人工制備抗體-PPT幻燈片

多克隆抗體

單克隆抗體

基因工程抗體人工抗體主要包括：一、多克隆抗體概念：以相應抗原免疫動物獲得抗血清，通過接種動物所獲得的免疫血清或抗血清是多種抗體的混合物，簡稱多抗。單抗制備過

程示意圖單克隆抗體的特點：高特異性高均質(zhì)性單克隆抗體的應用：1、在血清學技術(shù)方面,2、在免疫學基礎研究方面,3、在抗原純化方面,4、在腫瘤治療方面，如生物導彈,5、用于制備抗獨特型抗體疫苗。三、基因工程抗體概念：又稱重組抗體，利用基因工程技術(shù)制備抗體分子，這是分子水平的抗體?；蚬こ炭贵w的優(yōu)勢：去除或減少無關結(jié)構(gòu)，保留或增加天然抗體特異性和生物學活性?；蚬こ炭贵w包括：（一）改造鼠源性抗體（二）噬菌體抗體（三）胞內(nèi)抗體（一）改造鼠源性抗體1.人-鼠嵌合抗體2.改型抗體或人源化抗體3.小分子抗體1.人-鼠嵌合抗體

是指在同一抗體分子中含有不同種屬來源抗體分子片段的抗體。人-鼠嵌合抗體的特點：1.保留了鼠源單抗的特異性和親和力；2.其人源Fc段能有效介導生物學效應功能；3.能自由地選擇抗體，并有效地利用不同的生物學特點及理化特性；4.可以容許插入不同的鼠單克隆抗體的可變區(qū)，縮短操作和研制周期；操作相對簡單。2.改型抗體或人源化抗體概念：指利用基因工程技術(shù)，將鼠單抗V區(qū)中互補性決定區(qū)（CDR）序列取代人源抗體CDR序列，重構(gòu)成既具有鼠源性單抗的特異性又保持人抗體親和力的CDR移植抗體。改型抗體或人源化抗體的特點：保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性，又降低了其異源性，有利應用于人體。3.小分子抗體概念：是指由Fab和Fv組成的抗體片段。小分子抗體的優(yōu)點：a.僅含V區(qū)結(jié)構(gòu)，免疫原性較弱，b.分子量小，易透過血管壁，可有效克服腫瘤灶組織對抗體的生理阻抗，c.無Fc段，不與非靶細胞的FcR結(jié)合，易滲透至病灶局部，d.有利于作為導向藥物的載體。小分子抗體的局限性：與靶細胞表面抗原的結(jié)合力較弱，半壽期短，易從血液中被清除，從而影響到達腫瘤局部的抗體濃度。小分子抗體的類型：（1）Fcb片段，（2）單域抗體，（3）Fv片段，（4）單鏈抗體（ScFc），（5）最小識別單位（MRU），（6）雙價小分子抗體（diabody），（7）雙特異性小分子抗體，（8）微抗體（minibody）。（二）噬菌體抗體概念：是將克隆的人抗體V區(qū)基因與一種絲狀噬菌體DNA上的基因Ⅲ或基因Ⅷ精確連接，轉(zhuǎn)染細菌后在其膜表面表達Fab段--噬菌體外殼蛋白的融合蛋白。噬菌體抗體的優(yōu)點：（1）無須免疫，可直接從非免疫動物抗體庫中篩選出特異性抗體，（2）可供產(chǎn)生針對多種特異性抗原的人源抗體，以克服難以建立的人-人雜交瘤的困難，（3）細菌增殖快，培養(yǎng)成本低，適合大規(guī)模生產(chǎn)，為臨床上大量應用抗體提供了可能性。（三）胞內(nèi)抗體概念：指借助基因工程手段，獲得僅在細胞內(nèi)表達并僅作用于胞內(nèi)