藥物分析第七章芳香胺類藥物的分析課件

芳胺類:指氨基直接與苯環(huán)相連。

酰胺類、對氨基苯甲酸酯類芳烴胺類:指氨基在烴基側鏈上。苯乙胺類.芳氧丙醇胺類第七章芳香胺類藥物的分析§7.1

芳胺類藥物的分析對氨基苯甲酸酯類:芳伯氨基未被取代,對位有取代.酰胺類:芳伯氨基被?；?對位有取代.一、對氨基苯甲酸酯類1．結構特點：鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因2．性質：①

具有芳伯氨基，發(fā)生重氮化或重氮化-偶合反應②

堿性具有脂烴胺側鏈—堿性，能與生物堿沉淀試劑發(fā)生反應。③

具有酯的結構，容易水解。④

紫外吸收具有苯環(huán)結構，有紫外吸收。2．性質：※利多卡因，酰胺基鄰位上有兩個甲基，有很大空間位阻，水解較為困難。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加熱才能水解）①

水解后可發(fā)生重氮化反應有酰胺結構共性。水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應。②

與FeCl3反應具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基（對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。③

堿性利多卡因側鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應。④

紫外吸收具有苯環(huán)結構，有紫外吸收。三、鑒別反應1、重氮化-偶合反應具有芳伯氨基藥物，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應，再與堿性-萘酚（偶合染料）產(chǎn)生紅色偶氮化合物。例：鹽酸普魯卡因猩紅色苯佐卡因+鹽酸+NaNO2+堿性-萘酚----猩紅色對乙酰氨基酚紅色

對乙酰氨基酚具有潛在芳伯氨基，如，水解后可得芳伯氨基，能發(fā)生類似反應。3、與重金屬離子反應(1)．與銅離子的反應(2)．與鈷鹽反應2、三氯化鐵反應具有酚羥基（如對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用顯藍紫色。具有酰胺結構的藥物羥肟酸羥肟酸鐵（紫紅色----黑色）(3)．羥肟酸鐵的反應具有酰胺結構，被H2O2氧化成羥肟酸，羥肟酸與FeCl3反應生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。例：鹽酸普魯卡因胺。(2).鹽酸普魯卡因的鑒別試驗

白色沉淀油狀，五、含量測定1．亞硝酸鈉滴定法①

原理具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計算出含量。終點判斷：用永停法或外指示劑法。例：鹽酸普魯卡因含量測定用此法。

③外指示劑法把指示劑放在反應系統(tǒng)外面.外指示劑：淀粉-KI糊劑或試紙。鋪在白瓷板上，當近終點時用玻棒蘸少許測定液劃過，立即顯藍色為終點。原理：當達到滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉顯藍色。③滴定條件：

(a)加入溴化鉀，加快重氮化速度；

(b)滴定管尖端插入液面下2/3處滴定，可避免NaNO2揮發(fā)，并加快重氮化速度。近終點時提到液面上。

(c)反應溫度20~30o。

(d)加過量鹽酸，防止偶氮氨基化合物生成。而影響測定結果。如鹽酸量增加，則反應向左進行。2、分光光度法

分光光度法測定人唾液中對乙酰氨基酚（解熱鎮(zhèn)痛藥）含量：原理：

水解亞硝酰鐵氰化鈉對乙酰氨基酚-----------對氨基酚----------------------------絡合物

OH-（藍色）方法：①取樣：6位健康受試者口服1.0g對乙酰氨基酚0.25g,0.75g.1.25g,服藥后2,4,8,12小時取樣.②標準曲線:用空白人唾液制成每1ml1,5,10,20,30,40μg,在工作上95.6nm測吸光度,繪制A~C曲線.③測定:測不同樣品吸光度,以空白唾液為參比.在標準曲線中查出相應濃度.④繪制吸光度~時間曲線,得出動力學參數(shù).3、體內(nèi)藥物分析采用HPLC測定病人血中對乙酰氨基酚濃度。①標準曲線：測已知濃度的峰面積得：峰面積~濃度②取樣：③測定未知樣峰面積，并在標準圖中查出相應濃度。④判斷是否超標?！?.2

苯乙胺類藥物分析一．結構特點（P154表7-3）腎上腺素：R1=R2=-CH3R3=H鹽酸去氧腎上腺素腎上腺素二．鑒別試驗1.

三氯化鐵反應、與甲醛-硫酸反應區(qū)別腎上腺素和去甲腎上腺素。三氯化鐵甲醛—硫酸腎上腺素0.1mol/LHCl顯綠色加氨液顯紫色/紫紅色紅色鹽酸去甲氧腎上腺素紫色玫瑰紅---橙紅---深棕紅2.氧化反應三、特殊雜質檢查腎上腺素:腎上腺酮鹽酸去氧腎上腺素:酮體四、含量測定1、非水滴定法（腎上腺素含量測定）溶劑：冰醋酸指示劑：結晶紫終點：藍綠色滴定液：高氯酸

3、高效液相色譜法靈敏度高，高效分離，高選擇性。四.特殊雜質檢查(一)對乙酰氨基酚中的特殊雜質檢查

對乙酰氨基酚中除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、重金屬、水分、熾灼殘渣等一般雜質外，還需要檢查：乙醇溶液的澄清度與顏色、有關物質（對氯乙酰苯胺）、對氨基酚等特殊雜質。對乙酰氨基酚以對硝基氯苯為原料合成。(1)．乙醇溶液的澄清度與顏色對乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質存在。生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導致對乙酰氨基酚乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。（2）有關物質（對氯乙酰苯胺）副反應副副反應對硝基氯苯為原料合成對乙酰氨基酚時，如發(fā)生這樣的副反應就能夠引入對氯乙酰苯胺。副反應⑥

限量:④點樣量樣品液：200l

點于硅膠GF254薄層板上對照液：40l⑤

判斷在254nm波長紫外燈下觀察，供試品與對照品主斑點Rf值相同的斑點比較,不得超過其大小與顏色。(3)．對氨基酚制備中乙?；煌耆蛸A存不當發(fā)生水解都能引入對氨基酚☆檢查原理：對氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍色絡合物，與對照液比較判斷對氨基酚的限量。檢查方法：限量：0.005%(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查第一步反應速度比較慢，而后兩步反應速度則比較快。?。磻俣扰c藥物結構的關系重氮化反應機制：a.當苯環(huán)上特別是氨基鄰位或對位上有吸電基時,如吸電基通過誘導效應使氨基上電子云密度降低，從而堿性降低，游離芳伯胺濃度增大，所以反應速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應速度加快。b.

當在苯環(huán)上有供電基時，則使反應速度降低。如等。供電基能使氨基堿性增強，這樣氨基成鹽的機會就增大，游離芳伯胺的濃度就減小，所以反應速度就慢。ⅱ．反應速度與酸及酸度的關系a.

酸的種類重氮化反應在HBr、HCl、H2SO4中反應速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

用HBr時，生成NOBr量大，反應速度快。但HBr價格貴，用鹽酸代替，為加快反應速度，需加入KBr（催化劑）。產(chǎn)生HBr與HNO2反應，可生成大量NOBr，加快反應速度。b.

鹽酸的用量理論上:芳胺∶鹽酸＝1∶1mol

實際上:芳胺∶鹽酸＝1∶2.5~6mol原因：＊強酸性可加速反應＊重氮鹽在酸性下穩(wěn)定＊酸性下避免副反應發(fā)生。

ⅲ．反應速度與滴定時溫度的關系一般，溫度升高反應速度加快。但重氮化反應所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測定結果。所以，重氮化反應應在低溫條件下進行。ⅳ．反應速度與滴定速度的關系重氮化反應屬分子反應，反應速度比較慢，滴定速度不能過快。尤其是近終點時，更要慢慢地滴定。近終點時，游離芳伯胺濃度非常低，反應速度就更慢了。所以，每加一滴標準液后，要攪拌1~5分鐘后再判斷終點。②

操作中的主要條件＊重氮化反應屬于分子反應＊滴定液NaNO2及反應生成的重氮鹽都不穩(wěn)定＊反應速度受多種因素影響③

指示終點的方法重氮化滴定法指示終點的方法有:永停法電位法外指示劑法內(nèi)指示劑法我國藥典主要采用永停滴定法指示終點ⅱ．電位法在被測溶液中插入甘汞-鉑電極，到達滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2使電位產(chǎn)生突躍，從而指示終點。USP采用這個方法指示終點。使用方法：滴定時，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻