二頁，共三十三頁。 抗體1、抗原 動物體內(nèi)刺激漿細胞 抗原 動物體內(nèi)刺激漿細胞 抗體抗原不純抗體不純篩選單一漿細胞不能增殖產(chǎn)生大量抗體2、特異性差、純度低；產(chǎn)量低、反應不夠靈敏二、單克隆抗體第十三頁，共三十三頁。設計方案：一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖如何獲得化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體？雜種細胞二、單克隆抗體第十四頁，共三十三頁。 ？

5、？誘導其融合的方法有哪些？ 抗原 漿細胞2.制備過程： 二、單克隆抗體第十五頁，共三十三頁。B BB B瘤 瘤瘤 瘤細胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞？篩選（特定的選擇性培養(yǎng)基）雜種細胞第十六頁，共三十三頁。整個制備過程要經(jīng)過幾次篩選?（第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種），第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。 由于該細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學性質(zhì)單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個細胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細胞，而是雜交瘤細胞。） 第十七頁，共三十三頁。3.單克隆抗體的應用：

6、作為診斷試劑用于治療疾病和運載藥物生物導彈 特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。第十八頁，共三十三頁。主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學（聚乙二醇）誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較第十九頁，共三十三頁。 下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術的方法，設計的生產(chǎn)破傷風桿菌的實驗方案3、圖中B為_過程，常用_作為誘導劑，該細胞繼承_的遺傳特性，既能_,又能_。1、該實驗方案的目的是_2、A是從小鼠的脾臟中取

7、得_,該細胞能夠產(chǎn)生_4、C過程指細胞培養(yǎng)，該過程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個階段。制備單克隆抗體B細胞抗體細胞融合滅活病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到小鼠腹腔AC第二十頁，共三十三頁。下列屬于動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是A.培養(yǎng)基成分不同B.動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行C.動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能D.動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株下列與動物細胞培養(yǎng)有關的表述中，不正確的是 A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清B原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯C動物細胞培養(yǎng)一般能夠

8、傳到4050代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變D動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細胞AC第二十一頁，共三十三頁。生物技術的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復生”野驢的方法是 A將野驢的體細胞取出，利用組織培養(yǎng)技術，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個體B將野驢的體細胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個體C取出野驢的體細胞核移植到母家驢的去核卵細胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體D將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個體C第二十二頁，共三十三頁。一只羊的卵細胞核被另一只羊的體細胞核置換后，這個卵細胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結果

9、產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術具有多種用途，但是不能A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個體C用于保存物種 D改變動物的基因型D第二十三頁，共三十三頁。下列哪項屬于克隆A將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細胞內(nèi)C將鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的脾細胞融合成雜交瘤細胞 D將某腫瘤細胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個細胞系試管嬰兒、試管苗和克隆羊三者均屬于生物工程技術的杰出成果，下面敘述正確的是A.都屬于無性生殖能保持母本性狀 B.都是細胞工程的技術范圍C.都充分體現(xiàn)了體細胞的全能性 D.都不會發(fā)生基因重組和變異DB第二十四頁，共三十三頁。下圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過

10、程示意圖。請據(jù)此回答：（1）A中放置的是動物器官或組織。它一般取自 。（2）容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是 ， 然 后用 酶處理，使細胞分散開來，這樣做的目的是 。（3）培養(yǎng)首先在B瓶中進行，瓶中的培養(yǎng)基成分有_等。在此瓶中培養(yǎng)一段時間后，有許多細胞衰老死亡，這是培養(yǎng)到第 代，到這時的培養(yǎng)稱為 。（4）為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用 處理，然后配置成 ，再分裝。（5）在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞全部死亡，原因是 。第二十五頁，共三十三頁。CCTV一2于2005年4月7日報道，衛(wèi)生部4月6日發(fā)布了蘇丹紅危險性報告評估，報道中提到蘇丹紅一號是一種人工色素(工業(yè)染料)，它在

11、人體內(nèi)代謝生成相應的胺類?？蒲腥藛T欲采用一定的技術手段探究蘇丹紅是否對人體有危害。請回答：（1）根據(jù)所學的動物細胞工程知識，你認為采取下列哪種技術手段最合適： A動物細胞融合 B動物細胞培養(yǎng) C胚胎移植 D核移植第二十六頁，共三十三頁。（2）根據(jù)上述選擇，請你設計一個實驗來探究“蘇丹紅一號”是否對人體有危害。1該實驗的原理是： 。2實驗方法步驟： 材料準備：從醫(yī)院婦產(chǎn)科獲取所需要的原材料組織，濃度為0.09“蘇丹紅一號”試劑，高倍顯微鏡，培養(yǎng)瓶若干，配制好的培養(yǎng)液，剪刀，培養(yǎng)箱，所需要的酶。 制備檢測細胞：a配制細胞懸浮液： 。b將懸浮液分裝到兩個以上的培養(yǎng)瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間。 檢

12、測過程： 。實驗結果觀察、分析得出結論。(略) 第二十七頁，共三十三頁。動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是 A融合的原理 B融合的過程 C融合的誘導手段 D融合的結果C第二十八頁，共三十三頁。下表為動、植物細胞工程的有關內(nèi)容比較，你認為錯誤的有植物細胞工程動物細胞工程特殊處理酶解法去除細胞壁胰蛋白酶處理配制細胞懸液融合方法物理方法，化學方法物理方法，化學方法，生物方法典型應用人工種子，種間雜種植物單克隆抗體的制備培養(yǎng)基的區(qū)別麥芽糖是離體組織賴以生長的成分動物血清不可缺少A0處 B1處 C2處 D3處第二十九頁，共三十三頁。（1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已

13、用 處理，除去了 ；由A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法是 。融合完成的標志是 。（2）若A、B是植物細胞，則形成的D細胞還要應用 技術把D培養(yǎng)成植株。（3）若A、B是動物細胞，一般取自 ，然后用 使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞融合的手段是 ，所形成的D稱為 ，A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有 。（1）纖維素酶和果膠酶 細胞壁 電刺激、振動、離心 產(chǎn)生新的細胞壁 （2）植物組織培養(yǎng)(3)動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織 胰蛋白酶 滅活的病毒誘導 雜種細胞 一定的流動性第三十頁，共三十三頁。（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應B細胞，那么，在獲得

14、此細胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應的免疫反應，生成了_，圖中B為 。（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有 種，用來培養(yǎng)的D細胞應該是 。從中選擇出它的方法是 培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和 。(4)抗原 效應B細胞 抗體和記憶細胞 骨髓瘤細胞 (5)3 雜交瘤細胞 用特定的選擇培養(yǎng)基 小鼠腹腔內(nèi)增殖第三十一頁，共三十三頁。若人基因的作用不受鼠基因影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的 號染色體上。將分離出的雜種細胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得A、B、C三細胞株。各細胞株內(nèi)含有的人染色體如有表（“+”有，“”無）測定各細胞株中人體所具有的五種酶的活性。結果是：B株有a酶活性；A、B、C株均有 b酶活性：A、B株有c酶活性；C株有d酶活性；A、B、C株均無