Gao 第07章-苯乙胺類擬腎上腺素課件

第七

章苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析2022/11/28第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中具有苯乙胺基本結(jié)構(gòu)2022/11/28苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)*2022/11/28鹽酸克侖特羅硫酸沙丁胺醇2022/11/282022/11/282022/11/28化學(xué)性質(zhì)酚羥基特性：鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)，與金屬離子絡(luò)合呈色；在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深；在堿性溶液中更易變色。弱堿性：烴胺基側(cè)鏈，仲胺氮－弱堿性游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；其鹽可溶于水光學(xué)活性：手性碳原子，具有旋光性。苯環(huán)取代基特性：根據(jù)苯環(huán)取代基的電負(fù)性，最大吸收波長(zhǎng)以254nm為中心紅移或者藍(lán)移；紫外、紅外吸收特性進(jìn)行定性、定量分析。如鹽酸克倫特羅、鹽酸氨溴索--芳伯氨基2022/11/28二、與甲醛－硫酸反應(yīng)具有酚羥基取代的本類藥物，可與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。腎上腺素顯紅色，鹽酸異丙腎上腺素顯棕色至暗紫色，重酒石酸去甲腎上腺素顯淡紅色，鹽酸去氧腎上腺素為顯玫瑰紅→橙紅→深棕紅的變化2022/11/28三、還原反應(yīng)（酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀氧化呈現(xiàn)不同顏色）腎上腺素碘或過氧化氫中性或酸性腎上腺素紅放置棕紅色多聚體鹽酸異丙腎上腺素偏酸性條件碘異丙腎上腺素紅硫代硫酸鈉淡紅色溶液重酒石酸去甲腎上腺素酒石酸氫鉀飽和液pH3.56碘試液放置5min硫代硫酸鈉溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色腎上腺素或鹽酸異丙腎上腺素明顯的深紅棕色或紫色2022/11/28鹽酸去氧腎上腺素的鑒別：乙醚層不顯色，可與鹽酸麻黃堿區(qū)別2022/11/28五、脂肪伯胺的Rimini試驗(yàn)與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)

重酒石酸間羥胺的脂肪伯氨基2022/11/285mg重酒石酸間羥胺0.5ml水溶解亞硝基鐵氰化鈉試液2d丙酮2d，碳酸氫鈉0.2g△紅紫色脂肪伯氨基的專屬反應(yīng)丙酮不含有甲醛60℃，1min2022/11/28六、紫外光譜特征吸收紅外特征吸收：上述藥物還可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別。2022/11/28第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

一、酮體檢查 生產(chǎn)工藝：酮體氫化還原制得，若氫化不完全則引入酮體雜質(zhì)。 例如：腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素和鹽酸甲氧明等苯2022/11/28310酮體樣品利用酮體在紫外310nm處有最大吸收，而藥物本身在此波長(zhǎng)幾乎沒有吸收，測(cè)定一定濃度下樣品溶液在310nm處的吸收度來控制酮體的限量。2022/11/28二、光學(xué)純度檢查大多數(shù)苯乙胺類擬腎上腺素藥物分子結(jié)構(gòu)中存在手性碳原子通過比旋度測(cè)定控制藥物的質(zhì)量2022/11/28三、有關(guān)物質(zhì)檢查 例：鹽酸去氧腎上腺素檢查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取上述溶液適量，加甲醇稀釋成每1ml中含0.10mg的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇－氯仿－濃氨溶液(80:5:15)為展開劑，展開后，晾干，噴以重氮苯磺酸試液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。2022/11/28第四節(jié)含量測(cè)定

原料：非水溶液滴定法、溴量法制劑：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、高效液相色譜法2022/11/28一、非水溶液滴定法

非水溶液滴定法是在非水溶劑中進(jìn)行的酸堿滴定測(cè)定法。主要用來測(cè)定有機(jī)堿及其氫鹵酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽以及有機(jī)酸堿金屬鹽類藥物的含量。也用于測(cè)定某些有機(jī)弱酸的含量。酸性溶劑：冰醋酸堿性溶劑：DMF兩性溶劑：甲醇惰性溶劑：氯仿，甲苯，丙酮2022/11/28（一）基本原理 冰醋酸為溶劑 醋酸汞消除氫鹵酸的干擾 指示劑（終點(diǎn)顏色應(yīng)以電位滴定時(shí)的突躍點(diǎn)為準(zhǔn)，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正） 若堿性較弱則加醋酐使突躍明顯2022/11/28例：重酒石酸去甲腎上腺素－－直接滴定鹽酸克倫特羅－－加醋酸汞消除氫鹵酸干擾；由于堿性較弱，電位法指示終點(diǎn)硫酸沙丁胺醇－－加入醋酐以增大突躍，結(jié)晶紫為指示劑注：加入醋酐注意防止氨基被乙?；?，所以在冰醋酸溶解樣品后應(yīng)放冷后再加醋酐。2022/11/28二、溴量法鹽酸去氧腎上腺素及其注射液、重酒石酸間羥胺反應(yīng)摩爾比為1∶6

2022/11/28三、亞硝酸鈉法

鹽酸克侖特羅分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，可用永停滴定法取本品約0.25g，精密稱定，置100ml燒杯中，加鹽酸溶液(1→2)25ml使溶解，再加水25ml，照永停滴定法，用亞硝酸鈉滴定液(0.05mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于15.68mg的C12H18Cl2N2OHCl

2022/11/28四、紫外分光光度法&比色法鹽酸甲氧明注射液含量測(cè)定：精密量取本品適量(約相當(dāng)于鹽酸甲氧明100mg)，置250ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻；精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在290nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C11H17NO3HCl的吸收系數(shù)()為137計(jì)算，即得2022/11/28紫外分光光度法&比色法—重氮化-偶合顯色或與亞鐵離子絡(luò)合顯色 以鹽酸克倫特羅為例，測(cè)定原理如下：注意：由于偶合劑（N-(1-萘基)-乙二胺）與亞硝酸也能顯色干擾測(cè)定，所以在重氮化后，應(yīng)加入氨基磺酸銨分解剩余的亞硝酸。2022/11/28例：鹽酸克倫特羅栓（Chp2005） 【含量測(cè)定】對(duì)照品溶液的制備精密稱取鹽酸克侖特羅對(duì)照品適量，加鹽酸溶液(9→100)制成每1ml中含7.2μg的溶液。

供試品溶液的制備取本品20粒，精密稱定，切成小片，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸克侖特羅0.36mg），置分液漏斗中，加溫?zé)岬穆确?0ml使溶解，用鹽酸溶液(9→100)振搖提取3次(20ml、15ml、10ml)，分取酸提取液，置50ml量瓶中，用鹽酸溶液(9→100)稀釋至刻度，搖勻，濾過，收集續(xù)濾液，即得。

2022/11/28測(cè)定法精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15ml，分置25ml量瓶中，各加鹽酸溶液(9→100)5ml與0.1％亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置3分鐘，各加0.5％氨基磺酸銨溶液1ml，混勻，時(shí)時(shí)振搖10分鐘，再各加0.1％鹽酸萘乙二胺溶液1ml,混勻，放置10分鐘，用鹽酸溶液(9→100)稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄ⅣB），在500nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。2022/11/28五、高效液相色譜法高效分離，高靈敏度和高選擇性－可用于制劑常規(guī)分析，臨床藥物監(jiān)測(cè)和體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究。例1：重酒石酸去甲腎上腺素注射液分析色譜條件：色譜柱：ODS流動(dòng)相：0.14%庚烷基磺酸鈉溶液－甲醇(65:35)，用磷酸調(diào)pH至3.0±0.1，流速：1.0ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm2022/11/28測(cè)定方法：精密量取本品適量（約相當(dāng)于重酒石酸去甲腎上腺素4mg），置25ml量瓶中，加醋酸溶液（1→25）稀釋至刻度，搖勻，取2μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取重酒石酸去甲腎腺素對(duì)照品適量，精密稱定，加醋酸溶液（1→25）制成每1ml中含0.16mg的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。2022/11/28第五節(jié)體內(nèi)藥物分析)動(dòng)物組織中的鹽酸克倫特羅殘留的測(cè)定—瘦肉精1.提取稱取動(dòng)物肝臟組織樣品5g0.05g于帶蓋的聚四氟乙烯離心管中，加入乙酸乙酯15ml，再加入10.0%碳酸鈉溶液3ml，然后以10000r/min以上的速度勻質(zhì)60秒，蓋上蓋子以5000r/min的速度離心2分鐘，吸取上層有機(jī)溶劑于離心管中，在殘?jiān)性偌尤胍宜嵋阴?0ml，在渦旋混合器上混合1分鐘，離心后吸取有機(jī)溶劑并合并提取液。2022/11/28在收集的有機(jī)溶劑中加入0.10mol/L的鹽酸溶液5ml，渦旋混合30秒，以5000r/min的速度離心2分鐘，吸取下層水溶液，同樣步驟重復(fù)萃取一次，合并兩次萃取液，用2.5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.2。2022/11/282.凈化SCX小柱依次用甲醇5ml、水5ml和30mmol/L鹽酸5ml活化，然后將上述萃取液上樣至固相萃取小柱中依次用水5ml和甲醇5ml淋洗柱子，在溶劑流過固相萃取柱后，抽干SCX小柱，再用4%氨化甲醇溶液5ml洗脫，收集洗脫液。

2022/11/283.測(cè)定

(1)衍生化：在50℃水浴中用氮?dú)獯蹈缮鲜鱿疵撘?，加入甲?00l和BSTFA(雙三甲基硅烷三氟乙酰胺)100l，試管加蓋后于渦旋混合器上振蕩30秒，在80℃的烘箱中加熱衍生1小時(shí)(蓋住蓋子)；同時(shí)吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液0.5ml加入到4%氨化甲醇溶液4.5ml中，用氮?dú)獯蹈珊笸瑯悠凡僮?，待衍生結(jié)束后加入甲苯0.3ml轉(zhuǎn)入進(jìn)樣小瓶中，進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜(GC/MS)分析。2022/11/28(2)GC/MS測(cè)定參數(shù)：色譜柱HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷，30m×0.25mm(內(nèi)徑)，0.25m(膜厚)；進(jìn)樣口溫度220℃；進(jìn)樣方式不分流；進(jìn)樣體積1l；柱溫70℃(保持0.6分鐘)，以25℃/min升溫至200℃(保持6分鐘)，以25℃/min升溫至280℃(保持5分鐘)；載氣氦氣；流速0.9ml/min(恒流)；GC/MS傳輸線溫度280℃；溶劑延遲8分鐘；EM電壓高于調(diào)諧電壓200V；離子源(EI)溫度200℃；四極桿溫度160℃；選擇離子監(jiān)測(cè)(m/z)86、212、262、277。2022/11/284.定性定量方法(1)定性：樣品峰與標(biāo)樣的保留時(shí)間之差不多于2秒，并人工比較選擇離子的豐度，其中試樣峰的選擇離子相對(duì)強(qiáng)度(與基峰的比例)不超過標(biāo)準(zhǔn)相應(yīng)選擇離子相對(duì)強(qiáng)度平均值的20％(m/z262)和50％(m/z212、277)。(2)定量方法：選擇試樣峰(m/z86)的峰面積進(jìn)行單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)定量。當(dāng)單點(diǎn)校準(zhǔn)定量時(shí)根據(jù)樣品液中鹽酸克侖