無(wú)菌醫(yī)療器械環(huán)境控制及微生物檢測(cè)

1、無(wú)菌醫(yī)療器械環(huán)境控制及微生物檢測(cè)2022/10/142內(nèi) 容 YY0033的潔凈室（區(qū)）要求 相關(guān)法規(guī)和GMP中關(guān)于潔凈室（區(qū)）的內(nèi)容比較 潔凈室（區(qū)）的測(cè)試/維護(hù)及驗(yàn)證 產(chǎn)品的微生物檢測(cè)2022/10/143生產(chǎn)環(huán)境的污染與生產(chǎn)環(huán)境質(zhì)量相關(guān)的微粒污染 微生物的污染途徑通常有4種：A：自身污染由于患者或工作人員自身帶菌而污染B：接觸污染由于和非完全無(wú)菌的用具，器械和人的接觸而污染C：空氣污染由于空氣中所含細(xì)菌的沉降、附著或被吸入而污染D：其他污染由于昆蟲等其他因素而污染細(xì)菌還可能產(chǎn)生毒性物質(zhì)、色素等代謝產(chǎn)物2022/10/144空氣凈化的主要過(guò)程空氣凈化主要的過(guò)程一是利用過(guò)濾器有效地控制送入室

2、內(nèi)的全部空氣的潔凈度，由于細(xì)菌都會(huì)依附在微粒上，微粒過(guò)濾同時(shí)也濾掉了細(xì)菌；二是利用合理的氣流組織排除已經(jīng)發(fā)生的污染，由送風(fēng)口送入潔凈空氣，使室內(nèi)產(chǎn)生的微粒和細(xì)菌被潔凈空氣稀釋后強(qiáng)迫其由回風(fēng)口進(jìn)入系統(tǒng)的回風(fēng)管路，在空調(diào)設(shè)備的混合段和從室外引入的經(jīng)過(guò)過(guò)濾的新風(fēng)混合，再經(jīng)過(guò)進(jìn)一步過(guò)濾后又進(jìn)入室內(nèi)，通過(guò)反復(fù)的循環(huán)就可以把污染控制在一個(gè)穩(wěn)定的水平上，這個(gè)水平就應(yīng)該低于相應(yīng)的潔凈度級(jí)別；三是通過(guò)調(diào)整，使不同級(jí)別潔凈室室內(nèi)的空氣靜壓大于5帕（包括與非潔凈區(qū)），與室外大氣大于10帕，防止外界污染或交叉污染從門或各種縫隙部位侵入室內(nèi)。2022/10/145空氣凈化系統(tǒng)的三級(jí)過(guò)濾示意圖2022/10/146通過(guò)凈

3、化隔絕或排除污染合理設(shè)計(jì)建立的潔凈廠房和有效的管理在無(wú)菌醫(yī)療器械生產(chǎn)中會(huì)體現(xiàn)出非常優(yōu)越的性能，它通過(guò)對(duì)墻體、地板、屋頂、管線、水源、照明、通風(fēng)和溫度濕度等功能設(shè)計(jì)達(dá)到內(nèi)部的潔凈環(huán)境，通過(guò)空氣的三級(jí)過(guò)濾使進(jìn)入潔凈室的空氣是符合要求的，它能夠通過(guò)人員和物料的凈化程序隔絕或消除外來(lái)污染，通過(guò)氣流組織、壓差和換氣次數(shù)等參數(shù)抑制微生物、微粒的污染，它能夠排除由于光、味道、相對(duì)濕度等導(dǎo)致的任何質(zhì)量損害，通過(guò)嚴(yán)格的工藝紀(jì)律達(dá)到避免交叉污染的目的。2022/10/147法規(guī)YY0033 無(wú)菌醫(yī)療器具質(zhì)量管理規(guī)范醫(yī)療器械管理?xiàng)l例其他相關(guān)規(guī)章2022/10/148生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局廠址及廠區(qū) 廠址的選擇：（）

4、遠(yuǎn)離空氣污染、水質(zhì)污染、振動(dòng)或噪聲干擾的區(qū)域.2022/10/149生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局廠址及廠區(qū) 廠區(qū)內(nèi)的布局（） 廠區(qū)的道路和綠化、生活區(qū)和輔助區(qū)對(duì)生產(chǎn)區(qū)不產(chǎn)生污染為原則.2022/10/1410生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局生產(chǎn)廠房 一般生產(chǎn)區(qū)：（）應(yīng)設(shè)計(jì)合理，采光、通風(fēng)良好，能滿足生產(chǎn)需要.2022/10/1411生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局生產(chǎn)廠房 一般生產(chǎn)區(qū)：（）應(yīng)設(shè)計(jì)合理，采光、通風(fēng)良好，能滿足生產(chǎn)需要.2022/10/1412生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局潔凈區(qū)潔凈度的級(jí)別和潔凈度級(jí)別的設(shè)置（5.2.2.1)附錄A;附錄B2022/10/1413生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局無(wú)菌醫(yī)療器具產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境潔凈度級(jí)別設(shè)置指

5、南（附錄B）潔凈度設(shè)置的原則： 1、 根據(jù)產(chǎn)品的技術(shù)要求，采用使污染降至最低限的技術(shù)； 2、根據(jù)工序的不同要求，采用不同的潔凈度級(jí)別.可采用局部工作區(qū)與和全室空氣凈化相結(jié)合.2022/10/1414生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局潔凈區(qū)的內(nèi)表面（）潔凈區(qū)的密封性（）潔凈區(qū)門的設(shè)置（）工藝流程布局（）潔凈區(qū)內(nèi)水電設(shè)施（）潔凈區(qū)的照明（）潔凈區(qū)內(nèi)的操作臺(tái)要求（）潔凈區(qū)內(nèi)使用的壓縮空氣的要求（）水池、地漏等（）2022/10/1415生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局人員凈化人員凈化室（）凈化的程序（）人員凈化中的換鞋的要求（）人員的流向（）盥洗室和風(fēng)淋房的設(shè)置（）潔凈區(qū)人均面積的限制（）第三章資源管理.doc2022/10

6、/1416生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局物料凈化清潔措施（）物料的傳遞（）物料的包裝（）2022/10/1417生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局工藝布局按產(chǎn)品形成過(guò)程順向布置（）潔凈室內(nèi)的工藝裝備和設(shè)施、產(chǎn)品的中間庫(kù)、不同潔凈級(jí)別之間的物料傳遞（）潔凈室內(nèi)的器具和潔具的管理（）2022/10/1418潔凈區(qū)的周邊環(huán)境及格局潔凈室（區(qū)）周圍環(huán)境應(yīng)保持清潔整齊，沒(méi)有露土地面。潔凈廠房周圍的道路面層，應(yīng)選用整體性能好、發(fā)塵少的材料。潔凈廠房周圍應(yīng)進(jìn)行綠化，可鋪植草坪，但不應(yīng)種植對(duì)生產(chǎn)有害的植物，并不妨礙消防作業(yè)。藥包材生產(chǎn)企業(yè)的潔凈室（區(qū)）應(yīng)布置在廠區(qū)內(nèi)環(huán)境清潔，人流物流不穿越或少穿越的區(qū)域。潔凈室（區(qū)）應(yīng)為密閉廠房。生

7、產(chǎn)企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品的分類和用途確定相應(yīng)潔凈級(jí)別，并據(jù)此結(jié)合生產(chǎn)工藝進(jìn)行凈化廠房的設(shè)計(jì)和施工，以保證產(chǎn)品在符合規(guī)定的環(huán)境里生產(chǎn)。應(yīng)考慮與產(chǎn)品的生產(chǎn)流程相匹配。以最短的時(shí)間，即最小被污染的原則來(lái)制訂的。一般來(lái)說(shuō)，生產(chǎn)流程是按照產(chǎn)品的生產(chǎn)流向順序排列，不迂回交叉，不相互影響；應(yīng)考慮影響潔凈指標(biāo)的因素，主要是廠房結(jié)構(gòu)、裝修材料、門窗、生產(chǎn)設(shè)備、布局、工藝、人員等等，應(yīng)在滿足使用要求的同時(shí)滿足潔凈要求。2022/10/1419潔凈室的基本要求HVAC系統(tǒng)工程、工藝布局和相關(guān)維護(hù)設(shè)施應(yīng)遵循物料和產(chǎn)品發(fā)生任何污染的危險(xiǎn)度降至最低的原則。當(dāng)生產(chǎn)技術(shù)不能保證生產(chǎn)不受污染或不能有效排除污染時(shí)，該生產(chǎn)區(qū)域的潔凈級(jí)別

8、應(yīng)在條件許可的前提下提高生產(chǎn)控制區(qū)應(yīng)為密閉空間，具備粗效過(guò)濾的集中送風(fēng)系統(tǒng)，內(nèi)表面應(yīng)平整光滑，無(wú)顆粒物脫落，墻面和地面能耐受清洗和消毒，以減少灰塵的積聚。應(yīng)使用現(xiàn)行的設(shè)計(jì)和安裝標(biāo)準(zhǔn)2022/10/1420對(duì)潔凈室（區(qū)）測(cè)試的規(guī)定換氣次數(shù)（截面平均風(fēng)速）溫度相對(duì)濕度靜壓差懸浮粒子浮游菌沉降菌噪聲照度2022/10/1421FDA(食品和藥物管理局)TGA(醫(yī)療用品委員會(huì))MCA(藥物控制局)EMEA(歐洲藥物評(píng)估局-包括 MCA 和其它歐盟國(guó)家的等同機(jī)構(gòu)。MCC (藥物控制委員會(huì)) 每個(gè)人都免不了服藥。制定標(biāo)準(zhǔn)，保證藥物安全！ 每個(gè)人都有權(quán)力拒絕不符合規(guī)定的藥物。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)制定者NIHS亞洲(國(guó)家

9、衛(wèi)生科學(xué)協(xié)會(huì))HS-SC(Health Canada Sante Canada)2022/10/1422各國(guó)法規(guī)的比較藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（1998年修訂）獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2001年修訂） Code of GMP for Medicinal Products (Draft, 2003，F(xiàn)DA)Australian Code of GMP for Medicinal Products (16 August 2002) Code of GMP for Medicinal Products (2003，EU) ISO 14644 Cleanrooms and associated contro

10、lled environments ISO 14698 Cleanrooms and associated controlled environmentsBiocontamination controlUSP 27-1116 Microbiological Evaluation of Clean Rooms and Other Controlled EnvironmentsPDA Bethesda,Maryland,USA Microbiological Risk Assessment in Pharmaceutical Clean RoomsGB 500732002 潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范JGJ

11、7190 潔凈室施工和驗(yàn)收規(guī)范等等2022/10/1423以懸浮粒子為例與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比較動(dòng)態(tài)與靜態(tài)分級(jí)數(shù)值對(duì)核心區(qū)的控制2022/10/1424FS/209E和ISO/TC209-14644美國(guó)聯(lián)邦標(biāo)準(zhǔn)FS209E中規(guī)定了任意等級(jí)的微粒上限濃度可近似用下列計(jì)算公式求出： NM=10M(0.5/D)2.2式中：NM大于或等于粒徑為D的微粒上限濃度（粒/m3） M國(guó)際單位制（ISO/TC209-14644.1）的潔凈度級(jí)別序號(hào) D粒徑（m）2022/10/1425ISO/TC209 14644.1Classification number(N)0.10.20.30.515ISO class 1102

12、ISO class 210024104ISO class 31000237102358ISO class 4100002370102035283ISO class 51000002370010200352083229ISO class 6237000102000352008320293ISO class 7352000832002930ISO class 883200029300ISO class 92930002022/10/1426以浮游菌為例與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比較EU GMP 附錄 1FDA GMP (Draft)USP 27 NFTGA GMPISO 14644潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈

13、度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別Grade A11001M3.53Grade A1Class 5Grade B1010007/Grade B10Class 6Grade C1001000010M5.520Grade C100Class 7Grade D200100000100M6.5100Grade D200Class 8/2022/10/1427以沉降菌為例與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比較EU GMP 附錄 1FDA GMP (Draft)USP 27 NFTGA GMPISO 14644潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別Grade A11001M3.5/Grade A=5u

14、m）一個(gè)字母“P”的發(fā)音可產(chǎn)生100個(gè)顆粒（=5um）說(shuō)話1分鐘可產(chǎn)生15,000-20,000個(gè)顆粒（=5um）咳嗽可產(chǎn)生700,000-20,000個(gè)顆粒（=5um）打噴嚏可產(chǎn)生1,400,000-20,000個(gè)顆粒（=5um）2022/10/1465進(jìn)入潔凈室的程序（換鞋、更衣和洗手）2022/10/1466空氣Air進(jìn)行在線空氣懸浮粒子、壓差監(jiān)控和浮游菌、沉降菌的取樣 一般在層流罩下的無(wú)菌操作時(shí)連續(xù)監(jiān)控監(jiān)控舉例2022/10/1467設(shè)備表面，墻，地板每天（100級(jí)）或每周（10，000級(jí)）進(jìn)行平板或棉簽取樣設(shè)定微生物污染標(biāo)準(zhǔn)和啟動(dòng)限、報(bào)警限自凈時(shí)間的測(cè)試監(jiān)控舉例2022/10/146

15、8啟動(dòng)限和報(bào)警限對(duì)于微生物測(cè)試的取樣頻次，如果出現(xiàn)下列情況應(yīng)考慮修改，在評(píng)估以下情況后，也應(yīng)確定其它項(xiàng)目的測(cè)試頻次： 連續(xù)超過(guò)報(bào)警限和啟動(dòng)限； 停工時(shí)間比預(yù)計(jì)延長(zhǎng)； 關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有傳染的試劑； 在生產(chǎn)期間，空氣凈化系統(tǒng)進(jìn)行任何重大的維修； 環(huán)境設(shè)施的限制引起工藝的改變； 日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)； 凈化和消毒規(guī)程的改變； 引起生物污染的事故等2022/10/1469測(cè)試中懸浮粒子與細(xì)菌的對(duì)比對(duì)于控制微生物污染來(lái)說(shuō)，了解微生物的污染途徑是必要的。微生物的污染通常有4種途徑：自身污染、接觸污染、空氣污染、其它污染。對(duì)于自身污染、接觸污染、其它污染均可通過(guò)嚴(yán)格管理來(lái)控制，而空氣污染是由空氣凈

16、化系統(tǒng)帶來(lái)的。在直接接觸藥品的包裝材料和容器生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中所控制的空氣凈化系統(tǒng)的懸浮粒子是0.5um和5um粒徑的粒子。生物粒子因其生物特異性只能附著于37um以上粒徑的粒子上生存，即大氣菌的效率等價(jià)直徑為5um。我們的5um記數(shù)方法是以5um為底線將粒徑比它大的粒子全部記錄下來(lái)，通常5um以上粒子的多少直接影響到生物粒子的附著量。下面對(duì)301間潔凈室作了個(gè)統(tǒng)計(jì)2022/10/1470數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)潔凈度級(jí)別間數(shù)（間）5um粒子數(shù)（個(gè)/m3）沉降菌數(shù)（個(gè)/皿）浮游菌數(shù)（個(gè)/立方米）100級(jí)400110000級(jí)47195126703112100000級(jí)8423013670184156300000級(jí)

17、166112522386613402802022/10/1471潔凈室的使用和清潔2022/10/1472GMP的靈魂-驗(yàn)證驗(yàn)證的起源驗(yàn)證這個(gè)概念首先在美國(guó)FDA 1978年修訂后的GMP中提出并開(kāi)始推行，并規(guī)定了必須驗(yàn)證的內(nèi)容在最近十年里，越來(lái)越多的國(guó)家采用了類似GMP規(guī)范，期望實(shí)現(xiàn)驗(yàn)證所帶來(lái)的益處，參與愈演愈烈的全球藥業(yè)市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)2022/10/1473驗(yàn)證的歷史和價(jià)值生產(chǎn)過(guò)程或中間控制系統(tǒng)的不恰當(dāng)，對(duì)工藝控制指標(biāo)、程序缺乏合理評(píng)價(jià)及測(cè)試數(shù)據(jù)。缺乏對(duì)水、空氣及表面的輔助工序、規(guī)格指標(biāo)和檢測(cè)數(shù)據(jù)的監(jiān)測(cè)1976年，F(xiàn)DA提出修改GMP的有關(guān)規(guī)定，詳細(xì)提出設(shè)備和過(guò)程 如何設(shè)計(jì)、制造和測(cè)試。首先從滅

18、菌步驟開(kāi)始：濕熱和干熱消毒、環(huán)氧乙烷消毒、除熱原工藝 、SIP（在線滅菌）和過(guò)濾。開(kāi)始使用驗(yàn)證、規(guī)程和認(rèn)證等術(shù)語(yǔ)大多數(shù)公司對(duì)驗(yàn)證的努力是防御性的，一開(kāi)始對(duì)于國(guó)家規(guī)范的要求是被動(dòng)的隨著驗(yàn)證的積累和驗(yàn)證本身的價(jià)值體現(xiàn)，驗(yàn)證變成自覺(jué)的行為，和執(zhí)行規(guī)章制度一樣 。2022/10/1474必須驗(yàn)證的系統(tǒng)Sterilization Systems滅菌系統(tǒng)（特別是大輸液和水針劑的最終產(chǎn)品滅菌）Aseptic Filling Operations無(wú)菌灌裝操作Solution Preparation Systems溶解針劑系統(tǒng)（全過(guò)程）WFI (Water For Injection Systems)WFI（注

19、射用水）Environmental Systems環(huán)境系統(tǒng)FDA2022/10/1475系統(tǒng)驗(yàn)證的測(cè)試項(xiàng)目氣溶膠對(duì)的檢漏氣溶膠測(cè)定儀1.jpg自凈時(shí)間氣流流型動(dòng)態(tài)的重現(xiàn)性核心區(qū)的控制微生物其他常規(guī)項(xiàng)目的測(cè)試驗(yàn)證評(píng)價(jià)回顧性驗(yàn)證2022/10/1476HVAC系統(tǒng)的驗(yàn)證步驟常規(guī)的驗(yàn)證工作有以下幾個(gè)步驟；1，設(shè)立驗(yàn)證的組織機(jī)構(gòu)（驗(yàn)證小組等）；2，制定驗(yàn)證計(jì)劃，確定所需的設(shè)備、系統(tǒng)、過(guò)程和時(shí)間表；3，制定驗(yàn)證方案，必須確定為達(dá)到預(yù)期目的的具有可操作性的驗(yàn)證方法；包括驗(yàn)證目的、適用范圍、系統(tǒng)或設(shè)備、驗(yàn)證方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)施步驟等4，按照驗(yàn)證方案實(shí)施；5，收集驗(yàn)證數(shù)據(jù)出具驗(yàn)證報(bào)告，包括驗(yàn)證結(jié)果、驗(yàn)證評(píng)價(jià)

20、和建議，再驗(yàn)證周期等。2022/10/1477微生物的基本知識(shí)定義：自然界中除動(dòng)植物外，還存在一個(gè)龐雜，形態(tài)微小 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的生物類群，因個(gè)體微小，肉眼不能看到，需借光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百，幾千，幾萬(wàn)倍才能看到。此類微小的生物統(tǒng)稱為微生物（microorganism）特點(diǎn)：形體小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，新陳代謝能力強(qiáng)，生長(zhǎng)繁殖快，細(xì)胞未明顯分化，易發(fā)生變異，種類多分布廣。舉例：細(xì)胞，真菌分布：土壤，空氣，水， 動(dòng)植物人體表，腔道中等2022/10/1478微生物的主要特性細(xì)菌和菌類名稱 單體尺寸（m） 菌類（含真菌） 380 枯草菌 510 水腫菌 510 肺炎桿菌 1.17 乳酸菌 17 白喉菌

21、16 大腸菌 15 結(jié)核菌 1.54 破傷風(fēng)菌 24 傷寒桿菌 13 普通化膿桿菌 0.71.3 白色（黃色）葡萄球菌 0.31.2 炭疽桿菌 0.460.562022/10/1479微生物的基本知識(shí)對(duì)于細(xì)菌的生長(zhǎng)來(lái)說(shuō)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有： 水， 碳源（有機(jī)：糖類；無(wú)機(jī)：CO2）， 氮源（N2，硝酸鹽，銨鹽， 有機(jī)蛋白胨，氨基酸等）， 生長(zhǎng)因子（維生素，氨基酸， 嘌呤，嘧啶）， 無(wú)機(jī)鹽（磷酸鹽，硫酸鹽，氯鹽， 鉀鹽，鈉鹽，鎂鹽，鈣鹽等）2022/10/1480微生物的基本知識(shí)生長(zhǎng)條件：1.充足的營(yíng)養(yǎng) 2.合適的pH值，6.8-7.4 3.合適的溫度，哺乳動(dòng)物寄生的 為35，其他腐生的為25 4.氣體：氧氣，二氧化碳2022/10/1481微生物的基本知識(shí)培養(yǎng)方法：固體培養(yǎng)基：接種于平板固體培養(yǎng)基上，由單個(gè)繁殖形成肉眼可見(jiàn)的集團(tuán)菌落菌落特點(diǎn)的判定：大小， 形狀，光滑或粗糙，色澤 （固體培養(yǎng)基上）；若于液體 培養(yǎng)基中，有菌生長(zhǎng)則呈混濁。2022/10/1482微生物的基本知識(shí)細(xì)菌的生長(zhǎng)：分為延遲期，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，穩(wěn)定期，衰亡期。 其中，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期是細(xì)菌生 長(zhǎng)最旺盛的時(shí)期，很多藥物 選擇在這一時(shí)期作用最有效， 我們觀察細(xì)菌生長(zhǎng)也是在這 一時(shí)期最明