微生物檢查中無菌操作注意事項

微生物檢查中無菌操作注意事項微生物檢查中無菌操作注意事項微生物檢查中無菌操作注意事項V:1.0精細整理，僅供參考微生物檢查中無菌操作注意事項日期：20xx年X月微生物檢查中無菌操作注意事項一、關于采用酒精棉球消毒的注意事項1.用酒精棉球擦拭雙手，包括手掌、手背，尤其是手指，更換一個酒精棉球擦拭酒精燈附近（約10cm）桌面。2.點燃酒精燈，在酒精燈附近拆器皿包裝，并對器皿做相應標記。3.用酒精棉球再次擦拭雙手，開始實驗操作。4.消毒用酒精棉球濕度以不擠壓出酒精為宜。二、關于酒精燈正確使用的注意事項1.酒精量以大于1/3，小于2/3為正確量。2.防風罩應小口朝上放置于酒精燈上，反過來放置會導致氧氣沒有充分燃燒。3.使用酒精燈前要檢查燈芯帽是否蓋得太緊，以防酒精不能上升，影響酒精燈燃燒。點燃酒精燈時嚴禁兩個酒精燈對點。4.熄滅酒精燈方法：先用燈芯帽扣壓并熄滅火焰，再揭帽重新扣壓一次。這樣可防止蒸汽倒吸燈帽，再次使用酒精燈時難以揭開燈帽。5.做樣品稀釋及從試管取樣實驗時，酒精燈應放在操作人員和試管架之間，便于無菌操作。三、關于吸量管使用的注意事項1.左手拿洗耳球，右手持吸量管，用右手食指平按住吸量管的頂部。2.吸取樣品后進行定量時，吸量管吸液口應貼附于試管內壁；放樣時，吸量管吸液口也應貼附于試管約1/2內壁，不應貼附在管口處放液。吸量管應盡可能垂直放液。3.用吸量管往空平皿加入1ml溶液時，吸量管應貼附于平皿底部中央位置放液；用吸量管在平板上加入0.1ml溶液做涂布接種時，吸量管應垂直、懸空放液于平板中央。4.因吸量管拆封包裝后應馬上使用，故無須對吸量管吸液口過火焰消毒。5.整個取樣放樣的過程應盡可能保證試管口或錐瓶口靠近酒精燈火焰附近。四、關于樣品梯度稀釋的注意事項1.從試管架上取出所需試管于酒精燈火焰附近拔出試管塞，并在火焰外焰處對試管口過火焰進行消毒。2.將試管放回試管架后用吸量管進行取樣，然后取出該試管于火焰附近調節(jié)吸量管內溶液體積。3.取樣完成后對試管口再次消毒并塞上試管塞，將試管放回試管架原處。4.從試管架上取出所需加樣的試管于火焰附近進行加樣放液操作。五、關于培養(yǎng)皿記號的注意事項1.標記統(tǒng)一寫在平皿底部邊緣，以“字數(shù)少、字體小、清晰、明確”為原則。2.標記內容包括：班級、學號、日期、培養(yǎng)基名稱、稀釋級。六、關于平板制備的注意事項1.打開培養(yǎng)皿的方法：左手小指、無名指、中指及一部分掌腹托住平皿底部，食指和拇指張開輕握皿蓋側部，以食指為支點，擺動拇指打開皿蓋。打開的皿口應向著酒精燈的外焰。切勿把開口朝向操作人員。2.手持錐形瓶中下部將瓶中培養(yǎng)基傾倒入平皿中央位置，錐瓶口不應接觸平皿。培養(yǎng)基應一次注入夠量，不應分次加入（除實驗特殊規(guī)定）。3.混勻培養(yǎng)基時應將裝有混合培養(yǎng)基的平皿于手中順時針輕微搖勻2-3次，平放于桌面上后再次順時針搖勻2-3次，整個過程應在培養(yǎng)基尚未開始凝固時完成。學生只要有其中一個搖勻動作也算完成混勻培養(yǎng)基。4.手中裝有培養(yǎng)基的平皿應水平放置于臺面上，不應從臺面邊緣往里推。在位置允許的情況下，應分開平攤放置待凝。七、關于涂布方式的注意事項1.L型涂布棒應放平涂布。2.涂布時應從中間按同一個方向打圈方式往周邊涂布，可以重復涂布。3.從高稀釋級往低稀釋級涂布時，可以不用更換涂布棒，也不用灼燒涂布棒。涂布同一個稀釋級的不同平板時也不用灼燒涂布棒。但是從低稀釋級往高稀釋級涂布時，如不更換涂布棒，一定要灼燒涂布棒（原則上不采用這個涂布順序）。八、關于培養(yǎng)基接種的注意事項1.液體培養(yǎng)基接種時不強調接種環(huán)是否應接觸到液體培養(yǎng)基。2.單手持兩支大試管切忌手部覆蓋培養(yǎng)基面，空白管在里面（近操作人員），菌種在外面。九、關于接種環(huán)滅菌的注意事項 取完固體菌時，應先垂直灼燒環(huán)部再往上灼燒其余接種絲；取完液體菌時，應先灼燒非環(huán)處的其它接種絲，再灼燒環(huán)部，這樣可避免環(huán)上液體突然遇熱而爆破濺出，造成污染。

以下是做參考用的，類似考評項目和分值：我們以后實訓考試可否參考這些來調整我們以前的考核評分表？

分值考核項目考核內容配分評分標準得分7準備物品擺放2物品擺放有序合理，便于操作試管編號1試管編號位置、數(shù)據(jù)正確培養(yǎng)皿編號2培養(yǎng)皿打開方法正確，標注位置、數(shù)據(jù)正確培養(yǎng)基2加熱熔化、溫度控制合理12檢樣酒精燈1酒精燈正確使用消毒2手、樣品取樣前消毒操作正確取樣3取樣前混勻樣品，移液管使用正確，取樣量正確（準確制得10-1稀釋液）無菌操作4在酒精燈無菌區(qū)操作，取樣、放液各環(huán)節(jié)無菌操作正確混合均勻2振蕩正確稀釋操作開始時間記錄1810倍稀釋稀釋度精確3稀釋前混勻樣品，取樣量正確（精確制得10-4、10-5、10-6稀釋液）移液管使用5移液管取液、放液、讀數(shù)等操作規(guī)范，高濃度移液管管口不得伸入低濃度稀釋液液面下無菌操作5在酒精燈無菌區(qū)操作，取樣、放液各環(huán)節(jié)無菌操作正確混合均勻2更換移液管后混勻各試管，混勻方法正確整體印象3本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練15接種接種與稀釋的順序4正確做稀釋，移液管不得混亂使用加入樣品2準確加入0.1ml稀釋待檢液，檢液濃度與培養(yǎng)皿標記一致無菌操作3在酒精燈無菌區(qū)操作，取樣、放液各環(huán)節(jié)無菌操作正確平行2每個稀釋度接種2個平皿空白對照2有做空白稀釋液整體印象2本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練15培養(yǎng)基加入培養(yǎng)基4準確、快速倒入15~20ml熔化培養(yǎng)基，不得污染皿壁無菌操作3在酒精燈無菌區(qū)域操作，培養(yǎng)皿持法正確培養(yǎng)基溫度2培養(yǎng)基溫度不得過高，不得出現(xiàn)結塊現(xiàn)象混勻4混勻操作正確，不得污染皿壁、皿蓋整體印象2本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練15涂布結束時間記錄8綜合評價實驗熟練程度3理解實驗原理，各環(huán)節(jié)安排合理，操作熟練時間5從稀釋到完成涂布時間不能超過20min，每超1分鐘扣1分5清場衛(wèi)生3清掃實驗環(huán)境及收拾垃圾，歸位有序實驗習慣2文明操作，實驗習慣良好5其他5100總分

分值考核項目考核內容配分評分標準得分3準備實驗著裝3著工作服順序正確，儀容整潔整理實驗平臺各種實驗器材、試劑擺放有序合理平板標注平板標注清晰合理3滅菌以酒精棉球擦拭手3操作動作到位擦拭實驗臺面操作動作到位、擦拭范圍合理擦拭菌種試管管口操作動作到位15培養(yǎng)基加入培養(yǎng)基4準確、快速倒入15~20ml熔化培養(yǎng)基，不得污染皿壁無菌操作3在酒精燈無菌區(qū)域操作，培養(yǎng)皿持法正確培養(yǎng)基溫度2培養(yǎng)基溫度不得過高，不得出現(xiàn)結塊現(xiàn)象混勻4混勻操作正確，不得污染皿壁、皿蓋整體印象2本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練14劃線點燃酒精燈1操作動作到位，火焰適宜灼燒接種環(huán)1靠近火焰，接種環(huán)灼燒紅，注意接頭部位的灼燒滅菌取菌3試管握持姿勢合理，拔棉塞、接種環(huán)冷卻、試溫、取菌、塞試管塞動作到位劃線操作3平板拿取、打開操作動作到位，劃線方法、手法合理固體培養(yǎng)基表面有無破損1無破損劃線完畢后平板倒置1操作動作到位灼燒多余菌1接種環(huán)灼燒紅操作熟練既整理印象314接種點燃酒精燈1操作動作到位，火焰適宜灼燒接種環(huán)1靠近火焰，接種環(huán)灼燒紅，注意接頭部位的灼燒滅菌取菌3試管握持姿勢合理，拔棉塞、接種環(huán)冷卻、試溫、取菌、塞試管塞動作