藥物分析第七章芳香胺類藥物的分析課件

芳胺類:指氨基直接與苯環(huán)相連。

酰胺類、對(duì)氨基苯甲酸酯類芳烴胺類:指氨基在烴基側(cè)鏈上。苯乙胺類.芳氧丙醇胺類第七章芳香胺類藥物的分析§7.1

芳胺類藥物的分析對(duì)氨基苯甲酸酯類:芳伯氨基未被取代,對(duì)位有取代.酰胺類:芳伯氨基被?；?對(duì)位有取代.一、對(duì)氨基苯甲酸酯類1．結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因2．性質(zhì)：①

具有芳伯氨基，發(fā)生重氮化或重氮化-偶合反應(yīng)②

堿性具有脂烴胺側(cè)鏈—堿性，能與生物堿沉淀試劑發(fā)生反應(yīng)。③

具有酯的結(jié)構(gòu)，容易水解。④

紫外吸收具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收。2．性質(zhì)：※利多卡因，酰胺基鄰位上有兩個(gè)甲基，有很大空間位阻，水解較為困難。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加熱才能水解）①

水解后可發(fā)生重氮化反應(yīng)有酰胺結(jié)構(gòu)共性。水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)。②

與FeCl3反應(yīng)具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基（對(duì)乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。③

堿性利多卡因側(cè)鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應(yīng)。④

紫外吸收具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收。三、鑒別反應(yīng)1、重氮化-偶合反應(yīng)具有芳伯氨基藥物，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與堿性-萘酚（偶合染料）產(chǎn)生紅色偶氮化合物。例：鹽酸普魯卡因猩紅色苯佐卡因+鹽酸+NaNO2+堿性-萘酚----猩紅色對(duì)乙酰氨基酚紅色

對(duì)乙酰氨基酚具有潛在芳伯氨基，如，水解后可得芳伯氨基，能發(fā)生類似反應(yīng)。3、與重金屬離子反應(yīng)(1)．與銅離子的反應(yīng)(2)．與鈷鹽反應(yīng)2、三氯化鐵反應(yīng)具有酚羥基（如對(duì)乙酰氨基酚），可與FeCl3作用顯藍(lán)紫色。具有酰胺結(jié)構(gòu)的藥物羥肟酸羥肟酸鐵（紫紅色----黑色）(3)．羥肟酸鐵的反應(yīng)具有酰胺結(jié)構(gòu)，被H2O2氧化成羥肟酸，羥肟酸與FeCl3反應(yīng)生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。例：鹽酸普魯卡因胺。(2).鹽酸普魯卡因的鑒別試驗(yàn)

白色沉淀油狀，五、含量測(cè)定1．亞硝酸鈉滴定法①

原理具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應(yīng)生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計(jì)算出含量。終點(diǎn)判斷：用永停法或外指示劑法。例：鹽酸普魯卡因含量測(cè)定用此法。

③外指示劑法把指示劑放在反應(yīng)系統(tǒng)外面.外指示劑：淀粉-KI糊劑或試紙。鋪在白瓷板上，當(dāng)近終點(diǎn)時(shí)用玻棒蘸少許測(cè)定液劃過，立即顯藍(lán)色為終點(diǎn)。原理：當(dāng)達(dá)到滴定終點(diǎn)時(shí)，溶液中稍過量的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉顯藍(lán)色。③滴定條件：

(a)加入溴化鉀，加快重氮化速度；

(b)滴定管尖端插入液面下2/3處滴定，可避免NaNO2揮發(fā)，并加快重氮化速度。近終點(diǎn)時(shí)提到液面上。

(c)反應(yīng)溫度20~30o。

(d)加過量鹽酸，防止偶氮氨基化合物生成。而影響測(cè)定結(jié)果。如鹽酸量增加，則反應(yīng)向左進(jìn)行。2、分光光度法

分光光度法測(cè)定人唾液中對(duì)乙酰氨基酚（解熱鎮(zhèn)痛藥）含量：原理：

水解亞硝酰鐵氰化鈉對(duì)乙酰氨基酚-----------對(duì)氨基酚----------------------------絡(luò)合物

OH-（藍(lán)色）方法：①取樣：6位健康受試者口服1.0g對(duì)乙酰氨基酚0.25g,0.75g.1.25g,服藥后2,4,8,12小時(shí)取樣.②標(biāo)準(zhǔn)曲線:用空白人唾液制成每1ml1,5,10,20,30,40μg,在工作上95.6nm測(cè)吸光度,繪制A~C曲線.③測(cè)定:測(cè)不同樣品吸光度,以空白唾液為參比.在標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出相應(yīng)濃度.④繪制吸光度~時(shí)間曲線,得出動(dòng)力學(xué)參數(shù).3、體內(nèi)藥物分析采用HPLC測(cè)定病人血中對(duì)乙酰氨基酚濃度。①標(biāo)準(zhǔn)曲線：測(cè)已知濃度的峰面積得：峰面積~濃度②取樣：③測(cè)定未知樣峰面積，并在標(biāo)準(zhǔn)圖中查出相應(yīng)濃度。④判斷是否超標(biāo)?！?.2

苯乙胺類藥物分析一．結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（P154表7-3）腎上腺素：R1=R2=-CH3R3=H鹽酸去氧腎上腺素腎上腺素二．鑒別試驗(yàn)1.

三氯化鐵反應(yīng)、與甲醛-硫酸反應(yīng)區(qū)別腎上腺素和去甲腎上腺素。三氯化鐵甲醛—硫酸腎上腺素0.1mol/LHCl顯綠色加氨液顯紫色/紫紅色紅色鹽酸去甲氧腎上腺素紫色玫瑰紅---橙紅---深棕紅2.氧化反應(yīng)三、特殊雜質(zhì)檢查腎上腺素:腎上腺酮鹽酸去氧腎上腺素:酮體四、含量測(cè)定1、非水滴定法（腎上腺素含量測(cè)定）溶劑：冰醋酸指示劑：結(jié)晶紫終點(diǎn)：藍(lán)綠色滴定液：高氯酸

3、高效液相色譜法靈敏度高，高效分離，高選擇性。四.特殊雜質(zhì)檢查(一)對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查

對(duì)乙酰氨基酚中除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、重金屬、水分、熾灼殘?jiān)纫话汶s質(zhì)外，還需要檢查：乙醇溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)（對(duì)氯乙酰苯胺）、對(duì)氨基酚等特殊雜質(zhì)。對(duì)乙酰氨基酚以對(duì)硝基氯苯為原料合成。(1)．乙醇溶液的澄清度與顏色對(duì)乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質(zhì)存在。生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導(dǎo)致對(duì)乙酰氨基酚乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。（2）有關(guān)物質(zhì)（對(duì)氯乙酰苯胺）副反應(yīng)副副反應(yīng)對(duì)硝基氯苯為原料合成對(duì)乙酰氨基酚時(shí)，如發(fā)生這樣的副反應(yīng)就能夠引入對(duì)氯乙酰苯胺。副反應(yīng)⑥

限量:④點(diǎn)樣量樣品液：200l

點(diǎn)于硅膠GF254薄層板上對(duì)照液：40l⑤

判斷在254nm波長(zhǎng)紫外燈下觀察，供試品與對(duì)照品主斑點(diǎn)Rf值相同的斑點(diǎn)比較,不得超過其大小與顏色。(3)．對(duì)氨基酚制備中乙酰化不完全或貯存不當(dāng)發(fā)生水解都能引入對(duì)氨基酚☆檢查原理：對(duì)氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍(lán)色絡(luò)合物，與對(duì)照液比較判斷對(duì)氨基酚的限量。檢查方法：限量：0.005%(二)鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查第一步反應(yīng)速度比較慢，而后兩步反應(yīng)速度則比較快。?。磻?yīng)速度與藥物結(jié)構(gòu)的關(guān)系重氮化反應(yīng)機(jī)制：a.當(dāng)苯環(huán)上特別是氨基鄰位或?qū)ξ簧嫌形娀鶗r(shí),如吸電基通過誘導(dǎo)效應(yīng)使氨基上電子云密度降低，從而堿性降低，游離芳伯胺濃度增大，所以反應(yīng)速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應(yīng)速度加快。b.

當(dāng)在苯環(huán)上有供電基時(shí)，則使反應(yīng)速度降低。如等。供電基能使氨基堿性增強(qiáng)，這樣氨基成鹽的機(jī)會(huì)就增大，游離芳伯胺的濃度就減小，所以反應(yīng)速度就慢。ⅱ．反應(yīng)速度與酸及酸度的關(guān)系a.

酸的種類重氮化反應(yīng)在HBr、HCl、H2SO4中反應(yīng)速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

用HBr時(shí)，生成NOBr量大，反應(yīng)速度快。但HBr價(jià)格貴，用鹽酸代替，為加快反應(yīng)速度，需加入KBr（催化劑）。產(chǎn)生HBr與HNO2反應(yīng)，可生成大量NOBr，加快反應(yīng)速度。b.

鹽酸的用量理論上:芳胺∶鹽酸＝1∶1mol

實(shí)際上:芳胺∶鹽酸＝1∶2.5~6mol原因：＊強(qiáng)酸性可加速反應(yīng)＊重氮鹽在酸性下穩(wěn)定＊酸性下避免副反應(yīng)發(fā)生。

ⅲ．反應(yīng)速度與滴定時(shí)溫度的關(guān)系一般，溫度升高反應(yīng)速度加快。但重氮化反應(yīng)所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時(shí)，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測(cè)定結(jié)果。所以，重氮化反應(yīng)應(yīng)在低溫條件下進(jìn)行。ⅳ．反應(yīng)速度與滴定速度的關(guān)系重氮化反應(yīng)屬分子反應(yīng)，反應(yīng)速度比較慢，滴定速度不能過快。尤其是近終點(diǎn)時(shí)，更要慢慢地滴定。近終點(diǎn)時(shí)，游離芳伯胺濃度非常低，反應(yīng)速度就更慢了。所以，每加一滴標(biāo)準(zhǔn)液后，要攪拌1~5分鐘后再判斷終點(diǎn)。②

操作中的主要條件＊重氮化反應(yīng)屬于分子反應(yīng)＊滴定液NaNO2及反應(yīng)生成的重氮鹽都不穩(wěn)定＊反應(yīng)速度受多種因素影響③

指示終點(diǎn)的方法重氮化滴定法指示終點(diǎn)的方法有:永停法電位法外指示劑法內(nèi)指示劑法我國(guó)藥典主要采用永停滴定法指示終點(diǎn)ⅱ．電位法在被測(cè)溶液中插入甘汞-鉑電極，到達(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)，溶液中稍過量的NaNO2使電位產(chǎn)生突躍，從而指示終點(diǎn)。USP采用這個(gè)方法指示終點(diǎn)。使用方法：滴定時(shí)，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻