生物技術(shù)基礎(chǔ)名詞解釋

學習好資料歡迎下載學習好資料歡迎下載第一章1、現(xiàn)代生物技術(shù):也稱生物工程。在分子生物學基礎(chǔ)上建立的創(chuàng)建新的生物類型或新生物機能的實用技術(shù)，是現(xiàn)代生物科學和工程技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。2、基因重組：generecombination造成基因型變化的核酸的交換過程。3、酶工程：enzymeengineering酶制劑在工業(yè)上的大規(guī)模應(yīng)用，主要由酶的生產(chǎn)、酶的分離純化、酶的固定化和生物反應(yīng)器四個部分組成。4、蛋白質(zhì)工程：proteinengineering按人們意志改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能或創(chuàng)造新的蛋白質(zhì)的過程。5、快速無性繁殖：7、生物工程：bioengineering應(yīng)用生命科學及工程學的原理，借助生物體作為反應(yīng)器或用生物的成分作工具以提供產(chǎn)品來為社會服務(wù)的生物技術(shù)。包括基因工程、細胞工程、發(fā)酵工程、酶工程等。8、細胞工程：cellengineering應(yīng)用細胞生物學和分子生物學的方法，通過類似于工程學的步驟在細胞整體水平或細胞器水平上，遵循細胞的遺傳和生理活動規(guī)律，有目的地制造細胞產(chǎn)品的一門生物技術(shù)。9、發(fā)酵工程：是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。10、轉(zhuǎn)基因工程：轉(zhuǎn)基因工程又叫重組DNA（objectgene）粒、病毒等載體（vector）重組連接，然后將其導入不含該基因的受體細胞(hostcell)，使受體細胞產(chǎn)生新的基因產(chǎn)物或獲得新的遺傳特性。11、生物固氮：是指固氮微生物將大氣中的氮氣還原成氨的過程。12、人類基因組計劃：humangenomeproject2080200123DNA（3×109）25000傳圖譜和物理圖譜的國際合作研究計劃。13、愈傷組織：callus;calli(復(fù))原指植物體的局部受到創(chuàng)傷刺激后，在傷口表面新生的組織。它由活的薄壁細胞組成，可起源于植物體任何器官內(nèi)各種組織的活細胞?，F(xiàn)多指切取植物體的一部分，置于含有生長素和細胞分裂素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，誘導產(chǎn)生的無定形的組織團塊。一、名詞解釋

第二章1DNADNADNADNA螺旋解體的過程。DNADNA的熱變性最常見。1.增色效應(yīng)：DNA0D260增高的現(xiàn)象。2.Tm：熱DNA`50%時的溫度稱DNAmeltingtemperature，TmG+C2（replicon）DNADNADNA制的獨立單位稱為復(fù)制子。每個復(fù)制子使用一次，并且在每個細胞周期中只有一次。3、啟動子：promoterDNARNA的調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合位點。4（introns）DNARNARNARNA5DNADNADNADNA6、酶切位點：DNA上一段堿基的特定序列，限制性內(nèi)切酶能夠識別出這個序列并在此將DNA序列切成兩段。7、PCRPolymeraseChainReactionDNADNADNA,RNA8DNADNA（目的基因）DNA種最常用的載體是細菌質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。9、質(zhì)粒：細菌細胞內(nèi)一種自我復(fù)制的環(huán)狀雙鏈DNA分子，能穩(wěn)定地獨立存在于染色體外，并傳遞到子代，一般不整合到宿主染色體上?，F(xiàn)在常用的質(zhì)粒大多數(shù)是經(jīng)過改造或人工構(gòu)建的，常含抗生素抗性基因，是重組DNA技術(shù)中重要的工具。10、Ti（Ti-plasmid）DNA并誘生冠癭瘤。11、噬菌體載體：12、基因芯片：genechipDNADNA交，可對樣品的基因表達譜生物信息進行快速定性和定量分析。13cDNA：是以特定的組織或細胞mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成的互補DNA（cDNA）與適當?shù)妮d體（用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌形成重組DNA克隆群，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織或細胞的cDNA文庫。cDNAcDNA文庫具有組織或細胞特異性。14（transformation）DNA發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象。15（transduction）DNARNA16、克隆子：攝取外源DNA并令其穩(wěn)定維持的受體細胞。17、報告基因：(reportergene)是一種編碼可被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因，也就是說，是一個其表達產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，在調(diào)控序列控制下進行表達，從而利用它的表達產(chǎn)物來標定目的基因的表達調(diào)控，篩選得到轉(zhuǎn)化體。18、DNA（DNAhybridization）DNA系密切程度的實驗技術(shù)。19、southernDNA片段，將膠上的DNADNA用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測特定DNA分子的含量。20northernRNARNADNANorthernWesternblot。二、思考題1、基因工程操作流程？目的基因或DNA片段的獲取、重組DNA分子的構(gòu)建、重組DNA分子引入受體細胞、目的基因或DNA片段的擴增或表達。2、原核生物與真核生物基因及轉(zhuǎn)錄的區(qū)別？基因的區(qū)別：真核生物基因編碼區(qū)有內(nèi)含子與外顯子的區(qū)別，內(nèi)含子不能編碼蛋白質(zhì)；原核生物沒有內(nèi)含子。轉(zhuǎn)錄的區(qū)別：1）真核生物有由核膜包裹的細胞核，因此，基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯有時間和地點的差別；而原核生物沒有細胞核，轉(zhuǎn)錄和翻譯可以同時同地點進行。2）真核生物基因有內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄所得的前提mRNA需要經(jīng)過修飾，除去由內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄得到的mRNA序列而得到成熟mRNA；原核生物基因因沒有內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄得到的mRNA不需要經(jīng)過修飾。3、EcoR1的識別序列，酶切位點？EcoR1是從大腸桿菌R菌株中分離出來的第一個限制酶,EcoR表示是從大腸桿菌的R型菌株分離來的,“Ⅰ”表示是從大腸桿菌R菌株中分離出來的第一個限制酶。EcoR1形成黏性末端。4、PCR

切割序列，切割位點在 G與A之間，PCR是一種體外DNA擴增技術(shù)，是在模板DNA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下，依賴于 DNA聚合酶的酶促反應(yīng)，將待擴增的DNA片段與其兩側(cè)互補的寡核苷酸鏈引物經(jīng)“高溫變性 ——低溫退火——引物延伸”三步反應(yīng)的多次循環(huán)，使DNA片段在數(shù)量上呈指數(shù)增加，從而在短時間內(nèi)獲得我們所需的大量的特定基因片段。5、MCS連桿？銜接頭？6、PBR322、λ噬菌體載體、cosmid載體、YAC載體的結(jié)構(gòu)、特點、主要用途？PBR3224362bp，73λ噬菌體載體：λ50Kb，6138原化狀態(tài)時，細胞質(zhì)中有一些λCICIλ左、右兩個早期起動子的轉(zhuǎn)錄，使之不λDNAUV誘導下RecCI90細胞裂解。有時λ也可自發(fā)地從宿主的染色體上游離出來，進行復(fù)制，最終導致宿主細胞的裂解，此稱為治愈（curing。游離在細胞質(zhì)中的λ可以進行滾環(huán)復(fù)制，產(chǎn)生多個拷貝，并合成頭部和尾部蛋白，包裝成完整的λ噬菌體，使細胞裂解，釋放出λ菌體再感染新的細胞。因為λDNAF同，λFcosmidcossite-carryingplasmidλDNAcosDNAcos（cohesive）末端及質(zhì)粒（plasmid）重組而成的載體。cosmid選擇性標記以及λcosDNADNAλcosYACYAC含有酵母染色體端粒（telesome、著絲點(centromere)200-500kb的外源DNA，導入酵母細胞可以隨細胞分裂周期復(fù)制繁殖供作克隆，成為人基因組研究計劃的重要7、獲取目的基因的途徑？基因組文庫與cDNA基因文庫中基因的區(qū)別？獲取目的基因的途徑：DNAPCRDNAmRNA法獲得目的基因。DNADNADNADNADNA有基因，叫做生物的基因組文庫。cDNA文庫是以特定的組織或細胞mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成的互補DNA（cDNA）與適當?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌形成重組DNA克隆群，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNAcDNA8、常用選擇標記（報告）基因及其用途？最常用的報告基因大多是編碼抗生素抗性蛋白的基因， 通過檢查產(chǎn)物是否具有抗生素的抗性來確定基因的表達情況。、氯霉素乙?；D(zhuǎn)移酶(CAT)：可催化乙酰CoA的乙酰基轉(zhuǎn)移到氯霉素 3羥基，而使氯霉素解毒。CAT在哺乳細胞無內(nèi)源性表達，性質(zhì)穩(wěn)定，半衰期較短，適于瞬時表達研究。可用同位素、熒光素和酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbantassay，ELISA)檢測其活性，也可進行蛋白質(zhì)印跡 (Westernblotting)和免疫組織化學分析。CAT與其他報告基因相比，線性范圍較窄，靈敏性較低。 （2、β半乳糖苷酶：可催化半乳糖苷水解。最大優(yōu)勢是易于用免疫組織化學法觀測其原位表達，是最常用的監(jiān)測轉(zhuǎn)染率的報道基因之一。 （3）熒光素酶：將熒光素酶報告基因載體轉(zhuǎn)染到細胞中，可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達。 （4分泌型堿性磷酸酶(SEAP)SEAP可化D—熒光素—O—磷酸鹽水解生成 D—熒光素，后者又可作為熒光素酶的底物，此即兩步生物發(fā)光法檢測酶活性的原理。此方法靈敏度高，接近于熒光素酶報告基因的檢測。還可用一步化學發(fā)光法檢測酶活性。作為報告基因，在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件：(1)已被克隆和全序列已測定；(2)表達產(chǎn)物在受體細胞中本不存在，即無背景，在被轉(zhuǎn)染的細胞中無相似的內(nèi)源性表達產(chǎn)物；(3)其表達產(chǎn)物能進行定量測定。9、鑒定重組子的方法？第三章1、細胞工程：應(yīng)用細胞生物學和分子生物學的方法，通過類似于工程學的步驟在細胞整體水平或細胞器水平上，遵循細胞的遺傳和生理活動規(guī)律，有目的地制造細胞產(chǎn)品的一門生物技術(shù)。2、細胞融合：細胞融合是在自發(fā)或人工誘導下，兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。3、組織培養(yǎng)：應(yīng)用無菌操作方法培養(yǎng)生物的離體器官、組織或細胞，使其在人工條件下生長和發(fā)育的技術(shù)。4、次生代謝產(chǎn)物：次生代謝產(chǎn)物(Secondarymetabolites)是由次生代謝(Secondarymetablism)產(chǎn)生的一類細胞生命活動或植物生長發(fā)育正常運行的非必需的小分子有機化合物，其產(chǎn)生和分布通常有種屬、器官、組織以及生長發(fā)育時期的特異性。5、原生質(zhì)體：protoplast脫去細胞壁的植物、真菌或細菌細胞。是一生物工程學的概念。動物細胞也可算做原生質(zhì)體。6、不對稱融合：7、抗性互補篩選：8、體細胞無性系變異：9、人工種子：通過組織培養(yǎng)技術(shù)，把植物組織的細胞培養(yǎng)成在形態(tài)及生理上與天然種子胚相似的胚狀體，也叫作體細胞胚。這種體細胞胚有于葉、根、莖分生組織的結(jié)構(gòu)?？茖W家把體細胞胚包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu)，使其具備種子機能。10、單克隆抗體技術(shù)：將產(chǎn)生抗體的B抗體的技術(shù)。11、原生質(zhì)體培養(yǎng)：將細胞去除細胞壁后形成裸露的原生質(zhì)體，把原生質(zhì)體放在無菌的人工條件下使其生長發(fā)育的技術(shù)。（原生質(zhì)體培養(yǎng)的其特點是：①比較容易