實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定培訓(xùn)課件

1、實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定一、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)目的 掌握網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret)試管法計(jì)數(shù)的原理及操作方法。原理 網(wǎng)織紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核蛋白體及核糖核酸等嗜堿性物質(zhì)，經(jīng)煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)等染液活體染色后，呈藍(lán)色網(wǎng)狀或點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)，可與成熟紅細(xì)胞相區(qū)別。2實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定操作步驟1.加染液 將Ret染液2滴加至小試管中，做好標(biāo)記。2.加血 在已加入染液的小試管內(nèi)注入新鮮全血2滴，立即混勻。3.染色 室溫下染色10-15min。4.涂片制備 取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥5.觀察 低倍鏡下選擇紅細(xì)胞分布均勻、著色好、背景清晰的部位進(jìn)行計(jì)數(shù)。6.計(jì)數(shù) 常規(guī)法：在油鏡下計(jì)數(shù)至少1000

2、個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞。7.計(jì)算 Ret百分?jǐn)?shù)=（1000個(gè)RBC中的Ret數(shù)/1000）100%8.結(jié)果報(bào)告 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)：X.X%4實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定血涂片制備推片載玻片血液將推片勻速向前，勿停頓。涂片的厚薄取決于速度和角度。一張滿(mǎn)意的血涂片應(yīng)厚薄均勻 頭 體 尾 涂片干燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫(xiě)上姓名和編號(hào)李四B 1 2 35實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定參考區(qū)間成人、兒童：0.5%-1.5%新 生 兒：2.0%-6.0%6實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定注意事項(xiàng)1.試劑準(zhǔn)備 推薦使用新亞甲藍(lán)染液，試劑應(yīng)定期配制，用前過(guò)濾。2.染色 染液與血液比以1:1為宜,染色時(shí)間不能過(guò)短。試

3、劑用后及時(shí)蓋好蓋子，以免揮發(fā)。3.標(biāo)本 應(yīng)及時(shí)染色，及時(shí)測(cè)定。4.計(jì)數(shù) 選擇紅細(xì)胞分布均勻，網(wǎng)織紅細(xì)胞著色好的、背景清晰的部位計(jì)數(shù)。應(yīng)兼顧血片邊緣和尾部。7實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定目的 掌握魏氏法測(cè)定血沉的原理及方法。原理 將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于魏氏血沉管中，直立于血沉架上，由于紅細(xì)胞比重大于血漿，克服血漿阻力而下沉，1h后讀取上層血漿高度的毫米數(shù)，即為紅細(xì)胞沉降率。器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）試劑 109mmol/L枸櫞酸鈉溶液。標(biāo)本 外周血。二、血液沉降率測(cè)定（魏氏法）8實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定1.采血 采靜脈血1.6ml加入含0.4ml 109mmol/L枸櫞

4、酸鈉溶液抗凝劑的采血管中（即采血量到采血管2ml刻度線處） ，混勻。2.吸血 混勻血吸入血沉管內(nèi)至刻度“0”處，拭去管外殘余血。3.立血沉管 將血沉管直立于血沉架上。4.讀數(shù) 1h末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后露出的血漿高度。5.報(bào)告方式 XX mm/h操作步驟9實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定參考值 50歲：男性 15mm/h 女性 20mm/h 50歲：男性 20mm/h 女性 30mm/h 85歲：男性 30mm/h 女性 42mm/h 兒童: 10mm/h二、血液沉降率測(cè)定（魏氏法）10實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定注意事項(xiàng) 1.嚴(yán)格控制采血量，使抗凝劑與血液比例為1：4。 2.血沉管應(yīng)垂直放置，不

5、得傾斜。 3.測(cè)量時(shí)，血沉架應(yīng)避免直接光照、移動(dòng)和振動(dòng)。 4.本實(shí)驗(yàn)最適宜溫度為1825，并要求在采血后 2h內(nèi)完成。 5.紅細(xì)胞沉降率在1h沉降過(guò)程中，并不是均衡等速度的沉降，絕不可以只觀察30min沉降率，將結(jié)果乘以2作為1h血沉結(jié)果。11實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定二、血液沉降率測(cè)定（自動(dòng)血沉儀法）12實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定白細(xì)胞計(jì)數(shù)一、目的 掌握顯微鏡白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。二、原理 用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時(shí)破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液沖入計(jì)數(shù)池后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)。13實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定三、器材 顯微鏡、改良計(jì)

6、數(shù)板、血蓋片、試管、微量 吸管、加樣槍、乳膠吸頭、紗布四、試劑 白細(xì)胞稀釋液五、標(biāo)本 EDTA鹽抗凝血14實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定六、操作1. 加稀釋液 用加樣槍吸取白細(xì)胞稀釋液0.38ml于小試管中。2. 加血 用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管外余血，輕輕加至白細(xì)胞稀釋液底部，再輕吸上清液清洗吸管23次，混勻。3. 充池 混勻后用微量吸管將細(xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)池，室溫下平放35分鐘，待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。4. 計(jì)數(shù) 用低倍鏡依次計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。5. 計(jì)算 白細(xì)胞/L=N/41020106=N/20109/L6. 報(bào)告方式 X.X109/L。15實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測(cè)定七、注意事項(xiàng) 1. 充池前應(yīng)將白細(xì)胞懸液充分混勻。 2.在充池時(shí)要一次完成，不能產(chǎn)生滿(mǎn)溢、氣泡或充池不足及充液后玻片移動(dòng)的現(xiàn)象。 3. 白細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均，各大方格間細(xì)胞計(jì)數(shù)不得相差8個(gè)以上，應(yīng)重新計(jì)數(shù)。 4. 白細(xì)胞數(shù)量過(guò)多時(shí)，可采取加大稀釋倍數(shù)的方法。 5. 白細(xì)胞稀釋液不能破壞有