微生物檢驗(yàn)操作步驟

微生物檢驗(yàn)操作步驟微生物檢驗(yàn)操作步驟微生物檢驗(yàn)操作步驟V:1.0精細(xì)整理，僅供參考微生物檢驗(yàn)操作步驟日期：20xx年X月樣品制備：取樣品10g/ml加入至90ml滅菌生理鹽水中，混勻，制成1︰10的稀釋液；菌落總數(shù)：（結(jié)果報(bào)告：XXXcfu/g(ml)）取上述1︰10的稀釋液1ml加入至9ml滅菌生理鹽水中，充分混勻，制成1︰100的稀釋液；取上述兩個(gè)稀釋級(jí)的稀釋液分別加入2塊平皿中，每塊平皿中加20ml，然后往平皿中倒入約45℃的卵磷脂吐溫80瓊脂培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基凝固，倒置放于36+/-1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。霉菌和酵母菌：操作同菌落總數(shù)，加入的培養(yǎng)基為虎紅培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基凝固，倒置放于℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，分別點(diǎn)計(jì)霉菌和酵母菌數(shù)。糞大腸菌群：（結(jié)果報(bào)告（未）檢出/）取上述1︰10的稀釋液10ml加入至10ml雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基中，搖勻，置44℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h；如果培養(yǎng)物產(chǎn)酸產(chǎn)氣（現(xiàn)象為培養(yǎng)基呈黃色，小倒管內(nèi)有氣泡），則應(yīng)取培養(yǎng)物分別接種至伊紅美藍(lán)瓊脂平板于37℃培養(yǎng)18-24h和蛋白胨水培養(yǎng)基中于44℃培養(yǎng)24h。在上述平板上，糞大腸菌群呈深紫黑色、圓形突起的菌落，并有金屬光澤。挑取分離的單個(gè)菌落，進(jìn)行革蘭氏染色和鏡檢，在顯微鏡下應(yīng)觀察到紅色短桿狀的菌。挑取菌落時(shí)，應(yīng)使滅菌的接種環(huán)冷卻后再行操作。上述蛋白胨水培養(yǎng)基的培養(yǎng)物還需做靛基質(zhì)試驗(yàn)，陽性現(xiàn)象為培養(yǎng)物表層出現(xiàn)玫瑰紅色。銅綠假單胞菌：（結(jié)果報(bào)告（未）檢出/）取上述1︰10的稀釋液10ml加入至90mlSCDLP培養(yǎng)基中，搖勻，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24h；挑取上述培養(yǎng)物，接種至十六烷基三甲基溴化銨瓊脂平板于37℃培養(yǎng)18-24h；在該平板上，銅綠假單胞菌應(yīng)為灰白色色、圓形濕潤(rùn)的菌落，周圍培養(yǎng)基溶有水溶性色的色素；挑取分離的單個(gè)菌落，染色鏡檢，在顯微鏡下應(yīng)觀察到紅色桿狀的菌。如果平板上只分離到1個(gè)可疑菌落，不夠做生化試驗(yàn)，則應(yīng)挑取該菌落于SCDLP增菌培養(yǎng)。取分離的菌落分別做氧化酶試驗(yàn)、綠膿菌素試驗(yàn)、硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)、明膠液化試驗(yàn)和42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)。金黃色葡萄球菌：增菌培養(yǎng)同銅綠假單胞菌項(xiàng)下，挑取上述增菌液的培養(yǎng)物，接種至B-P平板于37℃培養(yǎng)24-48h；在該平板上，金黃色葡萄球菌應(yīng)為灰黑色、圓形的菌落，菌落周圍有混濁帶和透明環(huán)挑取分離的單個(gè)菌落，染色鏡檢，在顯微鏡下應(yīng)觀察到紫色球狀的