《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)

《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是?將抗原注入動物體,然后從動物血清中提取抗體這種方法的缺點是什么?效率低，產(chǎn)量有限，純度低，動物抗體注入人體可能產(chǎn)生嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。運用已學(xué)知識，設(shè)想怎樣獲得單一類型的抗體？能否用單個B淋巴細胞通過克隆形成的細胞群來產(chǎn)生單一類型的抗體呢？B淋巴細胞在體外不能無限增殖。二：動物細胞融合的成功應(yīng)用

——單克隆抗體的制備人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是?二：動物細胞融合的成功應(yīng)用單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案將能夠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞和具有無限增殖能力的骨髓瘤細胞融合在一起，形成雜交瘤細胞。雜交瘤細胞既能在體外快速生長，又能持續(xù)分泌成分單一的特異性抗體。這種單一類型的只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子，就是單克隆抗體。米爾斯坦(阿根廷)和科勒(德國)因此在1984年獲諾貝爾獎。單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小單抗的制備過程要點：分離B淋巴細胞（B）；找到骨髓瘤細胞（G）。注意B淋巴細胞是一個系列。（B1,B2,B3,---Bn）細胞融合——三種融合方式:（BB;BG;GG）第一次篩選：在“選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)”上培養(yǎng)篩選雜交瘤細胞（只有BG雜交瘤細胞存活。但BG雜交瘤細胞也是一個系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在動物特異性免疫此培養(yǎng)基上不能存活。）單抗的制備過程要點：5.第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上”培養(yǎng)雜交瘤細胞系列

，每孔只放一個雜交瘤細胞?！翱寺』囵B(yǎng)”每個雜交瘤細胞，并進行“單一抗體檢測”，“檢測陽性”的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細胞。6.選擇所需要的雜交瘤克隆細胞群，體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。7.提取單克隆抗體。5.第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上”培養(yǎng)雜交瘤細胞系列，每孔3）、為何要進行兩次篩選？4）、如何進行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個雜交瘤細胞。第1次篩選得到雜交瘤細胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞群。問題強化：1）、本過程利用了哪些原理？免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2）、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體3）、為何要進行兩次篩選？4）、如何進行第2次篩選？培養(yǎng)在多1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速特點.2、用于治療疾病和運載藥物：主要用于癌癥治療。生物導(dǎo)彈：抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或細胞毒素。（單克隆抗體：導(dǎo)向。準(zhǔn)確找到癌細胞位置，原位殺死癌細胞。）2、單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，可大量制備。3、單克隆抗體的應(yīng)用1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定例題1：1975年，英國劍橋大學(xué)分子生物學(xué)實驗室的科勒和米爾斯坦，把小鼠的淋巴細胞（脾細胞）和小鼠的骨髓瘤細胞融合起來，成為雜交瘤細胞，實現(xiàn)在體外大量生產(chǎn)抗體的目的。實驗過程如圖所示。(1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能“融合”

在一起，說明細胞膜

。(2)單克隆抗體的準(zhǔn)確定義應(yīng)為()A．一類特殊抗體B．無性繁殖系

C．單一抗體細胞的無性繁殖第產(chǎn)生的抗體

D．單一抗體細胞的有性繁殖系產(chǎn)生的抗體(3)雜交瘤細胞繁殖進行的是_______分裂，其遺傳性狀__________。(4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動追蹤抗原(病原體或癌變細胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”這是利用了

_____________

。具有一定的流動性C有絲不變抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特點例題1：(1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞[例題2]（1）在用動物細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時，將抗原注射到小鼠體內(nèi)，可獲得(多選)

（）

A．T淋巴細胞B．效應(yīng)B淋巴細胞

C．抗體D．記憶細胞（2）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是(多選)（）

A．B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合，一般需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)

B．融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體

C．體外培養(yǎng)時，一個B淋巴細胞可以產(chǎn)生一種抗體，但不能無限增殖

D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強，靈敏度高，優(yōu)越性明顯

BCD

ACD[例題2]BCDACD例2、已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細胞。請回答：（1）試管中除融合的雜種細胞外，還有

種融合細胞。（2）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞，并說原理。方法：

。原理：培養(yǎng)液中加入氨基喋呤，收集增殖的細胞加入氨基喋呤后,使D合成的途徑阻斷,所以僅D合成途徑的骨髓瘤細胞或彼此融合的細胞就不能增殖,但雜種細胞則可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖例2、已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到小鼠腹腔AC

下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體的實驗方案3、圖中B為________過程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實驗方案的目的是__________2、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細胞能夠產(chǎn)生______4、C過程指細胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個階段，其中_____代以內(nèi)的的細胞屬于細胞株。制備單克隆抗體B細胞抗體細胞融合滅活病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代50例3：B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到AC1.動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）

A．動物細胞融合

B．胚胎移植

C．動物細胞培養(yǎng)

D．核移植Ｃ課堂練習(xí);1.動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）Ｃ課堂練習(xí);２．在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）A．結(jié)果是相同的

B．雜種細胞的形成過程基本相同C．操作過程中酶的作用相同D．誘導(dǎo)融合的手段相同Ｂ２．在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）３.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③C３.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞C《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回《一-免疫應(yīng)答》課件(陜西省縣級優(yōu)課)解析解析返回返回人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是?將抗原注入動物體,然后從動物血清中提取抗體這種方法的缺點是什么?效率低，產(chǎn)量有限，純度低，動物抗體注入人體可能產(chǎn)生嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。運用已學(xué)知識，設(shè)想怎樣獲得單一類型的抗體？能否用單個B淋巴細胞通過克隆形成的細胞群來產(chǎn)生單一類型的抗體呢？B淋巴細胞在體外不能無限增殖。二：動物細胞融合的成功應(yīng)用

——單克隆抗體的制備人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是?二：動物細胞融合的成功應(yīng)用單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案將能夠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞和具有無限增殖能力的骨髓瘤細胞融合在一起，形成雜交瘤細胞。雜交瘤細胞既能在體外快速生長，又能持續(xù)分泌成分單一的特異性抗體。這種單一類型的只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子，就是單克隆抗體。米爾斯坦(阿根廷)和科勒(德國)因此在1984年獲諾貝爾獎。單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小單抗的制備過程要點：分離B淋巴細胞（B）；找到骨髓瘤細胞（G）。注意B淋巴細胞是一個系列。（B1,B2,B3,---Bn）細胞融合——三種融合方式:（BB;BG;GG）第一次篩選：在“選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)”上培養(yǎng)篩選雜交瘤細胞（只有BG雜交瘤細胞存活。但BG雜交瘤細胞也是一個系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在動物特異性免疫此培養(yǎng)基上不能存活。）單抗的制備過程要點：5.第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上”培養(yǎng)雜交瘤細胞系列

，每孔只放一個雜交瘤細胞。“克隆化培養(yǎng)”每個雜交瘤細胞，并進行“單一抗體檢測”，“檢測陽性”的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細胞。6.選擇所需要的雜交瘤克隆細胞群，體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。7.提取單克隆抗體。5.第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上”培養(yǎng)雜交瘤細胞系列，每孔3）、為何要進行兩次篩選？4）、如何進行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個雜交瘤細胞。第1次篩選得到雜交瘤細胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞群。問題強化：1）、本過程利用了哪些原理？免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2）、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體3）、為何要進行兩次篩選？4）、如何進行第2次篩選？培養(yǎng)在多1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速特點.2、用于治療疾病和運載藥物：主要用于癌癥治療。生物導(dǎo)彈：抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或細胞毒素。（單克隆抗體：導(dǎo)向。準(zhǔn)確找到癌細胞位置，原位殺死癌細胞。）2、單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，可大量制備。3、單克隆抗體的應(yīng)用1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定例題1：1975年，英國劍橋大學(xué)分子生物學(xué)實驗室的科勒和米爾斯坦，把小鼠的淋巴細胞（脾細胞）和小鼠的骨髓瘤細胞融合起來，成為雜交瘤細胞，實現(xiàn)在體外大量生產(chǎn)抗體的目的。實驗過程如圖所示。(1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能“融合”

在一起，說明細胞膜

。(2)單克隆抗體的準(zhǔn)確定義應(yīng)為()A．一類特殊抗體B．無性繁殖系

C．單一抗體細胞的無性繁殖第產(chǎn)生的抗體

D．單一抗體細胞的有性繁殖系產(chǎn)生的抗體(3)雜交瘤細胞繁殖進行的是_______分裂，其遺傳性狀__________。(4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動追蹤抗原(病原體或癌變細胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”這是利用了

_____________

。具有一定的流動性C有絲不變抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特點例題1：(1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞[例題2]（1）在用動物細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時，將抗原注射到小鼠體內(nèi)，可獲得(多選)

（）

A．T淋巴細胞B．效應(yīng)B淋巴細胞

C．抗體D．記憶細胞（2）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是(多選)（）

A．B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合，一般需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)

B．融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體

C．體外培養(yǎng)時，一個B淋巴細胞可以產(chǎn)生一種抗體，但不能無限增殖

D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強，靈敏度高，優(yōu)越性明顯

BCD

ACD[例題2]BCDACD例2、已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細胞。請回答：（1）試管中除融合的雜種細胞外，還有

種融合細胞。（2）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞，并說原理。方法：

。原理：培養(yǎng)液中加入氨基喋呤，收集增殖的細胞加入氨基喋呤后,使D合成的途徑阻斷,所以僅D合成途徑的骨髓瘤細胞或彼此融合的細胞就不能增殖,但雜種細胞則可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖例2、已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的