動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體課件-高二下學(xué)期生物人教版選修3

1．闡明動(dòng)物細(xì)胞融合的概念。2．說出植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的區(qū)別。3．闡明單克隆抗體制備的基本流程。4．分析單克隆抗體制備過程中兩次篩選所使用的方法和達(dá)到的目的。5．關(guān)注藥物供給的“靶向”技術(shù)。學(xué)習(xí)目標(biāo)1．概念：動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。

融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。3．原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性2．結(jié)果：與植物原生質(zhì)體融合的方法相同物理方法：動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，可以直接誘導(dǎo)融合。離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）法生物方法：滅活病毒誘導(dǎo)法——?jiǎng)游锛?xì)胞融合特有4．動(dòng)物細(xì)胞融合的方法思考：19世紀(jì)30年代，科學(xué)家曾在肺結(jié)核、天花和麻疹等疾病的病人的病理組織中觀察到多核細(xì)胞。如何解釋這一現(xiàn)象？病人體內(nèi)病毒等誘導(dǎo)多個(gè)體細(xì)胞融合形成了多核細(xì)胞。肺結(jié)核病人病理切片原理是什么？01原理

病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝集，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。教材P52“生物技術(shù)資料卡”滅活：是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。

人細(xì)胞小鼠細(xì)胞細(xì)胞融合雜交細(xì)胞37℃40min紅色熒光染料標(biāo)記的膜蛋白綠色熒光染料標(biāo)記的膜蛋白用熒光染料標(biāo)記某種物質(zhì)，利用其熒光特性，來反應(yīng)研究對(duì)象的相關(guān)信息。熒光標(biāo)記技術(shù)1970年弗雷和埃迪登(Frye和Edidin)人鼠細(xì)胞雜交實(shí)驗(yàn)：注意說明動(dòng)物細(xì)胞融合與受精作用的區(qū)別（1）受精作用：是在同種生物之間進(jìn)行的，精子與卵細(xì)胞的融合不需要任何誘導(dǎo)劑，受精卵內(nèi)具備同種生物的兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)。（2）動(dòng)物細(xì)胞融合可在不同物種間進(jìn)行，由于物種間存在生殖隔離，所以自然條件下不能融合成雜交細(xì)胞，必須有誘導(dǎo)劑才能融合。形成的雜交細(xì)胞具備兩個(gè)親本細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，從而體現(xiàn)兩個(gè)親本的遺傳特性。4．誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）5．意義：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體6．應(yīng)用：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的比較植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合前的處理方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合成功的標(biāo)志主要用途意義細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性用果膠酶和纖維素酶去除細(xì)胞壁用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞物理法：離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）物理法和化學(xué)法滅活病毒誘導(dǎo)法再生出細(xì)胞壁細(xì)胞核的融合獲得完整的雜種植株主要用于制造單克隆抗體打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能新聞1：“血清/漿療法”是否可以治療新冠？國家衛(wèi)健委發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第五版）》中，增加了“恢復(fù)期血漿治療”，并建議適用于病情進(jìn)展較快、重型和危重型患者?！把瀵煼ā痹恚寒?dāng)病原體入侵人體時(shí)，免疫系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生抗體，將抗體鎖在敵人身上，將其標(biāo)記為被破壞?；謴?fù)后，這些抗體會(huì)在人的血液中循環(huán)流通數(shù)月至數(shù)年。從理論上講，將其中一些抗體轉(zhuǎn)移給具有相同病毒的其他人可以幫助他們的身體抵抗它?；蛘?，將這些抗體提供給健康的人，例如前線的醫(yī)護(hù)人員，可能會(huì)為感染提供一些臨時(shí)保護(hù)。新聞2：抗疫新招！玻利維亞開發(fā)驢血漿抗新冠血清玻利維亞《時(shí)代報(bào)》5月19日?qǐng)?bào)道，玻利維亞國家衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室正在三頭驢身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其產(chǎn)生的血清對(duì)新冠病毒的有效性估計(jì)“比人類血漿生成的血清至少高50倍”。動(dòng)物血漿產(chǎn)生的血清與人類的不同，因?yàn)閯?dòng)物血清是經(jīng)過多次“感染-免疫”過程產(chǎn)生的，而人類血漿產(chǎn)生的血清僅經(jīng)過了一次免疫過程，所以動(dòng)物產(chǎn)生的血清比人類的要“更濃縮”，抗病毒效果也會(huì)更強(qiáng)。提出問題：驢血漿抗體治療方法有沒有局限性呢？

自學(xué)教材P52－P53，回答下列問題：1．傳統(tǒng)方法生產(chǎn)抗體的缺點(diǎn)？2．什么是單克隆抗體？3．課后查閱資料人體編碼蛋白質(zhì)的基因大約有25000個(gè)，那為什么體內(nèi)產(chǎn)生的抗體能多達(dá)百萬種以上？抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：從血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn)：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。多種漿細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原1、為什么產(chǎn)量低？2、為什么純度低？3、為什么特異性差？血清中有多種抗體因?yàn)檠逯杏卸喾N抗體，會(huì)攻擊多種抗原漿細(xì)胞數(shù)量有限（高度分化、分裂能力弱）讀下面一段資料，找出單克隆抗體的概念人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。因此，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B細(xì)胞，形成細(xì)胞群。單克隆抗體的概念單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B細(xì)胞克隆形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？問題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案。提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和骨髓瘤細(xì)胞無限增殖能力同時(shí)具備呢？雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖的細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖

+一個(gè)漿細(xì)胞只分泌一種特異性抗體設(shè)計(jì)方案?米爾斯坦科勒BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞√體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖。如何篩選出培養(yǎng)液中的雜交瘤細(xì)胞？①細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。②人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，沒有S途徑，可是能不斷分裂增殖。你想到篩選雜交瘤細(xì)胞的方案了么？淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞S途徑D途徑D途徑S途徑D途徑合成DNA合成DNA合成DNA不能無限增殖能無限增殖能無限增殖經(jīng)過選擇性培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞群進(jìn)行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體？還需怎么辦？1．單克隆抗體的制備問題思考1．單克隆抗體的制備

※知識(shí)拓展：如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)及抗體檢測(cè)？融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用“有限稀釋法”來選擇。陽性孔多孔板專一抗體陽性檢驗(yàn)有限稀釋法通過適當(dāng)?shù)南♂屵_(dá)到分離單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的目的。（1）取出陽性孔培養(yǎng)液將其稀釋到每毫升10個(gè)細(xì)胞。（2）如果在多孔板中每孔加0．1毫升，使每孔內(nèi)落入一個(gè)細(xì)胞。（3）根據(jù)檢測(cè)的陽性結(jié)果再次進(jìn)行克隆化。項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選（需要多次篩選）篩選原因方法篩選結(jié)果誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，還有未融合細(xì)胞等用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長。篩選出融合的雜種細(xì)胞選擇培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞。用96孔板培養(yǎng)，在每個(gè)孔中盡量接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過多次篩選得到足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。篩選出分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞項(xiàng)目腹腔培養(yǎng)體外培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)易于控制培養(yǎng)條件（如無需提供無菌環(huán)境等），操作簡(jiǎn)單，成本較低規(guī)模小，產(chǎn)量少可大規(guī)模培養(yǎng)，大量生產(chǎn)需要人為控制培養(yǎng)條件，成本相對(duì)較高相關(guān)技術(shù)和原理：動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖2．單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。由于單克隆抗體純度高、特異性強(qiáng)，所以能準(zhǔn)確地識(shí)別各種______物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生_____________，因此，單克隆抗體在診斷的應(yīng)用上，具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。作為診斷試劑抗原特異性結(jié)合抗（人絨毛膜促性腺激素）單克隆抗體

在受精后不久，胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞就會(huì)分泌人絨毛膜促性腺激素(HCG)，是由受孕婦女體內(nèi)胎盤產(chǎn)生的一種糖蛋白類激素，在孕婦的尿液中大量存在。而在非妊娠婦女尿液中幾乎不含有。

正常的性成熟女性每個(gè)月都會(huì)排卵，最佳受精時(shí)間為排卵后24-36小時(shí)。在女性的月經(jīng)周期中，尿液中的促黃體生成素（SH）會(huì)在排卵前24小時(shí)左右出現(xiàn)高峰值。據(jù)此可推測(cè)，排卵試紙起核心作用的物質(zhì)是_____________________________?？勾冱S體生成素單克隆抗體2．單克隆抗體的應(yīng)用作為診斷試劑用于治療疾病和運(yùn)載藥物2．單克隆抗體的應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)：位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小如果把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“____________”，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的______作用，能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞。生物導(dǎo)彈導(dǎo)向2．單克隆抗體的應(yīng)用2．單克隆抗體的應(yīng)用2017年全球銷售額前五的單抗藥物商品名中文名稱公司適應(yīng)癥2017年銷售額(億美元）Humria阿達(dá)木單抗Abbbie自身免疫性疾病184．21rituxan利妥昔單抗Roche白血病等73．88Herceptin曲妥珠單抗Roche乳腺癌等多種癌癥70．14Avastin貝伐珠單抗Roche結(jié)腸癌等多種癌癥66．88Remicade英夫利昔單抗J&J/MSD自身免疫性疾病63．152018諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)公布：讓治愈癌癥成為現(xiàn)實(shí)美國免疫學(xué)家詹姆斯·艾利森（JamesPAlison）日本免疫學(xué)家本庶佑（TasukuHonjo）Tc細(xì)胞PD-1PD-L1Tc細(xì)胞PD-1PD-L1癌細(xì)胞癌細(xì)胞細(xì)胞膜具有流動(dòng)性物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒形成雜交細(xì)胞突破了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙制備單克隆抗體單克隆抗體雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞群分泌特異抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選二體外或體內(nèi)培養(yǎng)篩選一

誘導(dǎo)融合提取動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)單克隆抗體的制備既能大量繁殖又能產(chǎn)生專一抗體特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備骨髓瘤細(xì)胞已免疫的B淋巴細(xì)胞注射抗原請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。

1．關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的比較，下列敘述合理的是(

)A．均可使用PEG、電激或滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離C．兩者都可以體現(xiàn)細(xì)胞的全能性D．在適宜條件下，均可發(fā)育成完整個(gè)體B2．科學(xué)家以乙肝病毒的核衣殼蛋白為抗原，制備出了單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．利用該單克隆抗體可以診斷是否感染乙肝病毒B．體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得針對(duì)乙肝病毒的單克隆抗體C．將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞D．將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，從小鼠血清中分離出的抗體為單克隆抗體A3．20世紀(jì)30年代，科學(xué)家們相繼在肺結(jié)核，天花，水痘，麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細(xì)胞，這些多核細(xì)胞可能的來源是（）A．體細(xì)胞在有絲分裂過程中，染色體完成了復(fù)制，紡錘體的形成受到損壞，導(dǎo)致細(xì)胞不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞而形成多核細(xì)胞B．體細(xì)胞在有絲分裂過程中，體內(nèi)的有關(guān)病毒阻礙了細(xì)胞的分裂過程，導(dǎo)致細(xì)胞不能一次形成兩個(gè)子細(xì)胞而形成多核細(xì)胞C．患者的體細(xì)胞在病毒誘導(dǎo)下，由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核直接融合形成了多核細(xì)胞D．患者體內(nèi)的病毒直接誘導(dǎo)多個(gè)體細(xì)胞的細(xì)胞融合而形成多核細(xì)胞D4．(2019江蘇改編)如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT－)，在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述錯(cuò)誤的是A．可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C．雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D．細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)√D、SDDD、SD、S5．Graves病(GD)可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn)，GD患者甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)大量細(xì)胞間黏附分子1(ICAM－1)，導(dǎo)致甲狀腺腫大。科研人員通過制備單克隆抗體，對(duì)治療GD進(jìn)行了嘗試。(1)用ICAM－1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠，幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入____________以檢測(cè)這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出抗原—抗體反應(yīng)最____________(填“強(qiáng)”或“弱”)的培養(yǎng)孔所對(duì)應(yīng)的小鼠M。ICAM－1強(qiáng)(2)取小鼠M的脾臟細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，與實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有______________能力的細(xì)胞。核酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如圖)。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?？捎眉尤際、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”篩選出特定的雜交瘤細(xì)胞。無限增殖DS融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中____________(填“有”或“無”)骨髓瘤細(xì)胞生長，說明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。雜交瘤細(xì)胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是__________________________________。(3)將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM－1檢測(cè)，從中選擇_____________的雜交瘤細(xì)胞，將其植入小鼠腹腔中進(jìn)行克隆培養(yǎng)，一段時(shí)間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體。無雜交瘤細(xì)胞可以進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑大量產(chǎn)生抗ICAM－1抗體D途徑S途徑6．（2014新課標(biāo)Ⅰ卷）某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：①制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_______次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是__________小鼠，理由是__________________________。4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高②細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_______________________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_____________________________________。③雜交瘤細(xì)胞中有_____個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_______條。④未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是___________________。B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融且融合率達(dá)不到100%合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，1100不能無限增殖7．(2020全國Ⅰ卷)為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。回答下列問題：(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是_____________________________________________________。誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞《一輪復(fù)習(xí)講義》P365(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于____________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是_______________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是___________________________。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：___________________________________________________________________________________________。

取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性8．“生物導(dǎo)彈”是免疫導(dǎo)向藥物的形象稱呼，由單克隆抗體與藥物結(jié)合而成，單克隆抗體的制備過程如圖所示。(1)若只考慮細(xì)胞兩兩融合，B過程會(huì)獲得

種類型的細(xì)胞。經(jīng)特定選擇培養(yǎng)基篩選后，

和融合的

的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。

3具有同種核未融合的親本細(xì)胞(2)圖示過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是

。

(3)“生物導(dǎo)彈”中單克隆抗體的作用是

。

(4)除“生物導(dǎo)彈”外，請(qǐng)說出單克隆抗體在臨床上的其他應(yīng)用(答出兩點(diǎn))。

小鼠形成的抗體對(duì)人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)將藥物定向運(yùn)到靶細(xì)胞作為診斷試劑；單克隆抗體自身也能用于治療疾病。通過改造基因，將小鼠抗體上結(jié)合抗原的區(qū)域（即可變區(qū)）“嫁接”到人的抗體（即恒定區(qū)）上，經(jīng)過這樣改造的抗體誘發(fā)免疫反應(yīng)的強(qiáng)度就會(huì)減低很多?？贵w的人源化改造多克隆抗體單克隆抗體基因工程抗體蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)抗體CHO細(xì)胞科學(xué)家從某些無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因（prG），可將prG基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞中，導(dǎo)入prG基因的漿細(xì)胞具有的特點(diǎn)是