0-細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)備考

0-細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)備考0-細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)備考0-細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)備考V:1.0精細(xì)整理，僅供參考0-細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)備考日期：20xx年X月（一）顯微鏡的使用及保護(hù)①顯微鏡是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主要觀察工具，使用時(shí)必須注意保持外觀整潔、防濕、防高溫、防藥品侵蝕，使用時(shí)勿使染液或其它溶液沾污鏡頭，一旦沾污，及時(shí)用擦鏡紙蘸上鏡頭清洗液（無(wú)水乙醚：無(wú)水乙醇＝7：3）輕輕擦拭干凈。②帶光源的顯微鏡待電壓穩(wěn)定后，將電源的光亮度調(diào)節(jié)器調(diào)至最小，再打開顯微鏡的電源，緩慢調(diào)節(jié)光亮度適當(dāng)進(jìn)行量度觀察，觀察完畢后，則先將光亮度調(diào)節(jié)器調(diào)至最小，然后再關(guān)閉顯微鏡電源開關(guān)。③鏡頭的清洗：實(shí)驗(yàn)完畢后，鏡頭的清洗很重要。用擦鏡紙蘸取少量鏡頭清洗液，先從鏡頭的中央開始清洗，輕輕旋轉(zhuǎn)擦至鏡頭的邊緣部分，如此重復(fù)2－3次。④載物臺(tái)必須保持清潔，必要時(shí)亦可用擦鏡紙蘸少量清洗液擦試載物臺(tái)。聚光器上的污物的去除亦可采用類似的方法。⑤使用完畢后，玻片一律取下，套上布袋.放回原處。本桌的顯微鏡一律不準(zhǔn)搬離本實(shí)驗(yàn)桌。若需使用者，可到該桌使用，使用后務(wù)必保持該顯微鏡的清潔。（二）實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，一律不準(zhǔn)高聲喧嘩整潔，保持室內(nèi)安靜，認(rèn)真操作，仔細(xì)做好各項(xiàng)觀察與記錄。（三）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一切儀器、物品必須愛護(hù)。節(jié)約材料、藥品，取用時(shí)不要過(guò)量。公用物品不得獨(dú)自占用，用后歸還原處。（四）注意安全。使用有毒物品、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等，應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程。易燃物品遠(yuǎn)離火源。禁止?jié)袷帜萌‰娫撮_關(guān)或接觸電源。如發(fā)生觸電等事故，及時(shí)報(bào)告。（五）取用各種試劑，要用及時(shí)蓋上瓶蓋。按獻(xiàn)寶取出所需之藥品或溶液后，不得將原液倒回瓶?jī)?nèi)。滴管、玻棒、吸管不可混用。（六）實(shí)驗(yàn)中如有丟失、損壞儀器設(shè)備及用具，及時(shí)登記并報(bào)告，凡違反操作規(guī)程造成不應(yīng)有的損失者，視其情節(jié)輕重，態(tài)度好壞，按有關(guān)規(guī)定處理。（七）實(shí)驗(yàn)完畢后，須擺齊藥品，洗凈器皿，做好本桌清潔。離開前要關(guān)好門、窗、水、電。實(shí)驗(yàn)一、細(xì)胞形態(tài)及大小的觀測(cè)顯微側(cè)微尺分為物鏡測(cè)微尺（簡(jiǎn)稱物微尺或臺(tái)微尺）和目鏡測(cè)微尺（簡(jiǎn)稱目微尺）。目鏡測(cè)微尺是一個(gè)可以放入目鏡內(nèi)的特制園玻片，玻片中央刻的刻度長(zhǎng)5mm或10mm，將其分成50或100格（也有刻成十字形的）如下圖。物微尺為一載片上貼著一圓形玻片中央帶有刻度、長(zhǎng)度為1mm，等分為100格，每一格長(zhǎng)0.01mm（圖一）。當(dāng)測(cè)量細(xì)胞的大小時(shí)，不能用物微尺直接測(cè)量細(xì)胞，而只能使用目微尺。因目微尺測(cè)量的是細(xì)胞經(jīng)物鏡放大后的像，因而它每格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度隨物鏡的放大率而變，在測(cè)量時(shí)需先用物微尺標(biāo)定，求出某一放大率時(shí)目微尺每格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度，然后再用以測(cè)量細(xì)胞大小。1、如何測(cè)定目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度？將物微尺刻度向上放在鏡臺(tái)上夾好，以低倍鏡調(diào)焦能看到物微尺的刻度，換上你用來(lái)測(cè)量細(xì)胞的物鏡。調(diào)焦至看清刻度，這時(shí)鏡中同時(shí)看清兩尺。小心移動(dòng)物微尺和轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡，使兩尺平行，起點(diǎn)線重合，如下圖：然后找出另一處兩尺刻度重合處，記錄起點(diǎn)線到重合線之間各尺的刻度數(shù)（格數(shù)），按下式計(jì)算。在該放大系統(tǒng)下目微尺每格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度：目微尺每格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度（μ）=臺(tái)微尺格數(shù)/目微尺格數(shù)*10（μ）2、在制作顯微測(cè)量的樣品時(shí)應(yīng)注意什么問(wèn)題？3、目鏡測(cè)微尺每格代表的的實(shí)際長(zhǎng)度受哪些因素影響？實(shí)驗(yàn)二葉綠體的差速離心分離與觀察和線粒體的活體染色與觀察將組織勻漿后懸浮在等滲介質(zhì)中進(jìn)行差速離心，是分離細(xì)胞器的常用方法，一個(gè)顆粒在離心場(chǎng)中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀和密度，也同離心力以及懸浮介質(zhì)的粘度有關(guān)。在一給定的離心場(chǎng)中，同一時(shí)間內(nèi)，密度和大小不同的顆粒其沉降速度不同。依次增加離心力和離心時(shí)間，就能夠使非均一懸浮中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離心管底部，分批收集即可獲得各種亞細(xì)胞組分。差速離心是利用不同的粒子在離心力場(chǎng)中沉降的差別，在同一離心條件下，沉降速度不同，通過(guò)不斷增加相對(duì)離心力，使一個(gè)非均勻混合液內(nèi)的大小、形狀不同的粒子分部沉淀。操作過(guò)程中一般是在離心后用傾倒的辦法把上清液與沉淀分開，然后將上清液加高轉(zhuǎn)速離心，分離出第二部分沉淀，如此往復(fù)加高轉(zhuǎn)速，逐級(jí)分離出所需要的物質(zhì)。差速離心的分辨率不高，沉淀系數(shù)在同一個(gè)數(shù)量級(jí)內(nèi)的各種粒子不容易分開，常用于其他分離手段之前的粗制品提取。例如用差速離心法分離已破碎的細(xì)胞各組份。葉綠體的分離應(yīng)在等滲溶液(0.35mol/L氯化鈉或0.4mol/L蔗糖溶液)中進(jìn)行，以免滲透壓的改變使葉綠體受到損傷。分離過(guò)程最好在0~5℃的條件下進(jìn)行，如果在室溫下，要迅速分離和觀察?；铙w染色是指對(duì)生活有機(jī)體的細(xì)胞或組織能著色但又無(wú)害毒的一種染色方法。它的目的是顯示生活細(xì)胞內(nèi)的某些結(jié)構(gòu)，而不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)和產(chǎn)生任何物理、化學(xué)變化以致引起細(xì)胞的死亡?；钊炯夹g(shù)可用來(lái)研究生活狀態(tài)下的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)。不同細(xì)胞中線粒體的形態(tài)和數(shù)目不同。線粒體的數(shù)目與細(xì)胞類型和細(xì)胞的生理狀態(tài)有關(guān)，線粒體多聚集在細(xì)胞生理功能旺盛的區(qū)域。詹納斯綠B（JanusgreenB）對(duì)線粒體具有專一性的染色，是毒性最小的堿性染料。JanusgreenB染色是由于線粒體中的細(xì)胞色素氧化酶系的作用，使染料始終保持氧化狀態(tài)，呈藍(lán)綠色，而周圍的細(xì)胞質(zhì)被還原成無(wú)色的色基。1、分離葉綠體的實(shí)驗(yàn)原理是什么？2、兩次離心第一次去掉沉淀，第二次去掉上清液，分別去掉的是什么物質(zhì)？4、線粒體為何在細(xì)胞核周圍分布較多？

5、葉綠體分離與觀察實(shí)驗(yàn)中，操作過(guò)程中應(yīng)注意哪些問(wèn)題？6、立刻用詹納斯綠B染色和放置2h后再染色，兩者染色是否有差異，為什么？7、染色完成后，如何區(qū)別少量沉積于標(biāo)本上的染料和線粒體，若何避免此類麻煩？詹納斯綠活體染色線粒體后，水洗一定充分，以除去非特異性染料的附著，另一方面不能讓水直接對(duì)著樣品沖洗，防止樣品丟失。8、制備植物線粒體時(shí)應(yīng)注意什么？備植物線粒體隨組織破碎，伴隨線粒體易膨脹，及內(nèi)源脂肪酸，酚類物物質(zhì)可抵制線粒體正常活力，所以制備時(shí)注意使用甘露醇，蔗糖維持一定滲透壓力，加合劑和化合物可降低和去除酚類毒害作用，牛血清白蛋白（BSA）可以抵抗，降低脂肪酸或其它脂類毒害作用。實(shí)驗(yàn)三細(xì)胞膜的通透性細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障。它是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。各種物質(zhì)出入細(xì)胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶劑，水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透壓低的一側(cè)通過(guò)細(xì)胞膜向滲透壓高的一側(cè)擴(kuò)散，這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這種現(xiàn)象稱為溶血。將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細(xì)胞膜對(duì)各種溶質(zhì)的通透性不同，膜兩側(cè)的滲透壓平衡會(huì)發(fā)生改變，也會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象。因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時(shí)間長(zhǎng)短可作為測(cè)量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。滲透壓相等的兩種溶液稱為等滲溶液。滲透壓不同的兩種溶液，把滲透壓相對(duì)高的溶液叫做高滲溶液，把滲透壓相對(duì)低的溶液叫做低滲溶液。對(duì)同一類型的溶質(zhì)來(lái)說(shuō)，濃溶液的滲透壓比較大，稀溶液的滲透壓比較小。因此，在發(fā)生滲透作用時(shí)，水會(huì)從低滲溶液（即稀溶液）進(jìn)入高滲溶液（即濃溶液），直至兩溶液的滲透壓達(dá)到平衡為止。給傷病員進(jìn)行大量補(bǔ)液時(shí)，常用與血漿等滲的0.154mol/LNaCl溶液（生理鹽水），而不能用0.256mol/LNaCl的高滲溶液或0.068mol/LNaCl的低滲溶液。影響細(xì)胞膜的通透性的主要因素是跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)物質(zhì)自身的理化性質(zhì)，脂溶性大、分子量小、不帶電荷或非極性的分子比脂溶性小、分子量大、帶有電荷或極性的分子更容易穿膜。一般認(rèn)為，在簡(jiǎn)單擴(kuò)散的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中，涉及物質(zhì)溶解在膜脂中，再?gòu)哪ぶ囊粋?cè)擴(kuò)散到另一側(cè)，最后進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)水相中。所以，其通透性主要取決于分子大小和分子極性。本實(shí)驗(yàn)選用紅細(xì)胞作為細(xì)胞膜透性的實(shí)驗(yàn)材料，將其放入不同的介質(zhì)溶液中，觀察紅細(xì)胞的變化。由于細(xì)胞對(duì)各種溶質(zhì)的滲透性不同，有的溶質(zhì)可滲入，有的溶質(zhì)不可以滲入，滲入的紅細(xì)胞溶質(zhì)可提高紅細(xì)胞的滲透壓，促使水分進(jìn)入細(xì)胞，引起溶血。由于溶質(zhì)分子的大小、極性不同，溶質(zhì)滲入速度不同，因此溶血時(shí)間也不同。分子的極性、大小對(duì)物質(zhì)透過(guò)細(xì)胞的速度有影響。當(dāng)溶質(zhì)不能自由透過(guò)細(xì)胞膜時(shí)，溶液的滲透壓成為影響水分進(jìn)出細(xì)胞的因素。當(dāng)溶液滲透壓小于細(xì)胞滲透壓時(shí)，則水分進(jìn)入細(xì)胞，使細(xì)胞膨脹甚至溶血；反之，細(xì)胞失水。五、思考題1、血紅細(xì)胞的滲透性實(shí)驗(yàn)中，是否存在物質(zhì)跨膜的主動(dòng)運(yùn)輸現(xiàn)象為什么

2、常用的抗凝劑的種類和作用機(jī)理是什么？3、細(xì)胞膜的通透性觀察實(shí)驗(yàn)中溶血的原因是什么？NaCl溶液和葡萄糖溶液為什么不能產(chǎn)生溶血蒸餾水：水分子可以自由通過(guò)細(xì)胞膜，低滲溶液中的水分子迅速進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使細(xì)胞破裂。乙醇、甘油：可以自由進(jìn)入細(xì)胞，使細(xì)胞破裂。乙醇進(jìn)入的速度慢于甘油。4、已知四種等滲鹽溶液分別為0.17mol/L醋酸銨、0.17mol/L硝酸鈉、0.17mol/L氯化銨、0.12mol/L草酸銨，試劑瓶上的標(biāo)簽被蓋住了。如果用它們進(jìn)行血紅細(xì)胞的滲透性實(shí)驗(yàn)，你能否根據(jù)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果確切判斷出每一瓶中所裝的是哪一種試劑為什么5、推斷下列溶液的溶血反應(yīng)會(huì)如何。0.17mol/L氯化鉀、0.17mol／L硝酸鉀0.12mol／L氯化鎂、0.12mol／L氯化鈣、0.10mol／L硫酸鉀、0.10mol／L醋酸鉀、0.10mol/L檸檬酸鈉、0.32mol／L，甘露醇、0.32mol/L蔗糖。6、影響細(xì)胞膜通透性的因素有哪些？7、不同等滲溶液中紅細(xì)胞溶血時(shí)間明顯差異的原因是什么？實(shí)驗(yàn)四DNA顯示（Feulgen反應(yīng)）與細(xì)胞有絲分裂相的觀察實(shí)驗(yàn)原理：DNA是由許多單核苷酸聚合成的多核苷酸，每個(gè)單核苷酸又由磷酸、脫氧核糖和堿基構(gòu)成。DNA經(jīng)1mol/L鹽酸水解，其上的嘌呤堿和脫氧核糖之間的雙鍵打開，使脫氧核糖的第一碳原子上形成游離的醛基，這些醛基與Schiff試劑反應(yīng)。Schiff試劑是由堿性品紅和偏重亞硫酸鈉相作用，形成無(wú)色的品紅液，當(dāng)無(wú)色品紅與醛基結(jié)合即形成紫紅色的化合物。因此凡有DNA的地方，都能顯示紫紅色。紫紅色的產(chǎn)生，是由于反應(yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)含有醌基，醌基是一個(gè)發(fā)色基團(tuán)，所以具有顏色。材料不經(jīng)過(guò)水解或預(yù)先用熱的三氯醋酸或DNA酶處理，得到的反應(yīng)是陰性的，從而證明了Feulgen反應(yīng)的專一性。1、簡(jiǎn)述Feulgen反應(yīng)的原理及作好本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵？答：（1）DNA經(jīng)酸水解，其上的嘌呤堿和脫氧核糖之間的鍵打開，使脫氧核糖的一端形成游離的醛基，這些醛基在原位與Schiff試劑（無(wú)色品紅亞硫酸溶液）反應(yīng)，形成紫紅色的化合物，使細(xì)胞內(nèi)含有DNA的部位呈紫紅色陽(yáng)性反應(yīng)。紫紅色的產(chǎn)生，是由于反應(yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)含有醌基，醌基是一個(gè)發(fā)色團(tuán)，所以具有顏色。該反應(yīng)對(duì)DNA具有專一性。（2）Feulgen反應(yīng)成功的關(guān)鍵在于Schiff試劑的質(zhì)量。Schiff試劑只能選用注明“DNA染色反應(yīng)用”的堿性品紅才行。2、用Schiff試劑對(duì)DNA進(jìn)行染色與染料吸附的方法相比有什么優(yōu)勢(shì)？3、為什么Feulgen染色法不對(duì)RNA染色？4、要得到一張好的Feulgen反應(yīng)制片，制作過(guò)程應(yīng)注意什么問(wèn)題：①水解時(shí)間一定要合適，不宜過(guò)長(zhǎng)；②Schiff試劑的質(zhì)量要好，要注意試劑顏色是否正常，有無(wú)二氧化硫氣味；③亞硫酸水最好臨時(shí)配制，以便能保持較大的二氧化硫濃度；④染色結(jié)束應(yīng)充分的漂洗，否則殘留在組織中的Schiff試劑，一旦轉(zhuǎn)入蒸餾水中立刻還原變紅。5、細(xì)胞中的多糖、寡糖也會(huì)產(chǎn)生醛基，會(huì)不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響，葉綠體和線粒體中的DNA會(huì)不會(huì)被染色？6、染色后用亞硫酸水溶液漂洗的目的是什么？實(shí)驗(yàn)五植物細(xì)胞骨架的光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞骨架（cytoskeleton）是由蛋白質(zhì)絲組成的復(fù)雜網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，根據(jù)其組成成分和形態(tài)結(jié)構(gòu)可分為微管、微絲和中間纖維。它們對(duì)細(xì)胞形態(tài)的維持，細(xì)胞的生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)、分裂、分化，物質(zhì)運(yùn)輸，能量轉(zhuǎn)換，信息傳遞，基因表達(dá)的起到重要作用。細(xì)胞骨架在通常固定條件下不穩(wěn)定，如低溫、高壓、酸處理等。當(dāng)采用適當(dāng)?shù)氖侄危鏜-緩沖液洗滌細(xì)胞，可以提高細(xì)胞骨架的穩(wěn)定性，戊二醛在室溫下固定能較好的保存細(xì)胞骨架的成分，另外，TritonX-100處理能抽取掉一部分雜蛋白，可使骨架成分顯現(xiàn)的更加清晰。目前觀察細(xì)胞骨架的手段主要有電鏡、間接免疫熒光技術(shù)、酶標(biāo)和組織化學(xué)等。微絲是球形肌動(dòng)蛋白單體構(gòu)成的纖維結(jié)構(gòu)，單根微絲直徑7nm，在光學(xué)顯微鏡下看不到該細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)，本實(shí)驗(yàn)觀察的是植物細(xì)胞中由微絲平行排列形成的微絲束。常用的觀察微絲的方法主要是考馬斯亮藍(lán)R-250染色法。當(dāng)用適當(dāng)濃度的TritonX-100處理細(xì)胞時(shí)，可將細(xì)胞質(zhì)膜中和細(xì)胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)和全部脂質(zhì)被溶解抽提，但細(xì)胞骨架系統(tǒng)的蛋白質(zhì)不受破壞而被保存，經(jīng)用戊二醛固定，考馬斯亮藍(lán)R250染色后，可在光學(xué)顯微鏡下觀察到由微絲組成的微絲束為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，這就是細(xì)胞骨架。、思考題1.細(xì)胞骨架主要有哪幾類主要成分是什么

2.為什么用TritonX-100的緩沖液處理材料？3、戊二醛、考馬斯亮蘭R250、TritonX-100是什么在本實(shí)驗(yàn)中各起什么作用

PBS（磷酸緩沖液）作用：PH保證、與細(xì)胞滲透壓相近。戊二醛作用：固定蛋白，保證細(xì)胞形狀?？捡R斯亮藍(lán)R250作用:與蛋白特異性結(jié)合。TritonX-100（聚乙二醇辛基苯醚）：把骨架蛋白以外細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)蛋白剝離掉。4、為什么用TritonX-100不用SDS：因?yàn)門ritonX-100為非離子去污劑，把骨架蛋白以外細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)蛋白剝離掉，無(wú)離子性。SDS有離子性，去污性強(qiáng)容易破壞細(xì)胞膜。5、什么是細(xì)胞骨架它有何主要功能6、列舉你所知道的動(dòng)、植物細(xì)胞中由微絲組成的結(jié)構(gòu)。7、細(xì)胞松弛素對(duì)細(xì)胞中裝配好的微絲及正在裝配的微絲有什么不同作用？8、M-緩沖液和戊二醛的作用：9、.微絲觀察實(shí)驗(yàn)中，1%TritonX-100處理細(xì)胞的作用是什么此實(shí)驗(yàn)?zāi)芊窨吹轿⒐芎椭虚g纖維作出理由。答：（1）1%TritonX-100作用是為了抽提細(xì)胞骨架以外的蛋白質(zhì)，從而使骨架圖像更加清晰。（2）不能看到微管和中間纖維。因?yàn)槲⒐堋⑽⒔z和中間纖維是由不同的的蛋白質(zhì)組成的，微管、中間纖維的組裝蛋白都被1%的TritonX-100抽提出去，且沒(méi)有加入促進(jìn)微管、中間纖維組裝的試劑，所以看不到它們。

1.鏡檢標(biāo)本時(shí)，為什么要先用低倍鏡觀察，而不是直接用高倍鏡或油鏡觀察為什么使用油鏡時(shí)，為什么必須用香柏油答：因?yàn)榈捅剁R視野較大，易于發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定檢查的位置。而高倍鏡和油鏡的視野范圍小，用高倍鏡或油鏡直接觀察，則難以找到目標(biāo)。因香柏油的折射率與玻璃相同，當(dāng)光線通過(guò)載玻片后，可直接通過(guò)香柏油進(jìn)入物鏡而不發(fā)上折射。

2.簡(jiǎn)述線粒體詹納斯綠B活體染色原理？答：線粒體是細(xì)胞內(nèi)一種重要細(xì)胞器，是細(xì)胞進(jìn)行呼吸作用的場(chǎng)所。細(xì)胞的各項(xiàng)活動(dòng)所需要的能量，主要是通過(guò)線粒體呼吸作用來(lái)提供的?；铙w染色是應(yīng)用無(wú)毒或毒性較小的染色劑真實(shí)地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動(dòng)的一種染色方法。詹納斯綠B是線粒體的專一性活體染色劑。線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍(lán)綠色，而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原，成為無(wú)色狀態(tài)。1．對(duì)顯微鏡來(lái)說(shuō)，最重要的功能參數(shù)是它的（）；顯微鏡物鏡鏡頭上多刻有一些數(shù)字，如：40/0.65，其中40代表（），0.65代表（）1．分辨率；放大倍數(shù)，鏡口率（數(shù)值孔徑）。3．分離細(xì)胞器的常用方法是組織勻漿后進(jìn)行（）離心和（）離心；植物細(xì)胞勻漿后離心時(shí)，最先沉淀的是（