組織培養(yǎng)育苗課件

組織培養(yǎng)育苗植物組織培養(yǎng)（Planttissueculture）是指在無菌條件下，體的植物器官（根、莖、葉、花等）、組織（如形成層、花藥組織、胚乳、皮層等）、細胞（體細胞和生殖細胞），以及原生質體，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適當?shù)呐囵B(yǎng)條件，使其長成完整的植株，統(tǒng)稱為植物組織培養(yǎng)。

組織培養(yǎng)育苗獲取外植體無菌接種誘導愈傷組織的形成試管苗的形成擴大培養(yǎng)移栽脫分化再分化培養(yǎng)基配制組織培養(yǎng)步驟（脫毒）1．先在燒杯中放入一些蒸餾水。2．分別取母液10ml倒入。3．一般稱取30g蔗糖倒入，攪拌溶解。4．加蒸餾水用量筒定溶至1L。5．用微量可調(diào)移液器吸取各種激素，減少誤差。6．用精密試紙或酸度計調(diào)整PH至5.7～5.8。7．稱取5g左右瓊脂粉,倒入上面配好的溶液中，放在電爐上加熱至沸騰，直到瓊脂粉熔化。8．稍微冷卻后，分裝入培養(yǎng)容器中。無蓋的培養(yǎng)容器要用封口膜或牛皮紙封口，用橡皮筋或繩子扎緊。9．放入消毒滅菌鍋滅菌，滅菌20分鐘左右。10．滅菌后從滅菌鍋中取出培養(yǎng)基，平放在超凈工作臺上令其冷卻凝固。培養(yǎng)基的配置微量可調(diào)移液器

滅菌是組織培養(yǎng)重要的工作之一。培養(yǎng)基用濕熱滅菌高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。滅菌高壓蒸汽滅菌器7接種1．將初步洗滌及切割的材料放入燒杯，用消毒劑滅菌，再用無菌水沖洗，最后瀝去水分，取出放置在滅過菌的紗布上或濾紙上。2．材料吸干后，一手拿鑷子、一手拿剪刀或解剖刀，對材料進行適當?shù)那懈?。在接種過程中要經(jīng)常灼燒接種器械，防止交叉污染。3．用灼燒消毒過的器械將切割好的外植體插植或放置到培養(yǎng)基上。培養(yǎng)1．固體培養(yǎng)法

用瓊脂固化培養(yǎng)基來培養(yǎng)植物材料的方法。是現(xiàn)在最常用的方法。雖然該方法設備簡單，易行，但養(yǎng)分分布不均，生長速度不均衡，并常有褐化中毒現(xiàn)象發(fā)生。

2．液體培養(yǎng)法用不加固化劑的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)植物材料的方法。由于液體中氧氣含量較少，通常需要通過攪動或振動培養(yǎng)液的方法以確保氧氣的供給。這種定期浸沒的方法，既能使培養(yǎng)基均一，又能保證氧氣的供給。需要一定的營養(yǎng)物質、植物生長調(diào)節(jié)劑、光照等條件營養(yǎng)物質：水、糖類、維生素類、氨基酸類、大量元素化合物、微量元素化合物組織培養(yǎng)幼苗的優(yōu)缺點1、在不受植物體其它部分干擾下研究被培養(yǎng)部分的生長和分化的規(guī)律2、利用各種培養(yǎng)條件影響它們的生長和分化，以解決理論上和生產(chǎn)上的問題3、有力地推動了生物科學中各學科的發(fā)展和相互滲透4、促進了營養(yǎng)生