植物病害與生物技術(shù)組

2014年度課題進(jìn)展匯報植物病害與生物技術(shù)課題組匯

報

內(nèi)

容一、科研進(jìn)展二、科研業(yè)績技術(shù)研發(fā)基礎(chǔ)研究疫病檢測監(jiān)測技術(shù)病菌變異機(jī)制病菌致病機(jī)理防控技術(shù)開發(fā)一、科研進(jìn)展示范應(yīng)用應(yīng)用研究研究進(jìn)展一：致病相關(guān)功能解析去年完成的工作：的篩選、同源序列比對及1.磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白功能域分析生長不同階段及侵染不同時間轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析沉默載體構(gòu)建及PEG介導(dǎo)原生

轉(zhuǎn)化今年的工作：沉默轉(zhuǎn)化子半定量及定量PCR驗(yàn)證沉默對辣椒疫霉菌生長及致病的影響沉默對辣椒疫霉菌侵染能力的分析1.1

沉默轉(zhuǎn)化子半定量及定量PCR驗(yàn)證NbPepper1.2

沉默對辣椒疫霉菌生長及致病的影響1.3

沉默對辣椒疫霉菌侵染能力的分析研究進(jìn)展二：疫霉菌群體遺傳結(jié)構(gòu)及毒性變異去年完成的工作：1.大豆疫病樣本并分析180個大豆疫霉菌株的遺傳結(jié)構(gòu)2.分析120個大豆疫霉菌株毒性變異今年的工作：分離純化150個大豆疫霉菌株測定100個大豆疫霉菌株毒性組成及抗藥性分析150個大豆疫霉菌株遺傳多樣性注：植株（S）；植株率≤30%，記為抗?。≧）；植株

率≥70%，記為感病率在30%-70%之間，記為中間型（I).2.1

致病性分析結(jié)果福建地區(qū)大豆疫霉菌株對嘧菌脂、甲霜靈、烯酰嗎啉等藥劑均表現(xiàn)為敏感。10天福建大豆疫霉菌耐藥性檢測結(jié)果0.693

(<

0.002)

**1.836

(<

0.002)

**0.784

(<0.002)

**3.834

(<0.002)

**0.405(<

0.002)

**0.498

(<

0.002)

**0.812

(<

0.002)

**-0.012

(0.446)1.626(<

0.002)

**1.205

(<

0.002)

**1

026

(0

016)

*-0.262(1.000)BS13Bangshan,

FJPlantBS12Bangshan,

FJPlantBS10Bangshan,

FJPlantBS08Bangshan,

FJPlantHC13Haicheng,

FJPlantHC10Haicheng,

FJPlantGW10Gangwei,

FJPlantGW07Gangwei,

FJPlantBAIS04Baishui,

FJPlantJLJiling,

JLPlantAHAnhui,

AHPlantHLJ11Heilongjiang,

HLJPlantHLJ08Heilongjiang,

HLJPlantTotalCodePopulation(location,

province)SampleoriginYearisolationNHaplot-ypeHo(SE)Allelicrichness(SE)+IA(pvalue)YY13Yun ,

FJPlant201334220.049(0.020)4.333(1.000)0.777(<0.002)**YY12Yun ,

FJPlant201221100.026(0.014)2.444(0.377)0.099

(0.288)YY08Yun ,

FJSoil2008770.111(0.078)3.556(0.530)1.328

(<0.002)

**YY07Yun ,

FJPlant2007750.000(0.000)2.667(0.333)1.595(0.008)

**201357470.103(0.024)5.111(1.086)201220110.056(0.018)3.222(0.434)201032260.077(0.019)4.444(1.069)2008750.143(0.092)2.667(0.333)201328250.107(0.030)5.444(1.281)201032310.058(0.022)4.111(0.807)201037240.036(0.012)3.222(0.619)2007550.067(0.033)3.000(0.289)200412100.065(0.030)3.667(0.577)2008990.160(0.100)4.00(0.667)2008550.200(0.082)2.889(0.351)20111280.292(0.125)1.556(0.242)20080.085(0.055)4.667(0.816)0.564(0.002)

**.091(0.014)

3.494(0.175) -0.523

(<

0.002)

**在17個群體的IA中有13個極顯著和1個顯著偏離0，只有3個群體的IA值較接近于0（YY12、GW07

、HLJ11），且所有群體的IA值極顯著地偏離0，說明在整個群體存在著無性生殖或者是近親交配。2.2

遺傳多樣性分析Structure

聚類分析STRUCTRUE

分析結(jié)果表明，當(dāng)k=2時，Delta

k值最大可以推斷所有大豆疫霉群體可以分為2個類群注：Bootstrap=100；藍(lán)色字體表示福建地區(qū)p.sojae

群體黑色字體表示東北地區(qū)群體；Cluster

BCluster

ANJ聚類分析研究進(jìn)展三：重要植物病原菌檢測技術(shù)開發(fā)前期工作：1.10多種植物病原菌檢測技術(shù)的研發(fā)2.以鈣黃綠素為指示劑的LAMP檢測平臺建立今年的工作：辣椒疫霉菌LAMP檢測技術(shù)的開發(fā)黃曲霉菌LAMP檢測技術(shù)的開發(fā)3.1

辣椒疫霉菌LAMP檢測技術(shù)的開發(fā)特異性人工接種和自然發(fā)病樣品檢測能從人工接種和自然發(fā)病的樣本中檢測到病原菌ITSaflP分別只在陽性樣本中有顯色反應(yīng)，非常特異，能區(qū)分近緣種3.2

黃曲霉菌LAMP檢測技術(shù)的開發(fā)ITS-和aflP-LAMP引物靈敏性驗(yàn)證ITSaflP10fg1

pg靈敏度達(dá)10

fg和1pg研究進(jìn)展四：大豆疫病及馬鈴薯晚疫病防治去年完成的工作：拮抗放線菌的篩選及鑒定明確新型植物激發(fā)子亞磷酸鹽對致病疫霉菌的拮抗作用今年的工作：大豆疫霉菌拮抗放線菌發(fā)酵條件優(yōu)化

新型植物激發(fā)子亞磷酸鹽對馬鈴薯晚疫病的防治4.1

大豆疫霉菌拮抗放線菌發(fā)酵條件優(yōu)化St19屬鏈霉菌

1ml/100ml4.2

馬鈴薯晚疫病的防治Ck

(10

Day)銀法利(10Day)Phi

(10

Day)銀法利+phi(10

Day)小區(qū)發(fā)病及生長對比Ck

(10

Day)Phi+銀法利

(10Day)銀法利

(10Day)phi

(10

Day)研究進(jìn)展五：服務(wù)三農(nóng)參與項(xiàng)目“屏南花菜長期連作下土壤及病蟲害綜合防控技術(shù)示范”不處理氟啶胺處理“雙百行動”幫助龍海格林解決了其毛豆疫病防控難

的實(shí)際問題，減少了毛豆疫病的危害，提高出口品質(zhì)，促進(jìn)農(nóng)民增收。2015年度工作計劃檢測及群體遺傳變異致病相關(guān)功能研究防治技術(shù)及藥劑開發(fā)疫霉防控植物病害與生物技術(shù)課題組2014年度業(yè)績報表新立項(xiàng)目序號項(xiàng)目名稱項(xiàng)目類型項(xiàng)目來源經(jīng)費(fèi)（萬元）1重要植物有害生物快速檢測技術(shù)及試劑盒的應(yīng)用與示范農(nóng)業(yè)部科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目農(nóng)業(yè)部602鈣離子通道蛋白在辣椒疫霉菌生長發(fā)育及致病過程中的作用機(jī)制國家自然科學(xué)基金基金委253馬鈴薯寄主群體遺傳結(jié)構(gòu)在致病疫霉進(jìn)化中的作用機(jī)理973計劃前期研究專項(xiàng)子項(xiàng)目科技部104馬鈴薯晚疫病菌適應(yīng)寄主抗性選擇壓力的微進(jìn)化研究福建省自然科學(xué)基金省科技廳45辣椒疫霉菌熱激轉(zhuǎn)錄因子基因克隆及功能研究福建省自然科學(xué)基金省科技廳36院科技英才雙百計劃院科技英才基金農(nóng)科院107設(shè)施蔬菜病蟲害綜合防控技術(shù)集成與示范農(nóng)科院雙百項(xiàng)目農(nóng)科院28屏南花菜病蟲害綜合防控技術(shù)示范農(nóng)科院

項(xiàng)目農(nóng)科院文章序號題目第一作者/通訊作者1Development

and

evaluation

of

ITS

andaflP

based

LAMP

assay

for

rapid

detection

ofAspergillus

flavus

in

food

samplesCanadian

Journalof

microbiology/2Specific

and

sensitive

detection

of

Phytophthora

nicotianae

by

nested

PCR

andloop-mediated

isothermal

amplification

assaysJournal

ofPhytopathology李本金/3煙草青枯病菌巢式PCR檢測方法的建立及應(yīng)用熱帶作物學(xué)報李本金/投稿文章序號題目第一作者/通訊作者備注1Development

of

a

loop-mediatedisothermal

amplification

assayfor

sensitive

and

rapid

detectionof

Phytophthora

capsiciCanadianJournal

ofPlantPathology/正返修中2基于毒素編碼

aflp的黃曲霉菌巢式PCR檢測福建農(nóng)業(yè)學(xué)報/已接收知識序號名稱類型人1香蕉枯萎病菌4號小種的LAMP檢測引物及其應(yīng)用國家發(fā)明專利福建省農(nóng)業(yè)

植物保護(hù)2一種煙草疫霉菌分子檢測引物及其檢測方法國家發(fā)明專利福建省農(nóng)業(yè)

植物保護(hù)3一種黃瓜疫霉菌LAMP引物及其快速檢測方法國家發(fā)明專利福建省農(nóng)業(yè)

植物保護(hù)申報知識序號名稱類型人1一種煙草疫霉菌LAMP引物及其快速檢測方法國家發(fā)明專利福建省農(nóng)業(yè)

植物保護(hù)制訂序號標(biāo)準(zhǔn)名稱標(biāo)準(zhǔn)第一完成單位申報序號標(biāo)準(zhǔn)名稱標(biāo)準(zhǔn)第一完成單位1菜用大豆疫病防治技術(shù)規(guī)程福建省農(nóng)科院植保所2冬種馬鈴薯晚疫病防治技術(shù)規(guī)程福建省農(nóng)科院植保所成果序號獲獎項(xiàng)目名稱等級1重要植物有害生物快速檢測技術(shù)及試劑盒的研發(fā)與應(yīng)用福建省科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎一等獎評審成果或序號獲獎項(xiàng)目名稱等級1大豆疫霉菌分子檢測技術(shù)規(guī)程福建省貢獻(xiàn)