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冷凍切片技術(shù)實(shí)驗(yàn)及冷凍切片機(jī)的基本操作實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆绽鋬銮衅姆椒ㄕ莆绽鋬銮衅挠猛緦?shí)驗(yàn)原理冷凍切片是借助低溫使組織凍結(jié)達(dá)到一定的硬度并通過(guò)冰起支撐作用來(lái)進(jìn)行切片的一種方法。速凍可減小冰晶直徑,避免組織細(xì)胞損傷。制冷壓縮機(jī)佛里昂制冷、半導(dǎo)體溫差電制冷1實(shí)驗(yàn)材料新鮮動(dòng)物肝臟實(shí)驗(yàn)方法準(zhǔn)備 將儀器打開,樣品臺(tái)溫度調(diào)-40℃。取材 組織必須新鮮,盡可能不經(jīng)水洗。取材時(shí)應(yīng)避免組織擠壓,防止人為假象樣品大小5X5X3mm。速凍 將樣品放在樣品臺(tái)上,樣品四周加水加固,冷凍5-10min.切片 升高溫度-15℃(視樣品而定),約5min后開始切片,厚度6-15um。制片 將切片直接放在載波片上或先放在盛水(固定液)的培養(yǎng)皿中再轉(zhuǎn)移到載波上。染色觀察 吸干水,加一滴蘇木精,加蓋玻片,用顯微鏡觀察。記錄 將觀察的結(jié)果繪于實(shí)驗(yàn)報(bào)告上,整理自己用過(guò)的物品。附:切片溫度的設(shè)腦 -12℃肝臟 -14℃腎臟 -16℃肌肉 皮膚 -25℃多脂肪組織 -30℃經(jīng)過(guò)固定的組織 -5℃~-10℃附:快速永久制片1固定70%乙醇5~10min;2min;5~10min;脫色 %HCl至變紅;6水洗 5~10s;70%2min5~10min;1002minX2;3min;封片 中性樹膠封片。冷凍切片機(jī)的
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