除草劑生物測定技術課件

第四章除草劑生物測定技術

除草劑生物測定的意義除草劑生物測定的基本原理除草劑生物測定技術程序和原則除草劑生物測定方法簡介除草劑田間藥效試驗第四章除草劑生物測定技術除草劑生物測定的意義1一、除草劑生物測定的意義生物測定是除草劑研究種不可缺少的手段某種化合物是否具有殺草活性為特定雜草篩選一種除草劑除草劑作用方式的研究一、除草劑生物測定的意義生物測定是除草劑研究種不可缺少的手段2

二、除草劑生物測定的基本原理

試驗均在同一控制條件下必須設對照，每一處理重復3－4次試材應該健壯、整齊、隨機排列測定結(jié)果應進行統(tǒng)計學分析在一定范圍內(nèi)，生物試材與除草劑濃度成比例的傷害反應二、除草劑生物測定的基本原理試驗均在同一控制條件下3三、除草劑生物測定技術的程序和原則

（－）生物測定材料的選擇試材的選擇應兼?zhèn)鋵λ巹┹^感性高和具有一定的可測范圍以及大量易得的均一材料。三、除草劑生物測定技術的程序和原則（－）生物測定材料4（二）測定參數(shù)的選擇試材對除草劑的反應可以通過各種參數(shù)來評價。除草劑對植物的影響一般為非專一性的，因此，各種器官均能作為某一除草劑的活力指標。（二）測定參數(shù)的選擇試材對除草劑的反應可以通過各種參數(shù)來評5種子發(fā)芽率許多除草劑可抑制敏感種子的發(fā)芽及胚根和芽鞘的生長、因此，可以利用觀察種子的萌發(fā)率來測定某種藥劑的存在與否。

植株生長量在生物測定中，試材重量的測定是最常用的。主要測定參數(shù)種子發(fā)芽率許多除草劑可抑制敏感種子的發(fā)芽及胚根和芽鞘的生長6生理生化指標在肉眼可見的反應出現(xiàn)之前，試材的生理生化的變化往往可以測定出來。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陳代謝物質(zhì)的變化等都可以作為測定的指標。生理生化指標在肉眼可見的反應出現(xiàn)之前，試材的生理生化的變化7癥狀有些除草劑可引起試材的典型癥狀，因此，可以利用此種反應來鑒定除草劑。特殊技術Parker以青萍為試材，以百草枯和脲類除草劑的拮抗作用來測青萍的濃度；若以愈傷組織為試材，則測愈傷組織的生長量。

癥狀有些除草劑可引起試材的典型癥狀，因此，可以利用此種反8測定結(jié)果表達方法正確地評價某一藥劑的生物測定結(jié)果是很重要的。常用地上部鮮重減少50％（ED50）、地上部干重減少50％〔CR50〕、株高減少50％（LD50?；駿D50）及覆蓋面積減少50％（EC50）所需要的除草劑量來表示這一類試驗結(jié)果。Y=a+bx測定結(jié)果表達方法正確地評價某一藥劑的生物測定結(jié)果是很重要的9

0級——同對照1級——抑劑生長25％以下2級——抑制生長50％以下3級——抑制生長75％以下4級——抑制生長75％以上5級——死亡目測的分級標準0級——同對照目測的分級標準10四、除草劑常用的生物測定方法

黃瓜幼苗法小杯法小球藻法去胚乳小麥幼苗法浮萍法四、除草劑常用的生物測定方法黃瓜幼苗法11種子發(fā)芽測定法是一種常用的除草劑活性測定方法，種子發(fā)芽率、根與莖的生長量或作長度在一定范圍內(nèi)與藥劑劑量呈相關性，因此可用作除草劑的定量測定，有較高的靈敏度。種子發(fā)芽測定法種子發(fā)芽測定法是一種常用的除草劑活性測定方法，種12

1．發(fā)芽率

調(diào)查對照處理和藥劑處理種子的發(fā)芽數(shù)量，然后計算發(fā)芽率。藥劑處理的發(fā)芽數(shù)發(fā)芽率（％）＝一一――――――――X100對照處理的發(fā)芽數(shù)

調(diào)查項目1．發(fā)芽率調(diào)查項目132．生長抑制率

測定發(fā)芽以后芽或根的長度，或者是測量鮮重或干重（較少）。對照處理一藥劑處理生長抑制率（%）＝－－－―――――――X100對照處理2．生長抑制率141.黃瓜幼苗形態(tài)法。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。1234CK1.黃瓜幼苗形態(tài)法。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。11557%2,4D丁酯乳油對黃瓜種苗的抑制作用100mg/L10mg/L1mg/L1mg/L0.01mg/LCK57%2,4D丁酯乳油對黃瓜種苗的抑制作用100mg/L1016

本方法是測定激素類除草劑及其他植物生長調(diào)節(jié)劑活性的常用方法，具有反應靈敏、測定范圍大（0.1~1000ppm），操作簡便等優(yōu)點。

本方法是測定激素類除草劑及其他植物生長調(diào)節(jié)劑活性的常用172.小杯法45CK1232.小杯法4518該法是上海植物生理研究所于1972年建立的?？梢詼y定二苯醚類，酰胺類和氨基甲酸酯類、氯代脂肪酸類等除草劑的活性，但對抑制植物光合作用的除草劑則幾乎不能采用。該法具有操作簡便，測定周期短、范圍較廣的優(yōu)點。該法是上海植物生理研究所于1972年建立的?？?9

試材選用小麥、油菜、水稻、稗草等。以直徑3.5cm，高5.0cm的玻璃杯為容器（亦可用50ml的小燒杯代替）。杯底放一張圓濾紙片，吸取一定量的有機溶劑溶解的待測藥液倒入杯內(nèi)，揮發(fā)干溶劑。若以水稻、稗草等水生雜草種子為試材，則在小燒杯中加入2ml蒸餾水；3d后分別記載株高或測定鮮重。計算抑制生長50％所需要的濃度（LC50）。試材選用小麥、油菜、水稻、稗草等。以直徑3.5cm20

若以小麥、油菜種子為試材、則在濾紙片下放一層直徑約為0.5cm大小的玻璃珠（短玻棒也可）再加入3ml蒸餾水。選擇剛萌動的種子10粒，排放到濾紙片上，置28℃恒溫箱培養(yǎng)，白天給予日光燈照。培養(yǎng)期間每天加入一定量蒸餾水來補充揮發(fā)掉的水份。若以小麥、油菜種子為試材、則在濾紙片下放一層直徑21

0級——同對照1級——抑制生長25％以下2級——抑制生長50％以下3級——抑制生長75％以下4級——抑制生長75％以上

藥效的分級標準為0級——同對照藥效的分級標準為22然后計算每一濃度處理的抑制指數(shù)：

Σ（級別X各級代表株數(shù)）抑制指數(shù)＝――――――――――――X100總株數(shù)X最高級別

將抑制指數(shù)（抑制百分數(shù)）轉(zhuǎn)換為機率值，濃度（劑量）以對數(shù)值表示，求出EC50。然后計算每一濃度處理的抑制指數(shù)：23

本法是Parker于1966年首先報道的，后經(jīng)改進，縮短測定時間。高粱法適宜于測定非光合作用抑制劑，它具有操作簡便，培養(yǎng)期間不用管理、周期短，測定范圍廣等優(yōu)點。還可改用燕麥、黃瓜等為材料來擴大測試范圍。3.高梁法簡介本法是Parker于1966年首先報道的，后經(jīng)改進，24培養(yǎng)皿黃砂＋除草劑高梁種子培養(yǎng)皿黃砂＋除草劑高梁種子25

上海植生所的方法是：用直徑9cm的培養(yǎng)皿，裝滿干燥黃砂并刮平，每皿加人30ml藥液，正好使全皿黃砂浸透，然后用有十個齒的齒板在皿的適當位置壓孔（或用細玻棒均勻壓10個孔）以便每皿能排10位根長1－2mm（根尖尚未長出根鞘）的萌發(fā)高粱種子（一般于試驗前的一天在25℃溫箱內(nèi)催芽）。為了縮短測試時間，在排種培養(yǎng)的前一天，將上述培養(yǎng)好的培養(yǎng)皿、置于34℃恒溫箱中過夜，以提高砂溫（室溫低時尤為重要），排種工作在恒溫室中進行，然后放在34℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，隔8小時左右，就可劃道標記每一株根尖位置起點，過14－16h，對照根長30mm左右，即可測量，求出抑制生長50％的除草劑濃度。上海植生所的方法是：用直徑9cm的培26

此法對高粱種子要求嚴格，雜交高粱種子因生長勢不整齊不適于作試材，農(nóng)家品種生長勢整齊。可采用。此外，培養(yǎng)皿內(nèi)裝砂量要適合，少了會使植物材料與藥劑接觸不良，砂多則使植物生長受阻礙，這都會影響到測定結(jié)果的精確性此法對高粱種子要求嚴格，雜交高粱種子因生長勢不整27本方法是在Jaworski的黑麥草測定法啟發(fā)下，由沈陽化工研究院除草劑組建立的。它適宜于測定α一氯代乙酰胺類除草劑，敏感度達0.01PPm；亦可測除草醚、五氯酚鈉等除草劑，但敏感度較低。測定原理是利用稗草中胚軸（從種子到芽鞘節(jié)處的長度）在黑暗中伸長的特點，以藥劑抑制中胚軸的長度來測定藥劑的活性。

4.稗草胚軸中胚軸法

本方法是在Jaworski的黑麥草測定法啟發(fā)下，由沈陽化工研28

將一系列濃度的敵草胺藥液或待測液50ml注入50ml小燒杯中。每杯投入10顆剛剛露白的稗草籽。為了避免在測定中可能有個別幼芽浮起，可以在種子周圍撒一些石英砂，使種子固定。放入恒溫箱中，在28－30℃下黑暗培養(yǎng)，經(jīng)4天后測定中胚軸的長度。將一系列濃度的敵草胺藥液或待測液50ml29建立時間：1964年由上海植生所建立適用范圍：用于測定光合作用抑制劑類除草劑優(yōu)點：與其他測定光合作用抑制劑的方法相比，具有操作簡便、測定周期短、專一性好等優(yōu)點。5.去胚乳小麥幼苗法建立時間：1964年由上海植生所建立5.去胚乳小麥幼苗法30（1）選擇飽滿度一致的小麥種子，浸種2h后，排列在鋪有濾紙或紗布的搪瓷盤中，在室溫20℃左右進行催芽，3~4d后苗高達2~3cm。(2)精選高度一致的幼苗，輕輕取出；免得傷害根部，然后用鑷子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，準備種植。去胚乳小麥幼苗法（1）選擇飽滿度一致的小麥種子，浸種2h后，排列在鋪有濾紙或31（3）在直徑4.5cm高5.0cm的小玻璃杯注入不同濃度的供試藥液3ml和稀釋10倍的培養(yǎng)液6ml，每杯播入上述去胚乳小麥幼苗10株。（4）在溫度21~26℃左右和光照下培養(yǎng)6~7d后觀察藥效。注意每天應該給每個小杯稱重，補足損失的水分。（3）在直徑4.5cm高5.0cm的小玻璃杯注入不同濃度的供3212345CK12345CK33測量所有小麥苗的生長量，即從芽鞘到最長葉尖的距離，并按下式求出生長抑制率，繼而求出EC50

對照生長量一處理生長量

生長抑制率（％）＝－－－－－－－－－－－X100

對照生長量結(jié)果檢查與計算測量所有小麥苗的生長量，即從芽鞘到最長葉尖的距離，并按下式求34本法是由南開大學元素所譚惠芳等建立的。對測定觸殺型除草劑較敏感，如百草枯、殺草快、除草醚、敵稗等。另外，對通過干擾體內(nèi)含氮化合物代謝而殺草的除草劑也很敏感，如殺草強、殺草胺，2，4－D，2，4，5－T、二氯丁酸等。

6.蘿卜子葉法本法是由南開大學元素所譚惠芳等建立的。對測定觸殺型除35將洗凈的水蘿卜種子播種在墊有二層濾紙的大培養(yǎng)皿內(nèi)，加入適量蒸餾水，加蓋后置27℃恒溫箱黑暗培養(yǎng)約30h后，從幼苗上切下子葉，選擇大小一致的10片放于墊有一層濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)（皿直徑5cm），皿內(nèi)盛有2mm磷酸緩沖液配制的一系列不同濃度除草劑溶液5ml，加蓋置于25土l℃的恒溫室內(nèi)培養(yǎng)，給予2000—3000lx螢光燈連續(xù)光照3d后，稱子葉鮮重，求出抑制葉片生長50％的除草劑濃度，也可測定葉綠素的含量。將洗凈的水蘿卜種子播種在墊有二層濾紙的大培養(yǎng)皿內(nèi)，加36

該法是由沈陽化工研究院建立的，適用于脲類及均三氮苯類光合作用抑制劑的生物測定方法。對綠麥隆、利谷隆的敏感度可達0.025ppm。

7.番茄水培法該法是由沈陽化工研究院建立的，適用于脲類及均三氮苯類光合作37

首先用盆栽法培養(yǎng)番茄苗，待二片真葉時，作水培試材用。取30ml試管編號。將供試藥劑用培養(yǎng)液稀釋成一系列濃度的溶液，每只試管加入10ml。挑選生長健壯，大小高度一致的番茄苗，將主根及子葉剪掉后插入試管，每管插苗4株（播前稱重，使各管苗重相等）。在光照下25℃培養(yǎng)2周左右（反應速度與光照及溫度有關），測定苗的鮮重。培養(yǎng)期間應每天補加蒸發(fā)掉的水分。以生長抑制率來評價活性，亦可求出EC50。首先用盆栽法培養(yǎng)番茄苗，待二片真葉時，作水培試材38

和番茄水培法相似的還有燕麥法將土壤和供試藥劑混合，在大玻璃管內(nèi)裝入200g土壤（以干土計），播入挑選的燕麥種子，土壤水分保持在50％左右，自然光下培養(yǎng)2周后，測量地上部分的鮮重。

菜豆葉片法土壤內(nèi)混入一定量藥劑，然后播入菜豆種子，土壤含水量60％左右，自然光下培養(yǎng)，當?shù)谝黄貜腿~長全，第二片又剛剛出現(xiàn)時，測量其葉面積。和番茄水培法相似的還有燕麥法將土壤和供試藥劑混合，在大玻39

Taylor和Loader，1984年建立了該種方法，目的是篩選防治野燕麥的除草劑混劑，該法快速、簡便。8.葉鞘滴注法Taylor和Loader，1984年建立了該種方法40具體方法是：當正常生長的燕麥長至1個半葉（即1葉1心）時，在第一片葉張開的葉鞘里，滴加10ul供試的一定濃度的藥液。24-28h后，切下根，取上部約2cm長的一段，插入清水洋菜培養(yǎng)基上。再經(jīng)24h，取出測量每一劑量處理的葉片延伸長度，并以此評判除草劑活性。具體方法是：當正常生長的燕麥長至1個半葉（即1葉1心）時，在41

本法是Suwunnamek設計的，用來測定內(nèi)吸傳導性且作用緩慢的除草劑，如草甘膦等。該法既可反應藥劑的傳導性能，又能反映藥劑對地下部分再生能力的抑制程度。9.再生苗測重法本法是Suwunnamek設計的，用來測定內(nèi)吸傳導性且作42

用盆栽法種植香附子，等長成苗后，葉面噴灑一定濃度的草甘膦藥液，一周后剪除香附子苗（離土表1cm），再經(jīng)過一個月左右測再生苗的的鮮重。用盆栽法種植香附子，等長成苗后，葉面噴灑一定濃43沈陽化工研究院改進了此方法，利用玉米做試材。具體方法：將6粒已催芽的玉米種子種在花盆內(nèi)，在3葉期時噴施草甘膦，24h后，從第一片玉米葉基部剪去頂端。經(jīng)一定時間后，測量再生苗的鮮重或高度。也可在噴藥后不同時期剪去苗的地上部，測其是否再生或再生后地上部分的鮮重。沈陽化工研究院改進了此方法，利用玉米做試材。具體方法：將6粒44五、除草劑田間藥效試驗五、除草劑田間藥效試驗45調(diào)查除草劑效果或調(diào)查除草劑增產(chǎn)情況都要堅持隨機取樣，隨機取樣的方法有五點法，對角線法、棋盤式取樣法等。生育期施用除草劑，應在施藥前1～3天先調(diào)查一次雜草基數(shù)，作物播前或播后苗前施用除草劑則不進行用藥前的雜草基數(shù)調(diào)查。施藥后調(diào)查除草效果應根據(jù)除草劑的作用快慢決定調(diào)查時間，還要根據(jù)除草劑持效長短作第二次甚至第三次調(diào)查，每兩次調(diào)查之間相隔7～15天。調(diào)查點的數(shù)量應由小區(qū)面積決定，小區(qū)試驗一般每小區(qū)取3～5點調(diào)查，示范性試驗每區(qū)調(diào)查點應在5個以上。多次調(diào)查時；可以采用定點調(diào)查法或不定點調(diào)查法。應注意，如果第一次調(diào)查時將雜草剪下或拔除，第二次調(diào)查就應錯開這個調(diào)查點。調(diào)查點的面積應為1／16m2或1／4m2。調(diào)查結(jié)果可以用單位面積雜草株數(shù)表示，也可以用單位面積的雜草鮮重（g/m2）表示。鮮重一般指地上部分鮮重。調(diào)查除草劑效果或調(diào)查除草劑增產(chǎn)情況都要堅持隨機取樣，隨機46除草劑生物測定技術課件47一、填空：1.除草劑常用的生物測定方法有黃瓜幼苗法、小杯法、小球藻法、去胚乳小麥幼苗法浮萍法。一、填空：48二、問答題1.除草劑生物測定的基本原理是什么？2.除草劑生物測定的意義？二、問答題49第四章除草劑生物測定技術

除草劑生物測定的意義除草劑生物測定的基本原理除草劑生物測定技術程序和原則除草劑生物測定方法簡介除草劑田間藥效試驗第四章除草劑生物測定技術除草劑生物測定的意義50一、除草劑生物測定的意義生物測定是除草劑研究種不可缺少的手段某種化合物是否具有殺草活性為特定雜草篩選一種除草劑除草劑作用方式的研究一、除草劑生物測定的意義生物測定是除草劑研究種不可缺少的手段51

二、除草劑生物測定的基本原理

試驗均在同一控制條件下必須設對照，每一處理重復3－4次試材應該健壯、整齊、隨機排列測定結(jié)果應進行統(tǒng)計學分析在一定范圍內(nèi)，生物試材與除草劑濃度成比例的傷害反應二、除草劑生物測定的基本原理試驗均在同一控制條件下52三、除草劑生物測定技術的程序和原則

（－）生物測定材料的選擇試材的選擇應兼?zhèn)鋵λ巹┹^感性高和具有一定的可測范圍以及大量易得的均一材料。三、除草劑生物測定技術的程序和原則（－）生物測定材料53（二）測定參數(shù)的選擇試材對除草劑的反應可以通過各種參數(shù)來評價。除草劑對植物的影響一般為非專一性的，因此，各種器官均能作為某一除草劑的活力指標。（二）測定參數(shù)的選擇試材對除草劑的反應可以通過各種參數(shù)來評54種子發(fā)芽率許多除草劑可抑制敏感種子的發(fā)芽及胚根和芽鞘的生長、因此，可以利用觀察種子的萌發(fā)率來測定某種藥劑的存在與否。

植株生長量在生物測定中，試材重量的測定是最常用的。主要測定參數(shù)種子發(fā)芽率許多除草劑可抑制敏感種子的發(fā)芽及胚根和芽鞘的生長55生理生化指標在肉眼可見的反應出現(xiàn)之前，試材的生理生化的變化往往可以測定出來。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陳代謝物質(zhì)的變化等都可以作為測定的指標。生理生化指標在肉眼可見的反應出現(xiàn)之前，試材的生理生化的變化56癥狀有些除草劑可引起試材的典型癥狀，因此，可以利用此種反應來鑒定除草劑。特殊技術Parker以青萍為試材，以百草枯和脲類除草劑的拮抗作用來測青萍的濃度；若以愈傷組織為試材，則測愈傷組織的生長量。

癥狀有些除草劑可引起試材的典型癥狀，因此，可以利用此種反57測定結(jié)果表達方法正確地評價某一藥劑的生物測定結(jié)果是很重要的。常用地上部鮮重減少50％（ED50）、地上部干重減少50％〔CR50〕、株高減少50％（LD50?；駿D50）及覆蓋面積減少50％（EC50）所需要的除草劑量來表示這一類試驗結(jié)果。Y=a+bx測定結(jié)果表達方法正確地評價某一藥劑的生物測定結(jié)果是很重要的58

0級——同對照1級——抑劑生長25％以下2級——抑制生長50％以下3級——抑制生長75％以下4級——抑制生長75％以上5級——死亡目測的分級標準0級——同對照目測的分級標準59四、除草劑常用的生物測定方法

黃瓜幼苗法小杯法小球藻法去胚乳小麥幼苗法浮萍法四、除草劑常用的生物測定方法黃瓜幼苗法60種子發(fā)芽測定法是一種常用的除草劑活性測定方法，種子發(fā)芽率、根與莖的生長量或作長度在一定范圍內(nèi)與藥劑劑量呈相關性，因此可用作除草劑的定量測定，有較高的靈敏度。種子發(fā)芽測定法種子發(fā)芽測定法是一種常用的除草劑活性測定方法，種61

1．發(fā)芽率

調(diào)查對照處理和藥劑處理種子的發(fā)芽數(shù)量，然后計算發(fā)芽率。藥劑處理的發(fā)芽數(shù)發(fā)芽率（％）＝一一――――――――X100對照處理的發(fā)芽數(shù)

調(diào)查項目1．發(fā)芽率調(diào)查項目622．生長抑制率

測定發(fā)芽以后芽或根的長度，或者是測量鮮重或干重（較少）。對照處理一藥劑處理生長抑制率（%）＝－－－―――――――X100對照處理2．生長抑制率631.黃瓜幼苗形態(tài)法。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。1234CK1.黃瓜幼苗形態(tài)法。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。16457%2,4D丁酯乳油對黃瓜種苗的抑制作用100mg/L10mg/L1mg/L1mg/L0.01mg/LCK57%2,4D丁酯乳油對黃瓜種苗的抑制作用100mg/L1065

本方法是測定激素類除草劑及其他植物生長調(diào)節(jié)劑活性的常用方法，具有反應靈敏、測定范圍大（0.1~1000ppm），操作簡便等優(yōu)點。

本方法是測定激素類除草劑及其他植物生長調(diào)節(jié)劑活性的常用662.小杯法45CK1232.小杯法4567該法是上海植物生理研究所于1972年建立的?？梢詼y定二苯醚類，酰胺類和氨基甲酸酯類、氯代脂肪酸類等除草劑的活性，但對抑制植物光合作用的除草劑則幾乎不能采用。該法具有操作簡便，測定周期短、范圍較廣的優(yōu)點。該法是上海植物生理研究所于1972年建立的?？?8

試材選用小麥、油菜、水稻、稗草等。以直徑3.5cm，高5.0cm的玻璃杯為容器（亦可用50ml的小燒杯代替）。杯底放一張圓濾紙片，吸取一定量的有機溶劑溶解的待測藥液倒入杯內(nèi)，揮發(fā)干溶劑。若以水稻、稗草等水生雜草種子為試材，則在小燒杯中加入2ml蒸餾水；3d后分別記載株高或測定鮮重。計算抑制生長50％所需要的濃度（LC50）。試材選用小麥、油菜、水稻、稗草等。以直徑3.5cm69

若以小麥、油菜種子為試材、則在濾紙片下放一層直徑約為0.5cm大小的玻璃珠（短玻棒也可）再加入3ml蒸餾水。選擇剛萌動的種子10粒，排放到濾紙片上，置28℃恒溫箱培養(yǎng)，白天給予日光燈照。培養(yǎng)期間每天加入一定量蒸餾水來補充揮發(fā)掉的水份。若以小麥、油菜種子為試材、則在濾紙片下放一層直徑70

0級——同對照1級——抑制生長25％以下2級——抑制生長50％以下3級——抑制生長75％以下4級——抑制生長75％以上

藥效的分級標準為0級——同對照藥效的分級標準為71然后計算每一濃度處理的抑制指數(shù)：

Σ（級別X各級代表株數(shù)）抑制指數(shù)＝――――――――――――X100總株數(shù)X最高級別

將抑制指數(shù)（抑制百分數(shù)）轉(zhuǎn)換為機率值，濃度（劑量）以對數(shù)值表示，求出EC50。然后計算每一濃度處理的抑制指數(shù)：72

本法是Parker于1966年首先報道的，后經(jīng)改進，縮短測定時間。高粱法適宜于測定非光合作用抑制劑，它具有操作簡便，培養(yǎng)期間不用管理、周期短，測定范圍廣等優(yōu)點。還可改用燕麥、黃瓜等為材料來擴大測試范圍。3.高梁法簡介本法是Parker于1966年首先報道的，后經(jīng)改進，73培養(yǎng)皿黃砂＋除草劑高梁種子培養(yǎng)皿黃砂＋除草劑高梁種子74

上海植生所的方法是：用直徑9cm的培養(yǎng)皿，裝滿干燥黃砂并刮平，每皿加人30ml藥液，正好使全皿黃砂浸透，然后用有十個齒的齒板在皿的適當位置壓孔（或用細玻棒均勻壓10個孔）以便每皿能排10位根長1－2mm（根尖尚未長出根鞘）的萌發(fā)高粱種子（一般于試驗前的一天在25℃溫箱內(nèi)催芽）。為了縮短測試時間，在排種培養(yǎng)的前一天，將上述培養(yǎng)好的培養(yǎng)皿、置于34℃恒溫箱中過夜，以提高砂溫（室溫低時尤為重要），排種工作在恒溫室中進行，然后放在34℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，隔8小時左右，就可劃道標記每一株根尖位置起點，過14－16h，對照根長30mm左右，即可測量，求出抑制生長50％的除草劑濃度。上海植生所的方法是：用直徑9cm的培75

此法對高粱種子要求嚴格，雜交高粱種子因生長勢不整齊不適于作試材，農(nóng)家品種生長勢整齊。可采用。此外，培養(yǎng)皿內(nèi)裝砂量要適合，少了會使植物材料與藥劑接觸不良，砂多則使植物生長受阻礙，這都會影響到測定結(jié)果的精確性此法對高粱種子要求嚴格，雜交高粱種子因生長勢不整76本方法是在Jaworski的黑麥草測定法啟發(fā)下，由沈陽化工研究院除草劑組建立的。它適宜于測定α一氯代乙酰胺類除草劑，敏感度達0.01PPm；亦可測除草醚、五氯酚鈉等除草劑，但敏感度較低。測定原理是利用稗草中胚軸（從種子到芽鞘節(jié)處的長度）在黑暗中伸長的特點，以藥劑抑制中胚軸的長度來測定藥劑的活性。

4.稗草胚軸中胚軸法

本方法是在Jaworski的黑麥草測定法啟發(fā)下，由沈陽化工研77

將一系列濃度的敵草胺藥液或待測液50ml注入50ml小燒杯中。每杯投入10顆剛剛露白的稗草籽。為了避免在測定中可能有個別幼芽浮起，可以在種子周圍撒一些石英砂，使種子固定。放入恒溫箱中，在28－30℃下黑暗培養(yǎng)，經(jīng)4天后測定中胚軸的長度。將一系列濃度的敵草胺藥液或待測液50ml78建立時間：1964年由上海植生所建立適用范圍：用于測定光合作用抑制劑類除草劑優(yōu)點：與其他測定光合作用抑制劑的方法相比，具有操作簡便、測定周期短、專一性好等優(yōu)點。5.去胚乳小麥幼苗法建立時間：1964年由上海植生所建立5.去胚乳小麥幼苗法79（1）選擇飽滿度一致的小麥種子，浸種2h后，排列在鋪有濾紙或紗布的搪瓷盤中，在室溫20℃左右進行催芽，3~4d后苗高達2~3cm。(2)精選高度一致的幼苗，輕輕取出；免得傷害根部，然后用鑷子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，準備種植。去胚乳小麥幼苗法（1）選擇飽滿度一致的小麥種子，浸種2h后，排列在鋪有濾紙或80（3）在直徑4.5cm高5.0cm的小玻璃杯注入不同濃度的供試藥液3ml和稀釋10倍的培養(yǎng)液6ml，每杯播入上述去胚乳小麥幼苗10株。（4）在溫度21~26℃左右和光照下培養(yǎng)6~7d后觀察藥效。注意每天應該給每個小杯稱重，補足損失的水分。（3）在直徑4.5cm高5.0cm的小玻璃杯注入不同濃度的供8112345CK12345CK82測量所有小麥苗的生長量，即從芽鞘到最長葉尖的距離，并按下式求出生長抑制率，繼而求出EC50

對照生長量一處理生長量

生長抑制率（％）＝－－－－－－－－－－－X100

對照生長量結(jié)果檢查與計算測量所有小麥苗的生長量，即從芽鞘到最長葉尖的距離，并按下式求83本法是由南開大學元素所譚惠芳等建立的。對測定觸殺型除草劑較敏感，如百草枯、殺草快、除草醚、敵稗等。另外，對通過干擾體內(nèi)含氮化合物代謝而殺草的除草劑也很敏感，如殺草強、殺草胺，2，4－D，2，4，5－T、二氯丁酸等。

6.蘿卜子葉法本法是由南開大學元素所譚惠芳等建立的。對測定觸殺型除84將洗凈的水蘿卜種子播種在墊有二層濾紙的大培養(yǎng)皿內(nèi)，加入適量蒸餾水，加蓋后置27℃恒溫箱黑暗培養(yǎng)約30h后，從幼苗上切下子葉，選擇大小一致的10片放于墊有一層濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)（皿直徑5cm），皿內(nèi)盛有2mm磷酸緩沖液配制的一系列不同濃度除草劑溶液5ml，加蓋置于25土l℃的恒溫室內(nèi)培養(yǎng)，給予2000—3000lx螢光燈連續(xù)光照3d后，稱子葉鮮重，求出抑制葉片生長50％的除草劑濃度，也可測定葉綠素的含量。將洗凈的水蘿卜種子播種在墊有二層濾紙的大培養(yǎng)皿內(nèi)，加85

該法是由沈陽化工研究院建立的，適用于脲類及均三氮苯類光合作用抑制劑的生物測定方法。對綠麥隆、利谷隆的敏感度可達0.025ppm。

7.番茄水培法該法是由沈陽化工研究院建立的，適用于脲類及均三氮苯類光合作86

首先用盆栽法培養(yǎng)番茄苗，待二片真葉時，作水培試材用。取30ml試管編號。將供試藥劑用培養(yǎng)液稀釋成一系列濃度的溶液，每只試管加入10ml。挑選生長健壯，大小高度一致的番茄苗，將主根及子葉剪掉后插入試管，每管插苗4株（播前稱重，使各管苗重相等）。在光照下25℃培養(yǎng)2周左右（反應速度與光照及溫度有關），測定苗的鮮重。培養(yǎng)期間應每天補加蒸發(fā)掉的水分。以生長抑制率來評價活性，亦可求出EC50。首先用盆栽法培養(yǎng)番茄苗，待二片真葉時，作水培試材87

和番茄水培法相似的還有燕麥法將土壤和供試藥劑混合，在大玻璃管內(nèi)裝入200