新版快速定量檢測(HCG)課件

奧普U2/HCG-DOT金標(biāo)法快速定量檢測人絨毛促性腺激素（HCG）的臨床應(yīng)用上海解放軍85醫(yī)院主任技師薛漢陽教授

1WWW.POCT.COM.CN

概述 U2/HCG-DOT金標(biāo)定量檢測儀，可快速定量檢測血清和尿液中的人絨毛膜促性腺（HCG），操作簡單方便，3分鐘快速報告結(jié)果，超寬量檢測范圍（25-15000mIU/ml）大于常見進口儀器。儀器試劑經(jīng)復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院評估，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，是一種新型的POCT（即時檢驗）儀器，可用于急診快速定量檢測HCG含量。對正常和非正常妊娠，宮外孕，自發(fā)性流產(chǎn)，絨毛膜上皮癌，葡萄胎等診斷和鑒別診斷，及滋養(yǎng)層腫瘤術(shù)后的療效觀察有重要作用。現(xiàn)介紹如下2WWW.POCT.COM.CN一、U2/HCG-DOT測試系統(tǒng)的組成U2金標(biāo)定量檢測儀由三部分組成。（一）光電傳感器部分（二）微處理器（三）面板及控制按鈕(一）儀器的組成

3WWW.POCT.COM.CN面板及控制按鈕1．

顯示屏及打印機，可顯示檢測數(shù)據(jù)及打印報告。2．

四個控制按鈕可完成儀器檢測的各項操作選擇鍵SELECT開機；切換菜單；數(shù)字選擇。執(zhí)行鍵ENTER功能；執(zhí)行選定的功能并確認(rèn)。退出鍵QUIT功能；返回初選；光標(biāo)左移。移動鍵MOVE功能：光標(biāo)右移。

5WWW.POCT.COM.CNU2/HCG-DOT測試系統(tǒng)的組成

反應(yīng)板和相關(guān)配套試劑封閉液1%BSA溶液洗滌液PH7.4PBS金標(biāo)液凍干品復(fù)溶液0.1%疊氮鈉溶液濾紙和漏斗（二）試劑部分6WWW.POCT.COM.CN（三）測試方法1、接通電源，開機、儀器自動檢測；2、白板標(biāo)定（空白校正）；3、選定檢測項目；4、標(biāo)本測試，尿液需過濾預(yù)處理，血清可直接檢測，反應(yīng)孔內(nèi)加二滴封閉液，待滲入；加標(biāo)本（尿液300ul，血清100ul）待滲入；加洗滌液4滴，至背景變白；5、用儀器測試探頭對試劑板定量檢測。6、打印結(jié)果，待機進入下一個試驗。7WWW.POCT.COM.CN（四）U2/HCG-DOT?快速定量檢測的特點1、金標(biāo)儀定量檢測，操作簡單，3分鐘可得檢測結(jié)果；2、即可快速定量檢測血清，又可檢測尿液中的HCG；3、超寬量程檢測范圍：HCG含量在100~15000mIU/ml時，標(biāo)本無需稀釋，高濃度檢測范圍大于常見進口儀器。﹤100mIU/ml時，反應(yīng)板無肉眼可見紅色斑點結(jié)果應(yīng)為﹤25mIU/ml，如有紅色斑點，當(dāng)需要時，經(jīng)再加樣本和金標(biāo)液處理后，可在低濃度曲線模式下再測，可報=25mIU/ml或25～99mIU/ml之間具體數(shù)據(jù)。8WWW.POCT.COM.CN（五）U2/HCG-DOT和進口檢測儀器的比較儀器名稱奧普AbbotRocheBeckman(Access)Bayer(Acs)DPC測量范圍（mIU/ml）25~150000~10000~10000~10000~10001.1~5000高值是否稀釋15000內(nèi)不需要超過測量程均需稀釋后重做測量時間（min）33020201660標(biāo)本量（ul）血清100尿液300>202020255測量標(biāo)本血清、尿液一般均用血清測定儀器成本（萬）數(shù)萬數(shù)十萬檢測原理免疫金標(biāo)法化學(xué)發(fā)光微粒酶放大，化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光儀器應(yīng)用特點體積小,即時檢驗開機后最適合于連續(xù)集中檢測，八小時工作時間外一般均關(guān)機相關(guān)系數(shù)r=0.94~0.97r=0.95~0.98r=0.95~0.9810WWW.POCT.COM.CN 上海普陀人民醫(yī)院用DPCIMMULITE化學(xué)發(fā)光儀和配套HCG定量試劑，與U2儀器和試劑對31例婦產(chǎn)科病 人血清HCG定量同時檢測，結(jié)果顯示二者之間相關(guān)r=0.99（IMMULITE儀器檢測最高范圍是5000）。U2/HCG-DOT臨床應(yīng)用評估12WWW.POCT.COM.CN（

二HCG定量檢測的臨床意義

(一)改變觀念充分認(rèn)識HCG定量檢測的重要性 一般人的傳統(tǒng)觀念，即懷孕與否，應(yīng)做妊娠試驗。但是隨著HCG檢測技術(shù)的進步，優(yōu)生優(yōu)育需了解胎兒發(fā)育的情況；環(huán)境污染等多種因素的影響，先兆流產(chǎn)、宮外孕、滋養(yǎng)層細胞腫瘤發(fā)病的增高，臨床上迫切需要HCG的定量檢測，僅僅是妊娠試驗陽性，對上述疾病無診斷意義。14WWW.POCT.COM.CN因為定性的妊娠試驗HCG含量25mIU/ml，即可顯示陽性，而15000mIU/ml也報為陽性，同樣是陽性，其HCG含量差300多倍，這么大量的差異比較，臨床上可用于對胎兒發(fā)育狀況的觀察，宮外孕的診斷；先兆流產(chǎn)保胎的成功與否，滋養(yǎng)細胞源性腫瘤的診斷和療效觀察，妊娠殘留物的檢測以及作為腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用，而妊娠試驗的陽性不能反應(yīng)HCG絕對值不正常的過多或多低，改變觀念充分認(rèn)識HCG定量檢測的重要性15WWW.POCT.COM.CN因此，改變檢測觀念從單純的定性妊娠試驗，變?yōu)镠CG的定量檢測是何等的重要！而HCG的定量檢測可有助于對上述疾病的動態(tài)觀察和分析，便于正確診斷和治療。改變觀念充分認(rèn)識HCG定量檢測的重要性16WWW.POCT.COM.CN（二）HCG的基礎(chǔ)及特性（1）HCG的組成和特性hCG是由α亞基和β亞基組成。α亞基在hCG與受體結(jié)合中起主要作用，但α和β亞基形成完整的hCG分子是其與受體專一性結(jié)合的重要前提。β亞基決定了hCG的生物學(xué)和免疫學(xué)特性。α-肽鏈與LH、FSH和TSH的α鏈相似，β-肽鏈則是特異的。17WWW.POCT.COM.CNhCG的分泌部位和作用分泌:胎盤合體滋養(yǎng)層細胞分泌作用:hCG的生物學(xué)作用與LH相似。(1)刺激月經(jīng)黃體轉(zhuǎn)變?yōu)槿焉稂S體,分泌雌、孕激素(2)抑制淋巴細胞活動,防止母體對胎兒的排斥18WWW.POCT.COM.CNHCG分子結(jié)構(gòu)圖血液中HCG主要是完整HCG（α+β）形式存在，妊娠是一般分泌完整HCG也有很少的游離β亞基和片斷整分子HCGα亞基α亞基與LH、FSH、TSH有交叉α亞基與受體結(jié)合起主要作用Β亞基決定了HCG的生物學(xué)和免疫學(xué)特性在滋養(yǎng)層腫瘤等情況分泌的酶降解，使α、β鏈解離，成為游離片斷，最常見的（HCGβCF）游離β亞基和片斷β亞基20WWW.POCT.COM.CNHCG定量檢測的臨床意義

血清或尿液HCG定量測定的臨床重要性不只是妊娠的診斷，它有助于了解胚胎及胎兒發(fā)育狀況，胚胎發(fā)育正常時、HCG增長速率是極快的，特別當(dāng)流產(chǎn)癥狀出現(xiàn)后對于了解胎兒的存活極有幫助。妊娠期的婦女HCG絕對值不正常的過高過低均應(yīng)引起醫(yī)生的注意和病人的重視。HCG定量為什么能監(jiān)測胚胎發(fā)育的狀況呢？（一）、早孕的診斷及胚胎發(fā)育狀況的監(jiān)測21WWW.POCT.COM.CN妊娠早期血清hCG的變化正常妊娠約排卵后7-10d能測到hCG最初3周內(nèi)約1.7d增加一倍；第4-10周約3d增加一倍，孕5周時血hCG>1000uIU/ml，孕8-10周達高峰動態(tài)觀察血hCG水平，2d至少應(yīng)增加66%以上異位妊娠血hCG水平低、倍增時間延長約為3-8d，平均7d，每48小時的增值在66%以下。23WWW.POCT.COM.CN△ 在妊娠胚胎發(fā)育的不同時期，觀察HCG定量數(shù)值的變 化，是否符合HCG的增長規(guī)律了解胎兒發(fā)育的狀況。 先兆流產(chǎn)觀察HCG含量有助于先兆流產(chǎn)的處理，HCG定量逐漸上升表示胎兒能保住，不斷下降應(yīng)盡早處理，以免造成過期流產(chǎn)。這些情況定性妊娠試驗是不能做到的。△ HCG定量測定作為胚胎正常發(fā)育的監(jiān)測指標(biāo)，對孕婦 無任何損傷，HCG定量檢測的臨床意義24WWW.POCT.COM.CNhCG--診斷妊娠和異位妊娠B超檢查,一般停經(jīng)6周腹部B超可發(fā)現(xiàn)宮內(nèi)妊娠，陰道B超更可在31d時作出診斷。超聲檢查能明確診斷宮內(nèi)妊娠時的血hCG水平稱為超聲分辨閾值陰道超聲hCG水平為1500-2000mIU/ml，腹部超聲為6500mIU/ml。26WWW.POCT.COM.CNhCG--診斷妊娠和異位妊娠但hCG水平較低或倍增時間延長還見于先兆流產(chǎn)或難免流產(chǎn)。若hCG正常上升，則宮內(nèi)孕、異位妊娠和自然流產(chǎn)的敏感性分別為100%、23.3%和0。注意:血hCG的半衰期為37h，血hCG結(jié)果反映的并非取血當(dāng)日的滋養(yǎng)細胞的活性。27WWW.POCT.COM.CNhCG--診斷妊娠和異位妊娠Dart等:B超宮內(nèi)未發(fā)現(xiàn)孕囊的患者，血β-hCG值增加比降低患異位妊娠的危險性更大。血β-hCG增值在66%以下者，異位妊娠可能性最大,機會比是24.8；血β-hCG增值在66%以上者，患異位妊娠的機會比是2.6血β-hCG降值小于50%者，患異位妊娠的機會比是3.7。28WWW.POCT.COM.CN受個體差異的影響，至今尚無排除宮外孕的HCG絕對最低值，可以﹤25mIU/ml為參考，因為畢竟極少存在有不分泌HCG的不正常滋養(yǎng)層，所以宮外孕的診斷或排除應(yīng)根據(jù)臨床癥狀和實驗資料綜合慎重分析，并用同一方法測定。不能僅靠一項指標(biāo)作出診斷。HCG定量檢測的臨床意義30WWW.POCT.COM.CN（三）滋養(yǎng)層疾病的診斷與跟蹤臨床上引起HCG增加最明顯的情況見于絨毛膜組織腫瘤的患者。此種滋養(yǎng)層細胞源性腫瘤分泌的HCG與妊娠時正常胎盤所合成的HCG相同。正常妊娠頭三個月后，HCG水平不再增加，跌落到一個較平坦的水平，然而在滋養(yǎng)層細胞瘤患者中，HCG水平可隨瘤的發(fā)展而繼續(xù)升高。血清或尿HCG達80000mIU/ml而腹部超聲探測無胎心，則強烈提示胎塊妊娠。如卵巢、絨毛膜上皮癌、葡萄胎等。HCG定量檢測的臨床意義31WWW.POCT.COM.CN（四）療效觀察及預(yù)后判斷外科切除腫塊后，前三周每周測血清或尿HCG直至正常水平，以后一年內(nèi)逐月監(jiān)測，有助于判斷是否復(fù)發(fā)，術(shù)后3－6周HCG水平明顯下跌，如果HCG水平維持在一定水平或有所上升，應(yīng)考慮是否有轉(zhuǎn)移性疾病的可能。有作者報導(dǎo)，腦脊液與血清的HCG比值，有助于確定有無腦轉(zhuǎn)移。HCG定量檢測的臨床意義32WWW.POCT.COM.CN（五）妊娠殘留物的檢測在胎塊去除、自發(fā)性或誘導(dǎo)性流產(chǎn)、藥流、宮外孕手術(shù)治療或保守治療后，HCG定量監(jiān)測有助于證實滋養(yǎng)層組織的完全消除。HCG清除速率個體差異很大一般術(shù)后第一天可跌落約1/2，以后數(shù)天中跌落1/2，數(shù)周后可回復(fù)到正常水平。HCG定量檢測的臨床意義33WWW.POCT.COM.CN（六）作為腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用HCG定量有助于監(jiān)測卵巢胚細胞瘤的治療效果。由于個體差異的關(guān)系，應(yīng)注意測定治療前的HCG值作為基準(zhǔn)，與治療后的值相比較，是增加還是減低來判斷療效。HCG定量在診斷或跟蹤絨毛膜癌上十分有用，HCG大于40000mIU/ml與不良預(yù)后相聯(lián)系。精原細胞瘤病人的血清或尿HCG水平如高于正常情況提示預(yù)后差，化療劑量應(yīng)提高。非精原細胞瘤占睪丸細胞腫瘤的60％，如膀胱癌患者，其HCG水平升高意味著疾病的進展和放射治療的無效。HCG定量檢測的臨床意義34WWW.POCT.COM.CNHCG檢測結(jié)果持續(xù)﹤100mUI/ml時應(yīng)引起注意一般情況下，知道測試樣品HCG在25－100mIU/ml之間已能滿足臨床需要。特殊情況下如臨床需要了解25－100mIU/ml之間的詳細數(shù)據(jù)時，在25－100mIU/ml的低濃度曲線程序下用原測板處理后重新再測。再加血清，洗滌后再加金標(biāo)液，洗滌后再測；尿液標(biāo)本不加，再加金標(biāo)液100mIU洗滌后再測。儀器可顯示：＝25mIU/ml；或25－99mIU/ml之間的具體數(shù)字。

35WWW.POCT.COM.CNHCG定量檢測和數(shù)據(jù)分析比較對臨床診斷和鑒別診斷的價值充分說明，僅是妊娠試驗陽性對上述疾病并無診斷意義。HCG檢測結(jié)果持續(xù)﹤100mUI/ml時應(yīng)引起注意36WWW.POCT.COM.CNhCG檢測時需注意的情況hCG檢查時，須注意交叉反應(yīng)常用hCG檢測方法及乎不能排除LH，但正常尿中LH含量很少，在一般檢測中不顯陽性，對妊娠診斷的影響不大。更年期婦女，婦女排卵期及雙卵巢切除者等，其量增加，有時可達到240-480IU/L，對葡萄胎和絨毛膜癌隨訪病