DB37-T 3321-2018 蔬菜中涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ICS 67.050X04

DB37山 東 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB37/T3321—20181120182018061220180712山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布前 言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：吳成、王蕾、趙志強、任海雷。11質(zhì)譜法范圍11（A)殘留量液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于菠菜、豇豆、番茄、甘藍(lán)、黃瓜和韭菜中涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定，其它蔬菜可參照執(zhí)行。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2763食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理3原理試樣用乙腈勻漿提取，鹽析離心后，取上清液，過濾后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測，外標(biāo)法定量。4試劑和材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為色譜純，水為符合GB/T6682中規(guī)定的一級水。試劑a)乙腈(CH3CN，75-05-8)。b)甲醇(CH3OH，67-56-1)。c)甲酸(CH2O2，64-18-6)。d)醋酸銨(C2H7NO2，631-61-8)。e)氯化鈉(NaCl，7647-14-5)，分析純，140℃烘烤4h。溶液配制0.1%甲酸+5mmol/L醋酸銨水溶液：準(zhǔn)確移取1mL甲酸和稱取0.385g醋酸銨于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，現(xiàn)配現(xiàn)用。4.3標(biāo)準(zhǔn)品11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品信息參照附錄A；標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液分別準(zhǔn)確稱取適量（精確至0.1mg）農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(或購買有證標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液)，0～4℃保存，保存期為6個月。中間標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（4.4.1），用甲醇稀釋配制成10mg/L的7種農(nóng)藥及代謝物中間標(biāo)準(zhǔn)溶液，0～4℃保存，保存期為1個月?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)工作溶液準(zhǔn)確吸取適量的中間標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.4.2），用甲醇稀釋配制成所需濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。材料微孔過濾膜：有機系，0.22μm。5儀器和設(shè)備b)b)0.0001g0.01g；組織搗碎機；旋渦混合器；15000r/min；5000r/min；6試樣制備蔬菜樣品取樣部位按照GB2763附錄A均分成兩份，裝入潔凈的盛樣容器內(nèi)，密封并標(biāo)明標(biāo)記。應(yīng)將試樣于-18℃冷凍保存。7分析步驟提取稱取15g試樣（精確至0.01g）于100mL離心管中，加入30mL乙腈，用均質(zhì)器在12000r/min勻漿提取2min6g氯化鈉，再勻漿提取1min，3500r/min離心5min，取上清液約2mL，用0.22μm濾膜過濾，待測。測定液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜參考條件色譜柱：Shim-packXR-ODSⅢ色譜柱，50mm2.0mm（i.d.），1.6μm，或相當(dāng)者。流動相：A0.1+5mmol/L（4.2），B1，流速：0.35mL/min；c)柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：10.0μL；掃描方式：正/負(fù)離子模式；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)B；加熱塊溫度：400℃；脫溶劑管(DL)溫度：250i)干燥氣（N2）流速：15.0L/min，純度≥99.999%；j)霧化氣（N2）流速：3.0L/min，純度≥99.999%；電噴霧正離子源(ESI+)接口電壓：4.5kV；電噴霧負(fù)離子源(ESI-)接口電壓：-3.5kV；檢測器電壓：1.74kV。表1梯度洗脫程序時間/minA/%B/%0.590102.050505.050509.059511.559513.09010注以上質(zhì)譜條件是在SHIMADZULCMS-8040定性測定2）或采用增加其他確證離子的方式或用其他靈敏度更高的分析儀器來確證。表2定性時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%允許相對偏差±20%±25%±30%±50%定量測定7AC?？瞻自囼灣环Q取試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。平行試驗按以上步驟對同一試樣進(jìn)行平行測定。8結(jié)果計算和表述液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定結(jié)果可由計算機按外標(biāo)法自動計算，也可按式(1)計算：SV1AV3S式中：

A

V2

...................................(1)ω——質(zhì)量分?jǐn)?shù)，指試樣中各農(nóng)藥及代謝物殘留量，單位為毫克每千克（mg/kg）；——標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥及代謝物的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）；A——樣品溶液中農(nóng)藥及代謝物的峰面積；AS——農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥及代謝物的峰面積；V1——提取溶劑總體積，單位為毫升（mL）；m——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字，含量超過1mg/kg9精密度（計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字，含量超過1mg/kg9精密度（百分率附錄E。（百分率F。10定量限和回收率定量限本方法的定量限(LOQ)參照附錄A?；厥章蔐OQ2×LOQ20×LOQD。附錄A（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號、保留時間、定量限和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號、保留時間和定量限，參照表A.1。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖參照圖A.1。表A.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號、保留時間和定量限序號中文名稱英文名稱分子式CAS號保留時間/min定量限1乙酰甲胺磷AcephateC4H10NO3PS30560-19-11.310.0052涕滅威亞砜Aldicarb-sulfoxideC7H14N2O3S1646-87-32.000.00533-羥基克百威3-HydroxycarbofuranC12H15NO416655-82-63.030.0054涕滅威AldicarbC7H14N2O2S116-06-33.590.0055水胺硫磷IsocarbophosC11H16NO4PS24353-61-56.670.0056嘧菌酯AzoxystrobinC22H17N3O5131860-33-87.470.0057除蟲脲DiflubenzuronC14H9ClF2N2O235367-38-58.450.0058甲基異柳磷Isofenphos-methylC14H22NO4PS99675-03-38.560.0059苯醚甲環(huán)唑DifenoconazoleC19H17Cl2N3O3119446-68-39.040.00510二甲戊樂靈PendimethalinC13H19N3O440487-42-19.720.00511阿維菌素AbamectinC49H74O1471751-41-210.180.0051-乙酰甲胺磷2-涕滅威亞砜3-3-羥基克百威4-涕滅威5-水胺硫磷6-嘧菌酯7-除蟲脲8-甲基異柳磷9-苯醚甲環(huán)唑10-二甲戊樂靈11-阿維菌素圖A.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖附錄B（資料性附錄）11涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測離子對、碰撞氣能量和碎裂電壓，參照表B.1。表B.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測離子對、碰撞氣能量和碎裂電壓序號化合物名稱電離模式母離子子離子Q1/VCE/VQ3/V相對離子強度/%1乙酰甲胺磷+201143*-30-15-3011.1125-30-21-132涕滅威亞砜+22489*-24-19-1811.6132-24-22-2533-羥基克百威+238163*-16-14-3074.5181-16-11-204涕滅威+20889*-13-15-1837.7116-13-15-245嘧菌酯+404344*-15-28-1574.9372-15-28-156水胺硫磷+307231*-23-14-2654.5273-30-7-297除蟲脲-30915630192671.9289*1417178甲基異柳磷+332231*-22-17-2511.4273-22-14-149苯醚甲環(huán)唑+406251*-27-27-2819.3111-27-55-2010二甲戊樂靈+282212-15-30-1557.2194*-15-30-1511阿維菌素+895.5751.5-32-50-1581.1449.3*-32-50-22附錄C（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）質(zhì)譜圖1:乙酰甲胺磷TIC(+)1:乙酰甲胺磷TIC(+)CECE12575000

Inten.(x10,000)

0

0.0

圖C.1乙酰甲胺磷質(zhì)譜圖

5:涕滅威亞砜TIC(+)5:涕滅威亞砜TIC(+)CECE89132

Inten.(x10,000)9:3-羥基克百威9:3-羥基克百威TIC(+)(+)CE:-CE:-1630120圖C.2涕滅威亞砜質(zhì)譜圖02.82.93.03.13.23.33.43.53.63.7minm/z圖C.33-羥基克百威質(zhì)譜圖0

4:涕滅威TIC(+)4:涕滅威TIC(+)4:涕滅威208.00>116.00(+)CE:-15.04:涕滅威208.00>89.00(+)CE:-15.0

Inten.(x100,000)8989116圖C.4涕滅威質(zhì)譜圖7:水胺硫磷7:水胺硫磷TIC(+)7:水胺硫磷307.00>231.00(+)CE:-14.07:水胺硫磷307.00>273.00(+)CE:-7.0

Inten.(x100,000)0

231273231273

3443723443728:嘧菌酯8:嘧菌酯TIC(+)CECE

2.0

Inten.(x100,000)16:除蟲脲16:除蟲脲TIC(-)CECE1562891.51.51.00.500.0圖C.6嘧菌酯質(zhì)譜圖0250m/z圖C.7除蟲脲質(zhì)譜圖9:甲基異柳磷9:甲基異柳磷TIC(+)CECE0

Inten.(x1,000,000)231231273

圖C.8甲基異柳磷質(zhì)譜圖11:苯醚甲環(huán)唑11:苯醚甲環(huán)唑TIC(+)CECE

Inten.(x100,000)0

0.0

25111119425111119412:二甲戊樂靈12:二甲戊樂靈TIC(+)CECE

3.0

Inten.(x1,000)13:阿維菌素13:阿維菌素TIC(+)CE:-CE:-4497512.01.000.0圖C.10二甲戊樂靈質(zhì)譜圖3.02.01.000.0圖C.11阿維菌素質(zhì)譜圖附錄D（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率，參照表D.1。表D.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率化合物名稱添加水平(mg/kg)菠菜（%）豇豆（%）番茄（%）甘藍(lán)（%）黃瓜（%）韭菜（%）乙酰甲胺磷0.00564～8462～9062～8866～8662～9464～840.0166～8766～8963～8971～10168～8366～980.172～10674～9271～11170～9275～9076～97涕滅威亞砜0.00562～8066～9066～8670～9464～10666～860.0170～9080～10569～9977～9970～9364～1100.170～9266～10979～10379～10779～10989～1053-羥基克百威0.00564～8474～10068～10476～11464～12066～1080.0169～11173～10872～9381～10975～10070～1100.176～10974～11178～10278～10678～10971～115涕滅威0.00570～10474～10674～11072～10664～10472～980.0161～11368～10974～10873～11379～11366～1080.174～10674～10878～11570～11874～11078～111水胺硫磷0.00570～11872～10474～10472～10866～10470～1040.0165～10168～10672～10871～11372～10469～980.175～10876～10976～11077～11478～11179～103嘧菌酯0.00572～10876～10674～10676～9872～9670～980.0167～11271～10475～10676～10876～10069～1010.177～10481～10589～10782～10482～10280～109甲基異柳磷0.00570～8668～8066～9064～8866～10270～900.0181～11072～9873～10877～9774～9568～1130.184～11076～10684～10878～9682～10580～107苯醚甲環(huán)唑0.00572～11472～10068～11272～9272～10668～1060.0168～11068～9773～11171～9178～9369～990.175～10982～11083～11072～10284～1108