重醫(yī)大遺傳優(yōu)生學教案07細胞遺傳學技術(shù)

教案用紙（首頁）第9次課授課時間第9周教案完成時間學科遺傳優(yōu)生學年級專業(yè)層次五年制生殖醫(yī)學本科教師職稱授課方式講課4學時課題細胞遺傳學技術(shù)基本教材或主要參考書《遺傳優(yōu)生學》教學目的與要求：掌握染色體病診斷的細胞遺傳學方法、原理及應用。熟悉各種顯帶技術(shù)的臨床應用。了解酶、蛋白質(zhì)和代謝物檢測。了解分子遺傳學研究方法及臨床應用。教學重點、難點：1、外周血細胞染色體制備技術(shù)的臨床應用。2、骨髓細胞染色體直接制備及臨床應用。3、羊水細胞染色體制備及其原理和臨床應用。4、絨毛細胞染色體制備及其原理和臨床應用。5、G、C顯帶及Ag-NOR帶型特點及其臨床應用。大體進程及教學方法：第一節(jié)課：細胞體外培養(yǎng)的基本條件第二節(jié)課：外周血細胞染色體制備技術(shù)的臨床應用。第三節(jié)課：羊水細胞染色體制備及其原理和臨床應用。絨毛細胞染色體制備及其原理和臨床應用。第四節(jié)課：絨毛細胞染色體制備及其原理和臨床應用。G、C顯帶及Ag-NOR帶型特點及其臨床應用。教學方式：實施情況：已按教案的計劃和進度執(zhí)行。

授課教案用紙（續(xù)頁）基本內(nèi)容輔助手段和時間分配細胞遺傳學技術(shù)細胞體外培養(yǎng)的基本條件?溫度?氣體和氫離子濃度?基本營養(yǎng)物質(zhì)?滲透壓?生長刺激因子?無菌一、染色體制備技術(shù)（一）、外周血淋巴細胞培養(yǎng)制備染色體1、原理2、方法（1）培養(yǎng)基制備RPMI164080%小牛血清20%PHA（植物血球凝集素）0.5mg/ml肝素520u/ml雙抗（青、鏈霉素）各100iu/ml（2）接種全血細胞0.3—0.5ml/5ml培養(yǎng)基（3）細胞培養(yǎng)37℃72小時（4）秋水仙素處理終濃度0.1～0.15μg/ml（5）收獲細胞（制片）收集→低滲→預固定→固定→滴片→染色→鏡檢3、應用染色體病診斷（二）、骨髓細胞直接制備染色體1、原理骨髓是高等動物的造血器官，細胞增殖旺盛，利用骨髓中本身處于分裂狀態(tài)的細胞可進行染色體制備。2、方法取骨髓培養(yǎng)制備3、應用血液性疾患骨髓染色體分析射線接觸人員的骨髓染色體檢查（三）、羊水細胞培養(yǎng)制備染色體1、原理妊娠期羊水中含有大量處于分裂狀態(tài)的胎兒脫落細胞，收集這些細胞進行體外培養(yǎng)可制備染色體標本。2、方法（1）羊膜穿刺術(shù)抽取羊水妊娠16～20周（2）體外長期培養(yǎng)（3）制備染色體3、應用染色體病患兒的產(chǎn)前診斷（四）、絨毛細胞染色體制備技術(shù)1、原理絨毛膜是受精卵有絲分裂的衍生物，其本身處于旺盛分裂狀態(tài)。吸取一定量的絨毛便可用于染色體制備達到早期產(chǎn)前診斷胎兒染色體病的目的。2、方法（1）絨毛吸取術(shù)吸取絨毛孕8～10周（2）體外培養(yǎng)（3）染色體制備3、應用早期產(chǎn)前診斷染色體病患兒二、染色體