脲酶活性的測定推選優(yōu)秀ppt

脲酶活性的測定(cèdìng)第一頁，共12頁。一、實驗(shíyàn)目的1、掌握(zhǎngwò)大豆制品中脲酶活性的測定原理2、熟悉(shúxī)掌握用PH增值法測定大豆制品中脲酶活性第二頁，共12頁。二、測定(cèdìng)原理將粉碎的大豆制品與中性尿素緩沖溶液混合，在30℃保持30分鐘，尿素酶催化尿素水解產(chǎn)生氨，由于尿素水解釋放的氨是堿性的，可使溶液PH值升高，試樣溶液與空白(kòngbái)溶液的PH值之差，即可間接表示出氨量的多少。NH2CONH2+尿素(niàosù)酶2NH3↑+CO2第三頁，共12頁。三、儀器(yíqì)及試劑1、儀器(yíqì)分析(fēnxī)天平、樣品粉碎機、樣品分析(fēnxī)篩、恒溫水浴、酸度計、稱量瓶、移液管、角匙等第四頁，共12頁。樣品(yàngpǐn)試驗的PH值與空白試驗的PH值兩者之間的差異，則為脲酶活性的指數(shù)，即：樣品(yàngpǐn)試驗的PH值與空白試驗的PH值兩者之間的差異，則為脲酶活性的指數(shù)，即：分析(fēnxī)天平、樣品粉碎機、樣品分析(fēnxī)篩、恒溫水浴、酸度計、稱量瓶、移液管、角匙等分析(fēnxī)天平、樣品粉碎機、樣品分析(fēnxī)篩、恒溫水浴、酸度計、稱量瓶、移液管、角匙等△PH<0.2、熟悉(shúxī)掌握用PH增值法測定大豆制品中脲酶活性△PH<0.05mol/L磷酸鹽緩沖溶液(huǎnchōnɡrónɡyè)，加塞混合，置于30℃水浴中。05mol/L磷酸鹽緩沖溶液(huǎnchōnɡrónɡyè)，加塞混合，置于30℃水浴中。05mol/L磷酸鹽緩沖溶液(huǎnchōnɡrónɡyè)，加塞混合，置于30℃水浴中。脲酶活性的測定(cèdìng)NH2CONH2+尿素(niàosù)酶2NH3↑+CO2四、試樣(shìyànɡ)的選取和制備05mol/L磷酸鹽緩沖溶液(huǎnchōnɡrónɡyè)，加塞混合，置于30℃水浴中。2、試劑(shìjì)1、掌握(zhǎngwò)大豆制品中脲酶活性的測定原理0.05mol/L磷酸鹽緩沖液、尿素(niàosù)緩沖溶液等2、試劑(shìjì)四、試樣(shìyànɡ)的選取和制備

選取具有代表性的試樣，粉碎至40目，用“四分法”縮減至200～300g，密閉保存，以防試樣組分變化或變質(zhì)。第五頁，共12頁。NH2CONH2+尿素(niàosù)酶2NH3↑+CO2準確稱取0.分析(fēnxī)天平、樣品粉碎機、樣品分析(fēnxī)篩、恒溫水浴、酸度計、稱量瓶、移液管、角匙等001g樣品于稱量瓶中，加入10ml尿素緩沖溶液，加塞混合，然后置于30℃水浴(shuǐyù)中，在混合操作時稱量瓶切勿倒置。1、掌握(zhǎngwò)大豆制品中脲酶活性的測定原理05mol/L磷酸鹽緩沖溶液(huǎnchōnɡrónɡyè)，加塞混合，置于30℃水浴中。選取具有代表性的試樣，粉碎至40目，用“四分法”縮減至200～300g，密閉保存，以防試樣組分變化或變質(zhì)。分析(fēnxī)天平、樣品粉碎機、樣品分析(fēnxī)篩、恒溫水浴、酸度計、稱量瓶、移液管、角匙等△PH<0.1、掌握(zhǎngwò)大豆制品中脲酶活性的測定原理3、樣品試驗與空白試驗的制備應(yīng)相隔(xiānggé)5分鐘，并且每隔5分鐘攪拌內(nèi)容物一次。五、測定(cèdìng)步驟1、樣品試驗：準確稱取0.200±0.001g樣品于稱量瓶中，加入10ml尿素緩沖溶液，加塞混合，然后置于30℃水浴(shuǐyù)中，在混合操作時稱量瓶切勿倒置。第六頁，共12頁。2、空白試驗：準確稱取0.200±0.001g樣品于稱量瓶中，加入10ml0.05mol/L磷酸鹽緩沖溶液(huǎnchōnɡrónɡyè)，加塞混合，置于30℃水浴中。3、樣品試驗與空白試驗的制備應(yīng)相隔(xiānggé)5分鐘，并且每隔5分鐘攪拌內(nèi)容物一次。第七頁，共12頁。4、30分鐘后，相隔5分鐘將樣品與空白試驗的稱量瓶從水浴中取出，將上層(shàngcéng)液體移入5ml燒杯中，在從水浴中取出剛達5分鐘時，分別測定此種上層(shàngcéng)液體的PH值。第八頁，共12頁。1、計算公式：六、結(jié)果(jiēguǒ)的計算樣品(yàngpǐn)試驗的PH值與空白試驗的PH值兩者之間的差異，則為脲酶活性的指數(shù)，即：脲酶活性=試樣的PH測定(cèdìng)值-空白的PH測定(cèdìng)值第九頁，共12頁。每個樣品應(yīng)取兩個平行(píngxíng)樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。2、重復性：七、注意事項1、關(guān)于(guānyú)酸度計的使用第十頁，共12頁。BACK2、稱量瓶應(yīng)塞緊3、關(guān)于(guānyú)固定質(zhì)量稱量