新狼毒素 B 對化膿性感染治療作用的研究

新狼毒素B對化膿性感染治療作用的研究〔〕:

摘要：目的探究新狼毒素B對由金黃色葡萄球菌引起的小鼠皮膚化膿性感染的治療作用，觀察其能否有效治療局部皮膚化膿性感染，為臨床治療提供科學根據(jù)。方法選取40只清潔級6～7周齡昆明小鼠，適應性飼養(yǎng)1周后，建立40只由金黃色葡萄球菌引起的小鼠局部皮膚化膿感染模型，然后隨機分為新狼毒素B組、紅霉素組、魚石脂膏組及對照組，將上述藥物外敷于小鼠皮膚局部化膿處，連續(xù)給藥1周、1次/d，可根據(jù)局部感染范圍決定外敷用量，觀察一周內(nèi)化膿部位的皮膚變化。結(jié)果新狼毒素B對小鼠皮膚化膿性感染的治療效果明顯優(yōu)于魚石脂膏組〔P＜0.01〕及對照〔P＜0.01〕，與紅霉素組比擬差異不明顯〔P＞0.05〕。結(jié)論新狼毒素B對皮膚化膿性感染具有明顯治療效果。

關(guān)鍵詞：新狼毒素B；金黃色葡萄球菌；化膿性感染

本文引用格式：張書琳,范旭童,何愛玲,等.新狼毒素B對化膿性感染治療作用的研究[J].世界最新醫(yī)學信息文摘,2022,19(80):21-22.

TherapeuticEffectofNeochamaejasmineBonSuppurativeinfection

ZHANGShu-lin1,FANXu-tong1,HeAi-ling2,LIUWen-wen1,LIMing1*

(1.ShandongFirstMedicalUniversity,Tai'anShandong;2.LaboratoryofTaishansanatorium,Tai'anShandong)

ABSTRACT:ObjectiveToexplorethetherapeuticeffectofNeochamaejasmineBonskinsuppurativeinfectioninmicecausedbyStaphylococcusaureus,andtoobservewhetheritcaneffectivelytreatlocalskinsuppurativeinfection,soastoprovidescienti?cbasisforclinicaltreatment.MethodsFortyKunmingmiceaged6-7weekswereselectedandfedadaptivelyforoneweek.FortymicewithlocalskinpurulentinfectioncausedbyStaphylococcusaureuswereestablished.ThentheywererandomLydividedintoNeochamaejasmineBgroup,erythromycingroup,ichthyolgroupandcontrolgroup.Theamountofexternalapplicationwasdeterminedandtheskinchangesatthesuppurativesiteswereobservedwithinaweek.ResultsThetherapeuticeffectofNeochamaejasmineBwasbetterthanerythromycingroup(P＜0.05),ichthyolgroup(P＜0.05)andcontrolgroup(P＜0.01).ConclusionNeochamaejasmineBhasobvioustherapeuticeffectonskinsuppurativeinfection.

KEYWORDS:NeochamaejasmineB;Staphylococcusaureus;Suppurativeinfection

0引言

金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)是社區(qū)及醫(yī)院皮膚化膿性感染的主要致病菌，皮膚局部化膿性感染是指局部皮膚、皮下組織及肌肉筋膜的化膿性感染，其傳播途徑主要為細菌侵入破損皮膚、黏膜后引起的皮膚軟組織感染。金黃色葡萄球菌是需氧或兼性厭氧型革蘭陽性球菌的一種，廣泛分布在自然界和醫(yī)院環(huán)境中，金黃色葡萄球菌可以產(chǎn)生足夠數(shù)量的凝固酶和外毒素，致病性強。由金黃色葡萄球菌所引起的局部皮膚軟組織化膿性感染一般比擬嚴重，主要有癤、癰、膿疙瘡、毛囊炎、傷口感染、褥瘡感染等，有的患者可出現(xiàn)葡萄球菌菌血癥并伴有局部損害。

近年來,隨著廣譜抗生素和免疫抑制劑的廣泛應用，金黃色葡萄球菌的耐藥性日益嚴重，特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)引起的化膿性感染的發(fā)病率越來越高，導致治療困難。利用中藥成分治療金黃色葡萄球菌感染逐漸在臨床上開始應用，瑞香狼毒作為一種中醫(yī)普遍入藥抑菌的中草藥而受到了關(guān)注。新狼毒素B(NeochajasmineB)是一種存在于瑞香狼毒根中的天然雙黃酮化合物，具有抗菌譜廣、抗菌才能強和抗菌靶點新穎的特點，研究報道該化合物對多種植物病原菌和動物病原菌均具有良好的抑菌活性[1-2]。因其提取自中草藥，故藥效溫和且不易產(chǎn)生耐藥性，是一種理想的天然廣譜抗菌物質(zhì)。有研究說明，新狼毒素B在體外實驗中具有良好的抑制金黃色葡萄球菌生長的作用，但目前體內(nèi)實驗尚未進展。本工程通過建立小鼠金黃色葡萄球菌皮膚化膿性感染模型，觀察新狼毒素B局部外敷給藥后的治療效果，以期進一步討論新狼毒素B對金黃色葡萄球菌的抗感染作用。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1實驗動物

安康昆明小鼠40只，6～7周齡，體重20～25g，小鼠為SPF級，由本院實驗動物中心提供。飼養(yǎng)于獨立通風換氣籠中，置于標準實驗條件〔溫度：20～25℃，濕度：50%～70%〕中。動物實驗研究遵循國家制定的有關(guān)實驗動物保護和使用的指南，并經(jīng)山東第一醫(yī)科大學實驗動物倫理委員會批準。

1.1.2試驗菌株

金黃色葡萄球菌USA300為山東第一醫(yī)科大學微生物免疫實驗室保存。

1.1.3藥物

新狼毒素B購自武漢天植生物技術(shù)，紅霉素軟膏購自辰欣佛都藥業(yè)〔汶上〕消費，魚石脂膏購自合肥億城實驗儀器。

1.1.4主要試劑

0.9%生理鹽水購自泰安普天科技，75%酒精購自新鄉(xiāng)市新興生物科技，戊巴比妥鈉南京皇泰醫(yī)藥科技，靜脈留置針貼膜(3MTegadermFilmREF:1624W,USA)；無菌紗布；無菌膠布；皮膚打孔器〔直徑15mm打孔器〕均購自河南磊創(chuàng)醫(yī)療器械商貿(mào)。

1.2試驗方法

1.2.1小鼠化膿性感染模型的建立

實驗開始前對小鼠進展稱重記錄，1%的戊巴比妥鈉〔10mg/kg小鼠體重〕腹腔注射行麻醉處理。用小動物剃毛刀于麻醉后小鼠背部備皮處理，并用生理鹽水洗凈擦干小鼠背部皮膚，以便后續(xù)傷口處貼膜固定。在完成脫毛處理后將小鼠背部朝上妥善固定于小動物試驗臺上，用75%酒精對小鼠背部進展消毒處理，準備手術(shù)。將打孔器與皮膚接觸頭進展消毒，后在小鼠背部行皮膚打孔處理，過程中保證無菌，打孔深度到達破壞肌肉層為止。用無菌紗布或者棉簽擦拭傷口部位，以到達對傷口止血和去除傷口處血液。向小鼠傷口處滴加108CFU/mL金黃色葡萄球菌菌液100L。用留置針貼膜妥善封閉傷口處，確保貼膜可以與皮膚嚴密貼附，貼膜周圍用臨床無菌膠布再次固定，確保細菌可以足夠時間的與傷口處組織接觸[3-4]。待小鼠麻醉清醒后將每只小鼠單獨置于獨立通氣飼養(yǎng)籠(IVC)中飼養(yǎng)，飼養(yǎng)過程中對小鼠的生存狀態(tài)、傷口感染變化情況等進展觀察拍照記錄，直至傷口處明顯感染灶形成。

1.2.2試驗分組

把制備的皮膚化膿性感染小鼠模型常規(guī)飼養(yǎng)，48h傷口處出現(xiàn)明顯化膿灶顯示造模成功。將40只小鼠局部化膿感染模型隨機分為4組，每組10只，分別為新狼毒素B組、紅霉素組、魚石脂膏組及不用任何藥物的對照組。

1.2.3給藥方法

因新狼毒素B的水溶性差，為使其能很好的分散在外敷敷料中，選用DMSO做助溶劑。將新狼毒素B、紅霉素與魚石脂膏外敷于小鼠背部局部化膿感染處，根據(jù)局部感染范圍決定外敷藥量，連續(xù)給藥1周、1次/d。為防止小鼠舔舐，用藥后用透氣敷料保護傷口。

1.2.4觀察指標及評價標準

造模后觀察感染灶情況及小鼠精神狀況、進食情況、反響速度等。療效斷定標準：1周內(nèi)膿栓脫落，膿液排出，傷口結(jié)痂，紅腫等炎癥完全消退為顯效；1周內(nèi)紅腫范圍縮小，仍有小膿栓，傷口未完全枯燥，炎癥未全消退為有效；1周內(nèi)病灶無明顯變化為無效。

1.2.5統(tǒng)計學處理

計量資料采用均數(shù)標準差〔s〕表示；使用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件包進展統(tǒng)計學分析；計數(shù)資料采用卡方檢驗，計量資料比擬采用方差分析(P＜0.05)為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1皮膚化膿性感染模型的建立

于小鼠傷口處滴加108CFU/mL金黃色葡萄球菌懸液100L，造模成功率可達100%。建模24h后，小鼠精神狀態(tài)明顯變差，反響較慢，進食和飲水減少。傷口在24h左右初步形成淡黃色膿胎，48h可以看到明顯的黃色膿胎形成，且感染傷口處較潮濕，局部小鼠傷口有黃色膿液流出。

2.2新狼毒素B的治療效果

新狼毒素B組顯效9只〔90%〕，有效1只〔10%〕，總有效率100%；紅霉素組顯效6只〔60%〕，有效3只〔30%〕，總有效率90%；魚石脂膏組顯效3只〔30%〕，有效4只〔40%〕，總有效率70%；對照組顯效0只〔0%〕，有效2只〔20%〕，總有效率20%，見表1。

3討論

皮膚局部化膿性感染是指局部皮膚、皮下組織及肌肉筋膜的化膿性感染，感染的起因常是機體自身防御才能遭破壞，病原菌由破損的皮膚、黏膜侵入所致，感染處皮膚紅腫、皮溫增高、壓痛、硬結(jié)、硬塊或向心性蔓延的紅痛條狀物，膿腫形成時局部有波動感，甚至出現(xiàn)壞死、潰瘍及功能障礙【5】。金黃色葡萄球菌是引起局部化膿性感染最常見的細菌,金黃色葡萄球菌引起的感染也一直是我國醫(yī)院感染和社區(qū)感染的主要病原菌【6】。

近年來,由于各種抗菌藥物的不合理使用，MRSA的檢出率逐年增加并呈現(xiàn)多重耐藥的趨勢,給臨床治療帶來了極大的困難。利用中藥成分治療該菌感染可視為解決這一問題的有效方法。瑞香狼毒,多年生草本植物,瑞香科,狼毒屬,生長于溫帶地區(qū)【7】。瑞香狼毒化學成分復雜,目前研究的主要是該植物的黃酮類、木脂素、香豆素、二萜等成分。瑞香狼毒具有多種藥理活性,如抗腫瘤活性、抗病毒活性、抗驚厥、抗癲癇活性以及抗菌活性等[8-9]?？赡芘c其散結(jié)逐瘀之成效有關(guān)，中醫(yī)普遍以狼毒入藥抑菌。新狼毒素B是一種存在于瑞香狼毒根中的天然雙黃酮化合物，有試驗結(jié)果說明該化合物對多種植物病原菌和動物病原菌具有良好的抑菌活性，其抗菌譜廣、抗菌才能強和抗菌靶點新穎，是一種理想的天然廣譜抗菌物質(zhì)。

本實驗應用新狼毒素B治療小鼠局部皮膚化膿感染獲得了明顯效果。我們采用皮膚局部化膿性感染最常見的致病菌金黃色葡萄球菌作為致病菌，建立小鼠皮膚局部化膿性感染模型，將新狼毒素B外敷用藥，證實新狼毒素B對皮膚化膿性感染具有良好的治療效果。結(jié)果說明新狼毒素B治療效果明顯優(yōu)于魚石脂膏組〔P＜0.01〕及對照組〔P＜0.01〕，與紅霉素組比擬差異不明顯〔P＞0.05)說明新狼毒素B能有效地控制皮膚化膿性感染，可作為治療皮膚化膿性感染的有效藥物之一，臨床可以試用[10]。

參考文獻

【1】李福華.新狼毒素B的抑菌活性構(gòu)效關(guān)系研究IV[D].陜西:西北農(nóng)林科技大學,2022.

【2】李曉惠,項勛,唐曉萍,等.瑞香狼毒研究進展[J].動物醫(yī)學進展,202