免疫-案例分析課件

免疫寄生蟲實訓(xùn)報告2010年6月26日第三組組員：實訓(xùn)前期準(zhǔn)備病例一患者李某，男，32歲，江蘇人。因發(fā)熱，腹痛，拍膿血便1個月余就診?；颊?個月前乘船到湖南農(nóng)村，由于天氣炎熱多次在河里洗澡，當(dāng)時手腳及身體皮膚有米粒大小的紅色丘疹出現(xiàn)，發(fā)癢，有時有風(fēng)疹塊，未予重視，幾天后出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、食欲減退，給予感冒片治療好轉(zhuǎn)。1個月前患者又出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、膿血便，3~4次／d，上腹部疼痛，消瘦，到當(dāng)?shù)蒯t(yī)院給予抗生素治療無效。體檢：T39.2℃，消瘦面容，神志清，心肺（-),腹部稍膨脹，肝劍突下3cm，有壓痛，脾可觸及。血常規(guī)：白細(xì)胞升高，嗜酸性粒細(xì)胞增多。胸片：正常1、病原學(xué)檢查：⑴糞便檢查①直接涂片法：主要只用于急性血吸蟲病患者，此法操作簡單，但檢出率低，取粘液血便可提高檢出率。②自然沉淀法：操作麻煩，檢出率較高。③尼龍袋集卵法：此法比較自然沉淀法簡單，檢出率相近或稍高，適用于大規(guī)模普查，但尼龍袋要嚴(yán)格清洗干凈，防止交叉污染，用孔徑略大或小于日本血吸蟲卵的兩個尼龍篩率除糞便中的糞渣，能較快、較好地收集血吸蟲卵。必須進(jìn)行的試驗：2、免疫學(xué)診斷：①膠體金試驗：㈠將反應(yīng)板平放于實驗臺面上，于小孔內(nèi)滴加待測血清標(biāo)本1~2滴，待完全滲入；㈡于小孔內(nèi)滴加金標(biāo)血吸蟲抗體試劑1~2滴，待完全滲入；㈢于小孔內(nèi)滴加洗滌液2~3滴，待完全滲入；㈣判斷結(jié)果在膜中央有清晰的淡紅色斑點(diǎn)顯示者判為陽性反應(yīng)；反之則為陰性反應(yīng)。斑點(diǎn)呈色的深淺相應(yīng)地提示陽性強(qiáng)度。②環(huán)卵沉淀試驗（COPT）：此法操作簡便、快速、敏感性高、特異性強(qiáng)，是目前日本血吸蟲病的重要輔助診斷技術(shù)之一。常用于流行病學(xué)調(diào)查，疫情監(jiān)測及療效考核。常規(guī)方法為在載玻片上加待測者血清2滴，用針尖挑取血吸蟲新鮮蟲卵或凍干蟲卵約10~150個至血清，混勻。覆蓋24mm×24mm蓋玻片，石蠟封蓋玻片四周，置37℃溫箱48h，低倍鏡觀察結(jié)果。此外，免疫學(xué)診斷方法還包括：ELISA⑴取糞便標(biāo)本20~30g放入燒杯內(nèi)，加入10~20倍的清水充分混勻后靜置20~30分鐘；⑵緩慢傾去上清液，重新加滿水，靜置10~15分鐘，再傾去上清液，連續(xù)2~3次；⑶取沉渣直接涂片鏡檢病例二患者張某，男性，46歲，浙江人。近1月來發(fā)熱，咳嗽，咳痰，痰中帶血，伴胸痛、乏力、皮疹、消瘦，曾在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院對癥治療無效。因發(fā)現(xiàn)右上腹部腫塊，前來就診。詢問病史，有食“醉蟹”史。體檢：一般情況可，心肺無異常，無肝脾腫大。右上腹部腫塊，大小約為2.5×3cm，質(zhì)中等硬度，無壓痛，時有移行。實驗室檢查：白細(xì)胞11×10∧9／L，嗜酸性粒細(xì)胞直接計數(shù)2.84×10∧9,。痰抗酸桿菌（-）。胸片：肺紋理增粗，有小囊樣及隧道樣改變病原學(xué)檢查：①痰液檢查：⒈直接涂片法：取生理鹽水1~2滴于玻片并加入痰液，蓋上蓋玻片進(jìn)行鏡檢，若未見蟲卵，但見夏科—雷登結(jié)晶或嗜酸性粒細(xì)胞則須改用消化沉淀法。⒉消化沉淀法：此法檢出率較高，但較耗時。②糞便檢查：⒈重力沉淀法:⑴取糞便標(biāo)本20~30g放入燒杯杯內(nèi)，加入10~20倍的清水沖充分混勻后靜置20~30分鐘；⑵緩慢傾去上清液，重新加滿水，靜置10~15分鐘，傾去上清液，連續(xù)2~3次;⑶取沉渣直接涂片鏡檢⒉離心沉淀法必須進(jìn)行的試驗：①金標(biāo)試驗中試劑的用量以及標(biāo)本中抗原的含量和實驗者的觀察、肉眼的結(jié)果判定，均可造成結(jié)果不準(zhǔn)確出現(xiàn)假性。②在重力沉淀法操作過程中上清的傾去這一過程十分關(guān)鍵，若過度傾去會導(dǎo)致蟲卵的丟失，導(dǎo)致顯微鏡檢出現(xiàn)假陰性。③在生理鹽水直接涂片法過程中，涂片的厚薄均勻程度以及實驗者觀察部位的選擇，均可影響鏡檢的準(zhǔn)確性出現(xiàn)漏檢。④同時亦受檢驗者的細(xì)心程度及觀察力的影響。分