除草劑的生物測定課件

《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件1一、除草劑生物測定的定義及意義二、除草劑生物測定的基本原理三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)

野燕麥菟絲子狗芽根第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件1一、除草劑生物測定的定義及意義《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2一、除草劑生物測定的定義及意義

除草劑生物測定是指利用生物體（主要指有害植物）對除草劑的反應(yīng)來測定除草劑及其效果的基本方法。其目的在于：

1.篩選除草劑,了解除草劑防治的雜草種類及適用的作物范圍；

2.測定除草劑在土壤中的殘留動態(tài)（半衰期等），吸附、淋溶、持效期、光解、揮發(fā)速度、微生物降解等；

3.用于除草劑的定量研究；

4.了解不同除草劑在生物體內(nèi)吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)、作用部位、代謝速度等，為制訂除草劑的安全使用標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2一、除草劑生物測定的定義及意義《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3二、除草劑生物測定的基本原理

利用活的生物體或生物體器官，在生長、形態(tài)等方面對化學(xué)物質(zhì)（除草劑）的不同反應(yīng)來確定除草劑的濃度。通常選用對除草劑較敏感的生物材料作生測試材。例：單子葉植物對拉索、拿捕凈十分敏感，可用稗草、馬唐、谷子等來測定這類除草劑。五氯酚鈉對魚劇毒，可用魚來測定水中五氯酚鈉的殘毒。第三章除草劑的生物測定稗草馬唐谷子《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3二、除草劑生物測定的基本原理《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4

使生物體的敏感反應(yīng)成為生物測定方法，必須符合下列條件：

1、在一定濃度范圍內(nèi)，生物體內(nèi)對除草劑的反應(yīng)隨濃度的增加而有規(guī)律的增加；

2、在環(huán)境條件相似的情況下，用同一種試材重復(fù)試驗(yàn)時(shí)，對同種除草劑的反應(yīng)可以重現(xiàn)。二、除草劑生物測定的基本原理第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4使生物體的敏感反應(yīng)成為生《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件5三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)（一）優(yōu)點(diǎn):

1.可測定不同類型的除草劑，了解其作用方式、使用劑量、降解速度等。測試材料可以是作物、雜草、動物及微生物等；

2.精確度高：測試材料和測試條件一致時(shí)，它們對不同種類及不同劑量的除草劑的反應(yīng)有較高的靈敏度；

3.設(shè)備較簡單。第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件5三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)（《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件6（二）缺點(diǎn)

1.周期長、費(fèi)時(shí)間：一般3-7d，最快24h，個(gè)別需1個(gè)月以上；

2.測定條件較嚴(yán)格：恒溫、恒濕、光照、養(yǎng)分等條件控制需一致；

3.除草劑中所含雜質(zhì)對除草劑的藥效有一定影響，有時(shí)引起藥害。

因此，除草劑的生物測定技術(shù)也只能在一定條件和范圍內(nèi)應(yīng)用。三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件6（二）缺點(diǎn)三、除草劑生物測定技術(shù)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件7試材的確定和培育創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件第一節(jié)除草劑生物測定試材的確定和培育第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件7試材的確定和培育第一節(jié)除草劑生《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件8一、試材的確定和培育1.作物試材的確定和培育

因此，應(yīng)選擇對除草劑敏感的作物或其器官作為生測材料。

每一種除草劑都有其應(yīng)用范圍和禁用對象，因?yàn)橛械淖魑飳δ承┏輨┯锌剐裕鴮α硪恍┏輨┟舾?。敏感或不敏感隨作物生育期和生長狀況的不同也有很大差別，甚至同種作物的不同品種、一株作物的不同部位對除草劑的敏感度都有差別。《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件8一、試材的確定和培育1.作物試材《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件9《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件9《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件10

如除草醚、氟樂靈、敵草隆等以土壤處理為主的除草劑，要求試材是作物種子或剛發(fā)芽的幼苗。

為使測試結(jié)果精確一致，要求成熟度好、大小一致、發(fā)芽率高、發(fā)芽整齊、品種純度高的作物種子。若為玉米、高粱等大穗作物最好采用同一穗的中部種子，發(fā)芽生長整齊，生物測定結(jié)果更精確。高粱種子應(yīng)在試驗(yàn)前20h將種子放在培養(yǎng)皿中加適量水，置25-28℃培養(yǎng)箱中催芽，待芽長出1-2mm時(shí)取出備用。若用不同葉齡期的幼苗，需將種子播種在小盆缽中，播種深度一致，所用土壤要求過篩、肥力和濕度一致，放在溫室中或溫暖向陽處，也可用玻璃或塑料薄膜增溫保濕，待幼苗出土后，生長到所需葉齡期。一、試材的確定和培育1.作物試材的確定和培育作物試材的培育：不同性質(zhì)的除草劑要求不同作物試材及其生育狀態(tài)。

《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件10如除草醚、氟樂靈、敵《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件11不同種類的雜草及其不同生育期、不同器官對不同種類除草劑及其不同濃度都有不同反應(yīng)，因此，必須選擇對供試除草劑較敏感的雜草或其部位為生測試材。一、試材的確定和培育2、雜草試材的確定和培育《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件11不同種類的雜草及其不同生育《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件12雜草試材的培育：不同種類和不同性質(zhì)的除草劑的防除對象不同，作用部位也不同，所以測定不同除草劑時(shí)應(yīng)選擇不同的試材。

例如：敵草隆、阿拉特津、丁草胺等都是以殺剛發(fā)芽（露白）的雜草幼芽為主的土壤處理，所以，要求供試雜草種子大小一致、發(fā)芽率高、發(fā)芽整齊，否則，因雜草種子成熟度不一致、休眠期長短不一、發(fā)芽不整齊等，致使試驗(yàn)結(jié)果誤差較大。

一、試材的確定和培育2、雜草試材的確定和培育《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件12雜草試材的培育：不同種類和《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件13二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件第一節(jié)除草劑生物測定試材的確定和培育

作物、雜草種子萌發(fā)、幼苗生長都需一定的水分、溫度和氧氣。有的還需要一定的光照等條件。

不同作物和雜草生長在不同季節(jié)和環(huán)境中，形成了對環(huán)境條件的不同要求。

如野燕麥生長在東北、西北較冷涼地區(qū)，因而最適生長溫度為10-18℃；而綠狗尾24-32℃時(shí)2-3d內(nèi)發(fā)芽，稗草起于南方，最適生長溫度為17-32℃，燕麥、小麥要求較冷涼條件，大豆、芥菜要求較溫暖條件，而棉花、水稻、西瓜等要求較高溫度。對水分的要求除水稻需高含水量的土壤甚至淹水條件外，一般要求最大田間持水量70%-90%為宜?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件13二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件第《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件14二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件

采用培養(yǎng)箱進(jìn)行種子發(fā)芽較易控制溫度。如高粱在25-28℃時(shí)15-20h就能發(fā)芽露白，稗草在30-33℃時(shí)2-3d內(nèi)發(fā)芽，水稻在同樣溫度下3d后才能發(fā)芽。溫室內(nèi)的溫度雖不如培養(yǎng)箱那樣穩(wěn)定，但有光照條件。溫室內(nèi)一般用盆缽進(jìn)行試驗(yàn)。土壤、水分條件較接近于田間。人工氣候室能較好地控制溫度、濕度、光照、通風(fēng)等，可滿足生測中特殊試驗(yàn)要求的條件。小區(qū)試驗(yàn)更接近于生產(chǎn)條件，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果可驗(yàn)證室內(nèi)測定結(jié)果?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件14二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件15《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件第三章除草劑的生物測定

豬殃殃第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)一、除草劑活力的鑒定方法二、除草劑的藥效評價(jià)15《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件第三章除草劑的生物測定豬殃16《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、除草劑活力的鑒定方法(一)萌芽鑒定

許多除草劑能強(qiáng)烈抑制敏感植物種子的萌發(fā)，或明顯地抑制幼芽及胚根的生長，如除草醚、2,4-D、拉索等。隨除草劑劑量的變化，抑制反應(yīng)也有相應(yīng)變化，能較精確的測定劑量與抑制率之間的關(guān)系。一般情況下，典型的根系或初生莖葉的受抑制癥狀可在處理后，培養(yǎng)24-96h

觀察到。第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)16《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、除草劑活力的鑒定方法(一17《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）植株鑒定

通過測定供試植物的生長量來確定除草劑對試材的抑制程度及除草劑的活性。通常以鮮重為指標(biāo)。如對試驗(yàn)要求較精確時(shí)，還要測定實(shí)驗(yàn)植株或特定部位的干重。許多光合作用抑制劑在傷害癥狀出現(xiàn)前，莖葉的生長或株高就產(chǎn)生了差異，它可代替稱重來測定除草劑的活性。但測試植株的不同葉齡和生育期對除草劑的敏感性不同，一般禾本科植物測定葉片長度，豆科植物測定第一復(fù)葉的葉柄長度來鑒定。一、除草劑活力的鑒定方法第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)第三章除草劑的生物測定17《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）植株鑒定一、除草劑活18《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

在肉眼可見的反應(yīng)出現(xiàn)之前，試材生理生化的變化往往可以測定出來。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陳代謝物質(zhì)的變化等都可以作為測定的指標(biāo)。另外，以植物的耗水量表示除草劑的活性，可能比植物重量具有更大的敏感性。

測定用抑制光合作用的除草劑處理過的植株或子葉的光合速率，接觸除草劑幾小時(shí)后，CO2的交換量顯著減少。生長在含有撲草凈的培養(yǎng)基中的植物，其水分消耗在藥害癥狀出現(xiàn)前幾天就有變化，可用水分消耗量作為生測指標(biāo)。黃化反應(yīng)可由分光光度計(jì)或直觀地測定葉綠素含量來估量。另外，也可用根系活力作為生測指標(biāo)。一、除草劑活力的鑒定方法第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)第三章除草劑的生物測定（三）生理和形態(tài)效應(yīng)鑒定18《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件在肉眼可見的反應(yīng)出現(xiàn)之前，19《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件某些除草劑對植物的典型癥狀可用于定性測定，癥狀的強(qiáng)度與劑量呈正比關(guān)系，也可用于定量測定2,4-D的存在與否。除草劑所引起的特殊反應(yīng)常被發(fā)展成定量生物測定技術(shù)。如殺草強(qiáng)（ATA）引起植物向地性的喪失和棉花幼苗根毛發(fā)育的變化；當(dāng)種子用紅外光處理后，幾種三氮苯類除草劑能促進(jìn)萵苣種子的萌發(fā)和棉花胚軸的張開；殺草丹等氨基甲酸酯類除草劑能明顯抑制稗草等敏感植物的心葉生長。一、除草劑活力的鑒定方法（三）生理和形態(tài)效應(yīng)鑒定19《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件某些除草劑對植物的典型癥狀20《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件對照區(qū)雜草－處理區(qū)雜草對照區(qū)雜草抑制率(%)＝×100%二、除草劑藥效評價(jià)第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)第三章除草劑的生物測定

對不同類型的除草劑和不同種類的雜草，其防除效果的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不同。常用0（或1）-5（或10）的分級法。

受處理的雜草、作物的高度、重量、密度等指標(biāo)與對照按下列公式計(jì)算雜草抑制率或防治率并進(jìn)行比較：20《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件對照區(qū)雜草－處理區(qū)雜草對照區(qū)雜21《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件歐洲雜草研究會用目測法進(jìn)行9級法統(tǒng)計(jì)，國內(nèi)逐漸采用。二、除草劑藥效評價(jià)21《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件歐洲雜草研究會用目測法進(jìn)行9級22《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)第三章除草劑的生物測定二、植株生長量測定法三、生理生化指標(biāo)測定法四、癥狀鑒定法五、愈傷組織鑒定法22《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法第三節(jié)除草23《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法（一）試驗(yàn)方法

發(fā)芽試驗(yàn)的容器通常為培養(yǎng)皿和小燒杯。使用前首先對器皿進(jìn)行清洗和干熱滅菌，然后加入適量藥液，在發(fā)芽床上播種。發(fā)芽床：濾紙、脫脂棉或消毒過的砂子鋪放在培養(yǎng)皿內(nèi)而制成。第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)23《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法（一）試驗(yàn)24《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法1.供試植物種子（或在催芽前）先浸入0.2%次氯酸鈉溶液中消毒15min，用自來水洗滌并用流水浸泡2-6h，再用蒸餾水洗滌數(shù)次，或在5%漂白粉溶液中消毒半小時(shí)后取出，用水沖洗干凈，以防止試驗(yàn)過程中發(fā)霉，影響試驗(yàn)結(jié)果。2.藥液應(yīng)保持剛好濕潤發(fā)芽床為宜；3.保持供試種子所需的環(huán)境條件，溫度應(yīng)是供試種子發(fā)芽所需要的適溫。一般要求在黑暗下培養(yǎng)，特殊情況除外。4.不要把兩種以上的種子種于同一器皿中（即同一發(fā)芽床上）。注意事項(xiàng)：24《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法1.供試25《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）項(xiàng)目調(diào)查1、發(fā)芽率（%）＝藥劑處理的發(fā)芽數(shù)/對照處理的發(fā)芽數(shù)×1002、生長抑制率（%）＝(對照發(fā)芽率－藥劑發(fā)芽率)/對照發(fā)芽率×1003、發(fā)育異常描繪有些藥劑尤其是激素類藥劑可使供試生物根或莖畸形，因此應(yīng)調(diào)查根或莖的膨大或卷曲等異常情況，并做詳細(xì)描述或繪制特征圖。一、種子發(fā)芽測定法25《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）項(xiàng)目調(diào)查一、種子發(fā)芽測定26《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例1、黃瓜幼苗形態(tài)法：是測定激素類除草劑及其他植物生長調(diào)節(jié)劑活性的常用方法，具有反應(yīng)靈敏、測定范圍大（0.1-l000μg/mL），操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。（1）藥劑配制：將2,4-D配制成一系列濃度的丙酮溶液；（2）發(fā)芽床制作：用1張直徑11cm濾紙?jiān)谒幰褐薪溜柡?，取出揮發(fā)掉丙酮，放入直徑12cm培養(yǎng)皿中，再在其下墊兩張同樣大小空白濾紙。（3）種子消毒：（4）培養(yǎng)：每皿放入20粒，加入12mL蒸餾水（此時(shí)培養(yǎng)皿中的實(shí)際濃度比原來丙酮液濃度低10倍)。蓋好皿蓋，置25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)。（5）形態(tài)描述、繪圖、照相等：6天后取出觀察黃瓜幼苗，描述、繪制、照相或印相各濃度下黃瓜幼苗的形態(tài)。一、種子發(fā)芽測定法26《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例一、種子發(fā)芽測定法27《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法：可測定二苯醚類、酚胺類和氨基甲酸酯類、氯代脂肪酸類等除草劑的活性，但對抑制植物光合作用的除草劑則幾乎不能采用。該法具有操作簡便，測定周期短、范圍較廣的優(yōu)點(diǎn)。一、種子發(fā)芽測定法

試材選用小麥、油菜、水稻、稗草等。以直徑3.5cm，高5.0cm的玻璃杯或50mL的小燒杯為容器。杯底放一張圓濾紙片，吸取一定量的有機(jī)溶劑溶解的待測藥液倒入杯內(nèi)，揮發(fā)干溶劑。若以水稻、稗草等水生雜草種子為試材，在杯中加入2mL蒸餾水，若以小麥、油菜種子為材料時(shí)，則濾紙片底下放一層直徑約為0.5cm大小的玻璃珠，再加入3mL蒸餾水。選擇剛萌動的種子10粒，排放到濾紙片上，置28℃恒溫室中培養(yǎng)，白天給予日光燈照。培養(yǎng)期間每天加入一定量蒸餾水補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分。3d后分別記載株高或測定鮮重。計(jì)算抑制生長50%所需要的濃度（EC50）。（三）實(shí)例27《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法：可測定二苯醚類、酚28《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法一、種子發(fā)芽測定法藥效的分級標(biāo)準(zhǔn)為：0級同對照1級抑制生長25%以下2級抑制生長50%以下3級抑制生長75%以下4級抑制生長75%以上然后計(jì)算每一濃度處理的抑制指數(shù)：抑制指數(shù)＝∑（級別×各級代表株數(shù)）總株數(shù)×4（最高級別）×100

將抑制指數(shù)（抑制百分?jǐn)?shù)）轉(zhuǎn)換為機(jī)率值，濃度（劑量）以對數(shù)值表示，求出EC50。（三）實(shí)例28《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法一、種子發(fā)芽測定法29《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例3、高粱法4、稗草胚軸中胚軸法一、種子發(fā)芽測定法29《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例一、種子發(fā)芽測定法30《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）試驗(yàn)方法將所選試材進(jìn)行催芽處理后，種植在含有供試藥劑的基質(zhì)中（液體基質(zhì)或土壤）或在植株生長的某個(gè)適期施藥，經(jīng)一定時(shí)間、一定條件的培育后觀察試驗(yàn)結(jié)果。二、植株生長量測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)30《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）試驗(yàn)方法二、植株生長量測31《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）實(shí)例1、去胚乳小麥幼苗法：適用于測定光合作用抑制劑。

（1）選種：選擇飽滿度一致的小麥種子。（2）浸種催芽：浸種2h后，排列在鋪有濾紙或紗布的搪瓷盤中，在室溫20℃左右進(jìn)行催芽，3~4d后苗高達(dá)2~3cm。（3）3-4d后精選高度一致的幼苗，輕輕取出，避免傷害根部，然后用鑷子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，準(zhǔn)備種植。（4）用直徑4.5cm、高5cm小玻璃杯為測定容器，每杯注入不同濃度供試藥液3mL和稀釋10倍的培養(yǎng)液6mL，每杯插入上述去胚乳小麥10株。（5）在室溫21~26℃左右和光照下培養(yǎng)6~7天后觀察藥效。注意每天應(yīng)該給每個(gè)小杯稱重，補(bǔ)足損失的水分。（6）測量每株從芽鞘到最長葉尖的距離，求生長抑制率，繼而求EC50。生長抑制率（%）＝(對照生長量－處理生長量)/對照生長量×100二、植株生長量測定法31《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）實(shí)例生長抑制率（%）＝(32《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、蘿卜子葉法3、番茄水培法4、葉鞘滴注法5、再生苗測重法（二）實(shí)例1、去胚乳小麥幼苗法

二、植株生長量測定法32《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、蘿卜子葉法（二）實(shí)例二、植33《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法：應(yīng)用綠藻(chlorophyta)，藍(lán)藻(cyanophyta)等微小的藻類進(jìn)行有關(guān)除草劑實(shí)驗(yàn)的實(shí)例很多，其中小球藻法是最為普遍的一種方法。（二）浮萍法：（三）圓葉片漂浮法：植物在進(jìn)行光合作用時(shí)，葉片組織內(nèi)產(chǎn)生較高濃度的氧氣，使葉片容易漂浮，而若光合作用受抑制，不能產(chǎn)生氧氣，則葉片就難以漂浮。三、生理生化指標(biāo)測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)

利用植株在施藥后的生理生化反應(yīng)來作為測定的指標(biāo)，亦被廣泛應(yīng)用，特別是近年來由于生理生化技術(shù)發(fā)展，使這一方法更為準(zhǔn)確和靈敏。33《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法：應(yīng)用綠藻(34《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

1、藻類培養(yǎng)——培養(yǎng)基的選擇與制備；

2、試驗(yàn)法——用偏平燒瓶或三角瓶，將小球藻培養(yǎng)液分別定量加入三角瓶中，再定量加入一定濃度的除草劑。可通入一定流量的含3%CO2濃度的空氣，也可用二層紗布封住三角瓶口。25℃下，熒光燈照明培養(yǎng)。

3、測定方法

（1）觀察顏色變化：施藥后5d觀察小球藻退色變化情況。

（2）比色測定小球藻增殖率：因小球藻的增殖，培養(yǎng)液中的綠色逐漸變濃，用分光光度計(jì)在波長574nm下比色測定，吸光度與小球藻細(xì)胞數(shù)量間存在明顯的直線關(guān)系，故可用此法測定小球藻的含量。

（3）濃縮細(xì)胞量測定：把一定量的小球藻懸濁液放入帶刻度的離心管中，I800rpm離心5分鐘，測定沉淀小球藻的體積。

（4）葉綠素含量測定：因小球藻對不同藥劑反應(yīng)不同，故其培養(yǎng)液中小球藻葉綠素總含量是不同的，據(jù)此，可把葉綠素提取出來，測定其含量，以此來比較藥劑的毒力，并可求出LC50，即抑制葉綠體含量50%時(shí)所需要的除草劑濃度。三、生理生化指標(biāo)測定法（一）藻類實(shí)驗(yàn)法34《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件1、藻類培養(yǎng)——培養(yǎng)基的選35《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件比色法測定小球藻的增殖率I．蛋白核小球藻的構(gòu)造1．淀粉核

2．細(xì)胞核

3．載色體II、III．似親孢子的形成和釋放小球藻屬于綠藻類其細(xì)胞中只有一個(gè)葉綠體，葉綠體中含有和高等植物一樣的光合色素，如葉綠素A、葉綠素B等，也能進(jìn)行光合作用（一）藻類實(shí)驗(yàn)法35《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件比色法測定小球藻的增殖率I．蛋36《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件三、生理生化指標(biāo)測定法比色法測定小球藻的增殖率培養(yǎng)好的小球藻懸浮液5mLherbicide培養(yǎng)液45mL瓶口封上兩層紗布250C1000lx光培養(yǎng)24h處理前、后分別測波長574nm下的吸光度（OD值）增值阻礙率（%）＝處理后的OD值－處理前的OD值對照的OD值－處理前的OD值×100（一）藻類實(shí)驗(yàn)法36《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件三、生理生化指標(biāo)測定法比色法測37《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法（二）浮萍法（三）圓葉片漂浮法三、生理生化指標(biāo)測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)37《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法三、生理生化指38《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件四、癥狀鑒定法

除草劑對供試生物所產(chǎn)生的特異性癥狀。五、愈傷組織鑒定法1、培養(yǎng)基的制備2、外植體的選擇及消毒3、接種4、培養(yǎng)條件5、生長量的測定第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)第三章除草劑的生物測定38《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件四、癥狀鑒定法五、愈傷組織鑒定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件39第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用一、除草劑的篩選二、作物的安全性測定第三章除草劑的生物測定三、除草劑的作用特性測定四、除草劑在土壤中淋溶的測定五、除草劑降解和持效測定六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)七、除草劑混用藥效測定八、除草劑藥害癥狀的診斷《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件39第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件40第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用

利用除草劑的生物測定技術(shù)從大量化合物中發(fā)現(xiàn)除草活性化合物，是篩選新除草劑的重要手段。篩選程序?yàn)閷?shí)驗(yàn)室初篩——盆栽實(shí)驗(yàn)——田間實(shí)驗(yàn)三個(gè)步驟。第三章除草劑的生物測定

一、除草劑的篩選《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件40第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件41第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用二、作物的安全性測定第三章除草劑的生物測定

以作物水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、高粱、谷子、蔬菜等種子或幼苗進(jìn)行測定。用藥量一般與殺草譜試驗(yàn)一樣。再根據(jù)除草劑性能分別于播前、播后，苗前、苗后進(jìn)行藥劑處理，處理1-2周后測定出苗率、生長勢、藥害、株高、鮮重。計(jì)算其選擇性指數(shù)，以確定除草劑對作物的安全性。

一般認(rèn)為，選擇性指數(shù)在4級以上是比較安全的。數(shù)值越大，表示對作物的安全性越大，除草效果越好，因而中選程度也大?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件41第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件42

三、除草劑的作用特性測定

可研究除草劑吸收與作用部位、研究除草劑吸收與傳導(dǎo)。

第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用圖3-2活性炭隔層示意圖

研究除草劑吸收與傳導(dǎo)時(shí)，在供試植物的某一部位涂抹除草劑，經(jīng)一定時(shí)間后，把植物表面未吸收的除草劑沖洗下來進(jìn)行生物測定，觀察施藥部位上下組織受害癥狀，判斷其傳導(dǎo)方向。通過根系吸收的除草劑可用水培法測定，把試材培養(yǎng)在含有一定濃度的除草劑溶液中，經(jīng)一定時(shí)間后，測定除草劑在溶液中的剩余量，并與對照比較。也可采用同位素示蹤法標(biāo)記除草劑后，噴施導(dǎo)入試材中，用自顯影法測定試材對除草劑的吸收、傳導(dǎo)過程?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件42三、除草劑《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件43

將供試植物種子放在狹長的裝有土壤的淋溶槽中，在槽的左端加除草劑，自左部加水展開，展開時(shí)間和距離可因藥劑及目的而異，完畢后，將槽移入培養(yǎng)箱中給以適宜的條件，一定時(shí)間后，可測出除草劑在土壤中淋溶狀況。第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用

四、除草劑在土壤中淋溶的測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件43將供試植物種子放在狹長的裝《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件44（一）田間試驗(yàn)（二）盆栽實(shí)驗(yàn)（三）不同濃度下降解速度（四）除草劑的揮發(fā)和光解速度的測定第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用五、除草劑降解和持效測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件44（一）田間試驗(yàn)第四節(jié)生《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件45五、除草劑降解和持效測定第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用圖3-3土壤降解試驗(yàn)方法圖3-4土壤降解作用生物測定結(jié)果示意圖《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件45五、除草劑降解和持效測定第四節(jié)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件46（一）試驗(yàn)地選擇

實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)應(yīng)根據(jù)除草劑將來可能推廣的地區(qū)或有代表性的地點(diǎn)進(jìn)行選擇，如按大行政區(qū)分或按不同土壤類型地區(qū)分。作物應(yīng)根據(jù)盆栽實(shí)驗(yàn)的結(jié)果確定1-3個(gè)主要作物，選擇有其主要防除雜草的地中進(jìn)行殺草譜試驗(yàn)，應(yīng)避免多次施用除草劑防除雜草都無效的地塊或雜草極少的地上布置實(shí)驗(yàn)，否則，可人工撒播重要的防除對象雜草種籽。第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用

六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件46（一）試驗(yàn)地選擇第四節(jié)生物測《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件47（二）方法與步驟確定除草劑用量，若用一種除草劑時(shí)，可用2-4個(gè)用量作比較，若用幾種除草劑時(shí)，可分別用1-2個(gè)已知參考用量來比較。小區(qū)面積及重復(fù)：旱地小區(qū)面積一般10-30m2，重復(fù)3-4次。隨機(jī)排列，第一重復(fù)的第一處理（第一小區(qū)）應(yīng)為對照（不噴藥區(qū)），第2、3、4重復(fù)中每個(gè)處理小區(qū)的對應(yīng)位置應(yīng)錯(cuò)開，有時(shí)第2處理是以人工除草為對照，第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件47（二）方法與步驟第四節(jié)生物測《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件48（三）噴霧例如：噴幅流量為600mL/min，設(shè)計(jì)每666.7m2噴藥液共30000mL有效噴幅1m。步速：13.33m/min，即每秒走22cm，也就是每秒1m×0.22m=0.22m2；若小區(qū)面積為22m2，則應(yīng)噴22m2÷0.22m2/s=100s。4個(gè)重復(fù)的藥液量一次配好，用走速及時(shí)間來控制噴液量，（應(yīng)事先練習(xí)步速均勻）。第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件48（三）噴霧例如：第四節(jié)生物測《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件49六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)噴藥后7、15、30d分別進(jìn)行調(diào)查記錄，一般用①數(shù)量法②重量法第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用（四）藥效調(diào)查不同雜草對除草劑的敏感程度，可用下列符號記入苗情欄：+++（很敏感），++（敏感），+（不大敏感），０（抗），④也可用目測法來評價(jià)除草劑的藥效?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件49六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件50（一）按比例混合法第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用圖3-5

A、B兩藥劑混用的增效作用試驗(yàn)中可采用如下不同處理：A份、A1/3＋B2/3、A1/2＋B1/2、A2/3＋B1/3、B份等AB直線為兩劑無增無減的準(zhǔn)線，表示兩劑互不影響的藥效總和，若混用各點(diǎn)均在準(zhǔn)線之上，表示增效，反之即為減效。七、除草劑混用藥效測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件50（一）按比例混合法第四節(jié)生物《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件51七、除草劑混用藥效測定（二）殺草活力線法第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用圖3-6

A、B劑單用及混用的殺草活力通過將單用的兩種藥劑分別稀釋成不同濃度單用和將兩劑按一定比例混合的混用試驗(yàn)，做出三條殺草活力線。其中D為混用，A、B兩線為單用，A、B兩條直線間的虛線C為兩劑混用無增無減的準(zhǔn)線（1：1混用）優(yōu)點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)較準(zhǔn)確，適于室內(nèi)實(shí)驗(yàn)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件51七、除草劑混用藥效測定第四節(jié)52《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

1.

進(jìn)行A劑的系列濃度實(shí)驗(yàn)，求A點(diǎn)（IC50）；

2.

進(jìn)行B劑的系列濃度實(shí)驗(yàn)，求B點(diǎn)（IC50）；

3.

分別在縱軸和橫軸上確定A、B兩點(diǎn)并畫直線；第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用七、除草劑混用藥效測定（三）等效線法（千版法）4.

進(jìn)行A劑(一定劑量)+B劑(一系列濃度)的混用實(shí)驗(yàn)、B劑(一定劑量)+

B劑(一系列濃度)的混用實(shí)驗(yàn)以及B劑(一定劑量)+A劑(一系列濃度)的混用試驗(yàn)，求出各混用的IC50；5.

若混用后的IC50各點(diǎn)均在AB線之下為增效，反之則為減效。52《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件1.進(jìn)行A劑的《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件53八、除草劑藥害癥狀的診斷

1.除草劑霧滴漂移2.揮發(fā)3.誤用或過量使用以及使用時(shí)期不當(dāng)4.異常的土壤、氣候條件5.除草劑降解產(chǎn)物使作物受害6.混用不當(dāng)產(chǎn)生加成效應(yīng)或與其它農(nóng)藥混合使用而傷害作物7.長殘效性除草劑：西瑪津、阿拉特津、氟樂靈等造成輪作中敏感的后茬作物受害。

（一）除草劑使作物產(chǎn)生藥害的原因第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件53八、除草劑藥害癥狀的診斷54《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件觸殺型藥害激素型藥害褪綠型藥害芽期抑制型藥害生長抑制型藥害八、除草劑藥害癥狀的診斷（二）區(qū)分除草劑藥害的類型第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用54《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件觸殺型藥害八、除草劑藥害癥狀的55《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2.1觸殺型藥害接觸型除草劑引起葉片變黃癥狀接觸型除草劑引起葉片出現(xiàn)獨(dú)特斑點(diǎn)百草枯、雜草焚、克闊樂等觸殺性除草劑產(chǎn)生的藥害，常表現(xiàn)為作物表皮局部壞死，產(chǎn)生枯斑，這些藥害斑不繼續(xù)擴(kuò)大，以后也不產(chǎn)生新斑。55《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2.1觸殺型藥害接觸型除草56《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件二甲四氯、百草敵、快殺稗等激素類除草劑，它們作用于植物的分生組織，造成細(xì)胞生長異常，導(dǎo)致根莖葉畸形，也會影響到抽穗、開花，使穗子、果實(shí)畸形。2.2激素型藥害2,4-D的藥害——葉呈雞爪型

快殺稗藥害56《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件二甲四氯、百草敵、快殺稗等激素57《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2.3褪綠型藥害三嗪類、取代脲類(撲草凈、西瑪津)除草劑，抑制作物的光合作用。一般藥后7d左右，作物葉尖和葉緣開始褪綠，逐漸擴(kuò)展到全葉，最后全株死亡。取代脲類和三嗪類引起的典型藥害癥狀

57《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2.3褪綠型藥害三嗪類、取代58《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

2.4芽期抑制型藥害酰胺類(都爾、敵稗等)土壤處理除草劑，使作物幼芽、幼根吸收，敏感作物芽畸形死亡，已出土的幼苗心葉扭曲、萎縮，其它葉片皺縮、變黃。苗心葉萎縮58《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2.4芽期抑制型藥害酰胺類59《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

2.5生長抑制型藥害

磺酰脲、磺酰胺、咪唑啉酮類等抑制乙酰乳酸合成酶除草劑，它們破壞植物蛋白質(zhì)的合成，作物受害后能出苗，至3～5cm后生長停止而后死亡?？剐陨詮?qiáng)作物生長受抑，葉片黃化、畸形、扭曲。59《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2.5生長抑制型藥害60《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.1解剖診斷3.2生理診斷3.3形態(tài)診斷八、除草劑藥害癥狀的診斷（三）除草劑造成作物藥害的癥狀診斷第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用60《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.1解剖診斷八、除草劑藥害61《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.1解剖診斷解剖效應(yīng)是植物內(nèi)部組織的變化，在田間很難看出。61《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.1解剖診斷解剖效應(yīng)是植物62《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

3.2生理診斷失綠是葉片內(nèi)葉綠體崩潰、葉綠素分解造成的。失綠癥狀可以發(fā)生在葉、葉尖、或葉脈及其近緣，也可全葉失綠。失綠的色調(diào)因除草劑種類和植物種類的不同而異。有完全白化苗、黃化苗，也有的僅僅是部分失綠。3.2.1失綠

個(gè)別的生理效應(yīng)，如失綠、壞死在田間可以觀察到。62《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.2生理診斷失綠是葉63《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件草甘膦的典型藥害癥狀草甘膦引起新生葉片上出現(xiàn)淺黃色草甘膦引起新生葉片上出現(xiàn)淺黃色3.2生理診斷

3.2.1失綠63《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件草甘膦的典型藥害癥狀草甘膦引起64《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件壞死是作物的某個(gè)部分如器官,組織或細(xì)胞的死亡。死亡部位可發(fā)生在葉、葉尖、或葉脈及其近緣，壞死部分的顏色差別也很大。

3.2生理診斷

3.2.2壞死64《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件壞死是作物的某個(gè)部分如器官,組65《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.3形態(tài)診斷大多數(shù)除草劑引起植物生長異?；蚋?、莖、葉、花形態(tài)發(fā)生變化（如落葉、畸形葉、畸形果、植株矮化等）。形態(tài)效應(yīng)是藥害癥狀診斷的主要類型。65《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.3形態(tài)診斷大多數(shù)除草劑引66《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

3.3.1落葉失綠和壞死嚴(yán)重的葉片，最后因離層形成而落葉。這種現(xiàn)象在果樹上特別是在柑橘上最易見到。大田作物如大豆、花生、棉花等也常發(fā)生。大豆葉片部分壞死棉花葉片部分壞死3.3形態(tài)診斷66《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.3.1落葉失綠和壞死67《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2,4-D藥害左.根腫大右.健株

除草劑施用不當(dāng)對煙草根部的損傷

3.3.2根畸形3.3形態(tài)診斷67《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2,4-D藥害左.根腫大68《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件與正常葉相比，葉形和葉片大小都發(fā)生明顯變化成畸形。如苯氧羧酸類除草劑(如2、4一D)在非禾本科作物上應(yīng)用會出現(xiàn)柳條葉、雞爪葉，部分組織異常膨大等癥狀，這種情況下，常常造成生長點(diǎn)枯死，周緣芽叢生。

3.3.2畸形葉3.3形態(tài)診斷68《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件與正常葉相比，葉形和葉片大小都69《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件苯氧基除草劑藥害引起葉和莖扭曲苯氧基除草劑藥害導(dǎo)致葉片皺折僵硬

2,4-D的藥害——葉呈雞爪型

3.3.2畸形葉3.3形態(tài)診斷69《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件苯氧基除草劑藥害引起葉和莖扭曲70《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

3.3.3果實(shí)畸形3.3形態(tài)診斷70《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3.3.3果實(shí)畸形3.371《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件對于禾本科作物、煙草等作物,其葉片生長受抑制也就伴隨著植株矮化。煙草植株矮化煙草心葉受損導(dǎo)致植株矮化

3.3.4植株矮化3.3形態(tài)診斷71《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件對于禾本科作物、煙草等作物,其72《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.1清水沖洗4.2足量澆水4.3追施速效化肥，提高作物抵抗力4.4施解毒劑4.5用吸附劑八、除草劑藥害癥狀的診斷（四）除草劑造成作物藥害后的挽求措施第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用72《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.1清水沖洗八、除草劑藥害73《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.1清水沖洗當(dāng)除草劑噴灑過量或臨近作物敏感葉片遭受藥害時(shí)，可在受害葉片上連續(xù)噴灑幾次清水，清除或減少作物葉片上藥物的殘留量。遇堿性物質(zhì)易分解失效的除草劑造成的危害，可在水中加入0.2％的生石灰或堿面進(jìn)行淋洗。73《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.1清水沖洗當(dāng)除草劑噴灑過74《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.2足量澆水為降低作物體內(nèi)藥物的相對濃度，可采取足量灌水的方法減輕藥害。74《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.2足量澆水為降低作物體75《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.3追施速效化肥，提高作物抵抗力對受害作物結(jié)合澆水施肥追施硝銨等速效性化肥，促進(jìn)作物迅速生長，提高植株抗藥害的能力。75《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.3追施速效化肥，提高作物76《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

4.4施解毒劑作物受藥害生長受阻，可噴施赤霉素水溶液150kg／hm2，或蕓苔素450mL／hm2，每5d噴1次，連續(xù)噴2～3次即可恢復(fù)正常生長。76《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.4施解毒劑作物受藥害生77《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

4.5用吸附劑活性炭的吸附性能強(qiáng)，能減少除草劑污染土壤后對下茬作物的藥害，活性炭可以播種到溝中，條施或穴施，也可在幼苗移栽前用活性炭浸苗。77《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4.5用吸附劑活性炭的吸《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件78本章知識點(diǎn)掌握除草劑生物測定定義一般掌握除草劑生物測定原理除草劑生物測定優(yōu)缺點(diǎn)除草劑生物測定試材的確定和培育及程序和原則除草劑生物測定技術(shù)（每種方法要掌握一種，包括：試驗(yàn)方法、一個(gè)實(shí)例、判定指標(biāo)等）了解生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件78本章知識點(diǎn)掌握除草劑生物測定定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件79一、除草劑生物測定的定義及意義二、除草劑生物測定的基本原理三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)

野燕麥菟絲子狗芽根第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件1一、除草劑生物測定的定義及意義《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件80一、除草劑生物測定的定義及意義

除草劑生物測定是指利用生物體（主要指有害植物）對除草劑的反應(yīng)來測定除草劑及其效果的基本方法。其目的在于：

1.篩選除草劑,了解除草劑防治的雜草種類及適用的作物范圍；

2.測定除草劑在土壤中的殘留動態(tài)（半衰期等），吸附、淋溶、持效期、光解、揮發(fā)速度、微生物降解等；

3.用于除草劑的定量研究；

4.了解不同除草劑在生物體內(nèi)吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)、作用部位、代謝速度等，為制訂除草劑的安全使用標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2一、除草劑生物測定的定義及意義《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件81二、除草劑生物測定的基本原理

利用活的生物體或生物體器官，在生長、形態(tài)等方面對化學(xué)物質(zhì)（除草劑）的不同反應(yīng)來確定除草劑的濃度。通常選用對除草劑較敏感的生物材料作生測試材。例：單子葉植物對拉索、拿捕凈十分敏感，可用稗草、馬唐、谷子等來測定這類除草劑。五氯酚鈉對魚劇毒，可用魚來測定水中五氯酚鈉的殘毒。第三章除草劑的生物測定稗草馬唐谷子《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件3二、除草劑生物測定的基本原理《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件82

使生物體的敏感反應(yīng)成為生物測定方法，必須符合下列條件：

1、在一定濃度范圍內(nèi)，生物體內(nèi)對除草劑的反應(yīng)隨濃度的增加而有規(guī)律的增加；

2、在環(huán)境條件相似的情況下，用同一種試材重復(fù)試驗(yàn)時(shí)，對同種除草劑的反應(yīng)可以重現(xiàn)。二、除草劑生物測定的基本原理第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件4使生物體的敏感反應(yīng)成為生《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件83三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)（一）優(yōu)點(diǎn):

1.可測定不同類型的除草劑，了解其作用方式、使用劑量、降解速度等。測試材料可以是作物、雜草、動物及微生物等；

2.精確度高：測試材料和測試條件一致時(shí)，它們對不同種類及不同劑量的除草劑的反應(yīng)有較高的靈敏度；

3.設(shè)備較簡單。第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件5三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)（《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件84（二）缺點(diǎn)

1.周期長、費(fèi)時(shí)間：一般3-7d，最快24h，個(gè)別需1個(gè)月以上；

2.測定條件較嚴(yán)格：恒溫、恒濕、光照、養(yǎng)分等條件控制需一致；

3.除草劑中所含雜質(zhì)對除草劑的藥效有一定影響，有時(shí)引起藥害。

因此，除草劑的生物測定技術(shù)也只能在一定條件和范圍內(nèi)應(yīng)用。三、除草劑生物測定技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件6（二）缺點(diǎn)三、除草劑生物測定技術(shù)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件85試材的確定和培育創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件第一節(jié)除草劑生物測定試材的確定和培育第三章除草劑的生物測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件7試材的確定和培育第一節(jié)除草劑生《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件86一、試材的確定和培育1.作物試材的確定和培育

因此，應(yīng)選擇對除草劑敏感的作物或其器官作為生測材料。

每一種除草劑都有其應(yīng)用范圍和禁用對象，因?yàn)橛械淖魑飳δ承┏輨┯锌剐?，而對另一些除草劑敏感。敏感或不敏感隨作物生育期和生長狀況的不同也有很大差別，甚至同種作物的不同品種、一株作物的不同部位對除草劑的敏感度都有差別?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件8一、試材的確定和培育1.作物試材《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件87《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件9《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件88

如除草醚、氟樂靈、敵草隆等以土壤處理為主的除草劑，要求試材是作物種子或剛發(fā)芽的幼苗。

為使測試結(jié)果精確一致，要求成熟度好、大小一致、發(fā)芽率高、發(fā)芽整齊、品種純度高的作物種子。若為玉米、高粱等大穗作物最好采用同一穗的中部種子，發(fā)芽生長整齊，生物測定結(jié)果更精確。高粱種子應(yīng)在試驗(yàn)前20h將種子放在培養(yǎng)皿中加適量水，置25-28℃培養(yǎng)箱中催芽，待芽長出1-2mm時(shí)取出備用。若用不同葉齡期的幼苗，需將種子播種在小盆缽中，播種深度一致，所用土壤要求過篩、肥力和濕度一致，放在溫室中或溫暖向陽處，也可用玻璃或塑料薄膜增溫保濕，待幼苗出土后，生長到所需葉齡期。一、試材的確定和培育1.作物試材的確定和培育作物試材的培育：不同性質(zhì)的除草劑要求不同作物試材及其生育狀態(tài)。

《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件10如除草醚、氟樂靈、敵《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件89不同種類的雜草及其不同生育期、不同器官對不同種類除草劑及其不同濃度都有不同反應(yīng)，因此，必須選擇對供試除草劑較敏感的雜草或其部位為生測試材。一、試材的確定和培育2、雜草試材的確定和培育《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件11不同種類的雜草及其不同生育《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件90雜草試材的培育：不同種類和不同性質(zhì)的除草劑的防除對象不同，作用部位也不同，所以測定不同除草劑時(shí)應(yīng)選擇不同的試材。

例如：敵草隆、阿拉特津、丁草胺等都是以殺剛發(fā)芽（露白）的雜草幼芽為主的土壤處理，所以，要求供試雜草種子大小一致、發(fā)芽率高、發(fā)芽整齊，否則，因雜草種子成熟度不一致、休眠期長短不一、發(fā)芽不整齊等，致使試驗(yàn)結(jié)果誤差較大。

一、試材的確定和培育2、雜草試材的確定和培育《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件12雜草試材的培育：不同種類和《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件91二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件第一節(jié)除草劑生物測定試材的確定和培育

作物、雜草種子萌發(fā)、幼苗生長都需一定的水分、溫度和氧氣。有的還需要一定的光照等條件。

不同作物和雜草生長在不同季節(jié)和環(huán)境中，形成了對環(huán)境條件的不同要求。

如野燕麥生長在東北、西北較冷涼地區(qū)，因而最適生長溫度為10-18℃；而綠狗尾24-32℃時(shí)2-3d內(nèi)發(fā)芽，稗草起于南方，最適生長溫度為17-32℃，燕麥、小麥要求較冷涼條件，大豆、芥菜要求較溫暖條件，而棉花、水稻、西瓜等要求較高溫度。對水分的要求除水稻需高含水量的土壤甚至淹水條件外，一般要求最大田間持水量70%-90%為宜?！掇r(nóng)藥生物測定》多媒體課件13二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件第《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件92二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件

采用培養(yǎng)箱進(jìn)行種子發(fā)芽較易控制溫度。如高粱在25-28℃時(shí)15-20h就能發(fā)芽露白，稗草在30-33℃時(shí)2-3d內(nèi)發(fā)芽，水稻在同樣溫度下3d后才能發(fā)芽。溫室內(nèi)的溫度雖不如培養(yǎng)箱那樣穩(wěn)定，但有光照條件。溫室內(nèi)一般用盆缽進(jìn)行試驗(yàn)。土壤、水分條件較接近于田間。人工氣候室能較好地控制溫度、濕度、光照、通風(fēng)等，可滿足生測中特殊試驗(yàn)要求的條件。小區(qū)試驗(yàn)更接近于生產(chǎn)條件，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果可驗(yàn)證室內(nèi)測定結(jié)果。《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件14二、創(chuàng)造試材所需的環(huán)境條件93《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件第三章除草劑的生物測定

豬殃殃第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)一、除草劑活力的鑒定方法二、除草劑的藥效評價(jià)15《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件第三章除草劑的生物測定豬殃94《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、除草劑活力的鑒定方法(一)萌芽鑒定

許多除草劑能強(qiáng)烈抑制敏感植物種子的萌發(fā)，或明顯地抑制幼芽及胚根的生長，如除草醚、2,4-D、拉索等。隨除草劑劑量的變化，抑制反應(yīng)也有相應(yīng)變化，能較精確的測定劑量與抑制率之間的關(guān)系。一般情況下，典型的根系或初生莖葉的受抑制癥狀可在處理后，培養(yǎng)24-96h

觀察到。第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)16《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、除草劑活力的鑒定方法(一95《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）植株鑒定

通過測定供試植物的生長量來確定除草劑對試材的抑制程度及除草劑的活性。通常以鮮重為指標(biāo)。如對試驗(yàn)要求較精確時(shí)，還要測定實(shí)驗(yàn)植株或特定部位的干重。許多光合作用抑制劑在傷害癥狀出現(xiàn)前，莖葉的生長或株高就產(chǎn)生了差異，它可代替稱重來測定除草劑的活性。但測試植株的不同葉齡和生育期對除草劑的敏感性不同，一般禾本科植物測定葉片長度，豆科植物測定第一復(fù)葉的葉柄長度來鑒定。一、除草劑活力的鑒定方法第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)第三章除草劑的生物測定17《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）植株鑒定一、除草劑活96《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

在肉眼可見的反應(yīng)出現(xiàn)之前，試材生理生化的變化往往可以測定出來。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陳代謝物質(zhì)的變化等都可以作為測定的指標(biāo)。另外，以植物的耗水量表示除草劑的活性，可能比植物重量具有更大的敏感性。

測定用抑制光合作用的除草劑處理過的植株或子葉的光合速率，接觸除草劑幾小時(shí)后，CO2的交換量顯著減少。生長在含有撲草凈的培養(yǎng)基中的植物，其水分消耗在藥害癥狀出現(xiàn)前幾天就有變化，可用水分消耗量作為生測指標(biāo)。黃化反應(yīng)可由分光光度計(jì)或直觀地測定葉綠素含量來估量。另外，也可用根系活力作為生測指標(biāo)。一、除草劑活力的鑒定方法第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)第三章除草劑的生物測定（三）生理和形態(tài)效應(yīng)鑒定18《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件在肉眼可見的反應(yīng)出現(xiàn)之前，97《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件某些除草劑對植物的典型癥狀可用于定性測定，癥狀的強(qiáng)度與劑量呈正比關(guān)系，也可用于定量測定2,4-D的存在與否。除草劑所引起的特殊反應(yīng)常被發(fā)展成定量生物測定技術(shù)。如殺草強(qiáng)（ATA）引起植物向地性的喪失和棉花幼苗根毛發(fā)育的變化；當(dāng)種子用紅外光處理后，幾種三氮苯類除草劑能促進(jìn)萵苣種子的萌發(fā)和棉花胚軸的張開；殺草丹等氨基甲酸酯類除草劑能明顯抑制稗草等敏感植物的心葉生長。一、除草劑活力的鑒定方法（三）生理和形態(tài)效應(yīng)鑒定19《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件某些除草劑對植物的典型癥狀98《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件對照區(qū)雜草－處理區(qū)雜草對照區(qū)雜草抑制率(%)＝×100%二、除草劑藥效評價(jià)第二節(jié)除草劑生物測定的鑒定技術(shù)第三章除草劑的生物測定

對不同類型的除草劑和不同種類的雜草，其防除效果的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不同。常用0（或1）-5（或10）的分級法。

受處理的雜草、作物的高度、重量、密度等指標(biāo)與對照按下列公式計(jì)算雜草抑制率或防治率并進(jìn)行比較：20《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件對照區(qū)雜草－處理區(qū)雜草對照區(qū)雜99《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件歐洲雜草研究會用目測法進(jìn)行9級法統(tǒng)計(jì)，國內(nèi)逐漸采用。二、除草劑藥效評價(jià)21《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件歐洲雜草研究會用目測法進(jìn)行9級100《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)第三章除草劑的生物測定二、植株生長量測定法三、生理生化指標(biāo)測定法四、癥狀鑒定法五、愈傷組織鑒定法22《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法第三節(jié)除草101《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法（一）試驗(yàn)方法

發(fā)芽試驗(yàn)的容器通常為培養(yǎng)皿和小燒杯。使用前首先對器皿進(jìn)行清洗和干熱滅菌，然后加入適量藥液，在發(fā)芽床上播種。發(fā)芽床：濾紙、脫脂棉或消毒過的砂子鋪放在培養(yǎng)皿內(nèi)而制成。第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)23《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法（一）試驗(yàn)102《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法1.供試植物種子（或在催芽前）先浸入0.2%次氯酸鈉溶液中消毒15min，用自來水洗滌并用流水浸泡2-6h，再用蒸餾水洗滌數(shù)次，或在5%漂白粉溶液中消毒半小時(shí)后取出，用水沖洗干凈，以防止試驗(yàn)過程中發(fā)霉，影響試驗(yàn)結(jié)果。2.藥液應(yīng)保持剛好濕潤發(fā)芽床為宜；3.保持供試種子所需的環(huán)境條件，溫度應(yīng)是供試種子發(fā)芽所需要的適溫。一般要求在黑暗下培養(yǎng)，特殊情況除外。4.不要把兩種以上的種子種于同一器皿中（即同一發(fā)芽床上）。注意事項(xiàng)：24《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件一、種子發(fā)芽測定法1.供試103《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）項(xiàng)目調(diào)查1、發(fā)芽率（%）＝藥劑處理的發(fā)芽數(shù)/對照處理的發(fā)芽數(shù)×1002、生長抑制率（%）＝(對照發(fā)芽率－藥劑發(fā)芽率)/對照發(fā)芽率×1003、發(fā)育異常描繪有些藥劑尤其是激素類藥劑可使供試生物根或莖畸形，因此應(yīng)調(diào)查根或莖的膨大或卷曲等異常情況，并做詳細(xì)描述或繪制特征圖。一、種子發(fā)芽測定法25《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）項(xiàng)目調(diào)查一、種子發(fā)芽測定104《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例1、黃瓜幼苗形態(tài)法：是測定激素類除草劑及其他植物生長調(diào)節(jié)劑活性的常用方法，具有反應(yīng)靈敏、測定范圍大（0.1-l000μg/mL），操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。（1）藥劑配制：將2,4-D配制成一系列濃度的丙酮溶液；（2）發(fā)芽床制作：用1張直徑11cm濾紙?jiān)谒幰褐薪溜柡停〕鰮]發(fā)掉丙酮，放入直徑12cm培養(yǎng)皿中，再在其下墊兩張同樣大小空白濾紙。（3）種子消毒：（4）培養(yǎng)：每皿放入20粒，加入12mL蒸餾水（此時(shí)培養(yǎng)皿中的實(shí)際濃度比原來丙酮液濃度低10倍)。蓋好皿蓋，置25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)。（5）形態(tài)描述、繪圖、照相等：6天后取出觀察黃瓜幼苗，描述、繪制、照相或印相各濃度下黃瓜幼苗的形態(tài)。一、種子發(fā)芽測定法26《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例一、種子發(fā)芽測定法105《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法：可測定二苯醚類、酚胺類和氨基甲酸酯類、氯代脂肪酸類等除草劑的活性，但對抑制植物光合作用的除草劑則幾乎不能采用。該法具有操作簡便，測定周期短、范圍較廣的優(yōu)點(diǎn)。一、種子發(fā)芽測定法

試材選用小麥、油菜、水稻、稗草等。以直徑3.5cm，高5.0cm的玻璃杯或50mL的小燒杯為容器。杯底放一張圓濾紙片，吸取一定量的有機(jī)溶劑溶解的待測藥液倒入杯內(nèi)，揮發(fā)干溶劑。若以水稻、稗草等水生雜草種子為試材，在杯中加入2mL蒸餾水，若以小麥、油菜種子為材料時(shí)，則濾紙片底下放一層直徑約為0.5cm大小的玻璃珠，再加入3mL蒸餾水。選擇剛萌動的種子10粒，排放到濾紙片上，置28℃恒溫室中培養(yǎng)，白天給予日光燈照。培養(yǎng)期間每天加入一定量蒸餾水補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分。3d后分別記載株高或測定鮮重。計(jì)算抑制生長50%所需要的濃度（EC50）。（三）實(shí)例27《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法：可測定二苯醚類、酚106《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法一、種子發(fā)芽測定法藥效的分級標(biāo)準(zhǔn)為：0級同對照1級抑制生長25%以下2級抑制生長50%以下3級抑制生長75%以下4級抑制生長75%以上然后計(jì)算每一濃度處理的抑制指數(shù)：抑制指數(shù)＝∑（級別×各級代表株數(shù)）總株數(shù)×4（最高級別）×100

將抑制指數(shù)（抑制百分?jǐn)?shù)）轉(zhuǎn)換為機(jī)率值，濃度（劑量）以對數(shù)值表示，求出EC50。（三）實(shí)例28《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、小杯法一、種子發(fā)芽測定法107《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例3、高粱法4、稗草胚軸中胚軸法一、種子發(fā)芽測定法29《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（三）實(shí)例一、種子發(fā)芽測定法108《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）試驗(yàn)方法將所選試材進(jìn)行催芽處理后，種植在含有供試藥劑的基質(zhì)中（液體基質(zhì)或土壤）或在植株生長的某個(gè)適期施藥，經(jīng)一定時(shí)間、一定條件的培育后觀察試驗(yàn)結(jié)果。二、植株生長量測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)30《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）試驗(yàn)方法二、植株生長量測109《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）實(shí)例1、去胚乳小麥幼苗法：適用于測定光合作用抑制劑。

（1）選種：選擇飽滿度一致的小麥種子。（2）浸種催芽：浸種2h后，排列在鋪有濾紙或紗布的搪瓷盤中，在室溫20℃左右進(jìn)行催芽，3~4d后苗高達(dá)2~3cm。（3）3-4d后精選高度一致的幼苗，輕輕取出，避免傷害根部，然后用鑷子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，準(zhǔn)備種植。（4）用直徑4.5cm、高5cm小玻璃杯為測定容器，每杯注入不同濃度供試藥液3mL和稀釋10倍的培養(yǎng)液6mL，每杯插入上述去胚乳小麥10株。（5）在室溫21~26℃左右和光照下培養(yǎng)6~7天后觀察藥效。注意每天應(yīng)該給每個(gè)小杯稱重，補(bǔ)足損失的水分。（6）測量每株從芽鞘到最長葉尖的距離，求生長抑制率，繼而求EC50。生長抑制率（%）＝(對照生長量－處理生長量)/對照生長量×100二、植株生長量測定法31《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（二）實(shí)例生長抑制率（%）＝(110《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、蘿卜子葉法3、番茄水培法4、葉鞘滴注法5、再生苗測重法（二）實(shí)例1、去胚乳小麥幼苗法

二、植株生長量測定法32《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件2、蘿卜子葉法（二）實(shí)例二、植111《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法：應(yīng)用綠藻(chlorophyta)，藍(lán)藻(cyanophyta)等微小的藻類進(jìn)行有關(guān)除草劑實(shí)驗(yàn)的實(shí)例很多，其中小球藻法是最為普遍的一種方法。（二）浮萍法：（三）圓葉片漂浮法：植物在進(jìn)行光合作用時(shí)，葉片組織內(nèi)產(chǎn)生較高濃度的氧氣，使葉片容易漂浮，而若光合作用受抑制，不能產(chǎn)生氧氣，則葉片就難以漂浮。三、生理生化指標(biāo)測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)

利用植株在施藥后的生理生化反應(yīng)來作為測定的指標(biāo)，亦被廣泛應(yīng)用，特別是近年來由于生理生化技術(shù)發(fā)展，使這一方法更為準(zhǔn)確和靈敏。33《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法：應(yīng)用綠藻(112《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件

1、藻類培養(yǎng)——培養(yǎng)基的選擇與制備；

2、試驗(yàn)法——用偏平燒瓶或三角瓶，將小球藻培養(yǎng)液分別定量加入三角瓶中，再定量加入一定濃度的除草劑?？赏ㄈ胍欢髁康暮?%CO2濃度的空氣，也可用二層紗布封住三角瓶口。25℃下，熒光燈照明培養(yǎng)。

3、測定方法

（1）觀察顏色變化：施藥后5d觀察小球藻退色變化情況。

（2）比色測定小球藻增殖率：因小球藻的增殖，培養(yǎng)液中的綠色逐漸變濃，用分光光度計(jì)在波長574nm下比色測定，吸光度與小球藻細(xì)胞數(shù)量間存在明顯的直線關(guān)系，故可用此法測定小球藻的含量。

（3）濃縮細(xì)胞量測定：把一定量的小球藻懸濁液放入帶刻度的離心管中，I800rpm離心5分鐘，測定沉淀小球藻的體積。

（4）葉綠素含量測定：因小球藻對不同藥劑反應(yīng)不同，故其培養(yǎng)液中小球藻葉綠素總含量是不同的，據(jù)此，可把葉綠素提取出來，測定其含量，以此來比較藥劑的毒力，并可求出LC50，即抑制葉綠體含量50%時(shí)所需要的除草劑濃度。三、生理生化指標(biāo)測定法（一）藻類實(shí)驗(yàn)法34《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件1、藻類培養(yǎng)——培養(yǎng)基的選113《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件比色法測定小球藻的增殖率I．蛋白核小球藻的構(gòu)造1．淀粉核

2．細(xì)胞核

3．載色體II、III．似親孢子的形成和釋放小球藻屬于綠藻類其細(xì)胞中只有一個(gè)葉綠體，葉綠體中含有和高等植物一樣的光合色素，如葉綠素A、葉綠素B等，也能進(jìn)行光合作用（一）藻類實(shí)驗(yàn)法35《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件比色法測定小球藻的增殖率I．蛋114《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件三、生理生化指標(biāo)測定法比色法測定小球藻的增殖率培養(yǎng)好的小球藻懸浮液5mLherbicide培養(yǎng)液45mL瓶口封上兩層紗布250C1000lx光培養(yǎng)24h處理前、后分別測波長574nm下的吸光度（OD值）增值阻礙率（%）＝處理后的OD值－處理前的OD值對照的OD值－處理前的OD值×100（一）藻類實(shí)驗(yàn)法36《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件三、生理生化指標(biāo)測定法比色法測115《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法（二）浮萍法（三）圓葉片漂浮法三、生理生化指標(biāo)測定法第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)37《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件（一）藻類實(shí)驗(yàn)法三、生理生化指116《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件四、癥狀鑒定法

除草劑對供試生物所產(chǎn)生的特異性癥狀。五、愈傷組織鑒定法1、培養(yǎng)基的制備2、外植體的選擇及消毒3、接種4、培養(yǎng)條件5、生長量的測定第三節(jié)除草劑生物測定技術(shù)第三章除草劑的生物測定38《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件四、癥狀鑒定法五、愈傷組織鑒定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件117第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用一、除草劑的篩選二、作物的安全性測定第三章除草劑的生物測定三、除草劑的作用特性測定四、除草劑在土壤中淋溶的測定五、除草劑降解和持效測定六、除草劑田間藥效試驗(yàn)評價(jià)七、除草劑混用藥效測定八、除草劑藥害癥狀的診斷《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件39第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件118第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用

利用除草劑的生物測定技術(shù)從大量化合物中發(fā)現(xiàn)除草活性化合物，是篩選新除草劑的重要手段。篩選程序?yàn)閷?shí)驗(yàn)室初篩——盆栽實(shí)驗(yàn)——田間實(shí)驗(yàn)三個(gè)步驟。第三章除草劑的生物測定

一、除草劑的篩選《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件40第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件119第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用二、作物的安全性測定第三章除草劑的生物測定

以作物水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、高粱、谷子、蔬菜等種子或幼苗進(jìn)行測定。用藥量一般與殺草譜試驗(yàn)一樣。再根據(jù)除草劑性能分別于播前、播后，苗前、苗后進(jìn)行藥劑處理，處理1-2周后測定出苗率、生長勢、藥害、株高、鮮重。計(jì)算其選擇性指數(shù)，以確定除草劑對作物的安全性。

一般認(rèn)為，選擇性指數(shù)在4級以上是比較安全的。數(shù)值越大，表示對作物的安全性越大，除草效果越好，因而中選程度也大。《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件41第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件120

三、除草劑的作用特性測定

可研究除草劑吸收與作用部位、研究除草劑吸收與傳導(dǎo)。

第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用圖3-2活性炭隔層示意圖

研究除草劑吸收與傳導(dǎo)時(shí)，在供試植物的某一部位涂抹除草劑，經(jīng)一定時(shí)間后，把植物表面未吸收的除草劑沖洗下來進(jìn)行生物測定，觀察施藥部位上下組織受害癥狀，判斷其傳導(dǎo)方向。通過根系吸收的除草劑可用水培法測定，把試材培養(yǎng)在含有一定濃度的除草劑溶液中，經(jīng)一定時(shí)間后，測定除草劑在溶液中的剩余量，并與對照比較。也可采用同位素示蹤法標(biāo)記除草劑后，噴施導(dǎo)入試材中，用自顯影法測定試材對除草劑的吸收、傳導(dǎo)過程。《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件42三、除草劑《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件121

將供試植物種子放在狹長的裝有土壤的淋溶槽中，在槽的左端加除草劑，自左部加水展開，展開時(shí)間和距離可因藥劑及目的而異，完畢后，將槽移入培養(yǎng)箱中給以適宜的條件，一定時(shí)間后，可測出除草劑在土壤中淋溶狀況。第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用

四、除草劑在土壤中淋溶的測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件43將供試植物種子放在狹長的裝《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件122（一）田間試驗(yàn)（二）盆栽實(shí)驗(yàn)（三）不同濃度下降解速度（四）除草劑的揮發(fā)和光解速度的測定第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用五、除草劑降解和持效測定《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件44（一）田間試驗(yàn)第四節(jié)生《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件123五、除草劑降解和持效測定第四節(jié)生物測定技術(shù)在除草劑研究中的應(yīng)用圖3-3土壤降解試驗(yàn)方法圖3-4土壤降解作用生物測定結(jié)果示意圖《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件45五、除草劑降解和持效測定第四節(jié)《農(nóng)藥生物測定》多媒體課件124（一）試驗(yàn)地選擇

實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)應(yīng)根據(jù)除草劑將來可能推廣的地區(qū)或有代表性的地點(diǎn)進(jìn)行選擇，如按大行政區(qū)分或按不同土壤類型地區(qū)分。作物應(yīng)根據(jù)盆栽實(shí)驗(yàn)的結(jié)果確定1-3個(gè)主要作物，選擇有其主要防除雜草的地中進(jìn)行殺草譜試驗(yàn)，應(yīng)避免多次施用