中藥制劑分析總論課件

1、第五章 中藥制劑分析總論藥物分析教研室第五章 中藥制劑分析總論第一節(jié) 中藥制劑定性分析目的： 檢定制劑的真實性。中藥定性分析的方法顯微鑒別法理化鑒別法 一般化學(xué)反應(yīng)法升華法熒光法光譜法色譜法 第一節(jié) 中藥制劑定性分析一、中成藥的顯微鑒別 （一）制片方法 1散劑、膠囊劑 取粉末，直接加水或水合氯醛透化裝片。 2片劑 用刀片直接從藥片斷面刮取少量粉末或研碎后取少量樣品 透化裝片。 3水丸、錠劑 研成粉末后取少量直接透化裝片。 4蜜丸 取蜜丸切碎，加水?dāng)嚢?，洗滌后，置離心管中離心分離沉 淀。如此反復(fù)處理以除去蜂蜜后透化裝片。 若觀察細(xì)胞內(nèi)含物形狀，應(yīng)選用不同試劑制片。 淀粉粒 水或甘油醋酸試液； 糊

2、粉粒 甘油； 水溶性內(nèi)含物 乙醇或水合氯醛試液(不加熱)。 一、中成藥的顯微鑒別 固定標(biāo)本片制片方法 取中成藥粉末置離心管中，加乙醇浸過上面，玻棒攪拌510分鐘后離心使粉末沉積，傾去稀醇液，再加無水乙醇二次，丙酮一次，丙酮、二甲苯等量混合液一次，如前操作，每次1020分鐘；最后加入純二甲苯，略加攪拌，取處理后的樣品微量置載玻片上，滴加中性樹膠，加蓋玻片封藏，貼標(biāo)簽。 固定標(biāo)本片制片方法（二）觀察要點 中成藥粉末鏡檢時，首先要了解處方中的藥味組成，明確其來源的藥用植物的部位，才能根據(jù)該部位的顯微特征來進(jìn)行檢出。 1.根類 木栓組織碎片，表面觀多為多角形細(xì)胞， 排列緊密。 導(dǎo)管 直徑、節(jié)的長短、末

3、梢壁的穿孔及增厚壁的紋理類型。 草酸鈣結(jié)晶晶形、 分泌組織、 淀粉粒的形狀、 臍點 層紋 2.根莖類 與根類藥材粉末特征相似。而淀粉粒有時較大，有鱗葉組織，退化的 鱗葉表皮細(xì)胞大多狹長，細(xì)胞壁平直或波狀彎曲。 （二）觀察要點 3.莖類 （1）莖類 表皮細(xì)胞及垂周壁的形狀，氣孔的類型，毛茸的類型及形態(tài)； 導(dǎo)管的類型、直徑、長短。 管胞的形態(tài)； 纖維的形狀、直徑、長短、有無晶纖維等。 草酸鈣結(jié)晶多為方晶及簇晶，單子葉植物偶見針晶。 薄壁組織碎片、石細(xì)胞。 （2）皮類 纖維的直徑、長短及形狀，是否成束存在， 細(xì)胞壁厚薄、木化與否，能否看到胞腔及壁孔等。 石細(xì)胞的形狀、細(xì)胞壁增厚情況。 草酸鈣結(jié)晶多為

4、方晶及簇晶，砂晶及針晶較少。 皮類藥材粉末不應(yīng)含有木質(zhì)部組織，如導(dǎo)管、管胞等。 （3）木類 可見導(dǎo)管、管胞、木纖維、木射線及木薄壁細(xì)胞。細(xì)胞壁 通常均木化。不應(yīng)有木栓細(xì)胞及綠色組織等。 3.莖類 4.花類 （1）苞片及花萼 構(gòu)造類同葉片，表面上可見到氣孔及毛茸。 （2）花冠 上表皮細(xì)胞常呈乳頭狀或絨毛狀突起而無氣孔， 下表皮細(xì)胞常不呈乳頭狀， 細(xì)胞壁微波狀彎曲。 維管束組織細(xì)小。 （3）雄蕊 花粉囊內(nèi)壁細(xì)胞的壁不均勻地增厚，呈網(wǎng)狀、螺旋狀、 環(huán)紋狀及點狀等； 花粉粒具圓形、長圓形或多面形等多種形狀。 通常具內(nèi)外兩層壁，外壁多數(shù)具各種雕紋。 （4）雌蕊 柱頭的表皮細(xì)胞呈乳頭狀突起，或分化成絨毛狀

5、。 4.花類 5.葉類 （1）表皮 上下表皮細(xì)胞的形狀、大小，角質(zhì)層的形態(tài)， 垂周壁的形狀、厚度或增厚情況以及有無氣孔、毛茸等。 （2）氣孔 氣孔的形狀、大小、型式，保衛(wèi)細(xì)胞的形狀及內(nèi)含物， 副衛(wèi)細(xì)胞的數(shù)目、大小、形狀。 （3）毛茸 注意毛茸的種類。 非腺毛：注意細(xì)胞的數(shù)目、形狀、長短、大小、細(xì)胞壁的 厚薄及表面形態(tài)等。多為單列性多細(xì)胞毛，少為單細(xì)胞毛。 形狀一般呈長圓錐形或線形；細(xì)胞壁一般較薄，外壁表面大 都光滑。 腺毛： 注意頭部的形狀、大小、細(xì)胞的數(shù)目、排列情況以 及柄部的長短、細(xì)胞數(shù)目及行列數(shù)目等。 5.葉類 6.果實類 （1）果皮細(xì)胞的形狀、大小。 （2）外果皮上可能有非腺毛及腺毛，

6、注意長短、形狀。 （3）中果皮內(nèi)的分泌組織 油細(xì)胞，油室、油管、石細(xì)胞等 （4）內(nèi)果皮石細(xì)胞，大小、細(xì)胞壁的厚薄，如為鑲嵌層，則 應(yīng)注意其排列形式。 6.果實類 7.種子類 （1）種皮 表皮毛的形狀、細(xì)胞壁的厚薄、是否木化、有無紋理； 石細(xì)胞形狀、大小、色澤散布及細(xì)胞壁的增厚情況。 柵狀細(xì)胞及油細(xì)胞。 （2）外胚乳 細(xì)胞大小、形狀、壁厚、色澤、細(xì)胞內(nèi)含物。 （3）內(nèi)胚乳 細(xì)胞形狀、厚度、內(nèi)含物。 （4）胚的子葉 有無分泌組織及細(xì)胞的內(nèi)含物。 7.種子類 （三）應(yīng)用實例 六味地黃丸的顯微定性鑒別 顯微鑒別 取本品置顯微鏡下觀察， (1)薄壁組織棕色至黑棕色，細(xì)胞多皺縮，內(nèi)含棕色核狀物。 (熟地黃

7、) (2)果皮表皮細(xì)胞橙黃色，表面觀類多 角形，垂周壁略連珠狀增厚。(山茱 萸) (3)淀粉粒三角狀卵形或矩圓形，直 徑2440um，臍點短縫狀或人字狀。 (山藥) 3a草酸鈣針晶束3b淀粉粒 (4)草酸鈣簇晶存在于無色薄壁細(xì)胞中 ，有時數(shù)個排列成行。(牡丹皮) (5)不規(guī)則分枝狀團(tuán)塊無色，遇水合 氯醛溶化；菌絲無色，直徑4-6um。 (茯苓) (6)薄壁細(xì)胞類圓形，有橢圓形紋孔， 集成紋孔群。(澤瀉) （三）應(yīng)用實例二、中藥制劑的一般理化鑒別法 （一）一般化學(xué)反應(yīng)法 中藥制劑一般選擇有效成分、特征成分作為鑒別的對象。 一般化學(xué)反應(yīng)鑒別法多在試管中用濕法反應(yīng)進(jìn)行，制劑樣品要先制成適宜的供試液。

8、一般情形下用50-70乙醇回流提取制備供試液。 一般化學(xué)反應(yīng)法用于中藥制劑鑒別應(yīng)該注意以下幾點： (1)慎重使用專屬性不好的分析反應(yīng)，如泡沫生成反應(yīng)、三氯化鐵顯色反應(yīng)等。 (2)在分析前對樣品進(jìn)行分離、精制，除去干擾分析反應(yīng)的物質(zhì)借此改善鑒別方法的專屬性。 (3)采用陰性對照和陽性對照的方式，對擬定的鑒別方法進(jìn)行反復(fù)驗證，防止出現(xiàn)假陽性。 二、中藥制劑的一般理化鑒別法 實例1 牛黃解毒片中大黃、黃芩的定性鑒別反應(yīng) 取本品6片(去包衣)，研細(xì)，加乙醇10ml，溫?zé)?0分鐘，過濾，濾液作如下反應(yīng)： (1)取濾液5ml，加鎂粉少量與鹽酸0.5ml，加熱，即顯紅色。 （黃芩中有大量黃酮） (2)另取濾

9、液4ml，加氫氧化鈉試液，顯紅色，再加30過氧化氫溶液，加熱，紅色不消失，加酸或酸性時，紅色變?yōu)辄S色。 （大黃中含有羥基蒽醌） 實例2 牙痛一粒丸中蟾蜍、朱砂、雄黃的定性鑒別反應(yīng) (1)取本品約0.1 g，研細(xì)，加氯仿5ml，浸泡1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酐少量使溶解，再滴加硫酸，初顯藍(lán)紫色，漸變?yōu)樗{(lán)綠色。（蟾蜍） (2)取本品約0.2g，研細(xì)，加水濕潤后，加氯酸鉀的硝酸飽和溶液2ml，振搖，放冷，離心，取上清液，加氯化鋇試液0.5ml，搖勻，溶液呈白色渾濁，離心，棄去上層酸液，再加水2ml，振搖，沉淀不溶解。（雄黃） (3)取本品適量，研細(xì)，用鹽酸濕潤后，在光潔的銅片上摩擦，銅片表面即

10、顯銀白色光澤，加熱烘烤后，銀白色消失。（朱砂） 實例1 牛黃解毒片中大黃、黃芩的定性鑒 （二）顯微化學(xué)鑒別法 1.取藥材的切片、粉末或中成藥粉末，置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片 在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶或沉淀，以及特殊的顏色等，作為鑒別的特征。 例： 黃連粉末滴加稀鹽酸，放置5分鐘，可見小檗堿鹽酸鹽黃色結(jié)晶析出。 穿心蓮用水濕潤，切成橫切片，滴加乙醇后加Kedde試液，葉肉組織顯紫紅色(穿心蓮內(nèi)酯成分的不飽和內(nèi)酯環(huán)反應(yīng))。 丁香切片滴加30氫氧化鈉飽和溶液，略放置，可見油室內(nèi)有針狀丁香酚鈉結(jié)晶析出。 肉桂粉末加氯仿23滴，略浸漬，速加2鹽酸苯肼1滴，可見黃色針狀或桿狀結(jié)晶(肉桂酸反應(yīng))。

11、（二）顯微化學(xué)鑒別法2.取藥材粗粉加適當(dāng)?shù)娜軇┙?，將浸提液置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察反應(yīng)。 例如： 檳榔粉末0.5g，加水34ml及稀鹽酸1滴，微熱數(shù)分鐘，過濾，取濾液1滴于載玻片上，加碘化鉍鉀試液1滴，即發(fā)生混濁，放置后可見石榴紅球形或方形結(jié)晶(檳榔堿)。 曼陀羅葉少許，加氯仿提取，提取液蒸干，加發(fā)煙硝酸1滴，顯黃色，加氫氧化鉀1粒，顯紫堇色(莨菪烷類成分Vitali反應(yīng))。 2.取藥材粗粉加適當(dāng)?shù)娜軇┙?，將浸提液置載玻片上，滴加各種3.取藥材切片或粉末，滴加各種試劑，直接觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 例如： 鐘乳石少許，加濃鹽酸數(shù)滴，能產(chǎn)生大量氣泡(碳酸鹽分解 產(chǎn)生CO2)。

12、 番木鱉胚乳薄片，加1釩酸銨-硫酸試液1滴，胚乳速顯紫色 (番木鱉堿)，另取切片加發(fā)煙硝酸1滴，即顯橙紅色(馬錢子 堿 )。 大黃粉末少許，置白磁板上，加氫氧化鈉液l滴，顯深紅色( 蒽醌鈉鹽)。 3.取藥材切片或粉末，滴加各種試劑，直接觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 （三）升華法 操作方法：取金屬片安放在有圓孔(直徑約2cm)的石棉板上，在金屬片上放一小金屬圈(內(nèi)徑約1.5cm，高約0.8cm)，對準(zhǔn)石棉板上的圓孔，圈內(nèi)放入預(yù)先研細(xì)成粉末的中藥制劑一薄層，圈上覆蓋載玻片，在石棉板下圓孔處用酒精燈緩緩加熱，至粉末開始變焦，去火待冷，載玻片上有升華物凝集。將載玻片反轉(zhuǎn)后，置顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀、色澤，或取升華物加

13、試液觀察反應(yīng)。 實例 牛黃解毒丸微量升華鑒別 取本品進(jìn)行微量升華，先得白色升華物后（冰片），繼得黃色升華物（大黃中蒽醌）。將升華物分別置顯微鏡下觀察：白色升華物呈不定形的無色片狀結(jié)晶，加新制的1香草醛硫酸溶液，漸顯紫紅色，黃色升華物呈黃色針狀結(jié)晶或羽狀結(jié)晶，遇堿顯紅色，遇酸變?yōu)辄S色。 （三）升華法 （四）熒光法 有些中藥材中含有能產(chǎn)生熒光的化學(xué)成分，在可見光、紫外光照射下能發(fā)出熒光，或經(jīng)試劑處理后發(fā)出熒光。含有這類藥材的中藥制劑可用熒光法進(jìn)行鑒別。通常的操作方法是取制劑的提取液點在濾紙上或試紙上，置紫外光燈下(365nm)觀察，有時則是加一定的試劑后再進(jìn)行觀察。 實例l 元胡止痛片的熒光鑒別

14、取本品適量，去糖衣，研細(xì)，取粉末1g，加0.25molL硫酸液10ml振搖片刻，濾過，取濾液數(shù)滴，點于濾紙上，陰干后置紫外光燈(365nm)下觀察，顯亮黃色熒光。 （四）熒光法 1.可見紫外分光光度法 不同的藥材所含的成分不同，在一定條件下吸收光譜的特征 可用于鑒別藥材。利用這一特點，可見-紫外分光光度法也 可用于中藥制劑的鑒別。 2.紅外光譜法（五）光譜法 1.可見紫外分光光度法（五）光譜法 （六）色譜法 中藥制劑可用色譜法鑒定，包括薄層色譜法、紙色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法。 1.薄層色譜法 使用本法鑒定中藥制劑，通常是在同一塊薄層板上點入樣品和適宜的對照物 采用同一條件依法層析展開

15、，經(jīng)顯色或用其他方法檢出色譜斑點后，將樣品與對照物所得的色譜圖進(jìn)行對比，作出鑒定。 （1）樣品應(yīng)作適當(dāng)?shù)念A(yù)處理 對樣品進(jìn)行初步的分離精制。 常用的預(yù)處理方法有：升華法，蒸餾法，溶劑提取法，小型層析柱的柱色譜法、離子交換法等。 （2）展開劑的選擇 選用能突出主要斑點，便于分析比較的展開劑，如果鑒別的對象相同，應(yīng)首先試用已有的、較成熟的展開劑。 如無現(xiàn)有展開劑，可先以無水乙醇-苯（14）展開，如主要物質(zhì)的Rf在0.8以上，改用苯-氯仿（13），如主要物質(zhì)的Rf在0.3以下，改用丙酮-甲醇（11）。 （六）色譜法 （3）對照品的選擇 中國藥典(一部)作薄層鑒別用的對照物有對照品和對照藥材兩種。 TL

16、C用作中藥制劑鑒別的另一類對照物是陰陽對照溶液。 （4）薄層色譜的掃描定性鑒別 TLC展開后，斑點的檢識方法，有通用性的，如在紫外光燈下觀察出現(xiàn)的熒光，或用碘蒸氣、稀硫酸、磷鉬酸顯色等，這類方法專屬性不強(qiáng)。另一類是專屬性較好的顯色劑，例如碘化鉍鉀試液，茚三酮試液和三氯化鋁試液等，一般可依次說明斑點歸屬。 還可用薄層掃描儀將薄層板上的斑點轉(zhuǎn)換繪制成峰形色譜圖，這種色譜圖以斑點展開后移動的距離為橫坐標(biāo)，斑點對光輻射的吸收強(qiáng)度或發(fā)射熒光的強(qiáng)度為縱坐標(biāo)的峰形曲線圖譜。 （3）對照品的選擇 中國藥典(一部)作薄層 應(yīng)用實例 1.大黃及含大黃的成藥 (1)供試液制備 取各樣品適量，加甲醇20ml浸漬1h，

17、過濾，取濾液5ml，蒸干，加水10ml使溶解，再加HCl 1ml，水浴加熱30min，立即冷卻，乙醚提取兩次，20ml/次，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿溶解成1ml。 (2)對照液制備 取大黃對照藥材0.1g按供試液制備作為對照藥材溶液；另取蘆薈大黃素，大黃酸，大黃素，大黃素甲醚，大黃酚對照品，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作為對照品溶液。 (3)薄層板 硅膠H加0.3CMC-Na溶液的自制板；厚度：300um (4)點樣 分別點樣4uL。 (5)展開劑 石油醚(3060)-甲酸乙酯-甲酸(1551)放置后的上層溶液。 應(yīng)用實例 (6)展開方式 上行展開；展距：7cm。 (7)顯色 置紫外光燈

18、(365nm)下檢視。 (8)色譜識別 紫外光燈(365nm)下，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光主斑點 (9)備注 在部分成藥樣品的色譜中，除大黃的五個蒽醌成分的斑點外，尚有其它熒光斑點，為處方中的其它成分。 (6)展開方式 上行展開；展距：7cm。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 樣品： 1蘆薈大黃素； 2大黃酸； 3大黃素； 4大黃素甲醚； 5大黃酚； 6大黃(掌葉大黃)對照藥材； 7大黃(唐古特大黃)對照藥材； 8大黃流浸膏； 9小兒化毒散； 10檳榔四消丸； 11木香檳榔丸； 12枳實導(dǎo)滯丸； 13

19、牛黃上清丸； 14清寧丸； 15一捻金； 16牛黃解毒片； 17牛黃解毒丸中藥制劑分析總論課件 2.黃連、黃柏及含黃連、黃柏的成藥 (1)供試液制備 取各品種藥粉適量，加甲醇5ml，置水浴回流15min，過濾濾液濃縮至1ml。 (2)對照液制備 取鹽酸香檳酒小檗堿，硫酸黃連堿，硫酸表小檗堿，非 洲防己堿，藥根堿，鹽酸巴馬汀對照品，加甲醇制成每0.5mg/ml的溶液，作為 對照品溶液。 (3)薄層板 硅膠G自制板；厚度：500um (4)點樣 分別點樣1-2ul (5)展開劑 苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液 (631.51.50.5)另槽中加入與展開劑等體積濃氨試液 2.黃連、黃柏及含黃連

20、、黃柏的成藥(6)展開方式 展開箱預(yù)平衡15分鐘；上行展開；展距：8cm(7)顯色 置紫外光燈(365nm)下檢視。(8)色譜識別 中國藥典黃連項下收載有味連，雅連，云連三 種，總體分析黃連可見45個主要的黃色熒光斑點，自下 而上，分別為l.非洲防己堿+藥根堿(量少)；2.巴馬汀；3. 小檗堿；4.表小檗堿(云連不含，雅連含量低)；5.黃連堿( 味連含量高)。黃柏主要檢出巴馬汀及小檗堿，可與黃連區(qū) 別。(6)展開方式 展開箱預(yù)平衡15分鐘；上行展開；展距：8c 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 樣品： 1.黃連(味連)；2.黃連；3.黃連

21、(雅連)；4.黃連(云連)；5.黃連(野連)； 6.黃連(日本黃連)；7.小兒化毒散；8.萬應(yīng)錠；9.大補(bǔ)陰丸；10.木香檳榔丸； 11.香連丸；12.黃柏；13.非洲防己堿；14.藥根堿；15.巴馬汀；16.小檗堿； 17.表小檗堿；18.黃連堿。 1 2 3 4 2.紙色譜法 3.氣相色譜法 氣相色譜法的分離效能高，檢測器種類多而且靈敏度高， 是混合物鑒別的有效方法。該法目前主要是用于含揮發(fā) 油和揮發(fā)性成分的制劑分析。 4.高效液相色譜法 主要是利用化合物在特定的色譜柱上，在一定條件下的 保留值，將某一樣品與其對照品在同一條件下，進(jìn)行保 留時間的直接比較作為鑒別依據(jù)。對于復(fù)雜未知成分， 也

22、可以加入對照品，觀察被測峰是否增高，以初步作定 性結(jié)論。對于復(fù)雜組分尚可采用聯(lián)機(jī)技術(shù)，如本法與質(zhì) 譜聯(lián)用，先分離后再作定性鑒別。 2.紙色譜法第二節(jié) 中藥制劑雜質(zhì)檢查中制藥制劑檢查包括的主要內(nèi)容：制劑通則檢查一般雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查微生物限度檢查第二節(jié) 中藥制劑雜質(zhì)檢查中制藥制劑檢查包括的主要內(nèi)容：制劑一、雜質(zhì)的來源：中藥制劑中存在的雜質(zhì)，來源于三個方面：由中藥材原料中帶入；在生產(chǎn)制備過程中引入；貯存過程中受外界條件的影響而使中藥制劑 的理化性質(zhì)改變而產(chǎn)生。 一、雜質(zhì)的來源：中藥制劑中存在的雜質(zhì)，來源于三個方面：由中藥一般雜質(zhì)：指在自然界中分布較廣泛，在多種藥材的采集、收購、加工以及制劑的生產(chǎn)

23、或貯存過程中容易引入的雜質(zhì)。特殊雜質(zhì)：指在該制劑的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)其來源、生產(chǎn)工藝及藥品的性質(zhì)有可能引入的雜質(zhì)。雜質(zhì)的分類：一般雜質(zhì)：指在自然界中分布較廣泛，在多種藥材的采集、收購、加二、雜質(zhì)的限量檢查 雜質(zhì)限量： 藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾或百萬分之幾來表示。 限量檢查： 規(guī)定一定限度，要求所檢樣品中某組分含量不超過此限度。二、雜質(zhì)的限量檢查 雜質(zhì)限量： 三、雜質(zhì)限量計算方法 三、雜質(zhì)限量計算方法例：重金屬限量計算： 取供試品1.0g與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml制成的對照液比較，計算重金屬限量。例：重金屬限量計算：第三節(jié) 一般雜質(zhì)檢查方法 一、重金屬檢查法：（一）基本原理1、

24、在弱酸性條件下： CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S Pb2+ +H2SPbS+2H+2、在堿性條件下： Pb2+S2-PbS第三節(jié) 一般雜質(zhì)檢查方法 一、重金屬檢查法：（二）檢查方法 中國藥典2005版規(guī)定重金屬檢查方法有四種。第一法 適用于供試品不經(jīng)有機(jī)破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查 取兩支納氏比色管甲管乙管標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液+醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml+水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml 供試品溶液25ml硫代乙酰胺試液各2ml 搖勻 放置2min 同置白紙上,自上向下透視 乙管中顯出的顏色不得比甲管更深（二）檢查方法第一法 甲管乙管標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液+醋酸鹽緩沖液（pH

25、第二法 適于供試品需灼燒破壞，取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，經(jīng)處理后在酸性溶液中顯色的重金屬限檢查。 取熾灼殘渣項下遺留的殘渣 移置納氏比色管中 蒸干至氧化氮蒸汽除盡 加硝酸0.5ml放冷 加水15ml 置水浴上蒸干 滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性 加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml 加鹽酸2ml微熱溶解 加水稀釋成25ml 另取配制供試品溶液的試劑 置瓷皿中蒸干 加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml 加水15ml 移置納氏比色管中 微熱溶解 加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量 用水稀釋成25ml 以上兩管溶液，照上述第一法檢查 第二法 適于供試品需灼燒破壞，取熾灼殘渣項下遺留的殘第三法 適用于檢查能溶于堿而不溶于

26、稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬檢查。 置納氏比色管中硫化鈉試液5滴，搖勻 甲管乙管標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液適量氫氧化鈉試液5ml水20ml硫化鈉試液5滴，搖勻 供試品適量氫氧化鈉試液5ml水20ml溶解 乙管中顯出的顏色不得比甲管更深第三法 適用于檢查能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即第四法 適用于有色溶液或重金屬限量低的品種。 用微孔濾膜過濾，使重金屬硫化物深沉富集成色斑后與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液獲得的色斑進(jìn)行比較檢查 第四法 適用于有色溶液或重金屬限量低的品種。 二、砷鹽檢查法 砷鹽檢查法系指用于藥品中微量砷（以As計算）限量檢查的方法。 （一）古蔡法 1. 基本原理： AsO33+3Zn+9H

27、+AsH3+3Zn2+3H2O 二、砷鹽檢查法 砷鹽檢查法系指用于藥品中微量砷（以A 產(chǎn)生的砷化氫與溴化汞試紙作用: AsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2 (黃色) AsH3+3 HgBr23HBr 3+As(HgBr)3 (棕色) 五價砷在酸性溶液中也能被金屬鋅還原為砷化氫，但生成砷化氫比三價砷慢。 產(chǎn)生的砷化氫與溴化汞試紙作用: 五價砷在酸性溶液中2. 檢查方法：A為100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞 C為導(dǎo)氣管,全長約180mmD為具孔的有機(jī)玻璃旋塞 E為中央具有圓孔的有機(jī)玻璃旋塞蓋古蔡法裝置 頂端平面上放一片溴化汞試紙 蓋上旋塞E并旋緊 樣品溶液中裝入醋酸鉛棉

28、花60mg（裝管高度為6080mm） 2. 檢查方法：A為100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨(2)標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備 精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水2ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將照上法裝妥的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540水浴中反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，即得。 (2)標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備 (3)檢查法 取按各藥品項下規(guī)定方法制成的供試品溶液，置A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作。將生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，不得更深。 (3)檢查法 （二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DD

29、C法） 1. 基本原理： 二乙基二硫代氨基甲酸銀 二乙基二硫代氨基甲酸（簡稱Ag-DDC） （簡稱HDDC）（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法） 1.2. 檢查方法：（1）儀器裝置 A為100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶；B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞，C上連導(dǎo)氣管;D為平底玻璃管 測試時，于導(dǎo)氣管C中裝入醋酸鉛棉花60mg（裝管高度為60-80mm）；并于D管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸銀試液5ml。 （2）標(biāo)準(zhǔn)砷對照液的制備 精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液5ml（3）檢查法 將所得溶液與標(biāo)準(zhǔn)砷對照液同置白色背景上，從D管上方向下觀察、比較，所得溶液的顏色不得比標(biāo)準(zhǔn)砷對照液更深。 2. 檢查方法：3. 注意事

30、項： （1）有機(jī)堿液的選擇 該法需要加入一定量的有機(jī)堿以中和反應(yīng)中的二乙基二硫代氨基甲酸。 （2）反應(yīng)的溫度和時間 本法在2540水浴中反應(yīng)45分鐘為宜。在此溫度下，有部分氯仿?lián)]發(fā)損失，故在比色前應(yīng)添加氯仿至5.00ml，搖勻后再進(jìn)行比色測定。 3. 注意事項：三、干燥失重測定法1、藥品的干燥失重： 系指藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是指水分、結(jié)晶水，但也包括其他揮發(fā)性的物質(zhì)如乙醇等。 2、水分分為必要的水分：即結(jié)晶水或組成水分；不必要的水分:即附著水分或吸留的水分。三、干燥失重測定法1、藥品的干燥失重：3、檢查方法方法適用范圍檢查方法常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的中藥制劑的

31、測定將供試品置于烘箱中，在規(guī)定溫度下進(jìn)行干燥，干燥溫度一般為105，干燥時間一般在達(dá)到指定溫度2干燥24小時，再稱至恒重為止。干燥劑干燥法硅膠干燥法P2O5干燥法硫酸干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)性供試品檢查將供試品置于干燥器內(nèi)，利用干燥器內(nèi)貯放的干燥劑，吸收供試品中的水分，干燥至恒重減壓干燥法適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定及較難趕除水分的供試品檢查將供試品置于減壓干燥器中進(jìn)行干燥，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下。常用干燥失重測定法3、檢查方法方法適用范圍檢查方法常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)4、注意事項（1）供試品的顆粒大小 一般將顆粒控制在2mm以 下，若供試品為較大結(jié)晶，為了避免在研磨

32、過程 中水分等損失，應(yīng)先迅速搗碎成2mm以下的小粒。（2）供試品用量 除另有規(guī)定外，一般取供試品約1g。（3）鋪設(shè)的厚度 應(yīng)將供試品平鋪在扁形稱量瓶中， 厚度不可超過5mm，如為疏松物質(zhì)，厚度不可超 過10 mm。（4）瓶蓋的放置 將稱量瓶放入烘箱或干燥器中 時，應(yīng)將瓶蓋取下，置稱量瓶旁或?qū)⑵可w半開進(jìn) 行干燥。取出時須將瓶蓋蓋好。在每次干燥后應(yīng) 先置干燥器內(nèi)放冷至室溫，然后稱定重量。 4、注意事項（5）如供試品未達(dá)到規(guī)定的干燥溫度即融化 時，應(yīng)先將供試品置較低的溫度下干燥 至大部分水分除去后，再按規(guī)定條件干 燥。（6）減壓時需注意壓力變化，如真空度較高 時，干燥器易爆炸！初次使用新干燥器 時，

33、宜用較厚的布包在外部，以防玻璃 飛濺而引起傷害。（7）恒重系指供試品連續(xù)2次干燥后的重量 差異在0.3mg以下，干燥至恒重的第2次 及以后各次的稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼 續(xù)干燥1h后進(jìn)行。 中藥制劑分析總論課件四、水分測定法 水分測定法是指采用規(guī)定的方法對不同性質(zhì)的中藥材及其制劑進(jìn)行水分含量測定。 干燥失重測定法除測定水分外尚含有揮發(fā)成分，而水分測定僅僅是測定供試品中的水分。 因此，它們之間測定方法、測定條件和要求并不盡相同。四、水分測定法 水分測定法是指采用規(guī)定的方法對不同性質(zhì)（一）測定方法烘干法 本法適用于不含或含少量揮發(fā)性成分的藥品 測定方法：取供試品25g平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，

34、厚度不超過5mm，疏松樣品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100105干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量（%）。（一）測定方法烘干法 甲苯法 適用于含揮發(fā)性成分的藥品測定方法：取供試品適量精密稱定，置A瓶中，加甲苯約200ml，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿B管的狹細(xì)部分。將A瓶置電熱套中或用其它適宜方法緩緩加熱，待甲苯開始沸騰時，調(diào)節(jié)溫度，使每秒鐘餾出2滴。餾出液甲苯和水分進(jìn)入水分測定管中，水的相對密度大于甲苯，沉于底部，甲苯流回A瓶中。待水分完全餾出

35、，即測定管刻度部分的水量不再增加時，將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗，再用飽蘸甲苯的長刷或其他適當(dāng)方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水粘附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加顯色劑）。檢讀水量，并計算供試品中含水量（%）。甲苯法水分測定裝置 甲苯法水分測定裝置（二）注意事項 1. 測定用的供試品，一般先破碎成直徑不超過3mm的顆?；蛩槠ㄆ扑闀r不得使用高速粉碎機(jī)）。直徑和長度在3mm以下者可不破碎。如使用減壓干燥法需先經(jīng)二號篩。 2. 甲苯法中，為減少因甲苯與微量水混溶引起水分測定結(jié)果偏低，在測定前，甲苯需先加少量水，充分振搖使達(dá)

36、飽和后放置，將水層分離棄去，經(jīng)蒸餾后方可使用。 3. 進(jìn)行減壓干燥時，減壓操作宜逐漸進(jìn)行，不可驟然大幅度減壓。 4. 采用氣相色譜法時需注意無水乙醇含水量約3%，標(biāo)準(zhǔn)溶液與供試品溶液的配制需用同一批號試劑。無水乙醇中的含水量需要扣除。含水量的計算采用外標(biāo)法。（二）注意事項 1. 測定用的供試品，一般先破碎成直徑五、熾灼殘渣檢查法 熾灼殘渣（英國藥典稱為硫酸灰分）： 中藥多由有機(jī)化合物組成，有機(jī)物經(jīng)熾灼炭化，再加硫酸濕潤,加熱使硫酸蒸氣除盡后，于高溫（700800）熾灼至完全灰化，使有機(jī)質(zhì)破壞分解變?yōu)閾]發(fā)性物質(zhì)逸出，殘留的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)（多為金屬的氧化物或無機(jī)鹽類）成為硫酸鹽。五、熾灼殘渣檢查

37、法 熾灼殘渣（英國藥典稱為硫酸灰分）：（一）檢查方法 取供試品1.02.0或各藥品項下規(guī)定的重量，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫；除另有規(guī)定外，加硫酸0.51ml使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，在700800熾灼使完全灰化，移置干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱定后，再在700800熾灼至恒重，即可。如需將殘渣留作重金屬檢查，則熾灼溫度必須控制在500600。 （一）檢查方法 （二）注意事項 1. 取樣量可根據(jù)熾灼殘渣限量來決定，取樣量過多，炭化及灰化時間長，取樣量少，熾灼殘渣量少，稱量誤差大。 2. 加熱時，必須小心地先用小火加熱，以免供試品濺出坩堝外，切不可直

38、接大火加熱坩堝底部，否則供試品全部受熱引起暴沸或燃燒。 3. 生藥的灰化可以加一定量已恒重的純砂或混以乙醇、甘油，以分散增大其與氧接觸的面積，使灰化完全。 4. 如需將殘渣留作重金屬檢查，則熾灼溫度必須控制在500600。 5. 具有揮發(fā)性的無機(jī)成分中藥受熱揮發(fā)或分解，殘留非揮發(fā)性雜質(zhì)，也可用熾灼殘渣法檢查。（二）注意事項 六、灰分測定法 1、總灰分 中藥經(jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱一?，則其細(xì)胞組織及其內(nèi)含物成為灰燼而殘留，由此所得灰分為“生理灰分”即總灰分。 2、酸不溶性灰分 中藥經(jīng)高溫?zé)胱频玫降目偦曳旨欲}酸處理，得到不溶于鹽酸的灰分，稱為酸不溶性灰分。 六、灰分測定法 1、總灰分 中藥經(jīng)粉碎

39、后加熱，高溫?zé)耄ㄒ唬z查方法 1. 總灰分測定法 稱取供試品23g（如需測定酸不溶性灰分，可取供試品35g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01 g），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500600，使完全炭化并至恒重，根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。 （一）檢查方法 2. 酸不溶性灰分測定法 供試品先按總灰分測定 的方法測定其總灰分，然后取所得的灰分，在 坩堝中注意加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋 坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水 5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾 過，坩堝內(nèi)的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至 洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。

40、濾渣連同濾紙移至 同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘渣重 量，計算供試品中含酸不溶性灰分的含量（%）。 2. 酸不溶性灰分測定法 供試品先按總灰分測定 （二）注意事項 1. 測定前先將供試品稱取適量粉碎，使其能通過2號篩，將粉末混合均勻后再取樣。 2. 如供試品不易灰化，可將坩堝放冷，加熱水或10%硝酸銨溶液2ml；使殘渣濕潤，然后置水浴上蒸干，得到的殘渣再按上面所說的方法熾灼至坩堝內(nèi)容物完全灰化。（二）注意事項第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法一、特殊雜質(zhì)的概念 藥品中的特殊雜質(zhì)是指在該藥品的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)其來源、生產(chǎn)工藝及藥品的性質(zhì)有可能引入的雜質(zhì)。二、特殊雜質(zhì)檢查的目的意義 中藥制劑在生

41、產(chǎn)和貯存過程中，由于各種藥品的來源不同、制備方法不同、劑型不同，即使同一個品種也可以采取不同的工藝路線，而且藥品在貯存過程中也可能有不同分解變化的產(chǎn)物。因而應(yīng)對各種藥品進(jìn)行其特有的檢查，即特殊雜質(zhì)的檢查，以保證用藥安全。第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法一、特殊雜質(zhì)的概念 三、特殊雜質(zhì)檢查方法 利用藥品和雜質(zhì)的理化性質(zhì)及生理作用的差異，采用物理、化學(xué)、藥理、微生物等方法進(jìn)行檢查。 三、特殊雜質(zhì)檢查方法第四節(jié) 農(nóng)藥殘留量的檢查一、對中藥材及中藥制劑進(jìn)行農(nóng)藥殘留量檢查的 必要性 中藥材有相當(dāng)數(shù)量為人工栽培，為提高藥材產(chǎn) 量， 減少昆蟲、真菌和霉菌的危害，在生產(chǎn)過程 中常噴灑農(nóng)藥。此外，土壤中殘留的農(nóng)藥也可能

42、引 入藥材中，致使中藥材農(nóng)藥殘留問題較為嚴(yán)重，而 農(nóng)藥對人體危害極大，所以需對中藥材及中藥制劑 進(jìn)行農(nóng)藥殘留量檢查。第四節(jié) 農(nóng)藥殘留量的檢查一、對中藥材及中藥制劑進(jìn)行農(nóng)藥殘留量二、常見農(nóng)藥的種類按化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：有機(jī)氯類：DDT、六六六等；有機(jī)磷類：敵敵畏、樂果等；苯氧羧酸類除草劑：2，4D；2，4，5T等；氨基甲酸酯類：西維因（甲萘威）等；二硫代氨基甲酸酯類：福美鐵、福美鋅等；無機(jī)農(nóng)藥：磷化鋁、砷酸鈣等；植物性農(nóng)藥：煙葉和尼古丁等；其他：溴螨酯、氯化苦等。 其中有機(jī)氯和有機(jī)磷類農(nóng)藥是長期殘留的，故應(yīng)測定其含量。 二、常見農(nóng)藥的種類三、農(nóng)藥殘留量的測定1、殘留農(nóng)藥的提取提取溶劑： 有機(jī)氯類農(nóng)藥：常用正已烷（或石油醚）、乙腈、丙 酮、苯等，混合溶劑常用正已烷（或石油醚）丙酮、 乙腈水等。 有機(jī)磷類農(nóng)藥：根據(jù)其極性采用相應(yīng)極性的溶劑進(jìn)行 提取。提取方法： 索氏提取法 振蕩提取法三、農(nóng)藥殘留量的測定2、樣品純化：液液分配（LLP柱層析分離3、檢測方法： 以色譜分離方法為主，常用薄層色譜法、氣相色譜法。（1）薄層色譜法： 層析系統(tǒng)：有機(jī)氯農(nóng)藥 吸附劑：硅膠