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1、8.1 水的衛(wèi)生細菌學一、水中的細菌及其分布(1)水中細菌的來源 土壤、污水、垃圾、死的動植物、雨、雪等。(2)水中細菌的數(shù)量 被糞便污染的水工業(yè)區(qū)、城市附近細菌多,且有病原菌河水下游,細菌數(shù)目逐漸下降(3)水中細菌的分布(不均勻)近岸和湖中心,湖水表面和深水區(qū),雨前和雨后,湖底淤泥和湖水中。地下水和地表水,深層地下水和淺層地下水。第八章 水的衛(wèi)生細菌學及水中微生物的控制二、水中的病原細菌和病毒 水中的病原細菌極少,大多不是病原細菌,病原細菌主要來自腸道。 水中常見的病原細菌: 傷寒桿菌 痢疾桿菌 霍亂弧菌 腸道傳染病菌 水中常見的病毒: 腸道病毒 (1)傷寒桿菌 三種:傷寒沙門氏菌 副傷寒沙
2、門氏菌 乙型副傷寒沙門氏菌 形狀:桿狀 大?。?.60.7 x 2.04.0 um 癥狀:急、持續(xù)發(fā)熱、肝脾腫大、軀干出現(xiàn)紅腫、腹瀉 特點:不生芽孢、莢膜,周身有鞭毛,革蘭氏陰性菌。 5%石炭酸需5min殺死;60 30min殺死。 感染源:被感染者或帶菌者的尿及糞便, 接觸被污染的物品、食物、水等。(2)痢疾桿菌(細菌性痢疾) 兩種: 痢疾桿菌(痢疾志賀氏菌) 副痢疾桿菌(副痢疾志賀氏菌) 形狀:桿狀 大?。?.40.6 * 1.03.0 um 癥狀:急性腹瀉,大便中有血及黏液。菌重,菌輕 特點:不生芽孢、莢膜,沒有鞭毛,革蘭氏陰性菌。 1%石炭酸 30min殺死; 60 10min殺死。(
3、3)霍亂弧菌 形狀:彎曲桿狀。或短或粗 大?。?.30.6 * 1.05.0 um 特點:不生芽孢、莢膜,一根鞭毛,革蘭氏陰性菌。 1%石炭酸 5min殺死; 60 10min殺死; 耐高堿。 癥狀:輕腹瀉。 重嘔吐,“米湯樣”大便,腹疼,昏迷。 嚴重的12小時死亡。 感染源:被感染者或帶菌者的尿及糞便, 接觸被污染的物品、食物、水等,蠅類。防范措施: 改善糞便管理工作; 灌溉前沉淀處理城市生活污水; 砂濾; 消毒 以上三種病原菌和病毒用一般的加氯消毒均可除去。目前一般水廠的加氯量只能殺死腸道傳染病菌及腸道病毒。三、大腸菌群和生活飲用水的細菌標準(一)大腸菌群作為水衛(wèi)生指標的意義(1) 進行細
4、菌衛(wèi)生細菌學檢驗的目的 保證水中不存在腸道傳染病的病原菌;天然水體中的病原菌很可能是受糞便污染帶入;只檢測水中是否有腸道正常細菌存在,而不直接檢測水中的病原菌。(2)腸道正常細菌 三類: 大腸菌群 腸球菌 產(chǎn)氣莢膜桿菌(4) 選作衛(wèi)生指標符合的要求 該細菌生理特性與腸道病原菌類似,在外界存活時間基本一致; 該種細菌在糞便中的數(shù)量較多; 檢驗技術(shù)較簡單。(5)大腸菌群作為檢驗水的衛(wèi)生指標腸菌群的生理習性與病原菌相似,并且外界存活時間基本一致;腸球菌在外界存活時間比病原菌短;產(chǎn)氣腸桿菌存活時間時間長。 大腸菌群在人糞便中數(shù)量很大。 健康人5000萬個/克糞便,生活污水3萬個/毫升。 檢驗技術(shù)不復雜
5、。(2) 形態(tài)特性 革蘭氏陰性菌,無芽孢,無莢膜;有鞭毛;短桿菌,端部鈍圓。(3)生理特性 兼性好氧; 適宜pH 中性(4.59.0); 分解葡萄糖、甘露醇、乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣; 遠騰氏培養(yǎng)基或伊紅美蘭培養(yǎng)基上形成特征菌落。(4) 用于檢測的有機物(人糞便中存在大量的E.coli)葡萄糖、甘露醇 溫度:43 45 檢出:大腸桿菌、副大腸桿菌; 產(chǎn)氣桿菌、枸櫞酸鹽桿菌不能檢出。 乳糖(檢驗的水質(zhì)安全可靠) 溫度:37 檢出:大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌; 副大腸桿菌不能檢出。四、水的衛(wèi)生細菌學檢驗(一)細菌總數(shù)的測定 方法:將定量的水樣接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,在37溫度下培養(yǎng)24hr后,計數(shù)生長的細菌菌落數(shù),
6、然后根據(jù)接種的水樣數(shù)量就可算出每毫升水中的細菌數(shù)。 先接種稀釋水樣, 再傾注培養(yǎng)基, 細菌總數(shù)愈多,污染愈重。 (二)大腸菌群的測定 兩種方法: 發(fā)酵法 濾膜法 發(fā)酵法測定水中的大腸菌群數(shù)(以乳糖作有機物分解) 三步: 初步發(fā)酵試驗 平板分離 復發(fā)酵試驗(1)發(fā)酵法 初步發(fā)酵試驗 方法:將水樣置于乳糖液體培養(yǎng)基中,37培養(yǎng)24hr,觀察產(chǎn)酸和產(chǎn)氣情況。 產(chǎn)酸產(chǎn)氣初步確定有大腸菌群。 產(chǎn)酸:溴甲酚紫作指示劑,培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。 產(chǎn)氣:杜氏小管頂端有氣泡 產(chǎn)酸產(chǎn)氣的菌有:大腸菌群 厭氧芽孢桿菌 好氧芽孢桿菌 平板分離將第一步產(chǎn)酸產(chǎn)氣的菌落劃線接種在伊紅美蘭固體培養(yǎng)基表面, 37培養(yǎng)24hr,目
7、的阻止厭氧芽孢桿菌生長。 大腸菌群和好氧芽孢桿菌生長,同時大腸菌群有特征性菌落出現(xiàn)。革蘭氏染色 取有典型菌落特征的單個菌落進行革蘭氏染色。 大腸菌群:革蘭氏陰性菌、不生芽孢、好氧。 好氧芽孢桿菌:革蘭氏陽性菌、生芽孢、好氧。 復發(fā)酵試驗 將可疑菌落(革蘭氏陰性、伊紅美蘭特征菌落)移接于乳糖液體培養(yǎng)基中,37培養(yǎng)24hr。 產(chǎn)酸產(chǎn)氣者確定為有大腸菌群存在。 厭氧芽孢桿菌水樣接種 產(chǎn)酸產(chǎn)氣 大腸菌群 好氧芽孢桿菌 產(chǎn)生典型菌落(大腸菌群、產(chǎn)氣芽孢桿菌) 革蘭氏陰性無芽孢、大腸菌群 產(chǎn)酸、產(chǎn)氣(陽性管)初步發(fā)酵鑒別培養(yǎng)基,平板分離革蘭氏染色復發(fā)酵(2)濾膜法 為了縮短檢驗時間,簡化檢驗方法,可以采用
8、濾膜法。用這種方法檢驗大腸菌群,有可能在 24h 左右完成。濾膜法通常是用孔徑為 0.45 m 的微孔濾膜水樣,細菌被截留在濾膜上,將濾膜貼在懸著型培養(yǎng)基上培養(yǎng),計數(shù)生長在濾膜上的典型大腸菌群落數(shù)。 濾膜上生長的總大腸菌群數(shù)的計算公式如下:總大腸菌群菌落數(shù)(cfu /100 mL)= 濾膜法的主要步驟如下: 將濾膜裝在濾器上,用抽濾法過濾定量水樣,將細菌截流在濾膜表面。 將此濾膜沒有細菌的一面貼在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基或伊紅美藍固體培養(yǎng)基上,以培育和獲得單個菌落。根據(jù)典型菌落特性及可測得大腸菌群數(shù)。 為進一步確證,可將濾膜上符合大腸菌群特征的菌落進行革蘭染色,然后鏡檢。 將革蘭染色陰性無芽孢桿菌的
9、菌落接種到含糖培養(yǎng)基中,根據(jù)產(chǎn)氣與否來最終確定有無大腸菌群存在。8.2 水中微生物的控制方法一、病原微生物的去除 家庭:水煮沸 自來水廠: 加氯消毒 臭氧消毒 二氧化氯消毒 紫外線消毒(1)加氯消毒(常用) 液氯,漂白粉(2530%有效氯) 有效氯:凡是化合價高于-1的氯化物都有氧化能力,有效氯表示氯化物的氧化能力。 氯的氧化能力加氯氣后: Cl2 + H2O = HOCl + H+ + Cl- HOCl = OCl- + H+起氧化作用的是: HOCl 中性,擴散滲透進入細胞,氯原子殺死細菌。 OCl- 負電,細菌細胞帶負電,相斥,難起消毒作用。HOCl與 OCl-量的多少取決于水的pH值:
10、 pH 越低,所含的HOCl越多,因而消毒效果較好。 pH 5,幾乎全是HOCl pH 10,幾乎全是OCl- 水溫降低,HOCl所占比例增大(pH不變時) 加氯量水消毒時加氯量分兩部分:需氯量:用于殺死細菌和氧化有機物等所消耗的氯量。 余氯量:加入水中的氯用于殺死細菌和氧化有機物等消 耗后的剩余部分。保證一定量的余氯的重要性: 保證有持續(xù)的殺菌能力。 我國生活飲用水衛(wèi)生標準(TJ 20-76)規(guī)定:加氯接觸30min 后,游離性余氯不應低于0.3mg/L,集中式給水,除水廠的出水應符合上述要求外,管網(wǎng)末梢水的游離性余氯不應低于0.05mg/L。該規(guī)定適用范圍: 只能保證殺死腸道傳染病菌。一般
11、,pH=7時,殺死病毒所需余氯量是殺死一般細菌的220倍,并與水溫成反比。 殺死赤痢阿米巴需余氯310mg/L,時間30min。 殺死炭疽桿菌需余氯量更大,易形成致癌物三氯甲烷。(2)臭氧消毒(臭氧有強的殺菌力)優(yōu)點:不需長時間接觸,可殺死細菌; 對病毒、芽孢有很大的殺傷效果; 不受水中pH等的影響; 除鐵、錳,去臭、去味、去色度。用法:用于消毒過濾水,加量 1mg/L;去色,除臭味,加量45mg/L; 維持剩余臭氧量0.4mg/L,接觸時間15min。缺點:發(fā)生裝置復雜,費用高,1Kg臭氧耗電1520度。 在水中不穩(wěn)定,易散失。 不能儲藏,邊生產(chǎn)邊使用。(3)二氧化氯消毒 一種氯消毒法,效果
12、優(yōu)于氯,次于臭氧。優(yōu)點:不形成致癌物三氯甲烷; pH610范圍內(nèi),殺菌效果幾乎不受pH影響; 二氧化氯有很強的除酚能力。反應:NaClO2 =ClO2+缺點:NaClO2較貴,而且ClO2不能儲存,生產(chǎn)出來立即 使用;只有水源嚴重污染一般氯消毒有困難時才 采用該法消毒。(4)紫外線消毒 能處理的水: 色度低,懸浮雜質(zhì)和膠體物質(zhì)少,水深不超出12 cm ,一般僅在特殊情況下小規(guī)模使用。二、 藻類的去除天然水:病原微生物,藻類(水庫、湖泊)(1)CuSO4去除藻類 投加量: 天然水 0. 3 0.5 mg/L (0.30.5ppm),藥效長、效果好,幾天殺死大量藻類。但不能去臭。 幾個mg/L去除
13、水管、構(gòu)筑物內(nèi)軟體動物。(2)漂白粉去除藻類 投加量: 0.51 mg/L (0.51ppm),殺藻、去臭。8.3 飲用水的生物穩(wěn)定性一、有機物的來源、危害與生物穩(wěn)定性的提出 (1)水源水中的有機物的來源可分為兩大類:一類為天然有機物,是自然環(huán)境的代謝產(chǎn)物,包括腐殖質(zhì)、微生物分泌物、溶解的植物組織及動物的廢棄物等。另一類是人工合成有機物,包括農(nóng)藥、工業(yè)廢棄物等。 (2)危害作用: 部分有機物為高毒性的持久性有機污染物或內(nèi)分泌干擾物質(zhì),具有致癌性、生殖毒性、性等危害,對人體健康有直接的威脅; 部分有機物為消毒副產(chǎn)物的前體物質(zhì),在加氯消毒過程中可形成具有毒性的鹵代有機化合物,進而危害人體健康; 飲
14、用水中的可生物降解有機物將對給水管網(wǎng)和管網(wǎng)水質(zhì)產(chǎn)生危害。這其中的第三類危害已成為近年來的關(guān)注熱點。二、生物穩(wěn)定性的概念 飲用水生物穩(wěn)定性是指飲用水中可生物降解有機物支持異養(yǎng)細菌生長的潛力,即當有機物成為異養(yǎng)細菌生長的限制因素時,水中有機營養(yǎng)基質(zhì)支持細菌生長的最大可能性。飲用水生物穩(wěn)定性高,則表明水中細菌生長所需的有機營養(yǎng)物含量低,細菌不易在其中生長;反之,飲用水生物穩(wěn)定性低,則表明水中細菌生長所需的有機營養(yǎng)物含量高,細菌容易在其中生長。三、給水管網(wǎng)中細菌生長的影響因素余氯 保持管網(wǎng)內(nèi)一定的余氯含量以控制細菌生長是目前世界范圍內(nèi)普遍采用的消毒方法。營養(yǎng) 管網(wǎng)飲用水中存在的大多數(shù)是異養(yǎng)菌,必須依靠分解和利用可生物降解有機物質(zhì)維系生命。顆粒物 水中顆粒物易成為細菌生長的載體,并降低氯對細菌的殺滅作用。水力因素 水流速度增大可將更多的營養(yǎng)物帶到管壁生物膜處;同時也增加了消毒劑含量和對生物膜的
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