血漿凝固酶試驗(yàn)詳解

四、血漿凝固(nínggù)酶試驗(yàn)

第一頁，共九頁。【目的(mùdì)原理】血漿凝固酶定義：是指能使含有枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑的人或兔的血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)。致病性葡萄球菌大多能產(chǎn)生(chǎnshēng)凝固酶，非致病葡萄球菌不產(chǎn)生(chǎnshēng)此酶。作用：是鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)。第二頁，共九頁。分類(fēnlèi)游離型凝固酶分泌至細(xì)菌體外被血漿中凝固酶反響因子激活，形成葡萄球菌凝血酶使纖維蛋白(xiānwéidànbái)原變?yōu)槔w維蛋白(xiānwéidànbái)，導(dǎo)致血漿凝固采用試管法檢測結(jié)合型凝固酶在菌體外表(biǎomiàn)與纖維蛋白原結(jié)合，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白引起細(xì)菌凝集采用玻片法檢測第三頁，共九頁。纖維蛋白(xiānwéidànbái)原受體〔結(jié)合凝固酶〕致病菌纖維蛋白(xiānwéidànbái)原第四頁，共九頁。

【材料(cáiliào)】菌種：金黃色葡萄球菌〔SA〕表皮(biǎopí)葡萄球菌〔SE〕兔血漿、生理鹽水〔備用〕玻片第五頁，共九頁。【方法(fāngfǎ)】標(biāo)記玻片：在玻片反面用標(biāo)記筆劃兩個(gè)圓形區(qū)域，并標(biāo)上預(yù)取菌的菌名取兔血漿：用滅菌接種環(huán)分別取兔血漿3-4環(huán)于兩個(gè)標(biāo)記區(qū)域中取菌混懸：用滅菌接種環(huán)取少量表皮葡萄球菌與兔血漿混勻，以同樣的方法取金黃色葡萄球菌與另一側(cè)兔血漿混勻結(jié)果(jiēguǒ)觀察第六頁，共九頁。【結(jié)果(jiēguǒ)判讀】如出現(xiàn)顆粒狀凝集現(xiàn)象即為血漿(xuèjiāng)凝固酶實(shí)驗(yàn)陽性。如不立即發(fā)生凝集，可輕搖玻片加速反響，假設(shè)仍無凝集那么為陰性。第七頁，共九頁?！颈揪眄氈繉?shí)驗(yàn)前可用生理鹽水檢測兩種細(xì)菌有無自凝現(xiàn)象，以防假陽性結(jié)果的出現(xiàn)取兔血漿和兩種細(xì)菌時(shí)都要將接種環(huán)灼燒滅菌并待其冷卻實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)即使判讀，放置時(shí)間(shíjiān)過久會(huì)導(dǎo)致假陽性的出現(xiàn)第八頁，共九頁。內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)四、血漿凝固酶試驗(yàn)。定義：是指能使含有枸櫞酸鈉或肝素(ɡānsù)抗凝劑的人或兔的血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)。致病性葡萄球菌大多能產(chǎn)生凝固酶，非致病葡萄球菌不產(chǎn)生此酶。使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，導(dǎo)致血漿凝固。與纖維蛋白原結(jié)合，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白。標(biāo)記玻片：在玻片反面用標(biāo)記筆劃兩個(gè)圓形區(qū)域，并標(biāo)上預(yù)取菌的菌名。取兔血漿：用滅菌接種環(huán)分