變態(tài)反應原（變應原）制品質(zhì)量控制技術指導原則

1、 變態(tài)反應原（變應原）制品質(zhì)量控制技術指導原則一、定義變態(tài)反應原（變應原）：是指能夠引起人類變態(tài)反應（過敏反應）性疾病的物質(zhì)。包括：粉塵、昆蟲類、動物皮毛、植物及植物花草、食物等。變態(tài)反應原制品：是指用于診斷或治療人類變態(tài)反應性疾病的產(chǎn)品。二、質(zhì)量控制原則（一）初始原材料的控制1原材料應詳細說明變應原的原材料，包括其特殊的收集方式、預處理及保存方法，提供其質(zhì)控標準（如外購，可由供應商提供）。原材料的質(zhì)量和組成應盡可能一致。質(zhì)控標準應包括對原材料的鑒別和純度分析等。確定一種適宜的保存條件，以保證原材料在運輸和保存過程中質(zhì)量不變。常見變應原的原材料的技術要求如下，其他原材料參照執(zhí)行。（1）花粉類花

2、粉類變應原應在最佳的生態(tài)環(huán)境下收集。說明花粉的收集方式，并檢測其異種花粉、孢子、同種植物的其它無關成分。以上檢測結果應滿足質(zhì)控標準的要求?；ǚ凼占瘧谥参飳W專業(yè)人員指導下進行。采用顯微顆粒記數(shù)的方法，其它無關花粉的含量應限制在2%以下，能檢測到的孢子不能超過1%?；ǚ弁獾钠渌s質(zhì)的顯微顆粒不得超過10%。特殊情況，應予于說明。（2）真菌類說明真菌的株或系，詳細說明培養(yǎng)基的組成及培養(yǎng)方法，優(yōu)先選擇人工合成且不含致敏原的培養(yǎng)基。說明分離得到的原材料中真菌的形態(tài)特征（菌絲體和孢子體/只有孢子體/只有菌絲體）及培養(yǎng)基質(zhì)。提供相關資料證明其培養(yǎng)方法不會促進真菌毒素（如aflatoxins和/或ochra

3、toxins）的產(chǎn)生。真菌的培養(yǎng)應在真菌學專業(yè)人員的指導下進行。應選擇高抗原性、低毒性和無致突變作用的原材料。（3）螨類應說明選用螨蟲的種、屬和飼養(yǎng)物的組成及培養(yǎng)方法。飼養(yǎng)物的抗原性應盡可能低。對來源于人或動物的飼養(yǎng)物應當進行處理，以確保對可能存在的傳染性病原體進行滅活。螨蟲的培養(yǎng)應在專業(yè)人員指導下進行。（4）動物來源的變應原應明確動物的品系，選擇健康的動物。說明被處死動物的保存條件和動物變應原的收集方法，并應在專業(yè)人員的指導下進行收集。動物毛發(fā)或皮屑的收集，必須采用既不損傷動物皮膚，又能獲得大量上皮材料的方法。不能采用磨碎整張皮膚/毛皮的辦法。如處死動物取皮，必須在幾個小時內(nèi)取好皮或者將動物

4、于適當條件下保存，以確保不致因尸體腐敗而影響上皮。（5）食品類應選擇在良好生態(tài)環(huán)境下生長的X鮮食品，其農(nóng)藥殘留應符合相關的食品標準。食品原料的加工應采用適宜工藝，以確?？乖圆槐黄茐?。2輔料和相關材料輔料的質(zhì)量標準應符合對藥品的一般性規(guī)定。變應原制品中所含成分如緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑，制備過程所用試劑如脫脂劑、提取液，以及稀釋液等，應符合對一般藥品生產(chǎn)所用原輔材料的要求。不能使用對人有免疫原性或過敏性的物質(zhì)。（二）包裝材料所用包裝材料應符合對藥品包裝材料的相關要求。（三）生產(chǎn)工藝應說明生產(chǎn)過程，用一個圖表（流程圖）逐步地簡要說明過程的原理，并配有解釋文字。應清楚說明生產(chǎn)過程的不同階段，例如粉碎

5、、提取、過濾、凈化、透析、濃縮、分離、滅菌和凍干等。應說明純化和分離的原理，而且應清楚并明顯的看出過程的哪一步使用了特殊生化技術。詳細說明在生產(chǎn)過程中對中間體和半成品的鑒定，以及如何進行生產(chǎn)過程中的質(zhì)控。（四）變應原組分分析采用適宜的化學和免疫化學方法分析所有變應原成分，詳細說明所采用的方法及其可靠性，并附上相關參考文獻。（五）質(zhì)量標準研究應建立有關產(chǎn)品的鑒別、純度、生物活性和制劑等方面，用于質(zhì)控的所有檢測方法和標準。廠家應規(guī)定抽檢率和對中間產(chǎn)物及成品分別采用的檢測方法等。一般情況下，下列試驗對控制產(chǎn)品質(zhì)量是可以采用的。1總蛋白含量測定用適宜的蛋白含量分析方法對總蛋白含量進行測定。如：蛋白氮測

6、定（PNU）等。2蛋白組分的測定采用聚丙稀酰胺凝膠電泳，等電聚焦等適宜的方法檢測其蛋白組分。3主要致敏蛋白含量測定應采用適宜的分析方法，對制品中穩(wěn)定的抗原成分進行檢測，并與內(nèi)部參考品（IR）進行比較?？刹捎玫姆椒ㄓ校航徊婷庖唠娪?、交叉放射免疫電泳或免疫印跡試驗，或其它適宜方法。4變應原總生物活性測定應制定對每批變應原制品的總生物活性要求?？偵锘钚詼y定方法應標準化?？蛇x用體外的放射變應原吸附抑制實驗（RAS抑制試驗）、直接RAS試驗，或體內(nèi)皮膚點刺實驗（按藥品注冊的相關規(guī)定申請臨床研究）。需詳細說明操作方法、試劑和抗血清標準等。還要對檢測樣品和參考品的平行性關系進行檢測。應以IR為標準，對每批

7、產(chǎn)品進行總生物活性測定，并以生物活性單位表示效價。如果已有國際標準品（IS），則每批制品的總生物活性應以國際單位（IU）表示。如產(chǎn)品是由一種或幾種明確的變應原組成，可選用其它相關的方法，對變應原活性進行測定，如放射免疫擴散法、定量免疫電泳法或其它定量檢測技術等。以上檢測，也應采用生物活性單位系統(tǒng)進行校正。要求所測得的抗原效價應在標示效價的50%-200%之間，方法學研究應證實效價測定的標準差小于等于20%。（六）標準物質(zhì)變應原制劑的標準化要求建立一個有準確定義的、經(jīng)全面鑒定且性質(zhì)穩(wěn)定的參照品。1內(nèi)部參考品（IR）應制備具有代表性的變應原制劑作為IR，并以之作為對其它各批變應原制劑（包括中間體和

8、半成品）進行質(zhì)控的參考品。其它常規(guī)生產(chǎn)的變應原制劑應以IR為標準，進行變應原成分鑒別及效價測定。需采用適當?shù)姆椒▽R進行鑒定，并確定其特異的生物活性（體內(nèi)、體外生物活性）。可通過與數(shù)批初提取物進行比較，說明IR中存在所有相關變應原。應采用適當?shù)谋４娣椒ǎ源_保IR的穩(wěn)定。建議將IR分裝凍干并于低溫（-20）條件下存放。IR的熱穩(wěn)定性研究可通過加速降解試驗進行，即通過比較保存于高溫條件下變應原與持續(xù)保存于-20下變應原的相對降解率進行分析。穩(wěn)定性考察項目包括對變應原制劑總活性的分析及相關變應原含量的檢測。2國際標準品（IS）如果已有IS，需進行IR與IS的比較研究（包括定性和定量分析）。應進行

9、IS和IR總活性測定的平行線分析，如結果成立（呈平行關系），則可以用IS按國際單位校正IR的效價。IS的使用需參照國際免疫學會（IUIS）變應原標準化分會的建議。（七）經(jīng)修飾或其它處理的變應原制劑如果變應原經(jīng)過化學修飾、沉淀或吸附等處理后，制劑中的變應原成分已經(jīng)不再可溶，不能按常規(guī)方法進行檢測。在這種情況下，就應該對處理前的中間產(chǎn)品質(zhì)量進行檢測并制定相應標準。（八）制檢記錄及復檢報告應提供連續(xù)三批變應原制品的制檢記錄，以及中國藥品生物制品檢定所的檢定報告。（九）穩(wěn)定性變應原制劑的穩(wěn)定性研究應重點考察樣品存放期間的活性變化（應明確可接受的活性下降幅度），如需再配制（reconstituted p

10、roducts），需提供稀釋后的穩(wěn)定性，以及稀釋液本身的相關技術資料。三、臨床前藥理學和毒理學研究（一）藥效學研究應在可能的前提下，盡量提供藥效學的實驗數(shù)據(jù)。（二）毒理學研究從毒理學角度評價變應原制劑的安全性，原則上與其它注射用藥物的要求一致。毒理學資料應包括急性毒性試驗（診斷和治療用制劑）和亞急性毒性試驗（治療用制劑）研究。由于變應原制劑可能引起的免疫性副作用難以與一般的毒理相區(qū)別，所以傳統(tǒng)的毒理試驗方法不一定是恰當和可行的。四、臨床研究（一）變應原免疫治療（脫敏治療）的適應證只限于呼吸道過敏性疾病，如過敏性哮喘和過敏性鼻炎。（二）確定療效所需的臨床試驗應采用多中心、隨機、對照的方法，病例數(shù)應不少于50對。（三）臨床研究時間可隨試驗目的和變應原制品性質(zhì)的不同而不同，考慮到變應原免疫治療（脫敏治療）特點，治療用制劑的臨床試驗療程應足夠長，以制劑說明書的推薦時間為準，一般應不少于3年。（四）對于已制備供應多年（十年以上），有的臨床資料證明其制劑安全有效者，可免做臨床研究，但應按規(guī)范要求，整理有關