生物材料檢驗(yàn)質(zhì)量控制

1、第四節(jié) 生物材料檢驗(yàn) 質(zhì)量控制1實(shí)際上就就是對(duì)實(shí)實(shí)驗(yàn)誤差差進(jìn)行控控制生物材料料檢驗(yàn)的的特點(diǎn)：樣品基基體較復(fù)雜，大多數(shù)數(shù)被測(cè)物物質(zhì)是痕量組分，以以g/g、g/ml或ng/g、ng/ml級(jí)水平存存在；痕量分析析的突出出問(wèn)題之之一：易受玷污污，造成被被測(cè)組分分的損失失或引入入被測(cè)組組分或其其它干擾擾組分，從而使使測(cè)定結(jié)結(jié)果產(chǎn)生生誤差。2檢驗(yàn)人員員應(yīng)了解解整個(gè)分析析過(guò)程中中可能出出現(xiàn)哪些些誤差？誤差產(chǎn)生生原因及及其對(duì)測(cè)測(cè)定結(jié)果果的影響響；采取有效效措施，使誤差差控制在在允許限度度內(nèi)；同時(shí)對(duì)分分析結(jié)果果進(jìn)行質(zhì)質(zhì)量評(píng)價(jià)價(jià)，及時(shí)時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)問(wèn)題并加加以糾正正。3一、生物物材料檢檢驗(yàn)質(zhì)量量控制一一般方法法分析誤差

2、差產(chǎn)生于于分析全過(guò)程：樣品采集集樣品處理理分析方法法儀器和器器皿化學(xué)試劑劑和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)用水?dāng)?shù)據(jù)記錄錄與處理理檢驗(yàn)人員員的技術(shù)術(shù)水平實(shí)驗(yàn)環(huán)境境4實(shí)驗(yàn)室質(zhì)質(zhì)量控制制包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)內(nèi)部質(zhì)量量控制intralaboratorialquality control實(shí)驗(yàn)室間間質(zhì)量控控制interlaboratorialquality control5（一）實(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)內(nèi)質(zhì)量控控制的基基本條件件1實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室管理理應(yīng)建立、健全各各項(xiàng)規(guī)章制度度和標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)操作規(guī)規(guī)程，要有經(jīng)經(jīng)驗(yàn)豐富富的專業(yè)業(yè)管理人人員，從從制度上上杜絕質(zhì)質(zhì)量事故故的發(fā)生生，保證證各項(xiàng)質(zhì)質(zhì)量控制制措施的的實(shí)施。62檢驗(yàn)驗(yàn)人員培培訓(xùn)檢驗(yàn)人員員的責(zé)任感和技術(shù)水平平直

3、接影響響分析質(zhì)質(zhì)量，必必須對(duì)檢檢驗(yàn)人員員進(jìn)行專專業(yè)技術(shù)術(shù)培訓(xùn)，不斷更新新知識(shí)，進(jìn)行操操作訓(xùn)練練和技術(shù)術(shù)等級(jí)考考核，強(qiáng)強(qiáng)化對(duì)分分析質(zhì)量量保證工工作重要要性的認(rèn)認(rèn)識(shí)。73實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室環(huán)境境實(shí)驗(yàn)室溫溫度、濕濕度實(shí)驗(yàn)室空空氣中懸懸浮塵埃埃的污染染如實(shí)驗(yàn)室室空氣中中塵埃達(dá)達(dá)200g/m3時(shí)，對(duì)金金屬元素素測(cè)定將將帶來(lái)嚴(yán)嚴(yán)重影響響。84儀器器設(shè)備及及容器應(yīng)進(jìn)行定定期檢定定，以確確保實(shí)驗(yàn)驗(yàn)測(cè)量可可追溯到到已有的的國(guó)家計(jì)計(jì)量基準(zhǔn)準(zhǔn)，并進(jìn)進(jìn)行經(jīng)常常性維護(hù)護(hù)，保持持其處于于良好運(yùn)運(yùn)行狀態(tài)態(tài)。實(shí)驗(yàn)用容容器表面面的玷污污和容器器材料中中雜質(zhì)成成分的溶溶出及表表面吸附附是樣品品污染的的重要來(lái)來(lái)源，不不同材料料的容器器各具特

4、特性，適適于不同同的分析析項(xiàng)目。9例如：微量元素素分析所所用容器器：聚四四氟乙烯烯為最佳佳，其次次為聚乙乙烯或聚聚丙烯制制品；玻玻璃容器器：硅硼硼玻璃；容器使用用前要選選用合適適方法進(jìn)進(jìn)行清洗洗，如3%HNO3(CP)浸泡至少少一天，自來(lái)水水水沖洗洗 ，再再用純水水沖洗干干凈，于于無(wú)煙塵塵處晾干干保存待待用。有機(jī)成分分的分析析則多使使用玻璃璃器皿。105化學(xué)學(xué)試劑和和實(shí)驗(yàn)用用水化學(xué)試劑劑和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)用水的的純度是是空白值值的主要要來(lái)源，直接影影響分析析結(jié)果的的可靠性性，特別別是生物物樣品前前處理過(guò)過(guò)程中要要使用較較大量的的各種酸酸對(duì)樣品品進(jìn)行消消解，必必須使使用純度符合合要求的化學(xué)試試劑，純純水的

5、的電導(dǎo)率率應(yīng) 1s/cm。11（二）測(cè)測(cè)試過(guò)程程中的質(zhì)質(zhì)量控制制1分析方方法選擇擇優(yōu)先選擇國(guó)家家標(biāo)準(zhǔn)分分析方法法或有關(guān)關(guān)學(xué)術(shù)團(tuán)團(tuán)體推薦薦的方法法，若無(wú)國(guó)標(biāo)標(biāo)方法，應(yīng)選擇擇靈敏度度高、選選擇性好好、準(zhǔn)確確度高、精密度度好和相相對(duì)快速速的分析析方法。122樣品品的采集集和外理理采樣和樣樣品制備備時(shí)，采采樣器具具、器皿皿及所用用試劑是是污染的的又一重重要來(lái)源源，如微微量元素素測(cè)定，采樣時(shí)時(shí)若使用用不銹鋼鋼刀、剪剪、針頭頭等，其其中Mn、Cr、Ni等的含量量與生物物樣品中中這些元元素的含含量存在在巨大的的濃度差差，使這這些元素素?cái)U(kuò)散至至生物樣樣本中而而產(chǎn)生玷玷污；132樣品品的采集集和外理理整個(gè)分析析

6、過(guò)程往往往需要要較多的的操作，分析人人員使用用化妝品品、染發(fā)發(fā)劑、抽抽煙、手手觸摸樣樣品等都都可能玷玷污樣品品，也應(yīng)應(yīng)引起重重視。143分析析誤差預(yù)預(yù)評(píng)價(jià)檢驗(yàn)人員員用選定定的方法法反復(fù)多多次進(jìn)行行實(shí)驗(yàn)操操作，以以正確掌掌握分析析方法的的原理、實(shí)驗(yàn)過(guò)過(guò)程、條條件及特特性，并并繪制出出校正曲曲線。153分析析誤差預(yù)預(yù)評(píng)價(jià)對(duì)空白溶溶液、標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液液（取測(cè)測(cè)定上限限濃度的的0.2倍和0.8倍兩個(gè)濃濃度）、樣品、加標(biāo)樣樣品四類類溶液進(jìn)進(jìn)行平行雙樣樣測(cè)定，每每天測(cè)定定一批，共測(cè)定定6批。16由測(cè)定結(jié)結(jié)果對(duì)分分析誤差差、精密密度和準(zhǔn)準(zhǔn)確度進(jìn)進(jìn)行預(yù)評(píng)評(píng)價(jià)：由空白實(shí)實(shí)驗(yàn)的批批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)偏差計(jì)計(jì)算分析析方法的的檢出

7、限限；比較各溶溶液的批批內(nèi)變異異和批間間變異，檢驗(yàn)變變異差異異的顯著著性，以以判斷分分析方法法的精密密度；17由測(cè)定結(jié)結(jié)果對(duì)分分析誤差差、精密密度和準(zhǔn)準(zhǔn)確度進(jìn)進(jìn)行預(yù)評(píng)評(píng)價(jià)：比較樣品品、加標(biāo)標(biāo)樣品與與標(biāo)準(zhǔn)溶溶液測(cè)定定結(jié)果的的標(biāo)準(zhǔn)偏偏差，判判斷樣品品中是否否存在有有影響測(cè)測(cè)定精密密度的干干擾物質(zhì)質(zhì)，并確確定有無(wú)無(wú)消除干干擾物質(zhì)質(zhì)的必要要；計(jì)算樣品品的加標(biāo)標(biāo)回收率率，判斷斷樣品中中是否存存在改變變分析準(zhǔn)準(zhǔn)確度而而不影響響方法精精密度的的組分。18分析誤差差預(yù)評(píng)價(jià)價(jià)用標(biāo)準(zhǔn)參考考物質(zhì)與試樣在在完全相相同的條條件下進(jìn)進(jìn)行測(cè)定定，將標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)測(cè)定結(jié)結(jié)果與給給出的保保證值相相比較，若其誤誤差符合合方法規(guī)規(guī)定

8、的不不確定度度，說(shuō)明明方法和和測(cè)定過(guò)過(guò)程無(wú)系系統(tǒng)誤差差，結(jié)果果準(zhǔn)確可可靠。通過(guò)以上上實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)分分析方法法的精密密度、準(zhǔn)準(zhǔn)確度合合格后，即可運(yùn)運(yùn)用于常常規(guī)樣品品的檢驗(yàn)驗(yàn)工作。19（三）繪繪制質(zhì)量量控制圖圖簡(jiǎn)稱質(zhì)控控圖目的：對(duì)對(duì)日常分分析系統(tǒng)統(tǒng)進(jìn)行經(jīng)經(jīng)常性核核對(duì)，以以便及時(shí)時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)問(wèn)題、分分析原因因、采取取措施。20均值控制制圖最簡(jiǎn)單和和常用的的質(zhì)控圖圖以逐步累累積的20次以上“質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)樣”的測(cè)定定結(jié)果計(jì)計(jì)算出平平均值X和標(biāo)準(zhǔn)差差S，以平均均值X為中心線線，以X2S作為上、下警告告限，X3S作為上、下控制制限作圖圖，再將將各測(cè)定定值點(diǎn)在在圖上，并用直直線將其其連接。如圖1-1所示21均值控制制

9、圖22常規(guī)樣品品分析過(guò)過(guò)程中，每分析一一批樣品品(或每測(cè)定定10個(gè)樣品)插入一個(gè)個(gè)“質(zhì)控控樣”，與樣品平平行進(jìn)行行測(cè)定。將每次測(cè)測(cè)定未知知樣時(shí)，所分析析 的“質(zhì)控樣樣”所得的結(jié)結(jié)果，點(diǎn)點(diǎn)在質(zhì)控控圖上?！百|(zhì)控樣樣”測(cè)量量值落在在警告限限內(nèi)分析數(shù)據(jù)據(jù)準(zhǔn)確可可靠；23落在警告告限外、控制限限內(nèi)測(cè)定結(jié)果果可以接接受，質(zhì)質(zhì)量仍在在控制中中，但同同時(shí)提示示分析結(jié)結(jié)果開始始變劣，可能存存在失控控傾向，應(yīng)進(jìn)行行初步檢檢查，并并采取相相應(yīng)的校校正措施施，但結(jié)結(jié)果仍可可保留；超出控制制限測(cè)定過(guò)程程失控，應(yīng)停止止測(cè)定，找出原原因加以以糾正，并重新新測(cè)定該該批全部部樣品。24質(zhì)控圖類類型多種類型型：均值控制制圖空白實(shí)

10、驗(yàn)驗(yàn)值控制制圖回收率控控制圖均值-極差控制制圖等。25（四）實(shí)實(shí)驗(yàn)室間間質(zhì)量控控制定義：為為保證各各實(shí)驗(yàn)室室間分析析結(jié)果有有可比性性，常由由上級(jí)主主管部門門及中心心實(shí)驗(yàn)室室對(duì)其所所屬各實(shí)實(shí)驗(yàn)室及及其分析析人員的的分析質(zhì)質(zhì)量進(jìn)行行定期或或不定期期的考核核，稱為為實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量量控制。常用的方方法有：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢驗(yàn)法雙樣圖法法261標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)檢檢驗(yàn)法將考核樣樣品（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)）分發(fā)給給各參加加考核的的實(shí)驗(yàn)室室，要求求按選定定的統(tǒng)一一方法對(duì)對(duì)其進(jìn)行行測(cè)試，并上報(bào)報(bào)測(cè)定結(jié)結(jié)果。27將上報(bào)的的測(cè)試結(jié)結(jié)果進(jìn)行行統(tǒng)計(jì)處處理，分分別計(jì)算算各實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室的測(cè)測(cè)定結(jié)果果與考核核樣品保保證值（真值）的相對(duì)對(duì)誤差，或?qū)⒖伎己?/p>

11、樣品品的保證證值（中中心值及及不確定定度）中中的不確確定度適適當(dāng)展寬寬后，用用以評(píng)價(jià)價(jià)各實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室的測(cè)測(cè)定結(jié)果果。最后將結(jié)結(jié)果返回回各實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室，以以檢查是是否存在在系統(tǒng)誤誤差，并并查找原原因，加加以糾正正。282雙樣樣圖法（尤登試試驗(yàn)法）將組分相相同但濃濃度相差差不大的的兩個(gè)樣樣品A、B分發(fā)給各各實(shí)驗(yàn)室室，用統(tǒng)統(tǒng)一的方方法對(duì)樣樣品進(jìn)行行測(cè)定，然后在在坐標(biāo)紙紙上以樣樣品A的濃度為為X橫軸、樣樣品B的濃度為為Y縱軸繪圖圖。29將樣品A、B的真值（或均值值）標(biāo)在在圖上作作為中心心點(diǎn)，通通過(guò)該點(diǎn)點(diǎn)繪一條條垂線為為A(X)值線，繪繪一條水水平線為為B(Y)值線。測(cè)定結(jié)果果落在中中心點(diǎn)附附近時(shí)，表示結(jié)結(jié)果的

12、準(zhǔn)準(zhǔn)確度高高，距離離遠(yuǎn)時(shí)表表示準(zhǔn)確確度低。30圖中，X（平均值值）垂直直線和Y（平均值值）水平平線將坐坐標(biāo)系分分成四個(gè)個(gè)象限，即+，+，和+象限。若各實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室間不不存在系系統(tǒng)誤差差，代表表各實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室測(cè)定定值的點(diǎn)點(diǎn)應(yīng)隨機(jī)機(jī)分布在在四象限限中，且且大致落落在以代代表兩均均值直線線交點(diǎn)為為中心的的圓形范范圍內(nèi)，見(jiàn)A圖；31若各實(shí)室室間存在在系統(tǒng)誤誤差，則則兩樣品品測(cè)定值值會(huì)出現(xiàn)現(xiàn)偏高，或者偏偏低，各各實(shí)驗(yàn)室室測(cè)定值值將主要要分布在在+或- -象限內(nèi)，大致落落在與縱縱軸約成成45度傾斜的的橢圓形形范圍內(nèi)內(nèi)，根據(jù)據(jù)此橢圓圓形的長(zhǎng)長(zhǎng)軸和短短軸之差差及其位位置，可可估計(jì)實(shí)實(shí)驗(yàn)室間間系統(tǒng)誤誤差的大大小程度度和

13、正負(fù)負(fù)方向。(B圖)32還可根據(jù)據(jù)雙樣品品圖中各各點(diǎn)的分分散程度度估計(jì)實(shí)實(shí)驗(yàn)室間間的精密密度和準(zhǔn)準(zhǔn)確度。33二、標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)參考物物質(zhì)及其其在生物材材料檢驗(yàn)驗(yàn)中的應(yīng)應(yīng)用（一）標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)參考考物質(zhì)（ReferenceMaterial，RM）有證參考考物質(zhì)（certifiedreference material，CRM）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)有證標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)34國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)化組織織（ISO）的定義義是：已很好地地確定了了其一種種或多種種特性的的材料或或物質(zhì)，用于校校準(zhǔn)測(cè)量量?jī)x器、評(píng)價(jià)測(cè)測(cè)量方法法或確定定材料特特性值。35我國(guó)生產(chǎn)產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)分為兩個(gè)個(gè)等級(jí)一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW）二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)由由

14、國(guó)務(wù)院院計(jì)量行行政部門門批準(zhǔn)、頒布并并授權(quán)生生產(chǎn)。36標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)特征：（1）其一種種或幾種種特性值值用建立立了溯源性的程序確確定，使使之可溯溯源到準(zhǔn)準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)現(xiàn)的表示示該特性性值的測(cè)測(cè)量單位位，即它它的特性性值是用用絕對(duì)量量值法、或兩種種以上不不同原理理的準(zhǔn)確確可靠的的方法、或多個(gè)個(gè)實(shí)驗(yàn)室室（8個(gè)以上）用準(zhǔn)確確可靠方方法協(xié)同同確定。37（2）定值的的準(zhǔn)確度度具有國(guó)國(guó)內(nèi)最高高水平，每一種種出證的的特性值值都附有有給定置置信水平平的不確確定度。（3）具有國(guó)國(guó)家統(tǒng)一一編號(hào)的的標(biāo)準(zhǔn)物物質(zhì)證書書。（4）均勻性性保證在在定值的的精度以以內(nèi)，且且穩(wěn)定性性在一年以上，具具有規(guī)定定的合格格的包裝裝形式。38二級(jí)標(biāo)

15、準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)：其特性量量值通過(guò)過(guò)與一級(jí)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物物質(zhì)直接接比對(duì)或或用其他他準(zhǔn)確可可靠的分分析方法法測(cè)試而而獲得準(zhǔn)確度和和均勻性性能滿足足一般測(cè)測(cè)量的需需要，穩(wěn)穩(wěn)定性在在半年以上；或能滿足足實(shí)際測(cè)測(cè)量需要要；經(jīng)有關(guān)主主管部門門審查批批準(zhǔn)，報(bào)報(bào)國(guó)家計(jì)計(jì)量局直直接備案案。39實(shí)驗(yàn)室還還經(jīng)常使使用質(zhì)量量控制樣樣品（質(zhì)質(zhì)控樣），其作作用是在在一定范范圍內(nèi)用用于分析析過(guò)程的的質(zhì)量控控制，保保證分析析結(jié)果的的精密度度及準(zhǔn)確確度。40生物材料料（尿或或血）的的質(zhì)控樣樣通常可可以用不不含被測(cè)測(cè)物的尿尿樣或血血樣加入入一定量量被測(cè)物物的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品配制制。此外外，也可可用被測(cè)測(cè)物的主主要基體體成分和和一定量量被測(cè)物物的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品配制制模擬樣樣品。常用生物物材料標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)參考考物質(zhì)見(jiàn)見(jiàn)表1-141（二）標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)參考考物質(zhì)的的作用及及選用原原則1標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)參考物物質(zhì)的作作用評(píng)價(jià)分析析方法和和測(cè)定結(jié)結(jié)果的準(zhǔn)準(zhǔn)確度；作校準(zhǔn)物物校準(zhǔn)各各種測(cè)試試儀器；作為檢驗(yàn)驗(yàn)工作的的標(biāo)準(zhǔn)和和用于分分析質(zhì)量量保證工工作。422選用用標(biāo)準(zhǔn)參參考物質(zhì)質(zhì)的原則則（1）基體組組成：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)的基體體組成與與被測(cè)樣樣品的組組成越接接近越好好，可消消除基體體效應(yīng)引引入的系系統(tǒng)誤差差。（2）濃度水水平：分析方法法精密度度與被測(cè)測(cè)樣品的的濃度有有關(guān)，所所以要選選擇濃度度水平合合適的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)。432選用用標(biāo)準(zhǔn)參參考物質(zhì)質(zhì)的原則