細菌的繁殖、代謝、培養(yǎng)、消毒課件

1第2章細菌的生理PhysiologyofBacteria1第2章細菌的生理PhysiologyofBacter21.細菌生長繁殖的條件

（1）細菌生長繁殖的基本條件與方式

（2）根據(jù)對氧需求進行細菌分類2.細菌的分解和合成代謝由細菌產(chǎn)生并與醫(yī)學(xué)有關(guān)的主要合成及分解代謝產(chǎn)物國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求21.細菌生長繁殖的條件國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求33.細菌的人工培養(yǎng)

（1）培養(yǎng)基的概念

（2）細菌在液體和固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象

（3）細菌人工培養(yǎng)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求33.細菌的人工培養(yǎng)國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求44.消毒與滅菌

（1）消毒、滅菌、無菌、抑菌和防腐的概念

（2）熱力滅菌法的種類及其應(yīng)用

（3）射線滅菌法的原理和應(yīng)用

（4）常用化學(xué)消毒劑的種類、濃度和應(yīng)用

國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求44.消毒與滅菌國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求5一、細菌的化學(xué)組成占細胞總重量75%-90%碳、氫、氮、氧、磷、硫等鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、氯等肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等水有機物無機離子特有成分第一節(jié)細菌的理化性狀5一、細菌的化學(xué)組成占細胞總重量75%-90%碳、氫、氮、氧6二、細菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)半透明表面積體積小、表面積大帶電現(xiàn)象G+菌pI2~3G-菌pI4~5半透性細胞壁、膜有半透性滲透壓中性環(huán)境帶負電荷G+菌

20~25大氣壓G-菌

5~6大氣壓6二、細菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)半透明表面積體積小、表面積大帶電7一、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)水：營養(yǎng)的吸收與代謝均需水碳源：合成菌體成分，提供能量病原菌主要來源于糖類氮源：合成菌體成分病原菌主要來源于氨基酸、蛋白胨等無機鹽：常用元素（K\Na\Ca\Mg\P\S\Fe)

微量元素（Co\Mn|Mo\Zn)生長因子：生長必需但自身不能合成的物質(zhì)，如維生素、氨基酸等。第二節(jié)

細菌的營養(yǎng)與生長繁殖7一、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)水：營養(yǎng)的吸收與代謝均需水第二節(jié)細菌8二、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制被動擴散

易化擴散主動轉(zhuǎn)運ABC轉(zhuǎn)運離子偶聯(lián)轉(zhuǎn)運基團轉(zhuǎn)移特異性轉(zhuǎn)運8二、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制被動擴散9三、細菌營養(yǎng)類型

自養(yǎng)菌（Autotroph）以無機物為原料，合成菌體成分按能量來源，分化能自養(yǎng)菌和光能自養(yǎng)菌

異養(yǎng)菌（Heterotroph）以有機物為原料合成菌體成分分腐生菌(Saprophyte)和寄生菌(Parasite)所有病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分為寄生菌9三、細菌營養(yǎng)類型自養(yǎng)菌（Autotroph）10四、影響細菌生長的因素營養(yǎng)物質(zhì)充足氫離子濃度(pH)

多數(shù)病原菌最適pH為7.2～7.6溫度多數(shù)病原菌最適37℃10四、影響細菌生長的因素營養(yǎng)物質(zhì)充足11氣體專性需氧菌(Obligateaerobe)專性厭氧菌(Obligateanaerobe)兼性厭氧菌(Facultativeanaerobe)微需氧菌(Microaerophilicbacterium)

CO2對細菌的生長也很重要。大部分細菌在新陳代謝過程中產(chǎn)生的CO2可滿足需要。滲透壓一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數(shù)細菌少數(shù)細菌嗜鹽，如副溶血性弧菌11氣體12五、細菌的生長繁殖二分裂無性繁殖，代時細菌個體的生長繁殖12五、細菌的生長繁殖二分裂無性繁殖，代時細菌個體的生長繁殖對數(shù)期遲緩期

分為四期：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期細菌的生長曲線0515202530106.08.58.07.57.06.59.0衰亡期總菌數(shù)活菌數(shù)細菌數(shù)的對數(shù)小時穩(wěn)定期菌體增大代謝活躍分裂遲緩增殖最快形態(tài)染色生理活性典型活菌數(shù)恒定芽胞代謝產(chǎn)物產(chǎn)生死亡自溶形態(tài)改變對數(shù)期遲緩期分為四期：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期細14第三節(jié)細菌的新陳代謝一、細菌的能量代謝——生物氧化發(fā)酵：以有機物為受氫體呼吸：以無機物為受氫體需氧呼吸（受氫體：氧）厭氧呼吸（受氫體：硝酸鹽、硫酸鹽等 其他無機物）細菌的新陳代謝包括分解代謝和合成代謝14第三節(jié)細菌的新陳代謝一、細菌的能量代謝——生物氧化發(fā)酵15發(fā)酵EMP途徑（糖酵解）

——大多數(shù)細菌、專性厭氧菌磷酸戊糖途徑（HMP途經(jīng)）需氧呼吸（需氧菌和兼性厭氧菌）厭氧呼吸（專性、兼性厭氧菌）以葡萄糖為基質(zhì)的細菌的能量代謝15發(fā)酵以葡萄糖為基質(zhì)的細菌的能量代謝16二、細菌的代謝產(chǎn)物細菌具有不同的酶，對糖、蛋白質(zhì)等的分解能力的不同，因而代謝產(chǎn)物各異，根據(jù)這一點，利用生物化學(xué)方法鑒別不同細菌稱為細菌的生化反應(yīng)試驗。分解代謝產(chǎn)物和細菌的生化反應(yīng)16二、細菌的代謝產(chǎn)物細菌具有不同的酶，對糖、蛋17常見的細菌生化反應(yīng)對糖的反應(yīng)對蛋白質(zhì)的反應(yīng)枸櫞酸鹽利用試驗?zāi)蛩孛冈囼灱谆t試驗吲哚試驗硫化氫試驗糖發(fā)酵試驗VP試驗其他試驗17常見的細菌生化反應(yīng)對對枸櫞酸鹽利用試驗?zāi)蛩孛冈囼灱谆t試18細菌的合成代謝產(chǎn)物

及其醫(yī)學(xué)上意義

熱原質(zhì)（Pyrogen)細菌合成的一種注入人體內(nèi)引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。大多數(shù)是G-菌的脂多糖。熱原質(zhì)耐高溫，高壓蒸汽滅菌不能破壞（121℃，20min），250℃高溫干烤才能破壞。注射藥品去熱原18細菌的合成代謝產(chǎn)物

及其醫(yī)學(xué)上意義熱原質(zhì)（P19內(nèi)毒素(Endotoxin)

G－菌的脂多糖，菌體崩解后釋放外毒素(Exotoxin)

多數(shù)G＋菌和少數(shù)G－菌釋放的蛋白質(zhì)侵襲性酶

損傷機體組織，促進細菌侵襲和擴散，如卵磷脂酶（產(chǎn)氣莢膜梭菌）、透明質(zhì)酸酶（A群鏈球菌）。毒素和侵襲性酶19內(nèi)毒素(Endotoxin)毒素和侵襲性酶20色素脂溶性色素與水溶性色素有助于細菌鑒別20色素21抗生素(Antibiotics)：多粘菌素、桿菌肽細菌素(Bacteriocins)抗菌蛋白，只能殺傷有親緣關(guān)系的細菌，無治療意義，用于細菌分型、流行病學(xué)調(diào)查。大腸桿菌產(chǎn)生大腸菌素(Colicin)維生素某些腸道菌合成，如B族維生素、VK。21抗生素(Antibiotics)：多粘菌素、桿菌肽22第四節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)細菌的方法提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)和適宜的環(huán)境條件，包括酸堿度、滲透壓、溫度和氣體條件等根據(jù)不同標本及不同的培養(yǎng)目的，可選用不同的接種和培養(yǎng)方法。常用的有細菌的分離培養(yǎng)和純培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)22第四節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)細菌的方法提供充足的營養(yǎng)23二、培養(yǎng)基

（culturemedium）

由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品,滅菌后使用。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

增菌培養(yǎng)基

（通用、專用）

選擇培養(yǎng)基

鑒別培養(yǎng)基

厭氧培養(yǎng)基

液體、固體、半固體培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基23二、培養(yǎng)基（culturemedium）由241．基礎(chǔ)培養(yǎng)基

(Basicmedium)

含有細菌生長所需的基本營養(yǎng)成分，是配制其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)如營養(yǎng)肉湯（Nutrientbroth），營養(yǎng)瓊脂（Nutrientagar)241．基礎(chǔ)培養(yǎng)基252．增菌培養(yǎng)基（Enrichmentmedium）

通用增菌培養(yǎng)基添加葡萄糖、血液、生長因子等，最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等

專用增菌培養(yǎng)基

選擇性增菌培養(yǎng)基252．增菌培養(yǎng)基（Enrichmentmedium）263.選擇培養(yǎng)基（Selectivemedium）含有抑制劑，抑制標本中雜菌生長SS瓊脂使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到263.選擇培養(yǎng)基27

4.鑒別培養(yǎng)基（Differentialmedium）含有底物和指示劑。如：糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-美藍瓊脂（EMB）等。274.鑒別培養(yǎng)基（Differentialmedium285．厭氧培養(yǎng)基

（Anaerobicmedium）皰肉培養(yǎng)基

（Cookedmeatmedium)巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基285．厭氧培養(yǎng)基29根據(jù)成分，培養(yǎng)基可分為合成培養(yǎng)基（Syntheticmedium)天然培養(yǎng)基（Complexmedium)根據(jù)物理狀態(tài)，培養(yǎng)基可分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基賦形劑為瓊脂29根據(jù)成分，培養(yǎng)基可分為根據(jù)物理狀態(tài)，培養(yǎng)基可分為30在液體培養(yǎng)基中生長情況沉淀生長均勻混濁生長表面生長三、細菌在培養(yǎng)基中的生長情況30在液體培養(yǎng)基中生長情況沉淀生長均勻混濁生長表面生長三、細31在半固體培養(yǎng)基中生長情況

有鞭毛細菌

擴散生長，云霧狀渾濁無鞭毛細菌

沿穿刺線生長，周圍清亮31在半固體培養(yǎng)基中生長情況32在固體培養(yǎng)基中生長情況

分離培養(yǎng)

將標本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。

菌落（colony）

在固體培養(yǎng)基上，單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細菌集團。32在固體培養(yǎng)基中生長情況33四、人工培養(yǎng)細菌的用途醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用基因工程中的應(yīng)用感染性疾病的診斷細菌學(xué)研究病原性診斷生物制品的制備制造各種產(chǎn)品處理垃圾制造菌肥農(nóng)藥等表達重組DNA制備產(chǎn)品33四、人工培養(yǎng)細菌的用途醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用基因34一、消毒滅菌的常用術(shù)語滅菌（Sterilization）

殺滅物體上所有微生物的方法，包括芽胞消毒（Disinfection）

殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法防腐（Antisepsis）

防止或抑制微生物生長繁殖的方法第五節(jié)抑制或殺滅微生物的理化因素34一、消毒滅菌的常用術(shù)語滅菌（Sterilization）35清潔（Cleaning）

通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程，消毒滅菌前必需的處理無菌（Asepsis）和無菌操作無菌即無活菌，多是滅菌的結(jié)果無菌操作為防止細菌進入人體或其它物品的操作技術(shù)一、消毒滅菌的常用術(shù)語35清潔（Cleaning）一、消毒滅菌的常用術(shù)語36二、物理消毒滅菌法

熱力、輻射、濾過、干燥和低溫等36二、物理消毒滅菌法37

焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法干熱滅菌法熱力滅菌法高溫殺滅細菌干烤----加熱160-180℃2小時紅外線----表面熱效應(yīng)、不均勻37

焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌38濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好1、濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱38濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效39濕熱滅菌法巴氏消毒法（Pasterurization)用較低的溫度（62℃30分鐘或72℃15-30秒）殺滅致病菌39濕熱滅菌法巴氏消毒法（Pasterurization)40濕熱滅菌法煮沸法水煮100℃5分鐘(繁殖體)-2小時(芽胞)流動蒸汽消毒法間歇蒸汽滅菌法（Fractionalsterilization)水蒸汽100℃15-30分鐘(繁殖體)反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌40濕熱滅菌法煮沸法水煮100℃5分鐘(繁殖體)-2小時(41濕熱滅菌法壓力蒸汽滅菌法(Sterilizationbypressuredsteam)最有效的滅菌方法121℃15-20分鐘41濕熱滅菌法壓力蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃1542輻射殺菌法紫外線殺菌機理：

波長240-300nm的紫外線具有殺菌作用干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱、損傷眼睛、皮膚不耐熱物品的表面消毒

特點：

應(yīng)用范圍：空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細菌實驗室

42輻射殺菌法紫外線殺菌機理：波長240-300n43殺菌機理：

應(yīng)用范圍：電離輻射包括β射線和γ射線產(chǎn)生游離基，破壞DNA、胞膜、酶等一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒不破壞其營養(yǎng)成分

輻射殺菌法43殺菌機理：應(yīng)用范圍：電離輻射包括β射線和γ射44微波(Microwave)

殺菌機制：熱效應(yīng)特點：熱效應(yīng)不均勻一定含水量應(yīng)用范圍：食品、非金屬器械、檢驗室用品、食具等波長為1-1000mm的電磁波輻射殺菌法44微波(Microwave)殺菌機制：熱效應(yīng)波長45濾過除菌法(Filtration)

用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細菌、真菌,以達到無菌目的，不能除去病毒、支原體濾菌器

含有微細小孔<0.45μm,最小為0.1μm，只允許液體或氣體通過，常用的為薄膜濾菌器。適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌，空氣除菌采用生物潔凈技術(shù)45濾過除菌法(Filtration)用物理阻留的方46干燥與低溫抑菌法在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷凍真空干燥法46干燥與低溫抑菌法在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷47三、化學(xué)消毒滅菌法化學(xué)消毒劑的作用機制促進菌體蛋白質(zhì)變性或凝固干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝損傷細菌的細胞膜化學(xué)消毒劑一般對人體組織有害，只能外用或用于環(huán)境47三、化學(xué)消毒滅菌法化學(xué)消毒劑的作用機制化學(xué)消毒劑一般對48化學(xué)消毒劑分類1.高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

——殺滅包括芽胞的所有微生物含氯消毒劑次氯酸鈉、二氯異氰酸尿酸鈉、漂白粉過氧化物消毒劑過氧化氫（3%）、過氧乙酸（0.1-0.5%）二氧化氯醛類消毒劑戊二醛（2%）、甲醛環(huán)氧乙烷48化學(xué)消毒劑分類1.高效消毒劑（high-leveldi492.中效消毒劑

（intermediate-leveldisinfectants）——不能殺滅細菌的芽胞，但能殺滅細菌的繁殖體（包括分枝桿菌）、真菌和大多數(shù)病毒含碘消毒劑：碘酊（2%）

碘伏（0.3-0.5%）醇類消毒劑：乙醇、異丙醇492.中效消毒劑503.低效消毒劑

（low-leveldisinfectants）——多數(shù)細菌繁殖體，但對分枝桿菌、芽胞、抵抗力強的真菌、病毒無效季銨鹽類：苯扎溴銨（0.05-0.1%）氯己定（洗必泰）（0.02-0.05%）高錳酸鉀（0.1%）503.低效消毒劑51高危器械物品進入無菌組織的物品，如手術(shù)器械，應(yīng)該滅菌

中危器械物品不進入無菌組織但接觸黏膜的器械，采用消毒低危器械物品只接觸未損傷皮膚不進入無菌組織和不接觸黏膜的物品，一般用后清洗、消毒即可快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械瞬時滅菌、微波、高效消毒劑快速處理、中、低效消毒劑與低熱協(xié)同作用（一）醫(yī)療器械物品的消毒滅菌四、消毒滅菌的運用51高危器械物品（一）醫(yī)療器械物品的消毒滅菌四、消毒滅菌52

（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌

物理消毒法

紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2μm的高效過濾裝置以除去細菌和帶菌塵?；瘜W(xué)消毒法：化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點燃煙熏；四、消毒滅菌的運用52（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌四、消毒滅菌的運用53四、消毒滅菌的運用（三）手和皮膚的消毒用肥皂和流動水經(jīng)常并正確洗手病原微生物污染時應(yīng)用消毒劑消毒。（四）黏膜的消毒過氧化氫、洗必泰、高錳酸鉀

（五）患者排泄物與分泌物的消毒滅菌次氯酸鈉、漂白粉53四、消毒滅菌的運用（三）手和皮膚的消毒（四）黏膜的消毒54（六）患者污染物品的消毒煮沸、流通蒸汽消毒過氧乙酸、過氧化氫、含氯消毒劑（七）飲水的消毒氯氣、漂白粉

（八）環(huán)境的消毒過氧乙酸、生石灰、含氯消毒劑

四、消毒滅菌的運用54（六）患者污染物品的消毒四、消毒滅菌的運用55各種消毒劑的應(yīng)用種類使用濃度用途石炭酸3-5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇70-75%皮膚、體溫計消毒高錳酸鉀0.1-1%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞2%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞0.1%皮膚消毒、手術(shù)部位消毒過氧乙酸0.2-0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2-5%皮膚消毒新潔而滅0.4-1.6%手術(shù)洗手、浸泡手術(shù)器械龍膽紫2-4%淺表創(chuàng)傷消毒55各種消毒劑的應(yīng)用種類使用濃度用途石炭酸3-56五、影響消毒滅菌效果的因素消毒劑微生物環(huán)境性質(zhì)濃度作用時間生理狀態(tài)種類有機物溫度酸堿度數(shù)量56五、影響消毒滅菌效果的因素消毒劑微生物環(huán)境性質(zhì)濃度作用57第六節(jié)細菌的分類傳統(tǒng)分類（人為分類） 以生物學(xué)性狀為依據(jù)

種系分類(自然分類) 以細菌的發(fā)育進化關(guān)系為基礎(chǔ)

細菌分類鑒定的具體方法

表型分類、分析分類、基因型分類

一、細菌的分類原則與層次57第六節(jié)細菌的分類傳統(tǒng)分類（人為分類）一、細菌的分類原58表型分類以形態(tài)、生理特征等生物學(xué)性狀為依據(jù)數(shù)值分類：借助計算機按性狀相似程度歸類

（種的水平相似度>80%）分析分類分析菌體成分、代謝產(chǎn)物組成與圖譜等特征基因型分類分析細菌遺傳物質(zhì)，揭示細菌進化的信息

DNA堿基組成（G+Cmol%）、核酸分子雜交、16SrRNA

最新《伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)手冊》（2004年）已收集4000多種模式菌株16SrRNA序列，將原核生物分為古生菌域（2個門）、細菌域（24個門）58表型分類59種(Species)：生物學(xué)性狀基本相同的細菌群體

70%或70%以上DNA同源性，5℃或更低的△Tm屬(Genus)

：性狀相近，關(guān)系密切的若干菌種組成亞種(subspecies,subsp.)或變種（variety,var.)型(type):生物型/血清型/噬菌體型/細菌素型菌株(Strain)：不同來源的同一菌種的細菌標準菌株或模式菌株：具有某種細菌的典型特征

——門、綱、目、科、屬、種一、細菌的分類原則與層次59種(Species)：生物學(xué)性狀基本相同的細菌群體——門60二、細菌的命名法

采用拉丁雙名法，即由一個屬名（名詞）和一個種名（形容詞）構(gòu)成。中文譯名：種名在前，屬名在后。如： Mycobacteriumtuberculosis（結(jié)核分枝桿菌） Salmonellatyphi（沙寒沙門菌） S.typhi,

Salmonellasp.

(泛指，單數(shù)）

Salmonellaspp.（泛指，復(fù)數(shù)）60二、細菌的命名法采用拉丁雙名法，即由一個屬名（名61TheEnd61TheEnd62第2章細菌的生理PhysiologyofBacteria1第2章細菌的生理PhysiologyofBacter631.細菌生長繁殖的條件

（1）細菌生長繁殖的基本條件與方式

（2）根據(jù)對氧需求進行細菌分類2.細菌的分解和合成代謝由細菌產(chǎn)生并與醫(yī)學(xué)有關(guān)的主要合成及分解代謝產(chǎn)物國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求21.細菌生長繁殖的條件國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求643.細菌的人工培養(yǎng)

（1）培養(yǎng)基的概念

（2）細菌在液體和固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象

（3）細菌人工培養(yǎng)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求33.細菌的人工培養(yǎng)國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求654.消毒與滅菌

（1）消毒、滅菌、無菌、抑菌和防腐的概念

（2）熱力滅菌法的種類及其應(yīng)用

（3）射線滅菌法的原理和應(yīng)用

（4）常用化學(xué)消毒劑的種類、濃度和應(yīng)用

國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求44.消毒與滅菌國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試大綱要求66一、細菌的化學(xué)組成占細胞總重量75%-90%碳、氫、氮、氧、磷、硫等鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、氯等肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等水有機物無機離子特有成分第一節(jié)細菌的理化性狀5一、細菌的化學(xué)組成占細胞總重量75%-90%碳、氫、氮、氧67二、細菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)半透明表面積體積小、表面積大帶電現(xiàn)象G+菌pI2~3G-菌pI4~5半透性細胞壁、膜有半透性滲透壓中性環(huán)境帶負電荷G+菌

20~25大氣壓G-菌

5~6大氣壓6二、細菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)半透明表面積體積小、表面積大帶電68一、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)水：營養(yǎng)的吸收與代謝均需水碳源：合成菌體成分，提供能量病原菌主要來源于糖類氮源：合成菌體成分病原菌主要來源于氨基酸、蛋白胨等無機鹽：常用元素（K\Na\Ca\Mg\P\S\Fe)

微量元素（Co\Mn|Mo\Zn)生長因子：生長必需但自身不能合成的物質(zhì)，如維生素、氨基酸等。第二節(jié)

細菌的營養(yǎng)與生長繁殖7一、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)水：營養(yǎng)的吸收與代謝均需水第二節(jié)細菌69二、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制被動擴散

易化擴散主動轉(zhuǎn)運ABC轉(zhuǎn)運離子偶聯(lián)轉(zhuǎn)運基團轉(zhuǎn)移特異性轉(zhuǎn)運8二、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制被動擴散70三、細菌營養(yǎng)類型

自養(yǎng)菌（Autotroph）以無機物為原料，合成菌體成分按能量來源，分化能自養(yǎng)菌和光能自養(yǎng)菌

異養(yǎng)菌（Heterotroph）以有機物為原料合成菌體成分分腐生菌(Saprophyte)和寄生菌(Parasite)所有病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分為寄生菌9三、細菌營養(yǎng)類型自養(yǎng)菌（Autotroph）71四、影響細菌生長的因素營養(yǎng)物質(zhì)充足氫離子濃度(pH)

多數(shù)病原菌最適pH為7.2～7.6溫度多數(shù)病原菌最適37℃10四、影響細菌生長的因素營養(yǎng)物質(zhì)充足72氣體專性需氧菌(Obligateaerobe)專性厭氧菌(Obligateanaerobe)兼性厭氧菌(Facultativeanaerobe)微需氧菌(Microaerophilicbacterium)

CO2對細菌的生長也很重要。大部分細菌在新陳代謝過程中產(chǎn)生的CO2可滿足需要。滲透壓一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數(shù)細菌少數(shù)細菌嗜鹽，如副溶血性弧菌11氣體73五、細菌的生長繁殖二分裂無性繁殖，代時細菌個體的生長繁殖12五、細菌的生長繁殖二分裂無性繁殖，代時細菌個體的生長繁殖對數(shù)期遲緩期

分為四期：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期細菌的生長曲線0515202530106.08.58.07.57.06.59.0衰亡期總菌數(shù)活菌數(shù)細菌數(shù)的對數(shù)小時穩(wěn)定期菌體增大代謝活躍分裂遲緩增殖最快形態(tài)染色生理活性典型活菌數(shù)恒定芽胞代謝產(chǎn)物產(chǎn)生死亡自溶形態(tài)改變對數(shù)期遲緩期分為四期：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期細75第三節(jié)細菌的新陳代謝一、細菌的能量代謝——生物氧化發(fā)酵：以有機物為受氫體呼吸：以無機物為受氫體需氧呼吸（受氫體：氧）厭氧呼吸（受氫體：硝酸鹽、硫酸鹽等 其他無機物）細菌的新陳代謝包括分解代謝和合成代謝14第三節(jié)細菌的新陳代謝一、細菌的能量代謝——生物氧化發(fā)酵76發(fā)酵EMP途徑（糖酵解）

——大多數(shù)細菌、專性厭氧菌磷酸戊糖途徑（HMP途經(jīng)）需氧呼吸（需氧菌和兼性厭氧菌）厭氧呼吸（專性、兼性厭氧菌）以葡萄糖為基質(zhì)的細菌的能量代謝15發(fā)酵以葡萄糖為基質(zhì)的細菌的能量代謝77二、細菌的代謝產(chǎn)物細菌具有不同的酶，對糖、蛋白質(zhì)等的分解能力的不同，因而代謝產(chǎn)物各異，根據(jù)這一點，利用生物化學(xué)方法鑒別不同細菌稱為細菌的生化反應(yīng)試驗。分解代謝產(chǎn)物和細菌的生化反應(yīng)16二、細菌的代謝產(chǎn)物細菌具有不同的酶，對糖、蛋78常見的細菌生化反應(yīng)對糖的反應(yīng)對蛋白質(zhì)的反應(yīng)枸櫞酸鹽利用試驗?zāi)蛩孛冈囼灱谆t試驗吲哚試驗硫化氫試驗糖發(fā)酵試驗VP試驗其他試驗17常見的細菌生化反應(yīng)對對枸櫞酸鹽利用試驗?zāi)蛩孛冈囼灱谆t試79細菌的合成代謝產(chǎn)物

及其醫(yī)學(xué)上意義

熱原質(zhì)（Pyrogen)細菌合成的一種注入人體內(nèi)引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。大多數(shù)是G-菌的脂多糖。熱原質(zhì)耐高溫，高壓蒸汽滅菌不能破壞（121℃，20min），250℃高溫干烤才能破壞。注射藥品去熱原18細菌的合成代謝產(chǎn)物

及其醫(yī)學(xué)上意義熱原質(zhì)（P80內(nèi)毒素(Endotoxin)

G－菌的脂多糖，菌體崩解后釋放外毒素(Exotoxin)

多數(shù)G＋菌和少數(shù)G－菌釋放的蛋白質(zhì)侵襲性酶

損傷機體組織，促進細菌侵襲和擴散，如卵磷脂酶（產(chǎn)氣莢膜梭菌）、透明質(zhì)酸酶（A群鏈球菌）。毒素和侵襲性酶19內(nèi)毒素(Endotoxin)毒素和侵襲性酶81色素脂溶性色素與水溶性色素有助于細菌鑒別20色素82抗生素(Antibiotics)：多粘菌素、桿菌肽細菌素(Bacteriocins)抗菌蛋白，只能殺傷有親緣關(guān)系的細菌，無治療意義，用于細菌分型、流行病學(xué)調(diào)查。大腸桿菌產(chǎn)生大腸菌素(Colicin)維生素某些腸道菌合成，如B族維生素、VK。21抗生素(Antibiotics)：多粘菌素、桿菌肽83第四節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)細菌的方法提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)和適宜的環(huán)境條件，包括酸堿度、滲透壓、溫度和氣體條件等根據(jù)不同標本及不同的培養(yǎng)目的，可選用不同的接種和培養(yǎng)方法。常用的有細菌的分離培養(yǎng)和純培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)22第四節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)細菌的方法提供充足的營養(yǎng)84二、培養(yǎng)基

（culturemedium）

由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品,滅菌后使用。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

增菌培養(yǎng)基

（通用、專用）

選擇培養(yǎng)基

鑒別培養(yǎng)基

厭氧培養(yǎng)基

液體、固體、半固體培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基23二、培養(yǎng)基（culturemedium）由851．基礎(chǔ)培養(yǎng)基

(Basicmedium)

含有細菌生長所需的基本營養(yǎng)成分，是配制其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)如營養(yǎng)肉湯（Nutrientbroth），營養(yǎng)瓊脂（Nutrientagar)241．基礎(chǔ)培養(yǎng)基862．增菌培養(yǎng)基（Enrichmentmedium）

通用增菌培養(yǎng)基添加葡萄糖、血液、生長因子等，最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等

專用增菌培養(yǎng)基

選擇性增菌培養(yǎng)基252．增菌培養(yǎng)基（Enrichmentmedium）873.選擇培養(yǎng)基（Selectivemedium）含有抑制劑，抑制標本中雜菌生長SS瓊脂使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到263.選擇培養(yǎng)基88

4.鑒別培養(yǎng)基（Differentialmedium）含有底物和指示劑。如：糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-美藍瓊脂（EMB）等。274.鑒別培養(yǎng)基（Differentialmedium895．厭氧培養(yǎng)基

（Anaerobicmedium）皰肉培養(yǎng)基

（Cookedmeatmedium)巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基285．厭氧培養(yǎng)基90根據(jù)成分，培養(yǎng)基可分為合成培養(yǎng)基（Syntheticmedium)天然培養(yǎng)基（Complexmedium)根據(jù)物理狀態(tài)，培養(yǎng)基可分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基賦形劑為瓊脂29根據(jù)成分，培養(yǎng)基可分為根據(jù)物理狀態(tài)，培養(yǎng)基可分為91在液體培養(yǎng)基中生長情況沉淀生長均勻混濁生長表面生長三、細菌在培養(yǎng)基中的生長情況30在液體培養(yǎng)基中生長情況沉淀生長均勻混濁生長表面生長三、細92在半固體培養(yǎng)基中生長情況

有鞭毛細菌

擴散生長，云霧狀渾濁無鞭毛細菌

沿穿刺線生長，周圍清亮31在半固體培養(yǎng)基中生長情況93在固體培養(yǎng)基中生長情況

分離培養(yǎng)

將標本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。

菌落（colony）

在固體培養(yǎng)基上，單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細菌集團。32在固體培養(yǎng)基中生長情況94四、人工培養(yǎng)細菌的用途醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用基因工程中的應(yīng)用感染性疾病的診斷細菌學(xué)研究病原性診斷生物制品的制備制造各種產(chǎn)品處理垃圾制造菌肥農(nóng)藥等表達重組DNA制備產(chǎn)品33四、人工培養(yǎng)細菌的用途醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用基因95一、消毒滅菌的常用術(shù)語滅菌（Sterilization）

殺滅物體上所有微生物的方法，包括芽胞消毒（Disinfection）

殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法防腐（Antisepsis）

防止或抑制微生物生長繁殖的方法第五節(jié)抑制或殺滅微生物的理化因素34一、消毒滅菌的常用術(shù)語滅菌（Sterilization）96清潔（Cleaning）

通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程，消毒滅菌前必需的處理無菌（Asepsis）和無菌操作無菌即無活菌，多是滅菌的結(jié)果無菌操作為防止細菌進入人體或其它物品的操作技術(shù)一、消毒滅菌的常用術(shù)語35清潔（Cleaning）一、消毒滅菌的常用術(shù)語97二、物理消毒滅菌法

熱力、輻射、濾過、干燥和低溫等36二、物理消毒滅菌法98

焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法干熱滅菌法熱力滅菌法高溫殺滅細菌干烤----加熱160-180℃2小時紅外線----表面熱效應(yīng)、不均勻37

焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌99濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好1、濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱38濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效100濕熱滅菌法巴氏消毒法（Pasterurization)用較低的溫度（62℃30分鐘或72℃15-30秒）殺滅致病菌39濕熱滅菌法巴氏消毒法（Pasterurization)101濕熱滅菌法煮沸法水煮100℃5分鐘(繁殖體)-2小時(芽胞)流動蒸汽消毒法間歇蒸汽滅菌法（Fractionalsterilization)水蒸汽100℃15-30分鐘(繁殖體)反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌40濕熱滅菌法煮沸法水煮100℃5分鐘(繁殖體)-2小時(102濕熱滅菌法壓力蒸汽滅菌法(Sterilizationbypressuredsteam)最有效的滅菌方法121℃15-20分鐘41濕熱滅菌法壓力蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃15103輻射殺菌法紫外線殺菌機理：

波長240-300nm的紫外線具有殺菌作用干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱、損傷眼睛、皮膚不耐熱物品的表面消毒

特點：

應(yīng)用范圍：空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細菌實驗室

42輻射殺菌法紫外線殺菌機理：波長240-300n104殺菌機理：

應(yīng)用范圍：電離輻射包括β射線和γ射線產(chǎn)生游離基，破壞DNA、胞膜、酶等一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒不破壞其營養(yǎng)成分

輻射殺菌法43殺菌機理：應(yīng)用范圍：電離輻射包括β射線和γ射105微波(Microwave)

殺菌機制：熱效應(yīng)特點：熱效應(yīng)不均勻一定含水量應(yīng)用范圍：食品、非金屬器械、檢驗室用品、食具等波長為1-1000mm的電磁波輻射殺菌法44微波(Microwave)殺菌機制：熱效應(yīng)波長106濾過除菌法(Filtration)

用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細菌、真菌,以達到無菌目的，不能除去病毒、支原體濾菌器

含有微細小孔<0.45μm,最小為0.1μm，只允許液體或氣體通過，常用的為薄膜濾菌器。適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌，空氣除菌采用生物潔凈技術(shù)45濾過除菌法(Filtration)用物理阻留的方107干燥與低溫抑菌法在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷凍真空干燥法46干燥與低溫抑菌法在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷108三、化學(xué)消毒滅菌法化學(xué)消毒劑的作用機制促進菌體蛋白質(zhì)變性或凝固干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝損傷細菌的細胞膜化學(xué)消毒劑一般對人體組織有害，只能外用或用于環(huán)境47三、化學(xué)消毒滅菌法化學(xué)消毒劑的作用機制化學(xué)消毒劑一般對109化學(xué)消毒劑分類1.高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

——殺滅包括芽胞的所有微生物含氯消毒劑次氯酸鈉、二氯異氰酸尿酸鈉、漂白粉過氧化物消毒劑過氧化氫（3%）、過氧乙酸（0.1-0.5%）二氧化氯醛類消毒劑戊二醛（2%）、甲醛環(huán)氧乙烷48化學(xué)消毒劑分類1.高效消毒劑（high-leveldi1102.中效消毒劑

（intermediate-leveldisinfectants）——不能殺滅細菌的芽胞，但能殺滅細菌的繁殖體（包括分枝桿菌）、真菌和大多數(shù)病毒含碘消毒劑：碘酊（2%）

碘伏（0.3-0.5%）醇類消毒劑：乙醇、異丙醇492.中效消毒劑1113.低效消毒劑

（low-leveldisinfectants）——多數(shù)細菌繁殖體，但對分枝桿菌、芽胞、抵抗力強的真菌、病毒無效季銨鹽類：苯扎溴銨（0.05-0.1%）氯己定（洗必泰）（0.02-0.05%）高錳酸鉀（0.1%）503.低效消毒劑112高危器械物品進入無菌組織的物品，如手術(shù)器械，應(yīng)該滅菌

中危器械物品不進入無菌組織但接觸黏膜的器械，采用消毒低危器械物品只接觸未損傷皮膚不進入無菌組織和不接觸黏膜的物品，一般用后清洗、消毒即可快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械瞬時滅菌、微波、高效消毒劑快速處理、中、低效消毒劑與低熱協(xié)同作用（一）醫(yī)療器械物品的消毒滅菌四、消毒滅菌的運用51高危器械物品（一）醫(yī)療器械物品的消毒滅菌四、消毒滅菌113

（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌

物理消毒法

紫外線照射（1.