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第三節(jié)動物的克隆(第二課時)第三節(jié)動物的克隆乙肝病毒模式圖一般來說,醫(yī)院如何檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒?檢測抗原乙肝病毒用什么檢測?相應(yīng)的抗體思考題乙肝病毒模式圖一般來說,醫(yī)院如何檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒?1.描述動物細胞全能性的表現(xiàn)程度,說出動物難以克隆的原因;2.簡述動物細胞核移植的概念和核移植程序;3.列舉動物細胞培養(yǎng)與動物細胞核移植的應(yīng)用和發(fā)展前景。1.描述動物細胞全能性的表現(xiàn)程度,說出動物難以克隆的原因;1、細胞融合與細胞雜交:誘導(dǎo)方式物理法:離心、振蕩、電融合技術(shù)化學(xué)法:聚乙二醇生物法:滅活的仙臺病毒1、細胞融合與細胞雜交:誘導(dǎo)方式物理法:離心、振蕩、電融合技滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通,細胞膜連接細胞融合形成雜種細胞滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通,細胞膜連接植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞融合的方法去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合誘導(dǎo)方法電刺激化學(xué)(聚乙二醇)電融合、PEG、滅活的仙臺病毒用途獲得雜種植株制備單克隆抗體植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物2、雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備:(1)傳統(tǒng)抗體生產(chǎn)方法:抗原動物體內(nèi)抗體刺激效應(yīng)B(抗體不純)篩選單一效應(yīng)B細胞不能增值,產(chǎn)生大量抗體特異性差、純度低;產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏。2、雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備:(1)傳統(tǒng)抗體生產(chǎn)方法:抗原(2)單克隆抗體制備過程:設(shè)計方案:一個B淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞雜交瘤細胞+化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。特性:(2)單克隆抗體制備過程:設(shè)計方案:一個B淋巴細胞小鼠骨髓瘤單克隆抗體的應(yīng)用:疾病的診斷、治療和預(yù)防優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,優(yōu)越性強臨床應(yīng)用:單抗探針正在研究:用單克隆抗體治療癌癥單克隆抗體的應(yīng)用:疾病的診斷、治療和預(yù)防優(yōu)點:特異性強,靈敏受精卵>胚胎干細胞>多能干細胞>單能干細胞>體細胞3、動物細胞全能性的表現(xiàn)程度如多能造血干細胞:可分化為紅細胞、白細胞、血小板等(2)低等動物細胞:全能性一般容易體現(xiàn)。如水螅的上皮細胞,不經(jīng)過分裂就可以轉(zhuǎn)變?yōu)樯掀?、肌肉細胞。?)高等動物細胞受精卵>胚胎干細胞>多能干細胞>單能干細胞>體細胞3、動物細4、動物難以克隆的根本原因:在動物的個體發(fā)育過程中,分化的結(jié)果使得細胞在形態(tài)和功能上高度特化,這是由于細胞在伴隨著它們發(fā)育過程中在時間、空間的變化,基因表達的調(diào)控使得細胞中合成了專一的蛋白質(zhì)。4、動物難以克隆的根本原因:在動物的個體發(fā)育過程中,核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植(難度高)(1)基本過程:動物體細胞核移植是將動物的一個細胞的細胞核,移如入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中.使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體.5、細胞核移植實驗和動物的克隆繁殖核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植(難度高)(1)基本過程:動(2)培育過程去核卵細胞體細胞核細胞核移植重組細胞電脈沖刺激早期胚胎(或重組胚胎)胚胎移植母體子宮妊娠、出生個體(3)原理動物體細胞核具有全能性(2)培育過程去核卵細胞體細胞核細胞核移植重組細胞電脈沖刺激卵細胞A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質(zhì)細胞核細胞核移植8細胞胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠重組細胞多莉羊的培育過程卵細胞A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質(zhì)細胞核細胞核移植8細胞胚重組移核細胞丟失了源于乳腺細胞的調(diào)節(jié)蛋白,經(jīng)過三次分裂后,原乳腺細胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被卵細胞質(zhì)中的蛋白因子替換了,因此核DNA被重新編排,細胞開始表達自己的基因??寺⊙虺晒Φ姆肿蛹毎韺W(xué)機理重組移核細胞丟失了源于乳腺細胞的調(diào)克隆羊成功的分子細多莉羊的克隆成功證明:1、高度分化細胞經(jīng)一定技術(shù)處理,也可回復(fù)到類似受精卵時期的功能。2、在胚胎和個體發(fā)育中,細胞質(zhì)具有調(diào)控細胞核(包括異源的細胞核)發(fā)育的作用。多莉羊的克隆成功證明:1、高度分化細胞經(jīng)一定技術(shù)處理,也可回1、在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的是()A.結(jié)果是相同的 B.雜種細胞的形成過程基本相同C.操作過程中酶的作用相同D.誘導(dǎo)融合的手段相同B1、在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的是()2、單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是()①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③C2、單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后,3、單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是()A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D3、單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是()D4、動物細胞克隆是指()A.一個單細胞培養(yǎng)成一個新的細胞群的技術(shù)B.一個重組細胞經(jīng)分裂、分化發(fā)育成一個動物個體的技術(shù)C.幾個同種動物的細胞培養(yǎng)成一個新的細胞群的技術(shù)D.一個卵裂球經(jīng)胚胎分割發(fā)育成四個細胞群的技術(shù)A4、動物細胞克隆是指()A5、下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(

)A.培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細胞能產(chǎn)生單克隆抗體B.培養(yǎng)中的人B細胞能夠無限地增殖C.人的成熟紅細胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細胞株D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞D退出5、下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()D退出第三節(jié)動物的克?。ǖ诙n時)第三節(jié)動物的克隆乙肝病毒模式圖一般來說,醫(yī)院如何檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒?檢測抗原乙肝病毒用什么檢測?相應(yīng)的抗體思考題乙肝病毒模式圖一般來說,醫(yī)院如何檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒?1.描述動物細胞全能性的表現(xiàn)程度,說出動物難以克隆的原因;2.簡述動物細胞核移植的概念和核移植程序;3.列舉動物細胞培養(yǎng)與動物細胞核移植的應(yīng)用和發(fā)展前景。1.描述動物細胞全能性的表現(xiàn)程度,說出動物難以克隆的原因;1、細胞融合與細胞雜交:誘導(dǎo)方式物理法:離心、振蕩、電融合技術(shù)化學(xué)法:聚乙二醇生物法:滅活的仙臺病毒1、細胞融合與細胞雜交:誘導(dǎo)方式物理法:離心、振蕩、電融合技滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通,細胞膜連接細胞融合形成雜種細胞滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通,細胞膜連接植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞融合的方法去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合誘導(dǎo)方法電刺激化學(xué)(聚乙二醇)電融合、PEG、滅活的仙臺病毒用途獲得雜種植株制備單克隆抗體植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物2、雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備:(1)傳統(tǒng)抗體生產(chǎn)方法:抗原動物體內(nèi)抗體刺激效應(yīng)B(抗體不純)篩選單一效應(yīng)B細胞不能增值,產(chǎn)生大量抗體特異性差、純度低;產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏。2、雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備:(1)傳統(tǒng)抗體生產(chǎn)方法:抗原(2)單克隆抗體制備過程:設(shè)計方案:一個B淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞雜交瘤細胞+化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。特性:(2)單克隆抗體制備過程:設(shè)計方案:一個B淋巴細胞小鼠骨髓瘤單克隆抗體的應(yīng)用:疾病的診斷、治療和預(yù)防優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,優(yōu)越性強臨床應(yīng)用:單抗探針正在研究:用單克隆抗體治療癌癥單克隆抗體的應(yīng)用:疾病的診斷、治療和預(yù)防優(yōu)點:特異性強,靈敏受精卵>胚胎干細胞>多能干細胞>單能干細胞>體細胞3、動物細胞全能性的表現(xiàn)程度如多能造血干細胞:可分化為紅細胞、白細胞、血小板等(2)低等動物細胞:全能性一般容易體現(xiàn)。如水螅的上皮細胞,不經(jīng)過分裂就可以轉(zhuǎn)變?yōu)樯掀?、肌肉細胞。?)高等動物細胞受精卵>胚胎干細胞>多能干細胞>單能干細胞>體細胞3、動物細4、動物難以克隆的根本原因:在動物的個體發(fā)育過程中,分化的結(jié)果使得細胞在形態(tài)和功能上高度特化,這是由于細胞在伴隨著它們發(fā)育過程中在時間、空間的變化,基因表達的調(diào)控使得細胞中合成了專一的蛋白質(zhì)。4、動物難以克隆的根本原因:在動物的個體發(fā)育過程中,核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植(難度高)(1)基本過程:動物體細胞核移植是將動物的一個細胞的細胞核,移如入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中.使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體.5、細胞核移植實驗和動物的克隆繁殖核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植(難度高)(1)基本過程:動(2)培育過程去核卵細胞體細胞核細胞核移植重組細胞電脈沖刺激早期胚胎(或重組胚胎)胚胎移植母體子宮妊娠、出生個體(3)原理動物體細胞核具有全能性(2)培育過程去核卵細胞體細胞核細胞核移植重組細胞電脈沖刺激卵細胞A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質(zhì)細胞核細胞核移植8細胞胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠重組細胞多莉羊的培育過程卵細胞A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質(zhì)細胞核細胞核移植8細胞胚重組移核細胞丟失了源于乳腺細胞的調(diào)節(jié)蛋白,經(jīng)過三次分裂后,原乳腺細胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被卵細胞質(zhì)中的蛋白因子替換了,因此核DNA被重新編排,細胞開始表達自己的基因??寺⊙虺晒Φ姆肿蛹毎韺W(xué)機理重組移核細胞丟失了源于乳腺細胞的調(diào)克隆羊成功的分子細多莉羊的克隆成功證明:1、高度分化細胞經(jīng)一定技術(shù)處理,也可回復(fù)到類似受精卵時期的功能。2、在胚胎和個體發(fā)育中,細胞質(zhì)具有調(diào)控細胞核(包括異源的細胞核)發(fā)育的作用。多莉羊的克隆成功證明:1、高度分化細胞經(jīng)一定技術(shù)處理,也可回1、在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的是()A.結(jié)果是相同的 B.雜種細胞的形成過程基本相同C.操作過程中酶的作用相同D.誘導(dǎo)融合的手段相同B1、在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的是()2、單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是()①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③C2、單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后,3、單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是()A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D3、單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是()D4、動物細胞克隆是指()A.

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