梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查課件

梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查1ppt課件梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查1ppt課件梅毒的定義

梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體（蒼白螺旋體）引起，患病后病程漫長(zhǎng)，早期侵犯生殖器和皮膚，晚期侵犯全身各器官，并生多種多樣的癥狀和體征，病變幾乎能累及全身各個(gè)臟器。2ppt課件梅毒的定義梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體病原體為梅毒螺旋體，屬于密螺旋體屬，蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponemapallidumsubspeciespallidum)

蒼白亞種梅毒蒼白螺旋體地方亞種地方性梅毒極細(xì)亞種雅司病密螺旋體屬

品他螺旋體品他病3ppt課件病原體為梅毒螺旋體，屬于密螺旋體屬，蒼白密螺旋體蒼白亞種(T梅毒螺旋體的生物學(xué)特性1、直徑0.10~0.15μm，有8~14個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直。2、原生質(zhì)圓柱體上緊繞著3~4根周漿鞭毛，故運(yùn)動(dòng)活躍，運(yùn)動(dòng)方式多樣。3、G-，但不易著色。Fantana鍍銀染色呈棕褐色。4、在無(wú)活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢。5、抵抗力極弱，對(duì)溫度和干燥特別敏感；對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗生素敏感。在干燥條件下不易生存。肥皂水和一般消毒劑以及加溫42℃以上均極易將其殺滅。4ppt課件梅毒螺旋體的生物學(xué)特性1、直徑0.10~0.15μm，有8傳播途徑

性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來(lái)越小到感染后2年，通過(guò)性接觸一般無(wú)傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過(guò)胎盤(pán)傳染未經(jīng)治療者，雖已無(wú)性傳播（病期>2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒病期越長(zhǎng)，傳染性越小;輸血傳染間接傳播：日常用品、接吻、哺乳、醫(yī)療器械等途徑（接觸部位附有梅毒螺旋體）。5ppt課件傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑5ppt課件

免疫性

特異性抗體感染2周后產(chǎn)生特異性IgM抗體,不能通過(guò)胎盤(pán)感染4周后出現(xiàn)特異性IgG抗體,可通過(guò)胎盤(pán)非特異性抗體刺激機(jī)體產(chǎn)生抗心磷脂抗體/反應(yīng)素RPR

和TRUST等方法可檢出：5～7周或硬下疳后2～3周完全治愈的早期梅毒可再感染6ppt課件免疫性特異性抗體6ppt課件梅毒的分期7ppt課件梅毒的分期7ppt課件梅毒的診斷梅毒的診斷早期梅毒（一期、二期和早期隱性梅毒）和晚期梅毒（三期和晚期隱性梅毒）必須依靠病史、癥狀及實(shí)驗(yàn)檢查進(jìn)行綜合分析梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義8ppt課件梅毒的診斷梅毒的診斷8ppt課件常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)法：

（1）暗視野顯微鏡檢查（2）鍍銀染色檢查血清學(xué)檢測(cè)法：

非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)

（1）VDRL(性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn))：需滅活（2）USR（不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)）（3）RPR(加速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn))

（4）TRUST(甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn))梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（1）FTA-ABS

（2）TPPA/TPHA

（3）TP-ELISA

（4）發(fā)光法（5）膠體金法

9ppt課件常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)法：9ppt課件暗視野顯微鏡檢查標(biāo)本類型：梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液、淋巴結(jié)穿刺液方法：暗視野顯微鏡下查找梅毒螺旋體。結(jié)果：典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運(yùn)動(dòng)方式：①伸縮其螺旋間距離而移動(dòng)（主要方式）②蛇行式③旋轉(zhuǎn)式評(píng)價(jià)：①.簡(jiǎn)單、可靠。②.早期：硬下疳（梅毒血清學(xué)試驗(yàn)仍陰性）。③.陰性不能排出患梅毒的可能性

10ppt課件暗視野顯微鏡檢查標(biāo)本類型：梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體11ppt課件暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體11ppt課件鍍銀染色檢查基本原理：梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體結(jié)果：棕褐色的梅毒螺旋體12ppt課件鍍銀染色檢查基本原理：梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、方便、易操作的特點(diǎn)。螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法，對(duì)于患者的早期診斷、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見(jiàn)到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。13ppt課件病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理（抗心磷脂抗體）：人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來(lái)的一種類脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w產(chǎn)生時(shí)間感染3周-4周，硬下疳出現(xiàn)1周-2周一般在感染后5～7周（或硬下疳出現(xiàn)后2～3周）產(chǎn)生?？贵w作用無(wú)保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。14ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理（抗心磷脂抗體）：14ppt課梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀15ppt課件梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀15ppt課件四種非特異性試驗(yàn)方法比較16ppt課件四種非特異性試驗(yàn)方法比較16ppt課件檢測(cè)流程（定性）加樣：吸取50μl血清（漿）放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)。加抗原：將抗原輕輕搖勻，用試劑盒提供的針頭加1滴抗原。反應(yīng)：將卡片置梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀8分鐘立即在亮光下觀察結(jié)果。17ppt課件檢測(cè)流程（定性）加樣：17ppt課件檢測(cè)流程（定量）稀釋液準(zhǔn)備：在圈內(nèi)加入50μl生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開(kāi)。加樣：吸取50μl血清(漿)與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布滿整個(gè)圈內(nèi)。重復(fù)定性試驗(yàn)后兩步。18ppt課件檢測(cè)流程（定量）稀釋液準(zhǔn)備：18ppt課件凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：3+～4+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的紅色絮狀物，液體清亮。2+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小到大的紅色絮狀物，液體較清亮。1+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小的紅色絮狀物，液體渾濁?！簣A圈內(nèi)僅見(jiàn)紅色集中于中央一點(diǎn)或均勻分散。19ppt課件凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：3+～4+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的紅色絮狀物，RPR定量試驗(yàn)中等至大的凝塊為陽(yáng)性（圈4和7）有明確但很小的凝塊為弱陽(yáng)性（圈2和3）顆粒均勻分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）為陰性20ppt課件RPR定量試驗(yàn)中等至大的凝塊為陽(yáng)性（圈4和7）有明確但很小的21ppt課件21ppt課件臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，VDRL試驗(yàn)抗體滴度下降2個(gè)稀釋度，6個(gè)月下降4個(gè)稀釋度。一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽(yáng)性早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽(yáng)性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。22ppt課件臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，假陽(yáng)性問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽(yáng)性①技術(shù)性假陽(yáng)性由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過(guò)期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。②生物學(xué)假陽(yáng)性是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性23ppt課件假陽(yáng)性問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽(yáng)性23ppt課件急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病風(fēng)疹水痘傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性肝炎上呼吸道感染肺炎球菌性肺炎病毒性肺炎牛痘疹24ppt課件急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病風(fēng)疹24ppt課件慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡自身免疫性溶血性貧血盤(pán)狀紅斑狼瘡結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎橋本氏甲狀腺炎風(fēng)濕性心臟病干燥綜合征毒品癮者慢性腎炎肝硬化老年麻風(fēng)(是唯一產(chǎn)生慢性生物學(xué)假陽(yáng)性的感染性疾病)25ppt課件慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡風(fēng)濕性心臟病妊娠的假陽(yáng)性反應(yīng)這是一種生理情況下的生物學(xué)假陽(yáng)性

假陽(yáng)性發(fā)生率較低有報(bào)告為0.4%，滴度低。26ppt課件妊娠的假陽(yáng)性反應(yīng)這是一種生理情況下的生物學(xué)假陽(yáng)性26ppt課假陽(yáng)性問(wèn)題梅毒假陽(yáng)性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽(yáng)性反應(yīng)，經(jīng)過(guò)重復(fù)試驗(yàn)即可除外。對(duì)急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，應(yīng)做TPHA（TPPA）等試驗(yàn)進(jìn)行排除。27ppt課件假陽(yáng)性問(wèn)題梅毒假陽(yáng)性反應(yīng)的處理27ppt課件前帶現(xiàn)象原理指二期梅毒患者非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果。處理將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)。28ppt課件前帶現(xiàn)象原理28ppt課件血清固定耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。29ppt課件血清固定耐血清性（血清固定）29ppt課件梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)：檢測(cè)血中特異性抗梅毒螺旋體特異蛋白為抗原的抗體（IgG和IgM）。特異性IgM型抗梅毒螺旋體抗體，感染2周后即可測(cè)出。30ppt課件梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)：檢測(cè)血中特異性抗梅毒螺旋體特異蛋白實(shí)驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT)

熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）31ppt課件實(shí)驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)31ppt課件TPPA/TPHA原理TPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相同TPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒TPHA試驗(yàn)中梅毒螺旋體致敏羊紅細(xì)胞特點(diǎn)梅毒螺旋體(Nichols株)全抗原32ppt課件TPPA/TPHA原理TPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相同操作步驟1.試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前將試劑和待檢標(biāo)本恢復(fù)到室溫。

2.加稀釋液：每份樣本做4孔，加標(biāo)本稀釋液加至微量反應(yīng)板孔內(nèi)，第1孔100微升，第2～4孔各25微升。3.樣本稀釋：取血清25微升加至第1孔，混勻后取25微升至第2孔，混勻后取25微升至第3孔，混勻后取25微升至第4孔，混勻后棄去25微升。4.加對(duì)照液：第3孔加未致敏顆粒25微升，第4孔加致敏顆粒25微升。5.混合：將反應(yīng)板置振蕩器振蕩30秒。6.反應(yīng)：置有蓋濕盒，孵育2h，或放4℃冰箱過(guò)夜觀察結(jié)果。

33ppt課件操作步驟1.試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前將試劑和待檢標(biāo)本恢復(fù)到室溫。

結(jié)果判斷1.觀察加未致敏顆粒的第3孔，不出現(xiàn)凝集為有效試驗(yàn)。

2.觀察凝集反應(yīng)強(qiáng)度：分級(jí)如下。

4+：顆粒光滑覆蓋整個(gè)孔底，有時(shí)邊緣有折疊。

3+：顆粒光滑覆蓋大部分孔底。

2+：顆粒光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一顆粒環(huán)。

1+：

顆粒光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一明顯顆粒環(huán)。

±：顆粒沉集孔底，中央形成一小點(diǎn)。

一：顆粒緊密沉積孔底中央。34ppt課件結(jié)果判斷1.觀察加未致敏顆粒的第3孔，不出現(xiàn)凝集為有效試驗(yàn)。35ppt課件35ppt課件熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）原理將有完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑（用Reiter螺旋體制備而成）吸收過(guò)的梅毒患者血清形成抗原抗體復(fù)合物，再加入異硫氰酸熒光素（FTIC）標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，與抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，形成熒光的抗原抗體復(fù)合物。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯出蘋(píng)果綠色的熒光，即為陽(yáng)性反應(yīng)。曾經(jīng)認(rèn)為FTA-ABS試驗(yàn)是檢測(cè)梅毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”試驗(yàn)。36ppt課件熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）原理36ppt課件TP-ELISA原理用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標(biāo)記物，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶聯(lián)檢測(cè)儀判定試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)。特點(diǎn)本法可用于大規(guī)模血清檢測(cè)。37ppt課件TP-ELISA原理37ppt課件梅毒螺旋體抗體測(cè)定(ELISA法)結(jié)果的解讀

陰性對(duì)照OD≤0.1，陽(yáng)性對(duì)照OD＞0.8時(shí)實(shí)驗(yàn)正常，否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。計(jì)算方法：cut-off(co)值=0.12+陰性對(duì)照平均OD值，s/co值=病人OD值/cut-off(co)值，s/co值大于或等于1判為陽(yáng)性，s/co值小于1判為陰性注s/co值在0.5~2.0之間的灰區(qū)樣本需復(fù)檢確認(rèn)后報(bào)告38ppt課件梅毒螺旋體抗體測(cè)定(ELISA法)結(jié)果的解讀

陰性對(duì)照OD≤免疫層析39ppt課件免疫層析39ppt課件臨床應(yīng)用梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)它們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)是真陽(yáng)性還是假陽(yáng)性。一旦這些試驗(yàn)呈陽(yáng)性，則患者終身陽(yáng)性。40ppt課件臨床應(yīng)用梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)40ppt課件方法特點(diǎn)特異性強(qiáng)，敏感性高很少出現(xiàn)假陽(yáng)性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在普通人群中，有1%的生物學(xué)假陽(yáng)性發(fā)生。如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清可使FTA-ABS試驗(yàn)呈假陽(yáng)性反應(yīng)，但大多數(shù)病例中螺旋體呈串株?duì)顭晒?。傳染性單核?xì)胞增多癥，可能由于嗜異性抗體所致，可使TPHA呈假陽(yáng)性。麻風(fēng)患者也可使特異試驗(yàn)呈陽(yáng)性。41ppt課件方法特點(diǎn)特異性強(qiáng)，敏感性高41ppt課件臨床意義作為RPR初篩陽(yáng)性標(biāo)本的確證試驗(yàn)。不能作為療效觀察的指標(biāo)。陽(yáng)性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合RPR結(jié)果進(jìn)行診斷。42ppt課件臨床意義作為RPR初篩陽(yáng)性標(biāo)本的確證試驗(yàn)。42ppt課件假陽(yáng)性問(wèn)題存在交叉反應(yīng)的抗體處理方法：用Reiter株吸收血清中交叉反應(yīng)的抗體。43ppt課件假陽(yáng)性問(wèn)題存在交叉反應(yīng)的抗體43ppt課件老年人抗體陽(yáng)性的問(wèn)題1、真陽(yáng)性2、假陽(yáng)性：這些老年患者所患的基礎(chǔ)疾病可能使機(jī)體釋放誘導(dǎo)產(chǎn)生抗類脂抗體和/或抗T.pallidum抗體的交叉抗原；44ppt課件老年人抗體陽(yáng)性的問(wèn)題1、真陽(yáng)性44ppt課件梅毒檢測(cè)流程圖A1(ELISA)A1+A1-A2(PRP或TRUST）A1+A2+感染：既往或現(xiàn)在A1+A2-A3（TPPA）A1+A2-A3+可能是梅毒感染需結(jié)合臨床表現(xiàn)A1+A2-A3-基本排除梅毒潛伏期美國(guó)2009年指南45ppt課件梅毒檢測(cè)流程圖A1(ELISA)A1+A1-A2(PRP或T梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的臨床意義46ppt課件梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的臨床意義46ppt課件RPR結(jié)果解釋示意圖

陽(yáng)性陰性47ppt課件RPR結(jié)果解釋示意圖陽(yáng)性TPPA結(jié)果解釋示意圖

陽(yáng)性陰性48ppt課件TPPA結(jié)果解釋示意圖陽(yáng)性陰性48p檢測(cè)方法 樣品種類

血清血漿 末梢血 腦脊液非梅毒螺旋體試驗(yàn) 快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)

甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST） 性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL) 梅毒螺旋體試驗(yàn) 梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA） 梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(TP-RT)

熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS） 化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定試驗(yàn)（CLIA） 梅毒IgM抗體檢測(cè)（TP-IgM） 梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（TP-WB） 梅毒血清學(xué)試驗(yàn)適用范圍49ppt課件檢測(cè)方法 樣品ThankYou!50ppt課件ThankYou!梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查51ppt課件梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查1ppt課件梅毒的定義

梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體（蒼白螺旋體）引起，患病后病程漫長(zhǎng)，早期侵犯生殖器和皮膚，晚期侵犯全身各器官，并生多種多樣的癥狀和體征，病變幾乎能累及全身各個(gè)臟器。52ppt課件梅毒的定義梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體病原體為梅毒螺旋體，屬于密螺旋體屬，蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponemapallidumsubspeciespallidum)

蒼白亞種梅毒蒼白螺旋體地方亞種地方性梅毒極細(xì)亞種雅司病密螺旋體屬

品他螺旋體品他病53ppt課件病原體為梅毒螺旋體，屬于密螺旋體屬，蒼白密螺旋體蒼白亞種(T梅毒螺旋體的生物學(xué)特性1、直徑0.10~0.15μm，有8~14個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直。2、原生質(zhì)圓柱體上緊繞著3~4根周漿鞭毛，故運(yùn)動(dòng)活躍，運(yùn)動(dòng)方式多樣。3、G-，但不易著色。Fantana鍍銀染色呈棕褐色。4、在無(wú)活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢。5、抵抗力極弱，對(duì)溫度和干燥特別敏感；對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗生素敏感。在干燥條件下不易生存。肥皂水和一般消毒劑以及加溫42℃以上均極易將其殺滅。54ppt課件梅毒螺旋體的生物學(xué)特性1、直徑0.10~0.15μm，有8傳播途徑

性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來(lái)越小到感染后2年，通過(guò)性接觸一般無(wú)傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過(guò)胎盤(pán)傳染未經(jīng)治療者，雖已無(wú)性傳播（病期>2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒病期越長(zhǎng)，傳染性越小;輸血傳染間接傳播：日常用品、接吻、哺乳、醫(yī)療器械等途徑（接觸部位附有梅毒螺旋體）。55ppt課件傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑5ppt課件

免疫性

特異性抗體感染2周后產(chǎn)生特異性IgM抗體,不能通過(guò)胎盤(pán)感染4周后出現(xiàn)特異性IgG抗體,可通過(guò)胎盤(pán)非特異性抗體刺激機(jī)體產(chǎn)生抗心磷脂抗體/反應(yīng)素RPR

和TRUST等方法可檢出：5～7周或硬下疳后2～3周完全治愈的早期梅毒可再感染56ppt課件免疫性特異性抗體6ppt課件梅毒的分期57ppt課件梅毒的分期7ppt課件梅毒的診斷梅毒的診斷早期梅毒（一期、二期和早期隱性梅毒）和晚期梅毒（三期和晚期隱性梅毒）必須依靠病史、癥狀及實(shí)驗(yàn)檢查進(jìn)行綜合分析梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義58ppt課件梅毒的診斷梅毒的診斷8ppt課件常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)法：

（1）暗視野顯微鏡檢查（2）鍍銀染色檢查血清學(xué)檢測(cè)法：

非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)

（1）VDRL(性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn))：需滅活（2）USR（不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)）（3）RPR(加速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn))

（4）TRUST(甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn))梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（1）FTA-ABS

（2）TPPA/TPHA

（3）TP-ELISA

（4）發(fā)光法（5）膠體金法

59ppt課件常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)法：9ppt課件暗視野顯微鏡檢查標(biāo)本類型：梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液、淋巴結(jié)穿刺液方法：暗視野顯微鏡下查找梅毒螺旋體。結(jié)果：典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運(yùn)動(dòng)方式：①伸縮其螺旋間距離而移動(dòng)（主要方式）②蛇行式③旋轉(zhuǎn)式評(píng)價(jià)：①.簡(jiǎn)單、可靠。②.早期：硬下疳（梅毒血清學(xué)試驗(yàn)仍陰性）。③.陰性不能排出患梅毒的可能性

60ppt課件暗視野顯微鏡檢查標(biāo)本類型：梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體61ppt課件暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體11ppt課件鍍銀染色檢查基本原理：梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體結(jié)果：棕褐色的梅毒螺旋體62ppt課件鍍銀染色檢查基本原理：梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、方便、易操作的特點(diǎn)。螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法，對(duì)于患者的早期診斷、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見(jiàn)到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。63ppt課件病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理（抗心磷脂抗體）：人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來(lái)的一種類脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w產(chǎn)生時(shí)間感染3周-4周，硬下疳出現(xiàn)1周-2周一般在感染后5～7周（或硬下疳出現(xiàn)后2～3周）產(chǎn)生?？贵w作用無(wú)保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。64ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理（抗心磷脂抗體）：14ppt課梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀65ppt課件梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀15ppt課件四種非特異性試驗(yàn)方法比較66ppt課件四種非特異性試驗(yàn)方法比較16ppt課件檢測(cè)流程（定性）加樣：吸取50μl血清（漿）放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)。加抗原：將抗原輕輕搖勻，用試劑盒提供的針頭加1滴抗原。反應(yīng)：將卡片置梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀8分鐘立即在亮光下觀察結(jié)果。67ppt課件檢測(cè)流程（定性）加樣：17ppt課件檢測(cè)流程（定量）稀釋液準(zhǔn)備：在圈內(nèi)加入50μl生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開(kāi)。加樣：吸取50μl血清(漿)與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布滿整個(gè)圈內(nèi)。重復(fù)定性試驗(yàn)后兩步。68ppt課件檢測(cè)流程（定量）稀釋液準(zhǔn)備：18ppt課件凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：3+～4+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的紅色絮狀物，液體清亮。2+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小到大的紅色絮狀物，液體較清亮。1+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小的紅色絮狀物，液體渾濁?！簣A圈內(nèi)僅見(jiàn)紅色集中于中央一點(diǎn)或均勻分散。69ppt課件凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：3+～4+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的紅色絮狀物，RPR定量試驗(yàn)中等至大的凝塊為陽(yáng)性（圈4和7）有明確但很小的凝塊為弱陽(yáng)性（圈2和3）顆粒均勻分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）為陰性70ppt課件RPR定量試驗(yàn)中等至大的凝塊為陽(yáng)性（圈4和7）有明確但很小的71ppt課件21ppt課件臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，VDRL試驗(yàn)抗體滴度下降2個(gè)稀釋度，6個(gè)月下降4個(gè)稀釋度。一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽(yáng)性早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽(yáng)性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。72ppt課件臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，假陽(yáng)性問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽(yáng)性①技術(shù)性假陽(yáng)性由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過(guò)期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。②生物學(xué)假陽(yáng)性是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性73ppt課件假陽(yáng)性問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽(yáng)性23ppt課件急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病風(fēng)疹水痘傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性肝炎上呼吸道感染肺炎球菌性肺炎病毒性肺炎牛痘疹74ppt課件急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病風(fēng)疹24ppt課件慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡自身免疫性溶血性貧血盤(pán)狀紅斑狼瘡結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎橋本氏甲狀腺炎風(fēng)濕性心臟病干燥綜合征毒品癮者慢性腎炎肝硬化老年麻風(fēng)(是唯一產(chǎn)生慢性生物學(xué)假陽(yáng)性的感染性疾病)75ppt課件慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡風(fēng)濕性心臟病妊娠的假陽(yáng)性反應(yīng)這是一種生理情況下的生物學(xué)假陽(yáng)性

假陽(yáng)性發(fā)生率較低有報(bào)告為0.4%，滴度低。76ppt課件妊娠的假陽(yáng)性反應(yīng)這是一種生理情況下的生物學(xué)假陽(yáng)性26ppt課假陽(yáng)性問(wèn)題梅毒假陽(yáng)性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽(yáng)性反應(yīng)，經(jīng)過(guò)重復(fù)試驗(yàn)即可除外。對(duì)急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，應(yīng)做TPHA（TPPA）等試驗(yàn)進(jìn)行排除。77ppt課件假陽(yáng)性問(wèn)題梅毒假陽(yáng)性反應(yīng)的處理27ppt課件前帶現(xiàn)象原理指二期梅毒患者非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果。處理將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)。78ppt課件前帶現(xiàn)象原理28ppt課件血清固定耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。79ppt課件血清固定耐血清性（血清固定）29ppt課件梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)：檢測(cè)血中特異性抗梅毒螺旋體特異蛋白為抗原的抗體（IgG和IgM）。特異性IgM型抗梅毒螺旋體抗體，感染2周后即可測(cè)出。80ppt課件梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)：檢測(cè)血中特異性抗梅毒螺旋體特異蛋白實(shí)驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT)

熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）81ppt課件實(shí)驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)31ppt課件TPPA/TPHA原理TPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相同TPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒TPHA試驗(yàn)中梅毒螺旋體致敏羊紅細(xì)胞特點(diǎn)梅毒螺旋體(Nichols株)全抗原82ppt課件TPPA/TPHA原理TPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相同操作步驟1.試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前將試劑和待檢標(biāo)本恢復(fù)到室溫。

2.加稀釋液：每份樣本做4孔，加標(biāo)本稀釋液加至微量反應(yīng)板孔內(nèi)，第1孔100微升，第2～4孔各25微升。3.樣本稀釋：取血清25微升加至第1孔，混勻后取25微升至第2孔，混勻后取25微升至第3孔，混勻后取25微升至第4孔，混勻后棄去25微升。4.加對(duì)照液：第3孔加未致敏顆粒25微升，第4孔加致敏顆粒25微升。5.混合：將反應(yīng)板置振蕩器振蕩30秒。6.反應(yīng)：置有蓋濕盒，孵育2h，或放4℃冰箱過(guò)夜觀察結(jié)果。

83ppt課件操作步驟1.試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前將試劑和待檢標(biāo)本恢復(fù)到室溫。

結(jié)果判斷1.觀察加未致敏顆粒的第3孔，不出現(xiàn)凝集為有效試驗(yàn)。

2.觀察凝集反應(yīng)強(qiáng)度：分級(jí)如下。

4+：顆粒光滑覆蓋整個(gè)孔底，有時(shí)邊緣有折疊。

3+：顆粒光滑覆蓋大部分孔底。

2+：顆粒光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一顆粒環(huán)。

1+：

顆粒光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一明顯顆粒環(huán)。

±：顆粒沉集孔底，中央形成一小點(diǎn)。

一：顆粒緊密沉積孔底中央。84ppt課件結(jié)果判斷1.觀察加未致敏顆粒的第3孔，不出現(xiàn)凝集為有效試驗(yàn)。85ppt課件35ppt課件熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）原理將有完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑（用Reiter螺旋體制備而成）吸收過(guò)的梅毒患者血清形成抗原抗體復(fù)合物，再加入異硫氰酸熒光素（FTIC）標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，與抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，形成熒光的抗原抗體復(fù)合物。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯出蘋(píng)果綠色的熒光，即為陽(yáng)性反應(yīng)。曾經(jīng)認(rèn)為FTA-ABS試驗(yàn)是檢測(cè)梅毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”試驗(yàn)。86ppt課件熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）原理36ppt課件TP-ELISA原理用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標(biāo)記物，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶聯(lián)檢測(cè)儀判定試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)。特點(diǎn)本法可用于大規(guī)模血清檢測(cè)。87ppt課件TP-ELISA原理37ppt課件梅毒螺旋體抗體測(cè)定(ELISA法)結(jié)果的解讀

陰性對(duì)照OD≤0.1，陽(yáng)性對(duì)照OD＞0.8時(shí)實(shí)驗(yàn)正常，否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。計(jì)算方法：cut-off(co)值=0.12+陰性對(duì)照平均OD值，s/co值=病人OD值/cut-off(co)值，s/co值大于或等于1判為陽(yáng)性，s/co值小于1判為陰性注s/co值在0.5~2.0之間的灰區(qū)樣本需復(fù)檢確認(rèn)后報(bào)告88ppt課件梅毒螺旋體抗體測(cè)定(ELISA法)結(jié)果的解讀

陰性對(duì)照OD≤免疫層析89ppt課件免疫層析39ppt課件臨床應(yīng)用梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)它們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)是真陽(yáng)