病理科規(guī)章制度

舉例：送檢小片淺表胃粘膜組織，不能診斷。送檢物為血凝塊及少量炎性滲出物，無法診斷。送檢小塊組織，嚴(yán)重?cái)D壓變形，無法診斷。病理診斷的步驟（1）病理醫(yī)師進(jìn)行診斷前，核對申請單和切片核查是否相符。（2）熟悉臨床資料病理學(xué)的檢查方法主要是眼觀和鏡檢，并由此獲取建立病理診斷的形態(tài)學(xué)依據(jù)。但這絕不意味著僅僅領(lǐng)先這些依據(jù)就能正確地完整地確立患者的診斷。病理診斷離不開完整、準(zhǔn)確的臨床資料。不少疾病要領(lǐng)先臨床標(biāo)準(zhǔn)與病理標(biāo)準(zhǔn)即“雙標(biāo)準(zhǔn)”才能診斷。例如，“對于骨腫瘤來說，完整的臨床病史和一系列的影象學(xué)檢查資料，在診斷上可能比一個(gè)活檢更為重要”。（Ackeman外科病理學(xué)，第8版，第7頁）其實(shí)，臨床資料的重要性絕不限于骨腫瘤的診斷，即使僅以腫瘤而言，從以下的內(nèi)容里，也可看出“雙標(biāo)準(zhǔn)”的重要性。年齡a腫瘤年齡不同的腫瘤常有一個(gè)好發(fā)年齡段，即瘤年齡。例如:兒童好發(fā)腫瘤有：血管瘤、淋巴管瘤、橫紋肌肉瘤、白血病及惡性淋巴瘤（占15歲以下兒童惡性腫瘤的50％）；各種母細(xì)胞瘤：腎母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、髓母細(xì)胞瘤、肝母細(xì)胞瘤、肺母細(xì)胞瘤、胰母細(xì)胞瘤及嗅母細(xì)胞瘤。中老年人好發(fā)腫瘤有：消化道、呼吸道、泌尿生殖道等各系統(tǒng)的癌腫；皮膚的鱗狀細(xì)胞癌、惡性黑色素瘤及基底細(xì)胞癌（小兒幾乎沒有）；惡性纖維組織細(xì)胞瘤（幾乎不發(fā)生在20歲以前），脂肪肉瘤，小淋巴細(xì)胞性惡性淋巴瘤及血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤（多見于老年人，很少發(fā)生在20歲以前）。骨腫瘤的好發(fā)年齡：Ewing肉瘤好發(fā)于5~19歲；骨肉瘤常見于10~19歲；骨巨細(xì)胞瘤常見于20~39歲；軟骨肉瘤、脊索瘤常見于30~59歲；多發(fā)性骨髓瘤和轉(zhuǎn)移癌絕大多數(shù)在40歲以上，而骨Paget病幾乎不發(fā)生在40歲以前。b相同類型的腫瘤在嬰幼兒與成人形態(tài)表現(xiàn)不一致有些腫瘤發(fā)生于嬰細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞幼稚不成熟，但無真正異型性，不能誤診為惡性。如嬰兒纖維瘤病、嬰兒纖維性錯(cuò)構(gòu)瘤、脂肪母細(xì)胞瘤、胎兒性橫紋肌瘤、幼年性黑色素瘤等。c相同類型的腫瘤在不同的年齡診斷標(biāo)準(zhǔn)及預(yù)后不同如血管外皮瘤，嬰兒型（W1歲）為良性，成人型（＞1歲）為良性、交界性或惡性。兒童睪丸或卵巢的未成熟畸胎瘤，臨床上為良性可不作惡性對待，預(yù)后良好。但發(fā)生在成人卻均為惡性，預(yù)后較差。性別在腫瘤診斷及預(yù)后判斷上，亦具有一定的價(jià)值。鼻咽部血管纖維瘤，幾乎均發(fā)生于青春期男性，是否可發(fā)生于女性尚有爭議。b腹膜播散性平滑肌瘤病，幾乎均發(fā)生于女性。c相同形態(tài)細(xì)胞腫瘤在兩性的命名不同，如“精原細(xì)胞瘤（男）與無性細(xì)胞瘤（女）”。婚否對涉及妊娠、泌乳及性傳播性疾病的診斷，尤應(yīng)注意婚否，并在寫出診斷前作有關(guān)的了解，以免誤診及醫(yī)患糾紛。部位對判斷腫瘤的類型、病理診斷的標(biāo)準(zhǔn)和預(yù)測其生物學(xué)行為均有重大意義。a不同腫瘤的好發(fā)部位常有一定規(guī)律性大致有三種情況：有些腫瘤好發(fā)于正常即有該組織的部位，如平滑肌瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、脊索瘤、副節(jié)瘤、生死細(xì)胞源性腫瘤、各種上皮性腫瘤有些腫瘤多見于正常無或很少有該組織的部位，如粘膜相關(guān)淋巴組織型惡性淋巴瘤常見于胃、乳腺、甲狀腺、肺、睪丸；胚胎性橫紋肌肉瘤常見于膽囊、陰囊、陰道、宮頸及腹膜后，而本來富于橫紋肌的部位，除頭頸部外，四肢反而少見；有些腫瘤幾乎只發(fā)生在特定的部位，如鼻咽部纖維血管瘤幾乎均發(fā)生于鼻咽部，淺表纖維瘤病幾乎只發(fā)生在手掌尺側(cè)、趾部、指節(jié)及陰莖，骨巨細(xì)胞瘤及軟骨母細(xì)胞瘤好發(fā)于骨骺。b相同組織類型的腫瘤在不同的部位良惡性診斷標(biāo)準(zhǔn)不一例如：軟骨性腫瘤：發(fā)生在四肢長骨、盆骨、胸骨、肋骨及椎骨等大骨處，不輕易診斷為軟骨瘤，而發(fā)生在手足小骨，不輕易診斷為軟骨肉瘤。平滑肌腫瘤：在不同部位診斷良惡性所依據(jù)的核分裂象數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)不同（見附表），（注：當(dāng)然還有其他條件，如凝固性壞死、細(xì)胞異型性等此處從略）。附表：不同部位診斷平滑肌肉瘤的核分裂象數(shù)部位核分裂像數(shù)目診斷皮膚及皮下組織三1個(gè)/10HPF平滑肌肉瘤胃腸道三4個(gè)/10HPF平滑肌肉瘤腹膜后三5個(gè)/10HPF平滑肌肉瘤子宮三5~10個(gè)/10HPF平滑肌肉瘤軟組織腫瘤：因部位之深淺，病理學(xué)診斷的原則不一樣。如脂肪組織腫瘤，肉瘤樣的組織出現(xiàn)在淺表部位診斷為多形性脂肪瘤，而在深部則診斷為脂肪肉瘤。纖維組織細(xì)胞腫瘤，肉瘤樣的組織出現(xiàn)在淺表部位診斷為非典型性纖維黃色瘤（交界性），而在深部則診斷為惡性纖維組織細(xì)胞瘤（高度惡性）。c完全相同形態(tài)的腫瘤因發(fā)生部位不同其生物學(xué)行為大相徑庭。例如：副節(jié)瘤，膈以上生物學(xué)行為好，橫膈以下生物學(xué)行為差，腹腔及腹膜后惡性者多；闌尾類癌比小腸或胃類癌的生物學(xué)行為偏好；皮膚圓柱瘤為良性腫瘤，同樣形態(tài)的腫瘤發(fā)生在乳腺者呈低度惡性，發(fā)生自唾腺和肺者為中度惡性；朗格漢斯組織細(xì)胞增生癥發(fā)生于內(nèi)臟者預(yù)后常比僅發(fā)生于骨者差。病史及臨床癥狀臨床病史、癥狀、體征及輔助檢查結(jié)果對病理診斷的意義更為重要。有些疾病的病理診斷必須結(jié)合臨床表現(xiàn)才能作出，有些疾病無病史則不能也不宜由病理醫(yī)師單獨(dú)作出病理診斷。病理學(xué)家對沒有臨床資料的病理標(biāo)本不應(yīng)單獨(dú)作出診斷。a與外傷有關(guān)的病變骨折骨痂，易誤診為骨肉瘤；術(shù)后梭形細(xì)胞結(jié)節(jié)，易誤診為梭形細(xì)胞肉瘤。b藥物治療后引起病變形態(tài)發(fā)生醫(yī)源性變化子宮內(nèi)膜用藥后，形態(tài)變化與月經(jīng)周期不吻合；子宮頸上皮在大量應(yīng)用孕激素后可出現(xiàn)假惡性變化，易誤診為癌。c放療后肉瘤或惡變放射后肉瘤的診斷除形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，需具備臨床上兩個(gè)條件：發(fā)生肉瘤的部位必須在照射野內(nèi)；臨床上出現(xiàn)肉瘤前有較長無癥狀潛伏期，至少3~4年，平均10年以上。d病史在淋巴結(jié)疾病診斷中的作用一般而言，先發(fā)熱后有淋巴結(jié)腫大，時(shí)大時(shí)小，有疼痛或近期有病毒感染、疫苗注射及過敏史等，對診斷組織細(xì)胞壞死性淋巴結(jié)炎或彌漫性反應(yīng)性增生，有很強(qiáng)的提示性。反之，淋巴結(jié)先腫大后有發(fā)熱伴淋巴結(jié)進(jìn)行性增大及縱隔、腹膜后淋巴結(jié)腫大，或肝、脾腫大，對診斷惡性淋巴瘤或白血病具有很高的診斷參考價(jià)值。e病史在假惡性病變診斷中至關(guān)重要，例如：骨化性肌炎：好發(fā)于青年四肢肌肉，臨床上常有外傷史，病變發(fā)展快，短期內(nèi)可形成較大腫塊，但有自限性傾向。X線檢查，雖在近骨膜處有致密的腫塊陰影，卻與骨干不連。但其病理組織學(xué)圖象有時(shí)比骨旁骨肉瘤更為惡性，如無臨床資料，易誤診為骨旁骨肉假肉瘤性盤膜炎：極易誤診為肉瘤。在診斷中，以下病史特點(diǎn)比鏡下所見更重要：病程短，一般病程為1~2周，絕大多數(shù)在3個(gè)月內(nèi)，超過1年者僅占7%左右；生長快；體積小，腫塊多數(shù)在2~3cm之內(nèi)；青壯年多見（20~40歲），兒童少見，老人罕見。f月經(jīng)史是診斷婦科疾病必須掌握的資料，它在相當(dāng)程度上影響著病理診斷，如孕妊史對防止誤診宮頸微小腺癌幾乎是一盞醒目的紅燈。術(shù)中所見術(shù)中所見對判斷某些疾病的生物學(xué)行為極為重要。例如腦膜瘤、胸腺瘤，術(shù)中如發(fā)現(xiàn)其浸潤（常表現(xiàn)為難以分離的粘連），對診斷侵襲性腦膜瘤及惡性胸腺瘤常是重要的佐證。以往曾做過的病理檢查結(jié)果及記錄對判斷腫瘤的演變以及區(qū)別復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、多原發(fā)癌有極重要的價(jià)值。熟悉臨床資料的渠道有：a認(rèn)真閱讀病理檢查申請單；b調(diào)閱臨床病歷及影像學(xué)資料；c親自檢查病人。（3）鏡檢鏡檢是病理檢查中的至關(guān)重要的一步。病變的組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、特染和免疫組化結(jié)果的信息均來自鏡檢。病理醫(yī)師對病變的病理診斷與鑒別診斷的思考也在這一步集中，并最終形成診斷意見。鏡檢應(yīng)當(dāng)遵循有序、全面、細(xì)致的原則，即從低倍（物鏡X4-X10）到高倍［物鏡X20fX40—X100（油鏡，必要時(shí)）］的順序依次進(jìn)行。對每張切片也應(yīng)依序（…）觀察。發(fā)現(xiàn)有組織污染，應(yīng)查明原因。對鏡下見到與自己思路不一致的圖像，不要任意取舍要采取逆向思維進(jìn)行分析，然后再作結(jié)論。在觀察中，應(yīng)注意選擇片內(nèi)的“正常”組織、細(xì)胞、特染物質(zhì)及免疫組化染色反應(yīng)作“自身參照”。切片質(zhì)量不佳或取材的代表性不全時(shí)，應(yīng)深切、薄切或再取材。對復(fù)雜或疑難病例，如一次閱片難以形成判斷，可稍放置并查閱資料后再次閱片。不要急于匆忙診斷。（4）形成診斷過程中應(yīng)注意的問題a必須堅(jiān)持臨床資料與病理資料的統(tǒng)一，要始終記住病理學(xué)檢查是一種特殊形式的“會(huì)診”，是一種臨床和病理雙方為明確診斷而進(jìn)行的合作行為。病理醫(yī)師應(yīng)重視臨床資料并作為形成診斷的重要依據(jù)，慎重作出病理診斷。對與臨床資料不符的診斷應(yīng)慎之又慎。對缺乏必需臨床資料的病例，不要單方面作出診斷，應(yīng)與臨床取得聯(lián)系，或調(diào)閱病歷及影像學(xué)資料，必要時(shí)，應(yīng)親自檢查病人?？傊獔?jiān)持臨床標(biāo)準(zhǔn)與病理標(biāo)準(zhǔn)的“雙標(biāo)準(zhǔn)”原則。b必須堅(jiān)持巨檢與鏡檢的統(tǒng)一，病理標(biāo)本的肉眼檢查與正確取材是完成病理診斷的重要環(huán)節(jié)的繼續(xù)，二者相輔相成。病理醫(yī)師在閱片時(shí)應(yīng)復(fù)閱肉眼所見記錄或重看標(biāo)本，結(jié)合肉眼形態(tài)及臨床資料進(jìn)行分析，作出確切診斷。c必須堅(jiān)持HE圖像與輔助檢查結(jié)果（特染、免疫組化、電鏡、DNA檢測等）的統(tǒng)一，HE圖像是病理診斷最基本的依據(jù)。當(dāng)HE圖像不足以確定診斷時(shí)，須進(jìn)一步作各種輔助檢測，幫助確定診斷。必須指出，在應(yīng)用輔助檢測技術(shù)時(shí)，仍然需要密切結(jié)合HE圖像與臨床表現(xiàn)，一定要盡量做到三者統(tǒng)一；如不能統(tǒng)一時(shí)，應(yīng)重新考慮原來的診斷是否正確，并作補(bǔ)充檢查。d注意經(jīng)驗(yàn)與新信息的結(jié)合，外科病理學(xué)是一門運(yùn)用病理學(xué)知識和方法對病變進(jìn)行觀察，并根據(jù)其病變形態(tài)特點(diǎn)作出診斷的科學(xué)。因此，病理醫(yī)師必須在全面、正確掌握病理學(xué)基礎(chǔ)理論（前人經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)概括）和形態(tài)改變特點(diǎn)后才能正確作出病理診斷，而且其中最重要的是正確識別肉眼和鏡下形態(tài)特點(diǎn)（自己的經(jīng)驗(yàn)起著重要作用）。病理醫(yī)師的診斷過程，實(shí)際上也是一種病理知識積累和不斷豐富經(jīng)驗(yàn)的過程。但單靠經(jīng)驗(yàn)，不注意吸收新知識、新方法，顯然是不夠的，甚至很難作出正確診斷和分型。所以，在診斷過程中必須不斷通過閱讀文獻(xiàn)（信息）來更新和積累自己的知識和經(jīng)驗(yàn)，以利于提高診斷水平。e學(xué)會(huì)逆向思維與傾聽不同意見在病理診斷過程中，對一些較特殊或復(fù)雜的病變常會(huì)提出一毓可能性，此時(shí)，應(yīng)逐一加以比較、鑒別及排除，要注意不能僅考慮符合自己診斷的一面，也要考慮到和自己診斷不符合的一面，要進(jìn)行逆向思維。只有不斷否定、肯定、再否定、再肯定，反復(fù)推敲，才能避免診斷錯(cuò)誤。此外，還應(yīng)虛心傾聽不同意見，認(rèn)真分析不同意見與病變符合的一面，再復(fù)看切片并加以分析比較，得出最后斷意見。病理報(bào)告的書寫規(guī)范（1）病理學(xué)報(bào)告內(nèi)容患者的一般資料應(yīng)填寫完備，包括病理號、送檢標(biāo)本的科室、患者姓名、性別、年齡、標(biāo)本取材部位、門診號和/或住院號；大體描述：首先指明標(biāo)本屬切取還是切除。切除標(biāo)本應(yīng)指明術(shù)式、器官、病變部位、數(shù)目、大小、切緣、送檢或檢出之淋巴結(jié)情況。鏡檢：宜簡，有確診或鑒別診斷意義者才寫，供臨床醫(yī)師分析，無特殊性者可略去。病理診斷：病變部位和疾病名稱。惡性腫瘤應(yīng)符合TNM分期要求，寫明原發(fā)灶大小、組織學(xué)分型、分級及浸潤深度與轉(zhuǎn)移，切緣有無癌殘留。未做病原學(xué)檢查者，原則上不應(yīng)寫病原病理診斷，如有典型的HE表現(xiàn)和臨床病史可寫“符合”或“考慮”為某某病。一般情況下，也不宜寫純功能性診斷，要寫規(guī)范的中文或國際通用的病理專業(yè)術(shù)語。做過特染或免疫組化染色者，應(yīng)寫出與診斷有關(guān)的結(jié)果。原始樣品過小或在采集過程中擠壓嚴(yán)重，或取材代表性不夠（如腎臟穿刺未見足夠數(shù)目的腎小球，肝穿刺標(biāo)本無足夠的匯管區(qū)等）影響正確的診斷均需在報(bào)告中說明。其他需要報(bào)告或建議內(nèi)容：多用于活檢中的復(fù)雜疑難或罕見病例，是對病理診斷的補(bǔ)充。內(nèi)容包括指出診斷依據(jù)及重要的鑒別診斷，指出與判斷預(yù)后有關(guān)的指標(biāo)，提供治療的參考意見，注明選用的參考文獻(xiàn)。建議較常用來提示該例還應(yīng)補(bǔ)做的檢查，對交界性病變或潛在惡性病變患者的隨訪等。簽名（初、復(fù)檢醫(yī)師親筆簽名）、報(bào)告日期。（2）病理診斷與臨床診斷不符合時(shí)，涉及病變部位或病變性質(zhì)的，需重新審查。（3）病理診斷報(bào)告應(yīng)在5個(gè)工作日內(nèi)發(fā)出，疑難病例和特殊標(biāo)本除外。（4）嚴(yán)禁出具假病理診斷報(bào)告，不得向臨床醫(yī)師和患方提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學(xué)報(bào)告書。（5）病理診斷報(bào)告原則上在5個(gè)工作日內(nèi)發(fā)出（±85%）。病理學(xué)診斷的局限性病理學(xué)診斷的重要性是從所周知的，甚至被譽(yù)為“金標(biāo)準(zhǔn)”。正確的病理診斷對臨床診斷的最后確立的確具有重要意義，并有助于臨床制訂治療方案和判斷預(yù)后；有計(jì)劃的定期活檢可以協(xié)助臨床了解疾病發(fā)展的動(dòng)態(tài)變化，判斷療效；科學(xué)的完整病理資料有助于新的疾病或類型的發(fā)現(xiàn)，推動(dòng)醫(yī)學(xué)的發(fā)展。但是，病理診斷也存在著局限性，而這種局限性常為臨床和病理雙方所忽視。病理學(xué)診斷的局限性可歸納如下：（1）只能對有形態(tài)學(xué)改變的疾病，尤其是有特征性和具有確定診斷性病變的疾病進(jìn)行診斷。對于無形態(tài)學(xué)改變的功能或代謝變化不一致性的表現(xiàn)。（2）一次活檢的病理學(xué)診斷只反映某一疾病發(fā)展中某一階段的病理變化。多數(shù)疾病的發(fā)展具有多階段性，有的疾病只在一定階段才顯示特征性變化，如腸Crohn病只有在出現(xiàn)典型的裂隙樣潰瘍及肉芽腫性改變時(shí)，才能作出準(zhǔn)確的病理診斷?！稗用咕∏捌诘溺R下改變是非診斷性的”只有當(dāng)其演進(jìn)到腫塊期，在真皮見到異型淋巴細(xì)胞和表皮內(nèi)的pautrier膿腫時(shí)，病理診斷才有可能。此外，形態(tài)變化具有“滯后”性：如：心肌梗死，一般需經(jīng)4h后才能看到核的變化，6h后肉眼才能辨認(rèn)出梗死灶。如取材樣本中病變處在非特征期，則可導(dǎo)致“漏診”或“誤診”。這實(shí)質(zhì)上是疾病發(fā)展中“流”與“截面”之間關(guān)系的反映。（3）只局部地反映送檢樣本的病變。如取材不當(dāng)（如癌旁或非癌區(qū)或非病變區(qū)），也會(huì)造成“誤診”或“漏診”。嚴(yán)格地說，應(yīng)屬“漏取”或“誤取”。其本質(zhì)是疾病發(fā)展中局部與整體或空間的“面”與“點(diǎn)”之間關(guān)系的反映。（4）只反映診斷當(dāng)時(shí)醫(yī)學(xué)對某一疾?。愋停┑恼J(rèn)識深度與診斷標(biāo)準(zhǔn)，帶有明顯的時(shí)代（有時(shí)僅相隔幾年至十幾年）印跡。隨著對疾病認(rèn)識的深化和診斷標(biāo)準(zhǔn)的變化，原來診斷的可靠性與準(zhǔn)確性將發(fā)生變化。事實(shí)上，一個(gè)新的疾病（或亞型）的出現(xiàn)，常常是對以前認(rèn)識的修正、深化甚至是否定。WHO腫瘤組織學(xué)分型的每一次改版都是對上一版的補(bǔ)充、修正或局部否定。這種現(xiàn)象其本質(zhì)是相對真理與絕對真理的關(guān)系。既不能循古判今，也不應(yīng)以今非古。（5）它在相當(dāng)程度上受病理醫(yī)師的基本知識、閱片經(jīng)驗(yàn)及邏輯思維的影響，帶有主觀性和經(jīng)驗(yàn)性。這種影響在對一些交界性病變的判斷時(shí)表現(xiàn)得最為突出。在這種情況下，病變形態(tài)的不確定性（灰區(qū)）、診斷標(biāo)準(zhǔn)的人為性與武斷性、觀察者對圖像識別和進(jìn)行判斷過程中的主觀性，必然會(huì)導(dǎo)致一張切片經(jīng)不同專家會(huì)診得出不同的結(jié)論。一張切片經(jīng)不同專家會(huì)診出現(xiàn)幾種診斷的事例亦屢見不鮮。這實(shí)質(zhì)上是認(rèn)識論中認(rèn)識與客觀事物間存在差距的表現(xiàn)。當(dāng)然也反映觀察者辨證思維的缺陷。（6）新技術(shù)、新方法尚不夠普及，使一些本來可通過免疫組化、電鏡檢查、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子病理學(xué)技術(shù)等得到確診的病例，因得不到新技術(shù)、新方法的幫助而無法確定診斷。病理學(xué)里有些疾病其形態(tài)有共同性或相似性（即“同形異病”），如圓形細(xì)胞腫瘤、梭形細(xì)胞腫瘤、多形細(xì)胞腫瘤等，它們實(shí)際上并不是同一個(gè)獨(dú)立疾病單元（entity）,但它們在HE切片上卻因“同形”而難以區(qū)別，只能靠上述技術(shù)手段才能進(jìn)一步明確。如病理科設(shè)備簡陋，其診斷的局限性必然更突出。這實(shí)質(zhì)上是設(shè)備陳舊與先進(jìn)認(rèn)識差距的反映。上述局限性，可以通過主、客觀的努力得到縮小，但要使它完全消失則是不客觀的。臨床與病理雙方均應(yīng)對此持高度警覺性。（四）病理科技術(shù)操作規(guī)范常規(guī)石蠟制片操作1）固定固定應(yīng)在標(biāo)本離體后盡快進(jìn)行，小標(biāo)本可在取材后直接放入固定液內(nèi)，大標(biāo)本應(yīng)在離體后半小時(shí)內(nèi)放入固定液內(nèi)。固定液與標(biāo)本的比例不得少于標(biāo)本體積的3-5倍。有特殊要求者應(yīng)事先選定相應(yīng)得固定液，如查糖原，應(yīng)選擇無水乙醇作固定液等。固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)，微小標(biāo)本（如胃粘膜等）2?4h即可，大標(biāo)本應(yīng)置放12?24h，但亦不要過久，以免影響抗原性，造成免疫組化操作中得困難。常用的用固定液有：甲醛無色氣體，易溶于水成為甲醛溶液。易揮發(fā)，且有強(qiáng)烈刺激氣味，常用的是37％?40％的甲醛溶液。用作固定的濃度習(xí)慣為10％福爾馬林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），實(shí)際含甲醛4％。10％福爾馬林滲透力強(qiáng)，固定均勻，對組織收縮少。對脂肪、神經(jīng)及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定劑。經(jīng)福爾馬林固定時(shí)間長的組織，易產(chǎn)生黑色的沉淀，稱福爾馬林色素。乙醇無色液體，易溶于水，它除可作為固定劑外，還可作為脫水劑，對組織有硬化作用。固定用一般是80%~95%濃度，乙醇滲透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的著色不良。中性甲醛液（混合固定液）甲醛（濃）120ml，加蒸餾水880ml,磷酸二氫鈉（NaHPO?H0）4g,磷酸氫二納（NaHPO）2422413g。此液固定效果比單純10%福爾馬林要好。AF液（混合固定液）95%乙醇90ml，甲醛（濃）10ml。也有配方是95%乙醇85ml,甲醛（濃）10ml，冰醋酸5ml。此液除有固定作用外，兼有脫水作用，因此，固定后可直接入95%乙醇脫水。以上4種固定液，以中性甲醛為首選，其次為10%福爾馬林，乙醇應(yīng)盡量不用。（2）組織脫水最常用的脫水劑為乙醇，其它尚有正丁醇和二氧已環(huán)以及丙酮等。脫水用的乙醇濃度一般從70%?75%開始，然后依次80%-95%-100%，即由低濃度逐步到高濃度。脫水的時(shí)間與組織大小、厚薄有很大關(guān)系，組織厚大，脫水時(shí)間要長些；而小薄的組織脫水時(shí)間相對的可以短些。組織脫水時(shí)間在低濃度乙醇中可以長些（如70%?80%），而在高濃度乙醇中要短些，這是因?yàn)楦邼舛鹊囊掖紳B透力不強(qiáng)，延長脫水時(shí)間無益，相反高濃度乙醇易使組織收縮、變脆，致使以后切片和觀察困難。（3）組織透明采用既能與脫水劑（如乙醇）混合，并使之被提去，又能作為石蠟溶媒的誘導(dǎo)劑，使石蠟真正滲入組織中的過程稱為媒介。由于常用的透明劑作用之后，其折射指數(shù)與組織蛋白折射指數(shù)接近，組織顯示出半透明狀態(tài)，因此，常稱此過程為透明。但并非所有媒介過程均使組織透明。常用的透明劑為二甲苯，它易使組織收縮、變脆，故透明時(shí)間不宜長，一般1?2h,2級（即換2次），最好是肉眼觀察，見組織呈棕黃色或暗紅色透明狀（象琥珀樣）即可。（4）組織浸蠟組織經(jīng)媒介（透明）處理后，置入熔化的石蠟內(nèi)浸漬，使石蠟分子浸透入組織中的過程稱浸蠟或石蠟滲透。滲透的過程也可用火棉膠代替石蠟，稱為浸膠。但其透明過程應(yīng)作相應(yīng)更動(dòng)。浸蠟一般分2-3級，總共4-24h，浸蠟時(shí)間過短，蠟沒有完全滲入組織中，組織過軟，切片困難；浸蠟時(shí)間過長，造成組織硬脆，切片也困難。（5）組織包埋把浸蠟的組織包在蠟里成塊，使之有一定的硬度和韌度，便于在切片機(jī)上夾持切片，稱之為包埋。注意事項(xiàng)：包埋框要比組織塊大，這樣保證包成的蠟塊組織四周都有蠟邊。胃、腸、膽囊等組織，將能看到組織各個(gè)層面的一面作為切面。其它組織將切面朝下。包埋蠟冬季用低熔點(diǎn)（56~58°C），夏秋季用高熔點(diǎn)蠟（60~62°C）。包埋蠟最好是經(jīng)多次熔化、沉淀過的蠟，這樣的蠟干凈致密，利于切片。（6）組織處理過程常規(guī)組織處理過程a.中性甲醛固定液3hg.100%乙醇II1hb.75%乙醇1hh.二甲苯I0.5hc.80%乙醇1hi.二甲苯II1hd.95%乙醇I1hj.浸蠟I1he.95%乙醇II1hk.浸蠟II1hf.100%乙醇I1hl.浸蠟III2h淋巴組織處理程序先用4%中性甲醛固定1小時(shí)后，再沿其長軸切成數(shù)片（厚2-3mm）,繼續(xù)固定。a.中性甲醛固定液120分鐘g.100%乙醇30分鐘b.75%乙醇30分鐘h.二甲苯I30分鐘c.80%乙醇30分鐘i.二甲苯II30分鐘

d.95%乙醇30分鐘j.浸蠟I20分鐘e.95%乙醇40分鐘k.浸蠟II50分鐘f.100%乙醇30分鐘1.浸蠟III60分鐘小組織處理程序a.中性甲醛固定液120分鐘h.二甲苯I20分鐘b.75%乙醇30分鐘i.二甲苯II30分鐘c.80%乙醇30分鐘j.浸蠟I20分鐘d.95%乙醇30分鐘k.浸蠟II20分鐘e.95%乙醇40分鐘1.浸蠟III30分鐘f.100%乙醇30分鐘m.浸蠟W30分鐘g.100%乙醇40分鐘n.包埋（7）組織切片切片前蠟塊要冷凍，這樣容易切片，特別在夏秋季一定要冷凍，但不能把剛包埋好的熱蠟塊冷凍，否則會(huì)造成蠟塊裂痕，一夾就碎。修蠟塊時(shí)要把組織全部切出。蠟片切成后，切面朝下把切片放入40°C水中,攤平后用鑷子輕輕將連續(xù)蠟片分開，用載玻片撈起,蠟片應(yīng)撈在玻片的1/3處。蠟片厚度一般在3-5微米，淋巴結(jié)切片要薄，一般要求2-3微米。內(nèi)鏡小活檢、穿刺等需連續(xù)切片6?8片以上。用一邊毛砂處理的載玻片時(shí)用鉛筆寫號即可。不需配制蛋白甘油。如遇難切的蠟片時(shí)，可用與蠟塊切面差不多大小的薄紙潮濕后貼在蠟塊上切片，然后將附有蠟片的一面朝上放入水中漂片。如遇易脫片組織（如血凝塊、腦組織）時(shí)，可將載玻片上涂少許蛋白甘油后再撈片或用多聚賴氨酸處理過的玻片。不完整的蠟片，或皺縮或卷片，可能是刀不快。切出的蠟片總是皺縮，也可能是切片角度不對，慢慢調(diào)試，一旦有最佳磨刀角度和切片角度后不要隨意改變。?切片厚薄不勻或空片，可能是刀未固定緊或蠟塊未夾緊，也可能是切片機(jī)有問題。?烤片時(shí)間與溫度有關(guān)，一般時(shí)間寧長勿短，否則會(huì)造成脫片。62C0.5h以上，90C15min以上。?連續(xù)切片放入熱水漂片時(shí)，不要撈取第一、二張蠟片，因?yàn)榍?張蠟片厚、組織有空洞（鏡下可見）。?如遇硬脂酸石蠟處理的蠟塊時(shí)，切的蠟片不能直接入熱水漂片，否則蠟片會(huì)散碎而應(yīng)先入冷水，然后再慢慢加熱水。為了不影響切片、特殊染色及免疫組化的效果，目前，不用硬脂酸石蠟來代替二甲苯、石蠟。（8）HE染色染色程序a脫蠟二甲苯I5?lOmin—二甲苯115?lOmin—lOO%乙醇1?2min—95%乙醇l~2min—自來水洗b染色蘇木精浸染5min—自來水洗一1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒一自來水洗一伊紅浸染數(shù)秒一自來水洗c脫水、透明、封片95%乙醇lmin—100%乙醇Ilmin—100%乙醇IIlmin—100%乙醇Illlmin—二甲苯lmin—二甲苯Ilminf二甲苯Illminf滴中性樹膠、蓋玻片染色注意事項(xiàng)a二甲苯脫蠟時(shí)間冬季長些，夏季可短些，為防止脫蠟不凈影響染色，脫蠟時(shí)間寧長勿短。b鹽酸乙相離分化時(shí)間靈活掌握，可以在切片藍(lán)化后鏡下觀察。c染色后的脫水透明也很重要，若脫水不完全，切會(huì)會(huì)模糊不清，脫水的乙醇要保持純度，切片在進(jìn)入脫水乙醇前盡量把水多去掉。d若用Harris蘇木精液時(shí)，染色前要先用一張紙把液體表面的結(jié)晶撈去，否則會(huì)污染切片。e在脫水透明時(shí)，二甲苯一石碳酸的作用利于透明，此步故也可省去。fHE染色雖是常規(guī)染色，但是要制出一張完美的HE切片并不是易事，如兩種顏色的深淺對比、與染液的濃度、染液的新舊、染色時(shí)間有關(guān)，需每位操作者靈活運(yùn)用。常規(guī)石蠟制片注意事項(xiàng)制片過程中如出現(xiàn)異常，應(yīng)立即與有關(guān)的病理醫(yī)師聯(lián)系，并報(bào)告科主任，查清事實(shí)，采取相應(yīng)的補(bǔ)救措施；常規(guī)制片應(yīng)在取材后l-2個(gè)工作日內(nèi)完成。冷凍切片的制作冷凍切片的方法是一種最省時(shí)最快速的制片方法，于15分鐘內(nèi)完成制片，主要用于臨床手術(shù)中的病理診斷上，手術(shù)醫(yī)生根據(jù)病理診斷結(jié)果決定手術(shù)范圍，因此做出一些高質(zhì)量的冷凍切片至關(guān)重要。冷凍切片操作程序：冷凍切片機(jī)要始終處于運(yùn)行狀態(tài)，即使在不做冷凍切片時(shí)也要開著致冷，不能時(shí)開時(shí)關(guān)，以免影響機(jī)器壽命。手術(shù)取下的新鮮組織不要固定，因固定過的組織不利于切片，而且還會(huì)影響染色。用OCT做包埋劑，起到支撐的作用。先將OCT標(biāo)在固定頭上再將組織放在OCT上，OCT不要太多，以免流到固定頭外，組織表面露在OCT外。外固定頭放在冷凍機(jī)內(nèi)的速冷臺(tái)上，在-25°C左右，凍lOmin,視組織不同而時(shí)間略有差異，組織較大或脂肪組織時(shí)間可長一些，一般情況下lOmin左右即可。如果冷凍不足，則切片可呈粥糜狀或切不下來；如果冷凍過分，則切片呈碎悄狀或切片上呈條痕狀，都得不到良好的切片。高速刀的角度，固定好，切片刀要快。把凍好的凍頭夾到切片機(jī)上，用精調(diào)修平組織，使其暴露最大切面，將微調(diào)刻度調(diào)在5um，放下抗卷板開始切片，得到滿意切片后，打開抗卷板，將組織貼在載玻片上。載玻片要放平。動(dòng)作要穩(wěn)，一次完成，這樣才能將切片完整的貼在載玻片上。切片晾干后用95%乙醇固定10s，水洗后進(jìn)行常規(guī)染色。（8）冷凍切片完成后取下凍頭組織，固定后做常規(guī)切片。將冷凍機(jī)內(nèi)的組織碎屑清掃干凈，定期打開紫外線消毒。細(xì)胞涂片的制作涂片方法有3種：涂抹法：用棉簽或針頭將標(biāo)本單向、均勻地涂抹于載玻片上。拉片法：將一滴檢材置于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓，再將該兩張載玻片朝反向拉動(dòng)，從而獲得兩張涂片。推片法：將一滴檢液置于載玻片的右端，再用另一張窄邊光滑的載玻片作為推片，并以與滴液載玻片成40°夾角、自右向左勻力推動(dòng)檢液，形成涂片。（1）痰涂片的制作送檢的痰液應(yīng)是由肺內(nèi)咳出，最好是清晨空腹時(shí)自肺內(nèi)深咳出的痰液。核查無誤的收驗(yàn)痰液，應(yīng)立即制作涂片（通常為2?3張）。用細(xì)簽或無鉤鑷子挑取痰液置于載玻片上，并左右往復(fù)薄涂，隨即投入固定液中。痰液中呈現(xiàn)下列性狀的成分可能含有癌細(xì)胞，應(yīng)注意挑取制作涂片：血絲、灰白色痰絲（形如白色細(xì)線，微細(xì)螺旋狀，牽引時(shí)可伸長）、透明痰液（可拉成較長細(xì)絲）。［及時(shí)在細(xì)胞學(xué)檢查申請單上記錄痰液性狀］檢查痰液中的腫瘤細(xì)胞，一般應(yīng)連續(xù)送檢3次。（2）黏膜、皮膚表面刮?。ㄋ⑷?、拉?。┪锖头置谖锏耐科闹谱麝幍琅懦鑫?、子宮頸刮取物涂片：通常由婦產(chǎn)科醫(yī)師將已制作、固定后的涂片送交病理科檢查。［注意由子宮頸外口上皮移行帶刮取細(xì)胞涂片］支氣管鏡、胃鏡等內(nèi)腔鏡的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由內(nèi)腔鏡醫(yī)師制作、固定后送交病理科檢查。食管、胃拉網(wǎng)涂片：由食管拉出的套網(wǎng)氣囊適量放氣后，將氣囊套網(wǎng)在載玻片滾動(dòng)涂片，尤應(yīng)將套囊上血絲、灰白色物制作涂片；涂片通常由有關(guān)臨床醫(yī)師將已制作、固定后的刷片送交病理科檢查。套網(wǎng)中的小塊組織可用來制作石蠟包埋切片。眼、耳、鼻、咽、口腔、皮膚等處病變（潰瘍性病變等）的分泌物涂片。（3）液體涂片的制作液體標(biāo)本（檢材）包括乳頭溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、腦脊液、穿刺液、沖洗液、灌注液等。除乳頭溢液外，其他液體檢材一般均應(yīng)先行離心（2000r/min，10?20min）后，取其沉淀物制作涂片；液體檢材也可用細(xì)胞涂片離心機(jī)（cytospin）直接制作細(xì)胞涂片。制作好的涂片應(yīng)立即固定和染色。［及時(shí)在細(xì)胞學(xué)檢查申請單上記錄液體標(biāo)本的性狀和數(shù)量］液體標(biāo)本的離心沉淀物較多時(shí)，將制作涂片后剩余的沉淀物固定于4%中性甲醛中1h，然后用檫鏡紙或綢布將其包裹，制作石蠟包埋切片。乳頭溢液：直接滴于載玻片上制作涂片。a患者乳腺觸及腫物時(shí)用手指自腫物遠(yuǎn)方沿乳腺導(dǎo)管引流方向輕力按摩擠壓，獲取溢液，宜取中段溢液和血性溢液涂片。b患者乳腺未觸及腫物時(shí)：可自乳暈周圍向乳腺外周輕力按模擠壓，獲取溢液。胸水、腹水、胃液、沖洗液、腦脊液及穿刺液涂片的制作a由患者體內(nèi)抽取的胸水或腹水應(yīng)盡快送交病理科驗(yàn)收，檢液量以200?500ml為宜。因故（例如遠(yuǎn)途）延時(shí)送達(dá)時(shí)，需在標(biāo)本中加入40%的甲醛（加入量為送檢量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理鹽水。b胸水、腹水的離心：采取容器底部的液體10ml（包括可能存在的沉淀物），移入離心管內(nèi)進(jìn)行離心。c離心后，傾去全部上清液，將離心管底部含有沉淀物的液體搖勻并用吸管吸出適量，滴注于載玻片上，制作涂片。注意：腦脊液內(nèi)細(xì)胞一般較少，可用微孔濾膜過濾法、沉淀法或纖維捕捉法收集細(xì)胞，制作涂片。尿液含有膠狀物時(shí)，應(yīng)先將其除去。清除方法：用0?5ml/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)尿液Ph至6.0；離心后，傾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5?10ml/L（固定細(xì)胞），靜置5min后加入蒸餾水并輕搖（溶去膠狀物）；再次離心后，取沉淀物制作涂片。檢查尿液中的腫瘤細(xì)胞，一般應(yīng)連續(xù)送檢3次。（4）腫物細(xì)針穿刺物涂片的制備實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)前的準(zhǔn)備工作a實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)的病理醫(yī)師應(yīng)先了解患者臨床情況，向患者和/或患者授權(quán)人說明實(shí)施穿刺術(shù)的意義、局限性和其他相關(guān)問題等，取得患者和/或患方的知情和理解，并簽署由各醫(yī)院制訂的《申請實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)細(xì)胞病理學(xué)診斷患方知情同意書》。b合格的手術(shù)操作環(huán)境。c必備的適用手術(shù)器械和其他相關(guān)設(shè)施。腫物穿刺術(shù)的操作要點(diǎn)：a確認(rèn)腫物部位并估計(jì)其大小、與皮表距離和質(zhì)地（實(shí)/囊性、硬度等），以指導(dǎo)穿刺的方向、深度和用力程度。b必須嚴(yán)格實(shí)行無菌操作。c根據(jù)腫物大小及其血供情況選擇穿刺針頭。穿刺用針頭的外徑為0.6?0.9mm，安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。d針吸法穿刺術(shù)操作要點(diǎn)進(jìn)行穿刺前，先將安裝了穿刺用針頭的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺入腫物（注射器內(nèi)無空氣）。ii迅速上下提插注射器管芯10?20次（其間變換針頭方向3?4次），遂使腫物不同部位的多較內(nèi)容吸進(jìn)入針頭和注射器內(nèi)。將注射器與針頭分離（管內(nèi)負(fù)壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內(nèi)的針頭相接，拔出針頭，穿刺結(jié)束。迅速推動(dòng)注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內(nèi)的少量吸出物排射在2?3張清潔的載玻片上，進(jìn)行涂片。e涂片方法：用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開，或用推片法朝一個(gè)方向展開（不可雙向往返推移）。f吸出物過少時(shí)，可用向離心管內(nèi)沖洗穿刺針頭；再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片［參見上述項(xiàng)“液體涂片的制作”］。g吸出物較多時(shí)，可適量50％乙醇－生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內(nèi)剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規(guī)石蠟包埋切片。h吸出物中含有細(xì)小組織塊時(shí)，應(yīng)將其制作常規(guī)石蠟包埋切片。i內(nèi)臟腫物穿刺時(shí)，必須在影象學(xué)檢查的引導(dǎo)下用較長細(xì)針進(jìn)行穿刺。j穿刺操作完成后，即在細(xì)胞病理學(xué)檢查單上書寫穿刺記錄。5）涂片的固定用于HE染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進(jìn)行固定。乳頭溢液涂片和液體標(biāo)本離心沉淀物涂片，應(yīng)待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央?yún)^(qū)域未干）時(shí)進(jìn)行固定。用于瑞氏染色、May-GrUnwald姬姆薩染色和免疫細(xì)胞化學(xué)染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進(jìn)行固定。固定液a乙醇一冰醋酸液：95%乙醇：冰醋酸=99：1。常用。b乙醇一乙醚液：95%乙醇49.5ml,乙醚49.5ml,冰醋酸1ml。較常用。c甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-GrUnwald姬姆薩染色和免疫細(xì)胞化學(xué)染色。d丙酮：適用于酶類染色。eCarnoy液：由無水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成，適用于顯示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3?5min后，應(yīng)移入95%乙醇中繼續(xù)固定。f對于液體標(biāo)本的離心沉淀物、食管拉網(wǎng)獲取的小塊組織或吸出物中的細(xì)小組織塊等，固定于4%中性甲醛液中1h，然后制作常規(guī)石蠟包埋切片。固定方法a浸入法：i將稍為干燥（不能完全干燥）的涂片直接浸泡于固定液內(nèi)至少15?30min。因細(xì)胞容易脫落，宜以一個(gè)盛有固定液的容器只固定一例標(biāo)本的涂片；一個(gè)容器固定多例涂片時(shí)，有可能造成的腫瘤細(xì)胞交叉污染。必要時(shí)可將標(biāo)本涂在硅化載玻片上，以防脫落。固定液重復(fù)使用時(shí)，應(yīng)先用濾紙過濾。95%乙醇固定液多次重復(fù)使用時(shí)，需測定其濃度比重，乙醇濃度低于90%時(shí)應(yīng)予更換。b滴加法：將固定液滴加于平放的干燥涂片上，應(yīng)避免因固定液揮發(fā)造成沉淀。固定后未染色涂片的保存或郵寄:涂片固定15min后取出，立即滴加數(shù)滴甘油于涂膜上。對該涂片進(jìn)行染色前，應(yīng)先將其置于95%乙醇中溶去甘油。（6）涂片的染色最常用于細(xì)胞病理學(xué)涂片檢查的是蘇木素一伊紅（HE）染色和巴氏染色。一些特殊染色、組織化學(xué)染色和免疫組織化學(xué)染色也用于細(xì)胞病理學(xué)的涂片檢查（參見第4章第一、二節(jié)）。蘇木素一伊紅（HE）染色程序蘇木素液5min-自來水洗一1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒一自來水洗一伊紅數(shù)秒一自來水洗巴氏（Papanicolaou）染色程序巴氏染色時(shí)，細(xì)胞透明度好，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，色彩豐富而鮮艷，主要用于婦科細(xì)胞學(xué)涂片、痰涂片和富含鱗狀上皮細(xì)胞的涂片檢查。a將已經(jīng)固定的涂片置于80%乙醇中2min。b蒸餾水洗2min。c蘇木素液染核10?12min，自來水洗。d鹽酸-乙醇液分化約20?30s，至涂片呈淡橙紅色。e流水沖洗10?15min,蒸餾水洗。f依次用80%、95%乙醇脫水，各2min。g橙黃G6液染色3?5min。h95%乙醇洗2?3次，洗去多余染液。iEA36工作液染色3?5min。j95%乙醇洗2?3次，洗去多余染液。k無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。染色結(jié)果：細(xì)胞核呈深藍(lán)色，核仁呈紅色；不同分化類型的鱗狀上皮細(xì)胞，其胞漿顏色各異：角化細(xì)胞呈粉紅色，不全角化細(xì)胞呈橙黃色，角化前細(xì)胞呈淡藍(lán)或淡綠色；紅細(xì)胞呈橙紅或鮮紅色，白細(xì)胞的胞漿呈淡藍(lán)綠色；粘液呈淡藍(lán)或粉紅色。瑞氏(Wright)染色程序a涂片自然干燥；b滴加瑞氏液染色lmin；c滴加等量的磷酸緩沖液，輕輕搖蕩玻片或用洗耳膠球在玻片上輕輕吹氣，使兩液體混合均勻，持續(xù)10?15min；d流水洗去染液；e涂片風(fēng)干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。染色結(jié)果：胞核呈紫紅色，胞漿呈紫藍(lán)色，粘液呈粉紅色或淡藍(lán)色。May-GrUnwald-姬姆薩(Giemsa)染色程序a涂片自然干燥，蒸餾水洗1?2min。bMay-Grunwald工作液染15?30min。c自來水沖洗，洗去載玻片上的染液，蒸餾水稍洗。d姬姆薩工作液染15?30min。e自來水沖洗，洗去載玻片上的染液。f涂片風(fēng)干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。染色結(jié)果：胞核呈紫紅色，胞漿和核仁呈藍(lán)紫色。蠟塊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)組織塊脫水透明好，無回縮。蠟塊與其中組織大小適度(組織塊周圍不缺蠟；空白蠟邊1?2mm)；切出組織面積不低于90%。標(biāo)簽整齊牢固，編號字跡清楚。蠟塊數(shù)量與取材相符。切后封蠟。檢查方法：隨機(jī)抽查連續(xù)號50個(gè)蠟塊以上與申請單核對。驗(yàn)收評分辦法：每項(xiàng)不合格扣1分?？偤细衤蔬_(dá)98%。石蠟切片和冰凍切片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、完成時(shí)限及檢查方法質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)組織塊位置適當(dāng)1?3塊/片，組織切面完整，內(nèi)鏡咬檢、穿刺標(biāo)本切面數(shù)與取材數(shù)一致。小組織(內(nèi)鏡咬檢等)連續(xù)切片6片以上，排列整齊。切片?。??5口m）,厚薄均勻。切片無刀痕、裂隙、顫痕。切片平坦，無皺褶、折疊；無切片時(shí)因刀不鋒利而致的擠壓和細(xì)胞舒展不良。切片無污染物。蓋玻片大小適度（組織不外露）。封片無溢膠、無缺膠、無氣泡。切片清潔透明度好。切片染色適度，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)對比清晰，核染色質(zhì)清晰。切片無松散，裱貼位置適當(dāng)。切片整潔，標(biāo)簽端正粘貼牢固、編號清晰、字跡工整。（2）完成時(shí)限常規(guī)制片應(yīng)在取材后1-2個(gè)工作日內(nèi)完成，單件標(biāo)本冰凍切片制片應(yīng)在15分鐘內(nèi)完成。（3）檢查方法：隨機(jī)抽查切片50張以上與申請單核對，肉眼及顯鏡下檢查各項(xiàng)內(nèi)容。按《臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學(xué)分冊》6頁扣分標(biāo)準(zhǔn)扣分（1?9每一項(xiàng)滿分均為10分）：組織稍不完整：扣1?3分；不完整：扣4?10分；未達(dá)到規(guī)定面數(shù)：扣5分。切片厚（細(xì)胞重疊），影響診斷：扣6?10分；厚薄不均勻：扣3?5分。有刀痕、裂隙、顫痕，影響診斷：扣5分。有皺褶或折疊，尚不影響診斷：各扣2分；有皺褶或折疊，影響診斷：各扣5分。有污染物：扣10分。有氣泡：扣3分；膠液外溢：扣3分。透明度差：扣1?3分；組織結(jié)構(gòu)模糊：扣5?7分。細(xì)胞核著色灰淡或過藍(lán)：扣5分；紅（細(xì)胞質(zhì)）與藍(lán)（細(xì)胞核）對比不清晰：扣5分。切片松散：扣5分；切片裱貼位置不當(dāng)：扣5分。切片不整潔：扣3分；標(biāo)簽粘貼不牢：扣3分；編號不清晰：扣4分。切片質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)：①甲級片：三90分（優(yōu)）②乙級片：75?89分（良）③丙級片：60?74分（基本合格）；④丁級片：W59分（不合格）。細(xì)胞學(xué)涂片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與完成時(shí)限穿刺細(xì)胞學(xué)標(biāo)本的采集，由具備操作資質(zhì)的病理學(xué)醫(yī)師或臨床醫(yī)師執(zhí)行。必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。所采集標(biāo)本必須新鮮，并有足夠的數(shù)量。盛放的容器及制作涂片的玻片必須清潔。涂片操作時(shí)動(dòng)作輕巧，以免損傷細(xì)胞，涂片要厚薄適宜，細(xì)胞成分涂在玻片右側(cè)2/3處，另1/3部位粘貼標(biāo)簽。單向涂布檢材，避免細(xì)胞變形。均勻涂布檢材，涂片厚薄適當(dāng)。紅細(xì)胞過多的涂片，可酌情進(jìn)行溶解紅細(xì)胞處理。時(shí)限：常規(guī)，一天兩次出結(jié)果分上午和下午,30分鐘后出結(jié)果，特殊除外。免疫組化質(zhì)量控制技術(shù)規(guī)范（1）免疫組化的質(zhì)量要求病理科醫(yī)生要有相當(dāng)?shù)拿庖呓M化診斷知識和免疫組化技術(shù)經(jīng)驗(yàn)，要清楚認(rèn)識免疫組化技術(shù)是一門實(shí)驗(yàn)性、技術(shù)性非常強(qiáng)的技術(shù)，要多了解多種抗體在組織中的表達(dá)情況，以及影響免疫組化結(jié)果的各種因素，只有提高醫(yī)生的免疫組化診斷水平才能避免錯(cuò)誤的判斷，才能確保免疫組化診斷的準(zhǔn)確性。病理技術(shù)人員是免疫組化實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素，操作人員要有豐富的免疫組化的理論知識及熟練的免疫組化染色技術(shù)，十分清楚每一個(gè)步驟的應(yīng)用原理，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具可靠性?？煽康膶?shí)驗(yàn)試劑和實(shí)驗(yàn)方法是每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的必備條件。由于實(shí)驗(yàn)方法多種多樣，抗體的品種繁多，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)當(dāng)確保高質(zhì)量高效價(jià)的試劑，并摸索出最佳的實(shí)驗(yàn)條件。優(yōu)質(zhì)的免疫組化取決于有效的抗原修復(fù)、敏感的檢測系統(tǒng)、合適的實(shí)驗(yàn)質(zhì)控對照及熟練和有責(zé)任心的技術(shù)人員。（2）免疫組化染色前處理技術(shù)操作規(guī)范取材：理想的取材厚度是0.2cm?0.3cm,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都認(rèn)為組織在加熱抗原修復(fù)過程中造成脫片的主要原因是取材過厚或脫水浸蠟處理不當(dāng)所致。良好的取材、固定、脫水過程是免疫組化質(zhì)控的前提。固定：福爾馬林性能較好,既可保持組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性、抗原可測定性、組織滲透性,又經(jīng)濟(jì)實(shí)用。組織離體后固定一般不要超過30分鐘,在常溫條件下固定時(shí)間為8-24小時(shí),過度固定可造成的組織抗原丟失。因?yàn)榻M織固定后會(huì)引起蛋白或蛋白分子之間形成交聯(lián),導(dǎo)致抗原位點(diǎn)遮蓋,可以通過抗原修復(fù)方法來修正,若加抗體前不采用抗原修復(fù),則免疫組化染色常不能到達(dá)理想結(jié)果或不成功。組織不能長時(shí)間放置在70%的乙醇中,酒精固定后的組織形態(tài)不如福爾馬林固定的組織。脫鈣液對抗原破壞較為嚴(yán)重,因此在組織脫鈣前最好在福爾馬林液中固定48小時(shí),若組織沒有固定透則酸會(huì)破壞抗原,脫鈣液中酸的濃度與脫鈣時(shí)間都必須盡量控制在最低的限度。浸蠟：我們認(rèn)為浸蠟溫度應(yīng)控制在58?60°C左右，浸蠟用的石蠟應(yīng)經(jīng)常更換，以減少石蠟中二甲苯的含量。高溫下的二甲苯容易使組織發(fā)脆,細(xì)胞收縮,更容易掉片。切片厚度：用于免疫組織化學(xué)染色的切片厚度為3-4微米。為防止在染色過程中脫片，需要使用硅化玻片裱片?？酒呵衅?0°C?65°C烤箱中烤片30—60分鐘左右。溫度過高或時(shí)間過長均會(huì)影響抗原的活性，原因是在高溫干燥條件下可以加速組織切片中抗原的氧化。（3）染色結(jié)果的觀察陽性結(jié)果應(yīng)定位在細(xì)胞相應(yīng)的部位，在細(xì)胞膜表達(dá)的抗原陽性結(jié)果應(yīng)定位在細(xì)胞膜上，在其他部位的陽性反應(yīng)均為非特異性染色。不當(dāng)?shù)目乖迯?fù)會(huì)導(dǎo)致抗原在組織細(xì)胞中定位的改變。根據(jù)所檢測抗原的不同，抗原分別定位在：細(xì)胞膜：如LCA和CD3、CD20等；細(xì)胞質(zhì)：如Cytokeratin、GFAP、S100、CgA、AFP等；細(xì)胞核：如Ki-67、ER、PR、TTF-1、HPV-Ag、CyclinDI、TDT等。組織的周邊、氣泡、刀痕、皺折等部位往往呈現(xiàn)非特異性陽性表達(dá)。染色結(jié)果呈陰性并非都是抗原不表達(dá)，要考慮是否與組織中的抗原受到破壞有關(guān)。組織切片背景深與石蠟切片脫蠟不干凈、抗體不純因有關(guān)。（4）免疫組化實(shí)驗(yàn)對照為證實(shí)抗體和檢測試劑盒效價(jià)是否可靠，染色操作是否正確，一般需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對照，以避免試劑失效或操作失當(dāng)而出現(xiàn)假陰性和假陽性，確保染色結(jié)果的可靠性。陽性對照：選用已知染色中度陽性以上的組織切片染色，陽性切片應(yīng)呈陽性，此外組織中的內(nèi)對照也是很好的陽性對照。陰性對照：選用已知染色陰性的組織切片染色，其結(jié)果應(yīng)為陰性。每次實(shí)驗(yàn)中增加Vimentin染色作為對照，目的是觀察組織經(jīng)福爾馬林固定后預(yù)期抗原表達(dá)的敏感性，按福爾馬林固定后抗原損傷的程度來進(jìn)行分析。Vimentin幾乎在任何組織中都有表達(dá)，尤其適合活檢組織中的免疫組化染色觀察。在與上皮組織相連接的間質(zhì)中存在著大量的血管Vimentin可陽性表達(dá)，如果在同一張切片的間質(zhì)中出現(xiàn)Vimentin染色微弱或部分區(qū)域變?nèi)醯那闆r，表明是不當(dāng)?shù)墓潭▽?dǎo)致抗原破壞。所以在每批次實(shí)驗(yàn)中應(yīng)常規(guī)加入Vimentin染色，用于指導(dǎo)觀察福爾馬林固定后抗原表達(dá)敏感性情況。（5）抗體的保存，抗體應(yīng)放在4°C冰箱中保存。（6）完成時(shí)限：診斷醫(yī)生要求后約24小時(shí)內(nèi)完成制片。（五）病理科標(biāo)本檢查和取材操作規(guī)范1．肉眼觀察與記錄一般要注意標(biāo)本的大小（以mm、cm記錄，有時(shí)可用擬物化比較，如花生米大、鴿蛋大）、形狀、表面和切面的顏色、質(zhì)地以及病變部位、形態(tài)特點(diǎn)和病變與周圍組織的關(guān)系。描述應(yīng)先描述主要病變，后描述次要病變?，F(xiàn)將常見器官組織的觀察與描述舉例如下：（1）胃、腸及肝、膽胃粘膜活檢標(biāo)本的塊數(shù)及體積大??；標(biāo)本的色澤、質(zhì)地以及有無水腫、壞死；如同時(shí)送檢不同部位的幾件標(biāo)本，應(yīng)分別編寫小序號。胃潰瘍沿大彎剪開標(biāo)本，如病變在大彎，則沿小彎剪開；識別并記錄切除標(biāo)本的手術(shù)類型，大彎及小彎的長度以及十二指腸長度、直徑或周徑；觀察潰瘍的數(shù)目、位置、大小、外形以及其邊緣粘膜皺襞是否集中，切面潰瘍深度，潰瘍底部有無瘢痕，潰瘍邊緣的粘膜肌層和肌層是否粘合以及漿膜情況；如影像學(xué)診斷為胃潰瘍，但肉眼檢查未發(fā)現(xiàn)潰瘍，應(yīng)與外科聯(lián)系了解是否為潰瘍曠置術(shù)；非潰瘍區(qū)，尤其是邊緣粘膜形態(tài)，有無萎縮、肥大、水腫、糜爛和出血。胃癌記錄切除標(biāo)本手術(shù)類型，大小彎長度及十二指腸長度直徑或周徑；沿大彎剪開標(biāo)本，解剖胃區(qū)淋巴結(jié)并移開大網(wǎng)膜，如同時(shí)行脾切除，應(yīng)測量脾大小并解剖脾門淋巴結(jié)；觀察腫瘤的位置、大小、外形及邊緣粘膜形態(tài)，切面浸潤深度、漿膜及大網(wǎng)膜有無累及，十二指腸、食管是否累及，兩端切緣與腫瘤的距離，有無累及鄰近器官；非腫瘤區(qū)粘膜形態(tài)，有無糜爛、潰瘍、疣狀突起、息肉等病變。（2）結(jié)腸非腫瘤性病變識別并記錄切除標(biāo)本的解剖部位，腸管長度，擴(kuò)張和狹窄腸管的直徑及腸系膜體積；腸粘膜的病變、范圍，有無潰瘍、潰瘍形態(tài)及其深度，有無息肉樣增生、出血；腸壁有無局限性或彌漫性增厚、萎縮，有無纖維化、壞死、穿孔及瘺管；漿膜有無纖維素性滲出、膿苔及與腸系膜等粘連及可疑結(jié)節(jié)狀病灶；憩室部位，數(shù)量、大小、與結(jié)腸帶的部位關(guān)系，內(nèi)容物及其性狀，有無炎癥、出血或穿孔。息肉及腺瘤息肉或腺瘤的部位及數(shù)目；息肉或腺瘤的體積，其頭部的直徑和蒂的長度（多個(gè)息肉或腺瘤，至少應(yīng)測量最大及最小者）；息肉或腺瘤有無蒂、潰瘍，表面形狀，切面有無囊腫及蒂基底部情況。結(jié)腸癌手術(shù)術(shù)式，切除標(biāo)本部位，腸管長度及腸系膜體積；觀察腫瘤大小、形態(tài)，浸潤腸管周徑及范圍，累及腸壁深度，漿膜有無浸潤、有無出血、壞死及衛(wèi)星結(jié)節(jié)或侵犯血管與鄰近器官；分別測量不同部位腫瘤與每一切緣的距離；如結(jié)腸癌合并息肉、潰瘍等其它病變時(shí)，應(yīng)根據(jù)病變的正面觀繪制草圖，并對每個(gè)病灶編號分別描述；記錄各組淋巴結(jié)數(shù)目，最大及最小淋巴結(jié)直徑及淋巴結(jié)眼觀有無累及等情況。（3）肝及膽囊肝切取活檢及肝腫瘤分辨標(biāo)本切取類別與部位（肝小塊切除、部分切除、肝葉或半肝切除），測量標(biāo)本體積、重量；觀察表面有無炎性滲出、纖維粘連、不規(guī)則隆起或結(jié)節(jié)形成（結(jié)節(jié)大小、色澤），包膜有無緊張、皺縮、增厚，有無質(zhì)地堅(jiān)實(shí)或囊變區(qū)；觀察切面肝小葉結(jié)構(gòu)是否清晰，有無淤膽、膽管擴(kuò)張及結(jié)石，有無慢性淤血（檳榔肝），有無結(jié)節(jié)性病變，如有，應(yīng)注意其大小、數(shù)目、色澤、質(zhì)地、境界、與周圍組織關(guān)系以及與肝切緣距離；有無膿腫，門靜脈與肝靜內(nèi)有無血栓或瘤栓。膽囊切除標(biāo)本測量膽囊長度與最大直徑；切開膽囊（沿膽囊縱軸自底至膽囊頸），觀察粘膜色澤、外形，有無增生、息肉；囊壁是否增厚，有無出血；漿膜有無纖維粘連或纖維素性滲出；有無膽汁，膽汁容積、色澤與性狀；有無結(jié)石，結(jié)石數(shù)目、形態(tài)、大小，切面色澤與外形，結(jié)石類型；如為腫瘤，應(yīng)注意其部位、離膽囊底及頸的距離、大小、形狀、漿膜是否累及。（4）子宮頸、子宮體及卵巢子宮頸定位送檢標(biāo)本（如3點(diǎn)、6點(diǎn)、9點(diǎn)、及12點(diǎn)）應(yīng)分別觀察描述其形態(tài)、大小、色澤。由于標(biāo)本小，一般不作剖面檢查。子宮頸切取體積較大標(biāo)本（如前唇或后唇）應(yīng)觀察有無粘膜上皮存在，粘膜上皮有無糜爛、潰瘍及不規(guī)則增厚或形成息肉；有無腫瘤和囊腫。子宮頸錐形切除標(biāo)本應(yīng)記錄標(biāo)本大?。òㄖ睆健⑸疃龋?、外形；觀察子宮頸外口、頸和及移行區(qū)的色澤、質(zhì)地、糜爛、撕裂、不規(guī)則增生、息肉、潰瘍、腫塊（大小、形狀、部位及浸潤深度）、囊腫及原做過活檢的部位。子宮頸癌根治手術(shù)標(biāo)本觀察子宮頸：粘膜上皮色澤，有無不規(guī)則增生、糜爛、撕裂、腫瘤大體類型、大小、部位以及浸潤深度，囊腫及曾做過活檢的部位；觀察子宮體：內(nèi)膜、肌壁、漿膜；如標(biāo)本帶有輸卵管和卵巢，應(yīng)觀察輸卵管長度及最大管徑、漿膜、管壁、管腔以及粘膜與傘端；卵巢大小、色澤、光滑度以及有無結(jié)節(jié)或囊腫，切面皮髓質(zhì)和卵巢門特征以及有無囊腫、黃體、鈣化和出血；子宮旁組織；淋巴結(jié)：數(shù)量、最大和最小淋巴結(jié)直徑。子宮體刮宮活檢的子宮內(nèi)膜標(biāo)本測量標(biāo)本總體積；觀察標(biāo)本色澤、質(zhì)地，血塊與標(biāo)本的比例以及有無壞死與絨毛（注意絨毛的形態(tài)，尤其要注意有無水泡狀胎塊樣絨毛），有無孕囊和大而堅(jiān)實(shí)的組織。子宮切除標(biāo)本識別并記錄子宮切除術(shù)的類型：包括全切除子宮、子宮癌根治術(shù)；測量子宮大小，并從子宮頸經(jīng)兩側(cè)壁至子宮角剪開子宮或作Y形剪開；觀察子宮外形、漿膜（有無粘連、凸起腫塊）、肌壁（有無增厚、結(jié)節(jié)及出血壞死）、子宮內(nèi)膜（有無增厚、息肉、囊腫、出血及壞死）及子宮頸（外口、移行區(qū)及頸管改變）；如有肌瘤，應(yīng)觀察肌瘤的數(shù)量、部位（內(nèi)膜下、肌壁間、漿膜下）、大小、有無蒂以及繼發(fā)病變（出血、壞死、鈣化）。卵巢測量大小，觀察卵巢被膜有無增厚、粘連、破裂和出血；切面皮髓質(zhì)和卵巢門特征，有無囊腫（大小、內(nèi)容物）、黃體、鈣化和出血。b.如有病變，應(yīng)描述病變大小、特征與卵巢門及殘留卵巢的關(guān)系。如為腫瘤，囊性腫瘤應(yīng)觀察大小、囊內(nèi)壁是否光滑，內(nèi)容物的形態(tài)，有無乳頭狀突起，新生物和出血；實(shí)性腫瘤則應(yīng)觀察大小、開頭、部位和色澤，還應(yīng)注意腫瘤與卵巢的關(guān)系，以及有無水腫、出血、鈣化、囊性變和壞死等繼發(fā)病變。（5）乳腺乳腺切取活檢及良性病變a.測量送檢標(biāo)本大小，觀察色澤，觸捫標(biāo)本硬度。b.切面觀察腫塊大小、色澤、境界、硬度以及出血、壞死、鈣化等繼發(fā)性病變；如有囊腫應(yīng)觀察囊腫大小、數(shù)目、內(nèi)容物及囊壁厚度；如為導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤，應(yīng)觀察其導(dǎo)管大小，乳頭狀瘤的形態(tài)特征。乳腺癌根治切除標(biāo)本a.記錄乳腺切除標(biāo)本類型（如擴(kuò)大根治、根治、改良式根治、單純?nèi)橄偾谐⑵は氯橄偾谐龢?biāo)本等），分清乳腺的上下左右方位，確定腫塊所在部位（通常將乳腺分為內(nèi)上、內(nèi)下、外上、外下、正中五區(qū)）。b.注意皮膚有無隆起或潰瘍、有無橘皮樣外觀或濕疹樣改變，乳頭是否內(nèi)陷，擠壓有無分泌物溢出；切除標(biāo)本內(nèi)是否包含胸大肌、胸小肌筋膜、腋窩脂肪淋巴組織、胸壁組織。c.測量標(biāo)本體積及皮瓣面積（長徑及與長徑垂直的橫徑）。用手觸摸乳腺各部，注意有無硬結(jié)或囊腫區(qū)，確定腫塊位置，記錄腫塊離乳頭距離及其所在象限內(nèi)的幾點(diǎn)種處。在乳頭與腫塊正中部的連線作一切面然后，在兩側(cè)面每聵1?2cm作多個(gè)平行切面；觀察腫塊大小、形狀、色澤、硬度以及有無出血、壞死、鈣化；與皮膚、肌肉、盤子膜的關(guān)系；記錄病灶與標(biāo)本切緣的距離。如有淋巴結(jié)，記錄每群淋巴結(jié)（乳內(nèi)淋巴結(jié)、腋窩淋巴結(jié)、鎖骨下淋巴結(jié)）的數(shù)目與最大及最小淋巴結(jié)大小（最大徑長度），如肉眼觀察有明顯腫瘤轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，應(yīng)記錄部位、大小、及數(shù)目。（6）甲狀腺觀察和描述甲狀腺切除標(biāo)本的手術(shù)類型（單純腫瘤切取、腫瘤及側(cè)葉切除或亞全切除），測量標(biāo)本大小并對切除標(biāo)本定位（如腺葉上極、下極、左右側(cè)葉、峽部），檢查有無甲狀旁腺。在標(biāo)本最大直徑處作切面（標(biāo)本較大時(shí)應(yīng)每隔5mm作平行切面），觀察甲狀腺的被膜、腺體實(shí)質(zhì)，注意有無結(jié)節(jié)，其大小、數(shù)目，有無纖維化、囊性變、鈣化和出血壞死，如結(jié)節(jié)有包膜，應(yīng)觀察包膜是否完整，有無浸潤包膜或穿破包膜向腺體或穿過被膜向周圍組織侵犯。對有包膜的腫瘤，應(yīng)在包膜與甲狀腺交界處多點(diǎn)取材。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有微小瘢痕樣或白色結(jié)節(jié)區(qū)時(shí)，應(yīng)在該處取材，以避免漏診。（7）骨及軟組織①碎骨或小塊組織上記錄標(biāo)本數(shù)目和總體積，辨認(rèn)是碎骨還是軟骨，致密骨還是疏松骨，有無骨髓或軟組織，有無死骨片及壞死組織或炎性肉芽組織；軟組織呈膜狀的要辨認(rèn)是否為滑膜，如呈塊狀，結(jié)構(gòu)致密，灰白色，有可能是腫瘤組織，對送檢組織質(zhì)地、色澤及有無鈣化、壞死、囊性變均應(yīng)描述。②骨腫瘤截肢標(biāo)本記錄截肢手術(shù)類型肢體側(cè)別及切除肢體的長度與周徑（包括腫瘤部位的周徑）；記錄曾做過活檢的部位和大小；記錄腫瘤的特征，剝離皮肢，從腫瘤中央部病變骨縱軸平面鋸開，觀察腫瘤部位（骨、干骺端、骺端、骨髓腔），有無骨皮質(zhì)或骨膜被腫瘤掀起，有無反應(yīng)性骨質(zhì)增生，腫瘤是否侵犯關(guān)節(jié)軟骨及關(guān)節(jié)腔，是否穿過骺線，是否累及軟組織；觀察腫塊大小、形態(tài)、色澤、質(zhì)地及邊界，切面觀察有無成骨、軟骨、纖維、粘液樣變及出血、壞死和囊性變，測量腫瘤與骨切緣的距離；腫瘤遠(yuǎn)處骨有無衛(wèi)星結(jié)節(jié)，非腫瘤區(qū)肢體的皮膚、皮下脂肪、肌肉，大血管、神經(jīng)及關(guān)節(jié)有無異常；如有淋巴結(jié)，應(yīng)記錄最大與最小淋巴結(jié)的直徑及數(shù)目和肉眼有無轉(zhuǎn)移。軟組織截肢標(biāo)本同骨腫瘤截肢標(biāo)本；于腫瘤部位切開皮膚分離周圍組織觀察原發(fā)部位（即位于脂肪、肌肉間隙或盤子膜）以及有無累及周圍軟組織及骨膜、骨、關(guān)節(jié)、血管和神經(jīng)；觀察腫瘤大小、形態(tài)、色澤、邊界、包膜，是膨脹性或浸潤性生長，質(zhì)地和有無出血、壞死囊性變，有無粘液變性、鈣化、軟骨和骨；測量腫瘤距標(biāo)本切緣的最近距離，觀察肢體剩余部分有無異常；如有淋巴結(jié)，應(yīng)記錄數(shù)目，測量最大的最小淋巴結(jié)直徑并觀察其切面有無腫瘤累及。2．取材（1）組織塊應(yīng)具備的條件①疾病本質(zhì)的代表性既能反映所患疾病的病理特征，懷疑感染性病變，還應(yīng)包括病原菌成分。②組織學(xué)的代表性組織塊內(nèi)應(yīng)飲食有非病變的組織學(xué)成分（病變區(qū)+非病變區(qū)），便于識別及作出組織學(xué)定位，提供組織學(xué)、組織化學(xué)、免疫組化的“自身對照”。疾病范圍的代表性根據(jù)病變的性質(zhì)（炎癥、腫瘤等），在眼觀可疑的多個(gè)病灶及病灶周邊取材，可準(zhǔn)確判斷病變的真實(shí)范圍（例如小肝癌面積的判斷，腫瘤或炎癥累及的深度的判斷等等）。病變生物學(xué)行為的代表性對有包膜的腫瘤，或有被膜器官內(nèi)的腫瘤，常在跨包膜或被膜處取材［病變+包（被）膜+正常（臨近）組織］。這種取材，對判斷那些不能靠組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)而必須靠生物學(xué)行為，即有浸潤、穿破包（被）膜侵入包膜內(nèi)血管等，才能判斷良惡性的腫瘤，尤為重要。病變發(fā)展過程的代表性組織內(nèi)應(yīng)包含病變區(qū)與非病變區(qū)以及兩者間的移行區(qū)，以有助于觀察癌前變化，如惡性黑色素瘤的上皮內(nèi)異型增生痣dysplasticnevi、癌旁的非典型性增生、原位癌以及微小浸潤，對確定原發(fā)腫瘤排隊(duì)轉(zhuǎn)移有很高的價(jià)值。手術(shù)范圍合適程度的代表性指自腫塊或手術(shù)切除大標(biāo)本切緣的取材，合理和正確的取材，可以反映浸潤的范圍，證實(shí)手術(shù)范圍是否合適。在有另送檢的標(biāo)本如淋巴結(jié)、網(wǎng)膜或胸腦膜結(jié)節(jié)時(shí)，應(yīng)單獨(dú)取材，它可能反映轉(zhuǎn)移的范圍。（2）決定取材（組織塊）數(shù)量的原則組織塊是病理醫(yī)師獲取病變信息的主要信息源（另一些信息來自臨床及巨檢），是獲取組織病理學(xué)（包括特染、免疫組化、電鏡觀察、病原學(xué)檢查）的唯一信息源。因此，取材的數(shù)量應(yīng)以保存具體病例的更多的有代表性的信息為依據(jù)，而很難做到千人一標(biāo)準(zhǔn)，百病一標(biāo)準(zhǔn)。它們應(yīng)包括：——病變特征區(qū)；——病變與非病變交界區(qū)；——主要病變以外的衛(wèi)星病變、散在病變區(qū)；——切除的大標(biāo)本的深部及四周切緣區(qū)；——提示轉(zhuǎn)移（腫瘤）擴(kuò)散（炎癥）的病組織，如淋巴結(jié)、網(wǎng)膜、腦膜、胸膜等等。取材應(yīng)爭取一次取齊。因?yàn)椋孩偃〔目善茐臉?biāo)本原有的解剖學(xué)關(guān)系，給第二次取材定位造成困難；②由于多數(shù)病理科無取材后更換或添加固定液的規(guī)定，第一次取過材的標(biāo)本可能會(huì)干涸或自溶，或組織內(nèi)有福爾馬林色素沉著等等，使第二次取材的樣本不理想。但由于取材者的經(jīng)驗(yàn)不足、眼觀識別病變的水平不高、或病變不明顯，因而在日常工作中補(bǔ)充取材是經(jīng)常發(fā)生的，甚至也是正常的。由于送檢標(biāo)本一般在報(bào)告發(fā)出后2周即被清除，因此，取材的組織塊將是以后再研究時(shí)僅存組織學(xué)信息源。從這個(gè)角度看，取材不宜少。對小塊組織原則上應(yīng)全部選為組織塊保存。然而，對于取材的最少塊數(shù)還是可因病變標(biāo)本不同而作出不同的規(guī)定。（3）活檢——切取標(biāo)本的取材（只切取病變的一小部分組織塊，稱為切取標(biāo)本）。①切取標(biāo)本中大多數(shù)小標(biāo)本是由臨床醫(yī)師切取后送檢，病理醫(yī)師一般僅對其作肉眼觀察和修切。體積V2cmXl.5cmX0.3cm，原則上全取。但可視其厚度（X）.5cm）再做剖面切開，使組織塊厚度保持在2mm?？纱笾路譃?~2個(gè)1.5cmX1.5cmX0.2cm的組織片（全包）。體積〉2cmX2cmX0.5cm，如病變均一，可先作最大徑切開，視厚度再嗇剖面，按每塊1.5cmX1.5cmX0.2cm的要求取2~3個(gè)組織片（全包）。如病變不均勻，應(yīng)分別自不同變化之剖面切取2~5個(gè)組織片（全包）。――體積〉4cmX4cmXlcm,可先做最大蹭剖面，巨檢，視標(biāo)本厚度分別做平行術(shù)頁狀切開（每隔0.5cm），標(biāo)本三維相似者，也可做與厚剖面垂直剖面切開。病變均一者，蹭取一塊,周邊取4塊（上下左右），總數(shù)在5塊左右。病變不均一者，應(yīng)在不同病灶剖面取材，總數(shù)在5~6塊左右。送檢的息肉樣物——較小者，正中切開，切取2塊，全包，蒂部應(yīng)擺正，原則上應(yīng)連續(xù)?！L度〉2cm者，正中切開后，橫斷為2，—塊為息肉上部，一塊包括息肉下部+蒂部+粘膜的組織塊?！鄠€(gè)息肉，應(yīng)分別取材，分別編號。送檢物為碎組織（子宮內(nèi)膜、宮腔刮出物等）――將碎組織平鋪成3mm厚的正方或長方形，測量體積?！x取其中灰白、淺橙或雜色的實(shí)性區(qū)作組織塊；有膜狀物者宜單獨(dú)包；有絨毛或或小水泡者宜單獨(dú)包；懷疑絨癌或?qū)m外孕者，血塊樣物也應(yīng)選一小塊?！纯偭繛?.5cmX1.5cmX0.2cm的倍數(shù)分成若干“組織塊”。送檢為排出物者，少量的全包，大者選無明顯壞死、粘液區(qū)包。宮頸活切、原則上全部取材，單塊小組織厚度＞5mm者，正中切開（包在一個(gè)盒內(nèi)），否則不作修切，但注意包埋面。內(nèi)鏡取材，全取（記錄塊數(shù)）分號。（4）活檢――切除標(biāo)本的取材切除標(biāo)本有2個(gè)含義：a.病灶全部及其周圍一圈“正常”組織。病變器官的病變?nèi)考芭R近組織。b.病變?nèi)考按蟛糠制鞴俪煞只蚧疾〉恼麄€(gè)器官。病變器官的病變?nèi)考芭R近器官的部分。這種取材由病理醫(yī)師執(zhí)行。其操作可參照以下舉例進(jìn)行。3、非腫瘤器官切除標(biāo)本取材胃潰瘍切除標(biāo)本從潰瘍中心，取2~4塊帶有周圍胃組織的組織塊，其中包括胃小彎組織，或沿潰瘍作一長條切塊，包括潰瘍及其兩端胃組織，然后分成3~4小塊，每塊宜包括胃壁全層；若胃內(nèi)再無其它病變，一般不再多取材，如有其它病變，應(yīng)另取材；如有淋巴結(jié)應(yīng)根據(jù)部位分別取材。膽囊切除標(biāo)本在膽囊底部及體部選異常區(qū)域各取1塊（從粘膜至漿膜全層）；如膽囊管和淋巴結(jié)有異常，則加取1塊。闌尾切除標(biāo)本近1/3靠近切緣處橫斷面取1塊；遠(yuǎn)1/3處縱切面取1塊；如有穿孔、腫瘤及其他病變，則相應(yīng)多取幾塊；闌尾粘液囊腫標(biāo)本應(yīng)排除惡性可能，可作多個(gè)橫斷面尋找有無浸潤，并應(yīng)多取材；如行其他手術(shù)（如子宮切除）時(shí)切除的闌尾，則在尖端取1塊，體部取2塊；如系惡性腫瘤應(yīng)取有關(guān)部位淋巴結(jié)。子宮切除標(biāo)本子宮頸前、后壁各取組織1塊。如有息肉，則另取1塊；子宮體緊靠宮底處取2塊，厚度應(yīng)包括內(nèi)膜、肌層及漿膜。如有內(nèi)膜息肉，則另取1塊；如為肌瘤，每個(gè)肌瘤取1~2塊，注意取肉眼病變區(qū)（即軟化區(qū)、肉樣區(qū)、壞死或囊變區(qū)）。4、腫瘤根治手術(shù)切除標(biāo)本①胃癌切除標(biāo)本沿大彎切開胃壁，從粘膜面沿胃長軸經(jīng)病變最大徑，從賁門至幽門取一長條組織，寬0.4~0.5cm，厚度應(yīng)包括胃壁全層，繪圖后分切數(shù)塊，其中1~2塊應(yīng)帶有周圍胃組織；在胃體中央非腫瘤粘膜區(qū)取1~2塊；如腫瘤取材時(shí)未包括大、小彎在內(nèi)，則應(yīng)沿大彎與小彎各取1塊；近、遠(yuǎn)側(cè)切緣各取1~2塊；如切除脾或部分胰，應(yīng)另取材；淋巴結(jié)按分組取材。每組淋巴結(jié)數(shù)目及最大、最小淋巴結(jié)大小、切面是否轉(zhuǎn)移，應(yīng)分別編號取材。淋巴結(jié)分組：a、賁門淋巴結(jié)（包括賁門左和賁門右組）；b、小彎；c、幽門下組；d、大彎；e、幽門上組；早期胃癌（指癌組織限于粘膜層和粘膜下層，不論是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）從粘膜面通過癌灶最大徑，自賁門端至幽門端取一長條組織，以0.5cm左右厚度，將癌灶連續(xù)取材，癌周取2cm編號標(biāo)記。另一種取材方法稱席卷法，將標(biāo)本鋪平固定，沿小彎平行方向，將粘膜每0.5cm割一長條，剝下的粘膜按同一方向卷起包埋制片。子宮頸癌根治手術(shù)切除標(biāo)本子宮頸癌病變明顯者，可自腫瘤中央及腫瘤與正常組織交界處各取1塊，如腫瘤體積較大或有特殊病變，可酌情多取幾塊；如子宮頸肌層深部已有癌腫浸潤時(shí)，必須切取子宮頸全層，直至子宮頸旁及前后凹部的結(jié)締組織；如癌腫累及子宮內(nèi)膜，則取材必須延伸至病灶周圍正常子宮內(nèi)膜，但不需要取子宮壁的全層；如癌種有多中心病灶或轉(zhuǎn)移時(shí)，應(yīng)多點(diǎn)取材；手術(shù)標(biāo)本切緣，即子宮頸陰道部或陰道下切緣、子宮兩側(cè)壁及前后壁切緣各取組織1塊；取子宮旁左右軟組織和1塊；淋巴結(jié)按解剖分群取材；卵巢和輸卵管按該器官要求取材。乳腺癌根治手術(shù)切除標(biāo)本確定標(biāo)本方位：以腋窩脂肪作為外側(cè)標(biāo)記，以肌肉的手術(shù)切面作為上面的標(biāo)記，用防水筆通過乳頭畫一垂直線和水平線，把乳腺分為四個(gè)象限，外上、外下、內(nèi)上、內(nèi)下；腫瘤：至少選取3塊，腫瘤與皮膚交界處，腫瘤與乳腺交界處、腫瘤基底與肌盤子膜或肌肉處各取1塊；每個(gè)象限各取1塊；乳頭：在乳頭中央及其下方組織縱切取1塊；胸大?。涸诋惓^(qū)取1塊，如無異常區(qū)則在離腫瘤最近處取1塊；淋巴結(jié)：所有查到的淋巴結(jié)均應(yīng)取材，小的完全取格，直徑大于0.5cm的切開取材，如肉眼見腋窩脂肪受累，則應(yīng)在代表性區(qū)域取材，并按以下順序標(biāo)記：腋窩下淋巴結(jié)、腋窩中淋巴結(jié)、腋窩上淋巴結(jié)，胸肌間淋巴結(jié)（Rotter淋巴結(jié)），如無此淋巴結(jié)，取該部脂肪組織。（六）對蠟塊、切片、記錄單三項(xiàng)核對的規(guī)定與程序組織制片過程中，應(yīng)確保蠟塊與記錄單一致，切片號與蠟塊號一致。制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)檢查制片質(zhì)量，并加貼標(biāo)有病理科病理號的標(biāo)簽。制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)將所制切片與其相應(yīng)的活檢記錄單/取材工作單等進(jìn)行認(rèn)真核對，確認(rèn)無誤后，將切片連同相關(guān)的活檢申請單/活檢記錄單/取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師，雙方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。（七）細(xì)胞學(xué)診斷規(guī)范通過對涂片中細(xì)胞形態(tài)的觀察作出的診斷，稱細(xì)胞病理學(xué)診斷。細(xì)胞學(xué)報(bào)告常采用5級分類法：I級：片內(nèi)無異型或不正常細(xì)胞。II級：細(xì)胞呈增生性改變或稱核異質(zhì)。III級：可疑惡性細(xì)胞。W級：高度可疑惡性細(xì)胞。V級：肯定惡性細(xì)胞。由于經(jīng)驗(yàn)的積累，在細(xì)胞學(xué)報(bào)告中也出現(xiàn)直接定性、定型的診斷，如痰涂片中找到鱗狀細(xì)胞癌癌細(xì)胞，或淋巴結(jié)穿刺涂片中見到腺癌細(xì)胞，考慮為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性腺癌等。在FNAB的報(bào)告中，可以作出組織學(xué)類型的診斷。報(bào)告內(nèi)容患者的一般資料應(yīng)填寫完備，包括編號、送檢標(biāo)本的科室、患者姓名、性別、年齡、取材部位、、送檢材料（刮片、刷片、印片等）、門診號和/或住院號，醫(yī)師簽名、報(bào)告日期。對不能肯定診斷者，應(yīng)建議活檢。（八）細(xì)胞學(xué)標(biāo)本采集規(guī)范細(xì)胞學(xué)所有標(biāo)本必須由具備操作資質(zhì)的病理學(xué)醫(yī)師或臨床醫(yī)師執(zhí)行；穿刺細(xì)胞學(xué)標(biāo)本、胸水、腹水、腦脊液的采集要嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，應(yīng)盡快送交病理科驗(yàn)收，檢液量以200?500ml為宜。因故延時(shí)送達(dá)時(shí)，需在標(biāo)本中加入40%的甲醛（加入量為送檢胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理鹽水。黏膜、皮膚表面刮?。ㄋ⑷　⒗。┪锖头置谖锏耐科信R床醫(yī)師制作，固定后送交病理科檢查。痰標(biāo)本必須新鮮，咯痰前應(yīng)先潄口，要求患者從呼吸道深部咯出，痰中不應(yīng)含食物碎渣。陰道排出物、子宮頸刮取物涂片通常由婦產(chǎn)科醫(yī)師制作，由子宮頸外口上皮移行帶刮取細(xì)胞涂片。尿液：收集新鮮晨尿。（九）病理科尸檢操作規(guī)范1．拍照裸露死者遺體后，在醒目部位放置尸檢編號，進(jìn)行全身及重要病變部位拍照。（以下觀察、操作，由解剖者進(jìn)行，同時(shí)口述觀察結(jié)果。記錄者隨即準(zhǔn)確、完整記錄于記錄單上。對所有病變，均應(yīng)測量其數(shù)值（mm,cm），避免使用參照物類比描述，如黃豆大、棗大等）。2．體表檢查一般狀態(tài)：死者的年齡、性別、身長、體重。發(fā)育及營養(yǎng)狀況。全身皮膚的色澤，有無出血（淤點(diǎn)或淤斑）、水腫、黃疸、有無外傷等。死后現(xiàn)象：（尸體現(xiàn)象）（1）尸冷：死亡后，尸體體溫一般即逐漸下降。有衣物覆蓋的成人尸體，氣溫在11~15°C的環(huán)境中，須經(jīng)28h，尸溫始下隆至與周圍溫度相同。如為冷藏尸體，則免去此項(xiàng)。（2）尸僵：死后各部肌肉漸成僵硬，稱為尸僵。一般于死后2h自下頜開始，漸延及頸部、軀干、上肢及下肢，持續(xù)24h以上，以后逐漸消失，順序同上。猝死或死前有痙攣者，尸僵出現(xiàn)較早，程度較強(qiáng)，持續(xù)時(shí)間較長；老弱久病者，則尸僵程度較弱，持續(xù)時(shí)間較短。氣溫較高時(shí)尸僵出現(xiàn)較早，消失出較快；寒冷時(shí)則相反。（3）尸斑：死后血管內(nèi)血液逐漸向尸體下垂部沉降，于皮膚顯出不規(guī)則的紫紅色斑紋或斑塊，即為尸斑。一般在死后2~4h出現(xiàn)，但也有死后很快發(fā)生者。開始時(shí)，壓之即褪以，12h后尸斑即成固定狀態(tài)，壓之不易褪色。24h后則壓之不褪。尸斑通常為暗紫紅色，時(shí)間愈長，顏色愈深。死于一氧化碳中毒及氰化物中毒者，尸斑呈櫻桃紅色。（4）角膜混濁：死后尸體的組織蛋白質(zhì)受細(xì)菌的作用而分解，稱為尸體腐敗。表現(xiàn)為腹壁皮膚變綠、變軟、發(fā)生所泡、水泡，甚至全身膨脹、舌眼突出、口唇、面部腫脹，呈所謂“巨人觀”。尸體腐敗由體內(nèi)腐敗菌引起。通常在死后一晝夜末或數(shù)日才明顯出現(xiàn)。出現(xiàn)的快慢與溫度、濕度、空氣是否流通等有關(guān)。內(nèi)臟亦可形成多數(shù)大氣泡，稱為泡沫器官。體表各部狀態(tài)：從頭部至四肢逐部檢查。頭皮及頭發(fā)狀況（如頭皮有外傷、血腫、腫塊；頭發(fā)顏色、長度、密度，有無脫發(fā)禿頂?shù)龋?；兩?cè)瞳孔形狀、直徑（mm）是否等大；結(jié)合膜是否蒼白，有無充血、出血；鞏膜有無黃疸，眼瞼有無水腫；鼻腔及外耳道有無內(nèi)容物流出；口腔有無液體流出，牙齒有無脫落，口唇粘膜是否變青紫色；腮腺、甲狀腺及頸部淋巴結(jié)是否腫大；胸廓平坦或隆起，左右是否對稱；腹壁是否膨隆，有無手術(shù)切口及切口瘢痕（測量其長度）、人工肛門等；背部及骶部有無褥瘡；外生殖器有無泌物及疤痕；腹股溝淋巴結(jié)是否腫大；四肢有無損傷或疤痕；體表有無畸形等。3．頸部器官及胸、腹腔的剖檢胸、腹腔的切開方法常用的有“T”形及“I”字形切開法?！癟”形切開法其橫切線自左肩峰起，沿鎖骨、胸骨柄達(dá)于右肩峰；直切線自胸骨柄起，沿正中線，繞過臍左側(cè)，止于恥骨聯(lián)合處。“I”字形切開以下頜骨下方，大約相當(dāng)于甲狀軟骨處為起點(diǎn)，沿前正中線切開，切線繞過臍左側(cè)，止于恥骨聯(lián)合處。頸部器官的剖檢：將置于項(xiàng)部的木枕向背部移動(dòng)，使頸部墊高，以利操作。如用“T”形切開法，沿橫切線從鎖骨、胸骨柄起，向上將頸前半部的皮膚，連同皮下組織剝離。刀口朝下，以免割穿皮膚；左手提起皮瓣相助。待頸前部皮膚及皮下組織與頸部器官和肌肉分離完畢，沿下頜骨內(nèi)側(cè)，從正中分別向左右將口腔底部肌肉與下頜骨分離。然后從下頜骨分離。然后從下頜骨下將舌等器官向下拉出，再把軟腭切斷，在盡量高的位置切斷兩側(cè)頸外及頸內(nèi)動(dòng)脈，然后向下沿頸椎前將軟組織剝離，將頸部各器官組織剖出（剝離時(shí)注意連帶將兩側(cè)扁桃體完整剝下，一并取出）。如用“I”字形切開法，則從頸部正中切線向兩側(cè)及上方將頸前半部的皮膚及皮下組織剝離（其余同“T”形切開法）。胸廓的暴露：在切線完成后，將胸廓皮膚，連同皮下組織、胸大肌等自正中線向兩側(cè)剝離至腋前線。剝離時(shí)可用左手緊握皮膚和肌肉，手背面對皮膚用力向上外翻起，右手執(zhí)刀，將胸廓外組織盡量切除，充分暴露肋骨。腹腔的切開，可在皮膚、皮下脂肪及肌肉切開后，在腹膜上方作一小切口，注意有無液體或氣體排出。繼以左手二指伸入切口，稍向上提，右手持剪沿二指間剪開腹膜，以避免傷及腹腔器官。繼則切斷連于胸壁下緣的肌肉，擴(kuò)大暴露腹腔。觀察腹壁皮下脂肪層的厚度，肌肉的色澤等。腹腔：檢查大網(wǎng)膜及腹腔各器官的位置是否正常，肝臟是否腫大，其前緣在鎖骨中線處是否超過肋弓。脾臟是否腫大，伸出肋弓下多少厘米。胃、腸有無脹氣。各器官之間有無粘連。腹腔內(nèi)有無過多的液體（腹水），記錄其性狀及量。如有出血，注意尋找器官或大血管破裂處。如有腹膜炎，檢查有無器官穿孔。記錄橫膈高度，以鎖骨中線為標(biāo)準(zhǔn)，正常時(shí)右側(cè)達(dá)第4肋骨（或肋間），左側(cè)達(dá)第5肋骨。胸腔：如疑有氣胸，可于胸壁皮膚切開后，將皮膚提起呈袋形，注水少許，然后用尖刀在水面下穿刺胸廓，如有氣胸即見氣泡從水底冒出。切開胸廓時(shí)，先用軟骨刀自第二肋骨開始切斷兩側(cè)肋軟骨，切線距肋軟骨與肋骨交界處0.5~lcm為宜。繼用手術(shù)刀將胸鎖關(guān)節(jié)切斷（避免切破鎖骨下動(dòng)脈、靜脈，防止血液流入胸腔），并用肋骨剪剪斷兩側(cè)第一肋骨，然后將肋弓提起，緊貼胸骨及肋軟骨后面，分離膈肌和縱隔，最后將胸骨（連同肋軟骨）摘除，暴露胸腔。檢查胸腔有無積液，記錄其量及性狀。肺膜與胸壁有無粘連。將胸腺剝離取出，記錄其脂肪化程度及重量。剪開心包，記錄心包腔內(nèi)液體量和性狀（正常約有5~10ml，淡黃色澄清的液體）。懷疑有敗血癥時(shí)，應(yīng)在無菌操作下，抽取心血5ml，置入消毒的試管內(nèi)，送細(xì)菌室培養(yǎng)。疑有空氣栓塞者，應(yīng)在原位向心包注入少量水，在水平面下刺穿心室，觀察有無氣泡逸出。4．胸腔器官一般采用聯(lián)合取出法，以保持各器官及管道原來的關(guān)系，但也可將器官分別取出。在頸部器官剝離后，切斷無名動(dòng)脈及左鎖骨下動(dòng)脈，然后將氣管連同心、肺一并拉出胸腔，一般可自橫膈以上將食管、胸主動(dòng)脈等切斷，取出心肺。懷疑有肺動(dòng)脈栓塞者，應(yīng)于原位剪開肺動(dòng)脈探查其主干及左右分支，直達(dá)肺門。若主動(dòng)脈有病理變化（如梅素性主動(dòng)脈炎、主動(dòng)脈粥樣硬化癥等）確需保存整個(gè)主動(dòng)脈時(shí)，須將心臟及主動(dòng)脈與肺分離，待腹腔各器官取出后，再將心臟連同主動(dòng)脈整個(gè)摘出。肺的單獨(dú)取出，可將肺提出胸腔，靠在胸廓肋軟骨斷面邊緣上，然后角解