水產微生物學

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第一章緒論

一.名詞解釋

1.微生物：存在于自然界中的一群個體微小、結構簡單、必須借助顯微鏡放大數百倍甚至數萬倍才能觀察清楚的一類微小生物的總稱。

2.微生物學：是在細胞、分子或群體水平上研究微生物形態(tài)結構、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布、分類進化和生命活動基本規(guī)律以及微生物與人類、動植物和自然界的相互關系，并將其應用于農牧漁業(yè)、工業(yè)、環(huán)境保護、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程等領域的科學。

3.水產微生物學：是微生物學應用于水產養(yǎng)殖業(yè)后而形成的微生物學的一個分支學科，其主要任務是在研微生物學的—般理論和技術的基礎上，研究微生物與水產養(yǎng)殖環(huán)境、水產動物飼料、水產動物疾病和水產品保鮮、貯藏的關系，充分發(fā)揮微生物在改善養(yǎng)殖環(huán)境、提高抗病力和健康水平、防治水產動物疾病以及防止水產品腐敗變質中的作用。

二、雜題

1、原核細胞型微生物：細菌、放線菌、霉形菌、立克次體、衣原體、螺旋體、藍細菌。

2、真核細胞型微生物：真菌、原生動物等。

3、按結構差異，微生物有三種類型：非細胞型微生物（主要是病毒）、原核細胞型微生物、真核細胞型微生物。

4、病原微生物的致病性檢測技術有：檢樣處理、細胞與動物接種、MLD口LD50測定、致病因子分析等

5、用于微生物的免疫學技術有：抗原和抗體的制備、凝集、沉淀和抗體標記技術等。

6、研究病毒大小和形態(tài)的方法有：電子顯微鏡法、超濾膜過濾法、超速離心法、電離輻射與X線衍射法。

三.問答題

1、微生物有哪些特性？

①個體微小，結構簡單②種類繁多，分類廣泛

③群居混雜，相生相克④生長繁殖快，適應能力強。

⑤生物遺傳性狀典型，實驗技術體系完善。

2、微生物的主要作用

1）有益方面：①推動自然界物質循環(huán)和能量流動②凈化環(huán)境，維持生態(tài)平衡

③維護人和動物健康④制造加工食品和工農業(yè)產品⑤用于生物科學研究和生物工程

2）有害方面：①某些微生物能引起人和動植物疾病

②毀壞工農業(yè)產品，農副產品和生活用品

第二章細菌

一、名詞解釋

1、細菌：是指個體微小、形態(tài)與結構簡單、具有細胞壁和原始核質，無核仁和核膜，除核糖體外無其他細胞器的原核生物。

2、菌落：某個細菌在適合生長的固體培養(yǎng)基表面或內部，在適宜的條件下，經過一定時間培養(yǎng)，多

數為18-24h,可生長繁殖大量的菌體，形成一個肉眼可見的、有一定形態(tài)的獨立群體，稱為菌落，又稱克隆。

3、細菌的多形性：有些細菌在適宜的環(huán)境條件下生長，其形態(tài)并不會完全一致的現象。

4、細菌細胞壁：在細菌細胞的外圍，是一層堅韌而具有一定彈性的膜。

5、原生質體：革蘭氏陽性菌經溶菌酶或青霉素處理后，可完全除去細胞壁，形成僅有細胞膜包裹細胞質的菌體稱為原生質體。

6、原生質球：用溶菌酶等作用于革蘭氏陰性菌，僅能除去細胞壁內的肽聚糖，形成仍有外膜層包裹的菌體，稱為原生質球。

7、間體：細菌的部分細胞膜內陷、折疊、卷曲形成的囊狀物，多見于革蘭氏陽性菌，或叫中介體。

8、質粒：染色體外的遺傳物質，存在于細胞質中。是環(huán)狀閉合的雙鏈DNA帶有遺傳信息，

控制細菌某些特定的遺傳性狀。

9、核質：是細菌的遺傳物質，集中于細胞質的某一區(qū)域，多在菌體中央，無核膜、核仁和有絲分裂

器。因其功能與真核細胞的染色體相似，故習慣上亦稱為細菌的染色體。

10、芽孢：某些細菌在其生長發(fā)育后期，在細胞內形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極

低、抗逆性極強的休眠體，稱芽孢。

11、糖被：包被于某些細菌細胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質。

12、S層：某些細菌的一種特殊的表層結構，它完整的包裹菌體，由單一的蛋白質亞單位組成，規(guī)則排列，呈類晶格結構。

13、生長曲線：將一定數量的細菌接種于適宜的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時取樣檢查活菌數，可發(fā)現

其生長過程的規(guī)律性。以培養(yǎng)時間為橫坐標，培養(yǎng)物中活菌數的對數縱坐標，可繪制出一條生長曲線。根據生長曲線，細菌的群體生長繁殖可分為遲緩期、對數期、穩(wěn)定期、衰亡期。

14、培養(yǎng)基：是用人工方法配置而成的，專供微生物生長繁殖的混合營養(yǎng)物制品。

15、增菌培養(yǎng)基：若了解某種細菌的特殊營養(yǎng)要求，可配制出適合這種細菌而不適合其他細菌生

長的培養(yǎng)基。

16、選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質，使之抑制某些細菌生長，而有利于另一些

細菌生長，從而將后者區(qū)分出來，這種培養(yǎng)基叫選擇培養(yǎng)基。

17、鑒別培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)和區(qū)分不同細菌種類的培養(yǎng)基。

18、病原菌：能使機體產生損害的細菌叫病原菌，大多數是寄生性細菌。

19、條件病原菌：有些致病菌進入機體后，并不表現出致病性，只有在一定的條件下，如機體抵抗力下降時，才表現出致病性，這部分細菌叫條件性病原菌，如嗜水氣單胞菌。

20、致病性：病原菌在一定的條件下，能在宿主體內引起感染的能力。致病性也稱致病力或病原性。

21、毒力：病原菌致病力的強弱程度稱為毒力，毒力是菌株的特征。

22、柯赫法則：是確定某種細菌是否具有致病性的主要依據，其要點是：（1）特殊的病原菌應在同一疾病中查出，在健康者中不存在；（2）此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種；（3）此純培養(yǎng)物接種易感動物，能導致同樣病癥；（4）從實驗感染的動物體內能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)物。

23、基因水平的柯赫法則：主要內容：（1）在致病菌株中檢出某些基因或其產物。而無毒力

菌株中無。（2）有毒力菌株的某個基因被損壞，則菌株的毒力應減弱或消除，或者將此基因克隆到無毒株內，后者成為有毒力的菌株。（3）將細菌接種動物時，這個基因應在感染過程中表達。（4）在接種動物體內檢測到這個基因產物的抗體，或產生免疫保護。

24、侵襲力：病原菌具有在機體內定值，突破其防御屏障，通過內化作用進入細胞，然后繁

殖和擴散的能力。

25、毒力島（PAI）:指病原菌的某個或某些毒力基因組群,分子結構與功能有別于細菌染色體但位于細菌染色體之內，故稱為“島”。

26、外毒素：指細菌在生命活動過程中合成并釋放到周圍環(huán)境中的一種毒素，為一種蛋白質。

27、內化作用：指某些細菌黏附于細胞表面之后，能進入吞噬細胞或非吞噬細胞內部的過程。

28、內毒素：指革蘭氏陰性菌外膜中的脂多糖，細菌在死之后破裂或用人工分法裂解菌體后才釋放。

29、抗毒素：外毒素具有良好的免疫性，可刺激機體產生特導性的抗體，使機體具有免疫保護作用，這種抗體稱為抗毒素。

30、類毒素：外毒素在0.4%甲醛溶液作用下，經過一段時間可以脫毒，但仍保留原有抗原性，稱為類毒素

31、傳染：指病原微生物在一定條件下侵入易感動物機體，并與之相互作用，使機體呈現出一種病理生理學的過程。

32、局部傳染：病原微生物侵入機體后，在一定的部位定居下來，生長繁殖，產生毒素產物引起局部損害的傳染過程。

33、全身傳染：由于病原菌的毒力強大，而機體免疫力又較弱，不能將病原微生物局限于局部，

以至其向周圍擴散，散布全身，這一過程叫全身感染。

34、明顯傳染：侵入機體的病原菌毒力強、數量多，而機體的抵抗力又弱時，病原菌可在機

體內生長繁殖，產生毒素物質，致使機體不能維持其體內環(huán)境的相對穩(wěn)定，便表現出明顯的

臨床癥狀，叫做明顯傳染。

35、隱性傳染：侵入機體的病原菌毒力不強或數量不多時，機體能維持其內環(huán)境的相對穩(wěn)定，

因而在臨床上不表現出明顯的癥狀。

36、帶菌現象：有些病原菌雖然侵入了動物機體，但不引起傳染，只呈現出無害的寄生狀態(tài)，或者動物發(fā)病痊愈后一定時間，病原菌尚未完全被消滅或排出，這兩種狀態(tài)均稱為帶菌現象。

37、菌血癥：病原菌侵入機體，突破機體防御屏障，進入血流，但是由于機體的抵抗力強，

而是病原菌不能在血液中停留，轉移到其他位置。

38、敗血癥：在菌血癥的同時，由于機體抵抗力較弱，致使侵入的病原菌在血液中大量繁殖，波及

全身，造成全身性的損害狀態(tài)。

39、膿毒敗血癥：化膿性細菌在引起敗血癥的同時，又引起膿灶的全身轉移。

40、周漿間隙：在革蘭氏陰性菌的細胞膜和外膜的脂質雙層之間有一空隙，約占細胞體積的20%-40%稱為周漿間隙。該間隙含有多種蛋白酶、核酸酶、解毒酶及特殊結合蛋白，在細

菌獲得營養(yǎng)、解除有害物質毒性等方面有重要作用。

二、雜題

1、細菌細胞壁的主要成分：肽聚糖和磷壁酸

2、自卑培養(yǎng)基的最常用的凝固劑為：瓊脂

細菌主要繁殖方式為：裂殖

3、性菌毛的數量一般是1-4根

4、細菌的特殊構造有：鞭毛、莢膜、芽孢、菌毛。

5、芽孢核心的中心為核區(qū)，外圍依次有芽孢質、芽孢膜、芽孢壁。

6、只在液體表面出現菌膜的微生物屬：好氧型微生物

7、固體培養(yǎng)基中，瓊脂使用濃度為1.5-2.5%，半固體：0.3-0.5%

8、碳源和氮源來自同一有機物的是：化能異養(yǎng)型

9、水產動物病原菌的溫度類型一般是嗜溫型。

10、菌膜是微生物在液體表面的培養(yǎng)特征

10、MR式驗是測定細菌分解糖類的試驗。

三、問答題

1、鞭毛的功能如何，如何確定細菌有無鞭毛？

答：鞭毛的功能：運動。

確定細菌有無鞭毛：①電鏡觀察②鞭毛染色、光鏡檢查③半固體穿刺培養(yǎng)④

凹片，水浸片，暗視野檢查運動性⑤觀察菌落，菌落形狀大、薄且不規(guī)則，邊緣極不圓

整，為運動能力很強，菌落外形圓整、邊緣光滑、厚度較大，是無鞭毛的細菌。

2、試述革蘭氏染色的步驟和主要原理

步驟：結晶紫初染-碘液媒染-酒精脫色-沙黃（或夏紅）復染。

原理：①革蘭氏陰性菌的細胞壁的粘肽少，脂類多，脫色時脂類被溶解，細胞壁通透性增大，結晶紫碘液復合物被抽提出，細胞呈無色，用復紅染色時呈紅色。

②革蘭氏陽性菌的細胞壁的粘肽多，脂類少，脫色時粘肽孔徑小（關閉），組織結晶紫復合物不能逸出，復染時呈紫色。

3、細菌生長曲線可分為哪幾個時期？各期的主要特征如何？

細菌生長曲線可分為四個時期：遲緩期、對數期、穩(wěn)定期、衰亡期。遲緩期：分裂緩慢、細胞基本不增加、代謝活躍、菌體體積增大、對藥物敏感。對數期：細菌分裂很快，數目呈幾何級數增加，細菌的形態(tài)、染色性、生理生化特性一致而典型，適宜作菌種和用鑒定。穩(wěn)定期細菌死亡數與繁殖數相似，總菌數達最高水平，形成有經濟意義的產物。衰亡期菌體變

形，出現退化形或畸形，細菌最后均歸于死亡。

4、細菌可產生那些合成產物？

細菌可產生的合成產物：是指菌體成分以外的其他合成物質。主要有：（1）毒素：①外毒素：蛋白質②內毒素：糖、磷脂和蛋白質復合物。（2）酶：①卵磷脂酶。②膠原酶。③透明

質酸酶、凝血漿酶、溶纖維蛋白酶、溶血酶。（3）抗生素。（4）維生素。（5）熱原質。（6）色素。

5、試述毒力的控制方法和測定方法？

毒力的控制包括：增強細菌毒力的方法，減弱細菌毒力的方法及固定細菌毒力的方法三個方面的內容。

⑴增強細菌毒力的方法：①通過易感動物，②與其他細菌協(xié)同作用。

⑵減弱細菌毒力的方法：①長期在人工培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，②高于最適溫度下進行培養(yǎng)，

③含有特殊化學物質的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，④通過不易感動物，⑤在特殊的合適的氣體條件

下培養(yǎng)。

⑶固定細菌毒力的方法：低溫真空干燥法保存細菌，毒力數年不變。

細菌毒力的測定方法：

①最小致死量（MLD:能使特定的動物于感染后一定時間內發(fā)生全部死亡的最小細菌劑量或毒素劑量。方法簡單，但可能由于實驗動物個體差異而產生誤差。

②半數致死量（LD50）:是指在一定時間內能使半數實驗動物于感染后發(fā)生死亡所用的活細菌量或毒素劑量。此方法加入了統(tǒng)計方法，結果較準確。

第三章真菌

名詞解釋

1真菌：具有細胞壁和真正的細胞核，無葉綠素，不能進行光合作用，化能有機營養(yǎng)，能產生孢子進行有性和無性繁殖，不運動的一類真核微生物。

1酵母菌：一類單細胞的真核微生物，主要分布在含糖質較高和偏酸性的環(huán)境。

2、霉菌：在基質上生長的肉眼可見的絨毛狀，棉絮狀或蜘蛛網狀的絲狀真菌。

3、菌絲體：真菌的許多菌絲交織在一起叫菌絲體

4、營養(yǎng)菌絲：伸入基質內的菌絲，有吸收營養(yǎng)排除廢物的功能。

5、氣生菌絲：伸出基質外的菌絲。

二、雜題

1酵母菌的大小一般為：1-5umX5-30um,最長可達lOOum。

2、霉菌的形態(tài)觀察方法有：菌落形態(tài)觀察法、直接取菌法、玻璃紙透析培養(yǎng)觀察法和載玻片培養(yǎng)觀

察法

3、綿霉菌的分類屬于：鞭毛菌亞門

4、綿霉、鰓霉、水霉、毛霉屬于：無隔菌絲的霉菌

5、木霉、曲霉、青霉屬于：有隔菌絲的霉菌

6、酵母菌細胞壁的主要成分是：葡萄糖、甘露聚糖、蛋白質和幾丁質，另有少量脂質。

三、問答題試述檢查酵母菌假菌絲的步驟與方法(包括培養(yǎng)基種類、顯微鏡物鏡倍數、制片等)？

假菌絲的觀察方法：劃線接種法。

步驟：用劃線法把某個培養(yǎng)酵母菌接種到馬鈴薯或玉米粉瓊脂的平板培養(yǎng)基上，在劃線部分加無菌蓋玻片。25-28度培養(yǎng)3-5天，取蓋玻片油鏡下觀察，呈樹枝狀的分支的假菌絲細胞的形態(tài)為原始型的短鏈或延長的細胞。

第四章病毒

一.名詞解釋

1病毒：指一類超顯微結構，非細胞形態(tài)，專性活細胞內寄生的