生物11dna重組技術(shù)的基本工具新人教版選修

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具基因工程的概念基因工程：又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，把一種生物的某種基因提取出來(lái)，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳技術(shù)。（賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品）基因工程的概念基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對(duì)象基因操作水平DNA分子水平基本過(guò)程剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物抗蟲害的玉米轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)基因

鮭魚基因工程產(chǎn)品轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒乳汁中含有人生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程

DNA是遺傳物質(zhì)的證明DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立遺傳密碼的破譯基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)工具酶的發(fā)明DNA合成和測(cè)序技術(shù)的發(fā)明DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功第一例轉(zhuǎn)基因動(dòng)物問(wèn)世PCR技術(shù)的發(fā)明基礎(chǔ)理論技術(shù)發(fā)明DNA重組技術(shù)的基本工具

限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”

DNA連接酶——“分子縫合針”

基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”

一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”分布：主要在原核生物中作用特點(diǎn)：特異性。即一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。切點(diǎn)：磷酸二酯鍵結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端

大腸桿菌(E.coli)的一種限制酶能識(shí)別GAATTC序列，并在G和A之間切開。限制酶限制性內(nèi)切酶限制酶黏性末端和平末端限制酶所識(shí)別的序列有什么特點(diǎn)

限制酶所識(shí)別的序列，無(wú)論是6個(gè)堿基還是4個(gè)堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。限制酶在原核生物中的作用

原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了一套完善的防御機(jī)制，以防止外來(lái)病原物的侵害。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，從而達(dá)到保護(hù)自身的目的。

DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來(lái)，這樣一個(gè)重組的DNA分子就形成了。二、DNA連接酶——“分子縫合針”二、DNA連接酶——“分子縫合針”連接酶有兩種：一種是從大腸桿菌中分離得到的，稱之為E·coli連接酶。另一種是從T4噬菌體中分離得到，稱為T4連接酶。這兩種連接酶催化反應(yīng)基本相同，都是連接雙鏈DNA的缺口，而不能連接單鏈DNA。E·coli連接酶只能連接黏性末端；T4連接酶既可“縫合”黏性末端，又可“縫合”平末端。DNA連接酶——“分子縫合針”DNA連接酶與DNA聚合酶一樣嗎？為什么？三、基因的載體——“分子運(yùn)輸車”載體必須具備的條件：1、能夠在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存；2、具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接；3、具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。（如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等）

4、對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害載體的作用：1、將外源基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去。2、利用運(yùn)載體在受體細(xì)胞內(nèi)，對(duì)外源基因進(jìn)行大量復(fù)制。常用的載體有：

質(zhì)粒，λ噬菌體的衍生物，動(dòng)植物病毒等質(zhì)粒①?gòu)V泛地存在于細(xì)菌中、②獨(dú)立與擬核外、③能自主復(fù)制、④雙鏈閉環(huán)DNA分子、⑤很?。ù笮≈挥衅胀?xì)菌擬核DNA的百分之一）要對(duì)天然質(zhì)粒進(jìn)行人工改造濟(jì)南陽(yáng)光女子醫(yī)院wpe47xrz是在這里蹲點(diǎn)吧！”“你就不能配合點(diǎn)嗎?！薄澳阌譀]讓我配合?！薄蝗诉z忘的慕容凌娢終于從地上站了起來(lái)，但感覺自己的腦細(xì)胞正急速死亡，智商再次跌入谷底。韓哲軒怎么會(huì)知道我的真名？百蝶好像也知道他去找過(guò)夏樺。“呃……”慕容凌娢強(qiáng)壯鎮(zhèn)定的笑了笑，“韓哲軒你怎么會(huì)在這里？”“百蝶不是說(shuō)了嗎，我就是在這里專門等你們的?！表n哲軒極其爽快的承認(rèn)了自己的行為，“我看見你們兩個(gè)出來(lái)，就跟上了。剛想叫住你就看見你往后摔了……幸好我閃的快……”這劇情跟我想的怎么不一樣？按照言情小說(shuō)的正常套路，我不是應(yīng)該被人準(zhǔn)確無(wú)誤的接住嗎？然后不就順理成章的……慕容凌娢居然做起了花癡的白日夢(mèng)。慕容凌娢把自己的幻想和現(xiàn)實(shí)仔細(xì)對(duì)照了一下，又看了看面前這個(gè)笑得漫不經(jīng)心的人，悲痛的捂住了臉……童話里的故事果真都是騙人的……自己怎么能指望這種人呢？“凌娢你怎么了？”百蝶看著一直發(fā)呆的慕容凌娢，稍許有些擔(dān)憂，“不會(huì)真的摔傻了吧！”“沒……沒事。”慕容凌娢緊張的搖了搖頭，生怕百蝶看出什么端倪?！安贿^(guò)韓哲軒，你怎么會(huì)知道我的真名？”既然韓哲軒知道了自己的名字，也就是知道了自己一開始就說(shuō)了謊，真的好尷尬?。　跋裎疫@種開掛玩家，怎么能連這種東西都不知道呢?！表n哲軒居然沒有再提起“白綾”這個(gè)化名，這讓慕容凌娢很是欣慰?！笆窍南壬嬖V你的吧！”慕容凌娢絕對(duì)不會(huì)相信這是可以猜到的東西?！叭绻銟芬膺@樣想，我不介意。”(古風(fēng)一言)那時(shí)，誰(shuí)繡芙蓉鴛鴦戲。而今，誰(shuí)惹青絲千里外。第016章原來(lái)不是青樓“是夏先生告訴你的吧！我的真名。”慕容凌娢絕對(duì)不會(huì)相信這是可以猜到的東西。“如果你樂意這樣想，我不介意?！表n哲軒攤開雙手，還是一副漫不經(jīng)心的樣子?！澳强磥?lái)是我想錯(cuò)了，你是怎么知道的？”“猜得?！薄芭叮瓉?lái)是這樣啊……”慕容凌娢表面上笑著說(shuō)，心里卻在告誡自己，冷靜……一定要冷靜，不能著急，不能生氣……這算是答復(fù)嗎？太敷衍了吧！不想告訴我就直說(shuō)嗎，真是煩人。韓哲軒最終也沒有告訴慕容凌娢他是怎么知道她的真實(shí)姓名的，因?yàn)檫@個(gè)話題很快就被百蝶機(jī)智的轉(zhuǎn)移了，她可不想看著兩個(gè)人如此尷尬的僵持在大街上，畢竟這樣太引人注意了?！傲鑺危悴皇怯X得餓了嗎？趕快走吧。”百蝶拉著慕容凌娢的胳膊便將她向前拖去，強(qiáng)行拉開了她和韓