2022年醫(yī)學(xué)專題-第十六章-藥品質(zhì)量控制中的分析方法與技術(shù)

趙春杰沈陽藥科大學(xué)藥分教研室第十六章藥品質(zhì)量(zhìliàng)控制中的現(xiàn)代分析方法與技術(shù)第一頁，共二十七頁。主要(zhǔyào)內(nèi)容藥物現(xiàn)代(xiàndài)色譜法及其應(yīng)用藥物現(xiàn)代(xiàndài)光譜法及其應(yīng)用色譜聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用第二頁，共二十七頁。一、毛細(xì)管氣相色譜分析法（一）色譜柱類型

1、普通開管柱（1）壁涂開管柱（2）多孔層開管柱（3）擔(dān)體涂漬開管柱

2、微孔(wēikǒnɡ)內(nèi)徑開管柱

3、大內(nèi)徑開管柱一、藥物(yàowù)現(xiàn)代色譜法及其應(yīng)用第三頁，共二十七頁。（二）進(jìn)樣方式

1、分流進(jìn)樣

2、不分流進(jìn)樣

3、柱頭進(jìn)樣

4、直接進(jìn)樣（三）毛細(xì)管柱的選擇和性能評價

1、選用毛細(xì)管柱的原因(yuányīn)

2、毛細(xì)管柱的選擇

3、毛細(xì)管柱的性能評價（四）應(yīng)用示例

1、原料藥中殘留溶劑苯的分析

2、生物樣品中藥物的定量分析一、藥物(yàowù)現(xiàn)代色譜法及其應(yīng)用第四頁，共二十七頁。二、手性藥物的液相色譜分析法（一）概述建立和發(fā)展快速而靈敏的分離（或拆分）和測定對映體藥物的方法藉以有效地進(jìn)行以下四個方面的工作是十分重要和必要的：1、對某些手性藥物進(jìn)行對映體的純度檢查2、生物體液中藥物對映體的分離分析研究可探索血藥濃度與臨床(línchuánɡ)療效的關(guān)系

3、在研制手性藥物過程中，可分別評價單個對映體的效價、毒性、不良反應(yīng)以及藥動學(xué)性質(zhì)4、必要時，進(jìn)行手性藥物對映體的分離（或拆分）一、藥物現(xiàn)代(xiàndài)色譜法及其應(yīng)用第五頁，共二十七頁。（二）手性藥物拆分方法(fāngfǎ)與機(jī)理

“三點(diǎn)手性識別模式”至少要有三個作用力，其中一個要有立體選擇性，可以是吸引的，也可以是排斥的。這些相互作用可以是氫鍵、偶極-偶極作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。一、藥物(yàowù)現(xiàn)代色譜法及其應(yīng)用第六頁，共二十七頁。（三）手性HPLC拆分方法與分類1、柱前手性衍生2、手性流動相拆分法常用(chánɡyònɡ)的手性添加劑為：（1）配基交換型手性添加劑（2）環(huán)糊精類添加劑（3）手性離子對絡(luò)合劑3、手性固定相拆分（1）Pirkle型手性固定相（2）蛋白質(zhì)類手性固定（3）環(huán)糊精類一、藥物(yàowù)現(xiàn)代色譜法及其應(yīng)用第七頁，共二十七頁。（四）三類手性方法的比較CDR法優(yōu)點(diǎn)：應(yīng)用條件相對簡易，只需采用普通HPLC的固定相和流動相，衍生化有利于增加檢測靈敏度。缺點(diǎn)：樣品中相關(guān)化合物須預(yù)先(yùxiān)分離、衍生化手性試劑的光學(xué)純度高，異構(gòu)體對的衍生化反應(yīng)速率不一。一、藥物現(xiàn)代(xiàndài)色譜法及其應(yīng)用第八頁，共二十七頁。CMP法優(yōu)點(diǎn)：不必做柱前衍生化，對固定相無特殊要求，樣品的非對應(yīng)異構(gòu)化絡(luò)合具有可逆性且易于制備。缺點(diǎn)：可拆分的化合物范圍有限，某些添加劑不夠穩(wěn)定且干擾檢測。CSP法優(yōu)點(diǎn)：適用范圍廣，制備分離(fēnlí)方便，定量分析可靠性較高。缺點(diǎn)：樣品有時需做柱前衍生化，對樣品結(jié)構(gòu)有一定限制，適用性不及普通HPLC固定相。一、藥物現(xiàn)代(xiàndài)色譜法及其應(yīng)用第九頁，共二十七頁。三、毛細(xì)管電泳分析法（一）簡介毛細(xì)管電泳（CE）是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異(chāyì)而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。（二）主要分離模式1、毛細(xì)管區(qū)帶電泳（CZE）2、膠束電動毛細(xì)管色（MECC/MEKC）3、毛細(xì)管凝膠電泳（CGE）4、毛細(xì)管等電聚焦（CIEF）一、藥物現(xiàn)代(xiàndài)色譜法及其應(yīng)用第十頁，共二十七頁。（三）HPCE在藥物分析中的應(yīng)用（P412）示例一利巴韋林及各中間體的定量分析示例二復(fù)方(fùfāng)甘草片中甘草酸、甘草次酸、嗎啡和苯甲酸鈉的分析示例三血樣尿樣中巴比妥類藥物的分析一、藥物(yàowù)現(xiàn)代色譜法及其應(yīng)用第十一頁，共二十七頁。一、近紅外分光光度法（一）方法特點(diǎn)1、可獲得一系列物理性質(zhì)(wùlǐxìngzhì)的信息2、樣品無需預(yù)處理3、分析速度快4、靈敏度高5、運(yùn)用范圍廣6、便于在線分析和控制二、藥物現(xiàn)代(xiàndài)光譜法及其應(yīng)用第十二頁，共二十七頁。（二）常見的NIR吸收波長及其結(jié)構(gòu)歸屬(guīshǔ)（三）應(yīng)用

1、鑒別

2、純度檢查

3、含量測定二、藥物(yàowù)現(xiàn)代光譜法及其應(yīng)用第十三頁，共二十七頁。二、核磁共振光譜分析法（一）簡述核磁共振光譜（NMRS）是利用原子核的物理性質(zhì)，采用當(dāng)代最先進(jìn)的電子學(xué)和計算機(jī)技術(shù)，用于各種分子(fēnzǐ)物理和化學(xué)結(jié)構(gòu)的研究。二、藥物現(xiàn)代(xiàndài)光譜法及其應(yīng)用第十四頁，共二十七頁。（二）定量分析方法1、方法特點(diǎn)1）對于確定的核，其信號強(qiáng)度與質(zhì)子數(shù)目(shùmù)成正比，與化學(xué)性質(zhì)無關(guān)。2）用內(nèi)標(biāo)法或相對比較發(fā)時，需純品做對照品。3）混合物中不同組分的信號之間很少發(fā)生重疊。4）方法簡單快速、準(zhǔn)確、專屬性高，不破壞被測樣品。二、藥物現(xiàn)代(xiàndài)光譜法及其應(yīng)用第十五頁，共二十七頁。2、測定方法（1）內(nèi)標(biāo)法（2）相對測量法（三）應(yīng)用示例(shìlì)

1、鹽酸普魯卡因的結(jié)構(gòu)鑒定

2、植物中藥及其偽品的區(qū)別

3、亞硝酸戊酯及其吸入劑的含量測定二、藥物(yàowù)現(xiàn)代光譜法及其應(yīng)用第十六頁，共二十七頁。三、X射線粉末衍射法（一）X射線簡介（二）布拉格方程(fāngchéng)（三）X射線衍射儀的工作原理（四）應(yīng)用二、藥物(yàowù)現(xiàn)代光譜法及其應(yīng)用第十七頁，共二十七頁。一、氣相色譜-紅外光譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)（一）簡介采用兩臺紅外分光光度計分別記錄一個色譜餾分的高波段數(shù)和低波段數(shù)光譜，從氣相色譜柱流出的餾分直接進(jìn)入紅外檢測池，不需進(jìn)行樣品轉(zhuǎn)移，也無需終止氣相色譜儀的操作。三、色譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)及其應(yīng)用第十八頁，共二十七頁。（二）GC-FTIR系統(tǒng)組成與光譜檢索

GC-FTIR系統(tǒng)由色譜儀，光譜儀，接口三個部分組成常用的光譜檢索程序有四種：（1）差示絕對值程序（2）最小二乘方程序（3）導(dǎo)數(shù)(dǎoshù)絕對值程序（4）導(dǎo)數(shù)平方程序三、色譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)及其應(yīng)用第十九頁，共二十七頁。（三）應(yīng)用示例GC-FTIR聯(lián)用分析麝香風(fēng)濕(fēnɡshī)油（P431）二、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（一）簡述能使樣品的分離、鑒定和定量一次完成，對于藥物分析的發(fā)展起了很大的促進(jìn)作用。（二）色譜柱分為填充柱和毛細(xì)管柱。三、色譜(sèpǔ)聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用第二十頁，共二十七頁。（三）接口接口是解決氣相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用的關(guān)鍵組件(zǔjiàn)，起傳輸試樣，匹配兩者工作流量的作用。分三類：直接導(dǎo)入型，分流型，濃縮型（四）定量分析方法

1、總離子流色譜法

2、質(zhì)量碎片圖質(zhì)譜法三、色譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)及其應(yīng)用第二十一頁，共二十七頁。三、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（一）概述

HPLC-MS集HPLC的高分離能力和MS的高靈敏度、極強(qiáng)的結(jié)構(gòu)解析(jiěxī)能力、高度的專屬性和通用性、分析速度快于一體。樣品預(yù)處理簡單，一般不要求水解，或者衍生化，可以直接用于藥物及其代謝物的同時分離和鑒定。三、色譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)及其應(yīng)用第二十二頁，共二十七頁。（二）接口裝置

1、粒子束接口

2、熱噴霧接口

3、大氣壓離子化接口

4、動態(tài)快原子轟擊法（三）應(yīng)用(yìngyòng)示例（P440）1、曲安奈德中特殊雜質(zhì)的檢查2、血樣和尿樣中秋水仙堿的LC-ISP-MS定性定量分析三、色譜(sèpǔ)聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用第二十三頁，共二十七頁。四、液相色譜-核磁共振聯(lián)用技術(shù)（一）方法特點(diǎn)對色譜條件要求不高，使用普通色譜柱，重水，其余(qíyú)使用甲醇、乙腈、四氫呋喃等有機(jī)溶劑，也可以向流動相中加酸、堿和各種緩沖鹽離及離子對試劑。三、色譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)及其應(yīng)用第二十四頁，共二十七頁。（二）基本操作模式

1、連續(xù)流動操作模式

2、停流操作模式

3、峰存貯操作模式（三）應(yīng)用示例大鼠體內(nèi)抗心率失常(shīcháng)藥氯芐律定的代謝研究（P442）三、色譜聯(lián)用技術(shù)(jìshù)及其應(yīng)用第二十五頁，共二十七頁。第二十六頁，共二十七頁。內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)趙春杰。1、對某些手性藥物進(jìn)行對映體的純度檢查。3、在