微生物檢查中無(wú)菌操作注意事項(xiàng)

微生物檢查中無(wú)菌操作注意事項(xiàng)微生物檢查中無(wú)菌操作注意事項(xiàng)微生物檢查中無(wú)菌操作注意事項(xiàng)V:1.0精細(xì)整理，僅供參考微生物檢查中無(wú)菌操作注意事項(xiàng)日期：20xx年X月微生物檢查中無(wú)菌操作注意事項(xiàng)一、關(guān)于采用酒精棉球消毒的注意事項(xiàng)1.用酒精棉球擦拭雙手，包括手掌、手背，尤其是手指，更換一個(gè)酒精棉球擦拭酒精燈附近（約10cm）桌面。2.點(diǎn)燃酒精燈，在酒精燈附近拆器皿包裝，并對(duì)器皿做相應(yīng)標(biāo)記。3.用酒精棉球再次擦拭雙手，開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。4.消毒用酒精棉球濕度以不擠壓出酒精為宜。二、關(guān)于酒精燈正確使用的注意事項(xiàng)1.酒精量以大于1/3，小于2/3為正確量。2.防風(fēng)罩應(yīng)小口朝上放置于酒精燈上，反過(guò)來(lái)放置會(huì)導(dǎo)致氧氣沒(méi)有充分燃燒。3.使用酒精燈前要檢查燈芯帽是否蓋得太緊，以防酒精不能上升，影響酒精燈燃燒。點(diǎn)燃酒精燈時(shí)嚴(yán)禁兩個(gè)酒精燈對(duì)點(diǎn)。4.熄滅酒精燈方法：先用燈芯帽扣壓并熄滅火焰，再揭帽重新扣壓一次。這樣可防止蒸汽倒吸燈帽，再次使用酒精燈時(shí)難以揭開(kāi)燈帽。5.做樣品稀釋及從試管取樣實(shí)驗(yàn)時(shí)，酒精燈應(yīng)放在操作人員和試管架之間，便于無(wú)菌操作。三、關(guān)于吸量管使用的注意事項(xiàng)1.左手拿洗耳球，右手持吸量管，用右手食指平按住吸量管的頂部。2.吸取樣品后進(jìn)行定量時(shí)，吸量管吸液口應(yīng)貼附于試管內(nèi)壁；放樣時(shí)，吸量管吸液口也應(yīng)貼附于試管約1/2內(nèi)壁，不應(yīng)貼附在管口處放液。吸量管應(yīng)盡可能垂直放液。3.用吸量管往空平皿加入1ml溶液時(shí)，吸量管應(yīng)貼附于平皿底部中央位置放液；用吸量管在平板上加入0.1ml溶液做涂布接種時(shí)，吸量管應(yīng)垂直、懸空放液于平板中央。4.因吸量管拆封包裝后應(yīng)馬上使用，故無(wú)須對(duì)吸量管吸液口過(guò)火焰消毒。5.整個(gè)取樣放樣的過(guò)程應(yīng)盡可能保證試管口或錐瓶口靠近酒精燈火焰附近。四、關(guān)于樣品梯度稀釋的注意事項(xiàng)1.從試管架上取出所需試管于酒精燈火焰附近拔出試管塞，并在火焰外焰處對(duì)試管口過(guò)火焰進(jìn)行消毒。2.將試管放回試管架后用吸量管進(jìn)行取樣，然后取出該試管于火焰附近調(diào)節(jié)吸量管內(nèi)溶液體積。3.取樣完成后對(duì)試管口再次消毒并塞上試管塞，將試管放回試管架原處。4.從試管架上取出所需加樣的試管于火焰附近進(jìn)行加樣放液操作。五、關(guān)于培養(yǎng)皿記號(hào)的注意事項(xiàng)1.標(biāo)記統(tǒng)一寫(xiě)在平皿底部邊緣，以“字?jǐn)?shù)少、字體小、清晰、明確”為原則。2.標(biāo)記內(nèi)容包括：班級(jí)、學(xué)號(hào)、日期、培養(yǎng)基名稱、稀釋級(jí)。六、關(guān)于平板制備的注意事項(xiàng)1.打開(kāi)培養(yǎng)皿的方法：左手小指、無(wú)名指、中指及一部分掌腹托住平皿底部，食指和拇指張開(kāi)輕握皿蓋側(cè)部，以食指為支點(diǎn)，擺動(dòng)拇指打開(kāi)皿蓋。打開(kāi)的皿口應(yīng)向著酒精燈的外焰。切勿把開(kāi)口朝向操作人員。2.手持錐形瓶中下部將瓶中培養(yǎng)基傾倒入平皿中央位置，錐瓶口不應(yīng)接觸平皿。培養(yǎng)基應(yīng)一次注入夠量，不應(yīng)分次加入（除實(shí)驗(yàn)特殊規(guī)定）。3.混勻培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)將裝有混合培養(yǎng)基的平皿于手中順時(shí)針輕微搖勻2-3次，平放于桌面上后再次順時(shí)針搖勻2-3次，整個(gè)過(guò)程應(yīng)在培養(yǎng)基尚未開(kāi)始凝固時(shí)完成。學(xué)生只要有其中一個(gè)搖勻動(dòng)作也算完成混勻培養(yǎng)基。4.手中裝有培養(yǎng)基的平皿應(yīng)水平放置于臺(tái)面上，不應(yīng)從臺(tái)面邊緣往里推。在位置允許的情況下，應(yīng)分開(kāi)平攤放置待凝。七、關(guān)于涂布方式的注意事項(xiàng)1.L型涂布棒應(yīng)放平涂布。2.涂布時(shí)應(yīng)從中間按同一個(gè)方向打圈方式往周邊涂布，可以重復(fù)涂布。3.從高稀釋級(jí)往低稀釋級(jí)涂布時(shí)，可以不用更換涂布棒，也不用灼燒涂布棒。涂布同一個(gè)稀釋級(jí)的不同平板時(shí)也不用灼燒涂布棒。但是從低稀釋級(jí)往高稀釋級(jí)涂布時(shí)，如不更換涂布棒，一定要灼燒涂布棒（原則上不采用這個(gè)涂布順序）。八、關(guān)于培養(yǎng)基接種的注意事項(xiàng)1.液體培養(yǎng)基接種時(shí)不強(qiáng)調(diào)接種環(huán)是否應(yīng)接觸到液體培養(yǎng)基。2.單手持兩支大試管切忌手部覆蓋培養(yǎng)基面，空白管在里面（近操作人員），菌種在外面。九、關(guān)于接種環(huán)滅菌的注意事項(xiàng) 取完固體菌時(shí)，應(yīng)先垂直灼燒環(huán)部再往上灼燒其余接種絲；取完液體菌時(shí)，應(yīng)先灼燒非環(huán)處的其它接種絲，再灼燒環(huán)部，這樣可避免環(huán)上液體突然遇熱而爆破濺出，造成污染。

以下是做參考用的，類(lèi)似考評(píng)項(xiàng)目和分值：我們以后實(shí)訓(xùn)考試可否參考這些來(lái)調(diào)整我們以前的考核評(píng)分表？

分值考核項(xiàng)目考核內(nèi)容配分評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)得分7準(zhǔn)備物品擺放2物品擺放有序合理，便于操作試管編號(hào)1試管編號(hào)位置、數(shù)據(jù)正確培養(yǎng)皿編號(hào)2培養(yǎng)皿打開(kāi)方法正確，標(biāo)注位置、數(shù)據(jù)正確培養(yǎng)基2加熱熔化、溫度控制合理12檢樣酒精燈1酒精燈正確使用消毒2手、樣品取樣前消毒操作正確取樣3取樣前混勻樣品，移液管使用正確，取樣量正確（準(zhǔn)確制得10-1稀釋液）無(wú)菌操作4在酒精燈無(wú)菌區(qū)操作，取樣、放液各環(huán)節(jié)無(wú)菌操作正確混合均勻2振蕩正確稀釋操作開(kāi)始時(shí)間記錄1810倍稀釋稀釋度精確3稀釋前混勻樣品，取樣量正確（精確制得10-4、10-5、10-6稀釋液）移液管使用5移液管取液、放液、讀數(shù)等操作規(guī)范，高濃度移液管管口不得伸入低濃度稀釋液液面下無(wú)菌操作5在酒精燈無(wú)菌區(qū)操作，取樣、放液各環(huán)節(jié)無(wú)菌操作正確混合均勻2更換移液管后混勻各試管，混勻方法正確整體印象3本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練15接種接種與稀釋的順序4正確做稀釋，移液管不得混亂使用加入樣品2準(zhǔn)確加入0.1ml稀釋待檢液，檢液濃度與培養(yǎng)皿標(biāo)記一致無(wú)菌操作3在酒精燈無(wú)菌區(qū)操作，取樣、放液各環(huán)節(jié)無(wú)菌操作正確平行2每個(gè)稀釋度接種2個(gè)平皿空白對(duì)照2有做空白稀釋液整體印象2本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練15培養(yǎng)基加入培養(yǎng)基4準(zhǔn)確、快速倒入15~20ml熔化培養(yǎng)基，不得污染皿壁無(wú)菌操作3在酒精燈無(wú)菌區(qū)域操作，培養(yǎng)皿持法正確培養(yǎng)基溫度2培養(yǎng)基溫度不得過(guò)高，不得出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象混勻4混勻操作正確，不得污染皿壁、皿蓋整體印象2本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練15涂布結(jié)束時(shí)間記錄8綜合評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)熟練程度3理解實(shí)驗(yàn)原理，各環(huán)節(jié)安排合理，操作熟練時(shí)間5從稀釋到完成涂布時(shí)間不能超過(guò)20min，每超1分鐘扣1分5清場(chǎng)衛(wèi)生3清掃實(shí)驗(yàn)環(huán)境及收拾垃圾，歸位有序?qū)嶒?yàn)習(xí)慣2文明操作，實(shí)驗(yàn)習(xí)慣良好5其他5100總分

分值考核項(xiàng)目考核內(nèi)容配分評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)得分3準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)著裝3著工作服順序正確，儀容整潔整理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)各種實(shí)驗(yàn)器材、試劑擺放有序合理平板標(biāo)注平板標(biāo)注清晰合理3滅菌以酒精棉球擦拭手3操作動(dòng)作到位擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)面操作動(dòng)作到位、擦拭范圍合理擦拭菌種試管管口操作動(dòng)作到位15培養(yǎng)基加入培養(yǎng)基4準(zhǔn)確、快速倒入15~20ml熔化培養(yǎng)基，不得污染皿壁無(wú)菌操作3在酒精燈無(wú)菌區(qū)域操作，培養(yǎng)皿持法正確培養(yǎng)基溫度2培養(yǎng)基溫度不得過(guò)高，不得出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象混勻4混勻操作正確，不得污染皿壁、皿蓋整體印象2本環(huán)節(jié)操作規(guī)范、熟練14劃線點(diǎn)燃酒精燈1操作動(dòng)作到位，火焰適宜灼燒接種環(huán)1靠近火焰，接種環(huán)灼燒紅，注意接頭部位的灼燒滅菌取菌3試管握持姿勢(shì)合理，拔棉塞、接種環(huán)冷卻、試溫、取菌、塞試管塞動(dòng)作到位劃線操作3平板拿取、打開(kāi)操作動(dòng)作到位，劃線方法、手法合理固體培養(yǎng)基表面有無(wú)破損1無(wú)破損劃線完畢后平板倒置1操作動(dòng)作到位灼燒多余菌1接種環(huán)灼燒紅操作熟練既整理印象314接種點(diǎn)燃酒精燈1操作動(dòng)作到位，火焰適宜灼燒接種環(huán)1靠近火焰，接種環(huán)灼燒紅，注意接頭部位的灼燒滅菌取菌3試管握持姿勢(shì)合理，拔棉塞、接種環(huán)冷卻、試溫、取菌、塞試管塞動(dòng)作