血細(xì)胞分析在臨床中的應(yīng)用1課件

血細(xì)胞分析在臨床中的應(yīng)用

血細(xì)胞分析的發(fā)展近年來,隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展及計(jì)算機(jī)在血液分析儀中的廣泛應(yīng)用,各種先進(jìn)的血液分析儀逐漸普及.1953年，第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀問世，標(biāo)志著這一項(xiàng)目拋棄了作坊式手段；1913-1998ModelAHighspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzerCBC(全血細(xì)胞計(jì)數(shù))+DIFF(WBC分類)模式下WBC計(jì)數(shù)分類WBC/DIFF通道對(duì)WBC計(jì)數(shù)和分類時(shí),使用的兩個(gè)信號(hào):細(xì)胞經(jīng)半導(dǎo)體激光激發(fā)產(chǎn)生側(cè)向熒光強(qiáng)度側(cè)向散射光強(qiáng)度信號(hào)使用的兩種試劑:溶血素(4DL):將RBC完全溶解,同時(shí)在WBC膜表面打孔熒光染料(4DS,聚次甲基熒光染料)通過小孔進(jìn)入WBC內(nèi),對(duì)胞漿和胞核中的核酸物質(zhì)進(jìn)行染色測(cè)定經(jīng)過核酸熒光染色后的WBC在633nm激光的照射下,產(chǎn)生側(cè)向熒光信號(hào)和側(cè)向散射光信號(hào)。側(cè)向熒光強(qiáng)度與WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,側(cè)向散射光強(qiáng)度反映了細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度(核的分葉,胞漿顆粒的大小,數(shù)量,分布均勻程度)。SideScatter(Internalstructure)淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞嗜中性細(xì)胞

嗜酸細(xì)胞

Fluorescence(RNA,DNA)RBCghost嗜堿細(xì)胞SLS血紅蛋白檢測(cè)方法檢測(cè)使用的主要成份為十二烷基磺酸鈉表面活性劑先將RBC溶解，釋放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化為Fe3+，與SLS結(jié)合形成SLS-Hb有色基團(tuán)，在535nm有最大吸收峰。SLS血紅蛋白檢測(cè)方法特點(diǎn)不含氰化物，無毒具有環(huán)保性SLS是一種脂溶性試劑，可減少脂血和高WBC總數(shù)造成的濁度對(duì)血紅蛋白檢測(cè)的影響數(shù)據(jù)異常信息淋巴細(xì)胞增多惡性血液病感染(百日咳.傳單.病毒性風(fēng)疹)應(yīng)激狀態(tài)(急性心衰.心臟梗塞.過敏反應(yīng))自身免疫性疾病.腫瘤.吸煙單核細(xì)胞增多感染(細(xì)胞性.敗血癥)膠原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病惡性腫瘤中性粒細(xì)胞減少嚴(yán)重的細(xì)菌感染白血病.腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移藥物血液惡液質(zhì)過敏性休克.酒精中毒淋巴細(xì)胞減少流行性感冒.敗血病藥物(抗腫瘤藥物.腎上腺皮質(zhì)激素)腫瘤晚期.霍奇金氏病膠原性疾病(系統(tǒng)性紅斑狼瘡.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)WBC假性增高PLT聚集冷凝集有核紅細(xì)胞難溶紅細(xì)胞冷球蛋白PLT假性增高紅細(xì)胞碎片小紅細(xì)胞冷白蛋白PLT假性降低血小板聚集巨大血小板RBC假性降低紅細(xì)胞碎片冷凝集小紅細(xì)胞急性粒細(xì)胞白血病Auer小體出現(xiàn)原始粒細(xì)胞DIFF散點(diǎn)圖顯示:淋巴細(xì)胞.單核細(xì)胞和原始細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)且連成一片,大部分原始細(xì)胞由于異常增殖含有過多的DNA/RNA出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞散點(diǎn)圖顯示:有大量的異常淋巴細(xì)胞,熒光強(qiáng)度較弱而側(cè)向散射光強(qiáng)度稍強(qiáng)RBC雙峰分布表示出現(xiàn)大小不同的兩群紅細(xì)胞缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后

直方圖動(dòng)態(tài)變化-療效觀察

鐵劑治療2周后鐵劑治療4周后特發(fā)性PLT減少性紫癲(ITP)PLT直方圖分布上,在40fl附近出現(xiàn)一個(gè)高峰,提示有大型PLT,因此反映細(xì)胞大小的直方圖無法將PLT準(zhǔn)確檢測(cè)出來,許多大的PLT被計(jì)數(shù)成RBC需要鏡檢的情況、國際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦的41條自動(dòng)CBC和DC復(fù)檢規(guī)則：

1.新生兒：（1）復(fù)檢條件：首次檢測(cè)標(biāo)本；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）：（1）復(fù)檢條件：超出線性范圍；（2）復(fù)檢要求：稀釋標(biāo)本后重新測(cè)定。

3.WBC、PLT：（1）復(fù)檢條件：低于實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的儀器線性范圍；（2）復(fù)檢要求：按實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）進(jìn)行。4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）復(fù)檢條件：無結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：①檢查標(biāo)本是否有凝塊，②重測(cè)標(biāo)本，③如果維持不變，用替代方法計(jì)數(shù)。

5.WBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

6.WBC：（1）復(fù)檢條件：3天內(nèi)Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

7.PLT：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

8.PLT：（1）復(fù)檢條件：Delta值超限的任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

9.Hb：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢，②確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。

10.平均紅細(xì)胞體積（MCV）：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的首次結(jié)果<75fl或>105fl（成人）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

11.MCV：（1）復(fù)檢條件：24小時(shí)以上的成人標(biāo)本>105fl；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢觀察大紅細(xì)胞相關(guān)變化，②如無大紅細(xì)胞相關(guān)變化，要求重送新鮮血標(biāo)本，③如無新鮮血標(biāo)本，報(bào)告中注明。

12.MCV：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的Delta值超限的任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。

13.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）：（1）復(fù)檢條件：≥參考范圍上限20g/L；（2）復(fù)檢要求：檢查標(biāo)本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細(xì)胞。

16～22條為白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則：

16.無白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（DC）結(jié)果或DC結(jié)果不全：（1）復(fù)檢條件：無條件復(fù)檢；（2）復(fù)檢要求：人工分類和涂片鏡檢。

17.中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Neut＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

18.淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Lym＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>5.0x10e9/L（成人）或>7.0x10e9/L（<12歲）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

19.單核細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Mono＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>1.5x10e9/L（成人）或>3.0x10e9/L（<12歲）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

20.嗜酸粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Eos＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>2.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

21.嗜堿粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Baso＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>0.5x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

22.有核紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（NRBC＃）：（1）復(fù)檢條件：首次出現(xiàn)任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

23條為網(wǎng)織紅細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)則：

23.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Ret＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>0.10x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

24～41條為可以提示的復(fù)檢規(guī)則：

24.懷疑性報(bào)警[不成熟粒細(xì)胞(IG)/桿狀核中性粒細(xì)胞（Band）報(bào)警提示除外]：（1）復(fù)檢條件：首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

25.懷疑性報(bào)警：（1）復(fù)檢條件：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

26.WBC結(jié)果不可靠報(bào)警：（1）復(fù)檢條件：陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：①確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測(cè)標(biāo)本，②如出現(xiàn)同樣報(bào)警提示，檢查儀器，③如需要，進(jìn)行人工分類。

27.RBC碎片：（1）復(fù)檢條件：陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

28.雙形RBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

注意事項(xiàng)儀器為篩選試驗(yàn),不能從測(cè)定結(jié)果直接診斷疾病遇到異常提示時(shí)及時(shí)鏡檢儀器定期保養(yǎng),保證日常工作正常進(jìn)行（二）血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律1.細(xì)胞大小及形態(tài)大?。河纱蟮叫?。2個(gè)例外：巨核細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞。形態(tài)：紅細(xì)胞始終圓形，粒細(xì)胞圓形或橢圓形，單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形，巨核細(xì)胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。2.細(xì)胞核大?。河纱蟮叫　＞藓思?xì)胞除外。核形：各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。核位置：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴細(xì)胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。核染色質(zhì)：顏色由淺到深，染色質(zhì)由細(xì)致疏松到粗糙密集，最后緊縮成塊。核膜：不明顯到明顯。核仁：清晰、模糊、消失。3.細(xì)胞漿量：由少到多。顏色：粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到淺紅；淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色；漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。顆粒：從無到有，由非特異性到特異性。㈢、血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征1、紅細(xì)胞系統(tǒng)原紅（normoblast）早幼紅（basophilicnormoblast）中幼紅（polychromaticnormoblast）晚幼紅（orthochromaticnormoblast）原紅細(xì)胞：早幼紅細(xì)胞：中幼紅細(xì)胞2、粒細(xì)胞系統(tǒng)原粒（myeloblast）早幼粒（promyelocyte）中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜堿晚幼粒（metamyelocyte）桿狀核粒（stabgranulocyte,bandgranulocyte）分葉核（Segmenteelgranulocyte）原粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞中性中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞桿狀核粒細(xì)胞嗜酸粒細(xì)胞（中幼、晚幼、桿狀核、分葉核嗜堿粒細(xì)胞（早幼、中幼、晚幼、桿狀核、分葉核）3、淋巴細(xì)胞系統(tǒng)原淋（Lymphoblast）幼淋（prolymphocyte）淋巴（lymphocyte）大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞原淋巴細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞：大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞4、漿細(xì)胞系統(tǒng)原漿（plasmablast）幼漿（proplasmacyte）漿細(xì)胞（plasmacyte）原漿細(xì)胞幼漿細(xì)胞漿細(xì)胞5、單核細(xì)胞系統(tǒng)A.原單（monoblast）B.幼單（promonocyte）C.單核（monocyte）D.吞噬（maerophage）ABC原單核細(xì)胞幼單核細(xì)胞單核細(xì)胞6、巨核細(xì)胞系統(tǒng)原巨（megakaryoblast）幼巨（promegakaryocyte）顆粒巨（granularmegakaryocyte）產(chǎn)板巨（thrombacytogenousmegakaryocyte）裸核（nakednucleous）原巨核細(xì)胞幼巨核細(xì)胞顆粒型巨核細(xì)胞產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞推片推片、染片的質(zhì)量

正常骨髓象（油鏡）缺鐵性貧血骨髓象溶血性貧血骨髓象巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象地中海貧血

慢性ITP骨髓象（高倍鏡）幼紅細(xì)胞形態(tài)異常核間橋（細(xì)胞內(nèi)）核間橋（細(xì)胞外）核出芽不對(duì)稱雙核三核幼紅多核幼紅、點(diǎn)彩不對(duì)稱核分裂象核碎裂幼紅細(xì)胞多偽足核畸形巨大成熟紅細(xì)胞原粒I型：核圓形平坦，染色質(zhì)疏松核仁明顯胞漿中無顆粒.原粒II型：在I型基礎(chǔ)上胞漿有少數(shù)細(xì)小顆粒早幼粒細(xì)胞：核有偏位，染色質(zhì)聚集，顆粒增多急性非淋巴細(xì)胞型白血病原粒白AMLM2阿