細菌感染的檢查與防治原則

第8章:細菌感染的檢查方法與防治原則Diagnosisandcontrol

forbacterialinfection

第一頁，共五十二頁。病原菌的檢查程序直接涂片鏡檢初步診斷分離培養(yǎng)標本生化試驗血清學試驗動物試驗藥物敏感試驗明確診斷其他檢測法抗原檢測第二頁，共五十二頁。（一）標本的采集和運送原則避免雜菌污染運送注意保存不同期不同標本用抗菌藥物以前采集病變明顯部位標本必須新鮮

第一節(jié)細菌感染的檢查第三頁，共五十二頁。膽囊標本：在外科膽囊摘除手術(shù)中，采集膽囊炎患者的膽囊和膽石標本。第四頁，共五十二頁。

（二）細菌分離培養(yǎng)與鑒定形態(tài)學檢查:形態(tài)與染色性具有特征的病原菌可直接染色鏡檢直接涂片鏡檢不染色法：懸滴法,壓滴法

暗視野顯微鏡、相差顯微鏡染色法

革蘭染色Gramstain

抗酸染色acid-faststain

熒光顯微鏡

第五頁，共五十二頁。懸滴法鏡檢第六頁，共五十二頁。革蘭陽性菌革蘭陰性菌第七頁，共五十二頁。第八頁，共五十二頁。第九頁，共五十二頁。第十頁，共五十二頁。淋病患者尿道分泌物直接涂片鏡檢第十一頁，共五十二頁。

2.分離培養(yǎng)(isolationandcultivation):

診斷的金標準，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術(shù)。

病原菌的分離培養(yǎng)：菌落大小形態(tài)顏色表面性狀透明度溶血性第十二頁，共五十二頁。血瓊脂平板上分離的菌落取單個菌落，可獲得細菌的純培養(yǎng)物。第十三頁，共五十二頁。3.生化試驗:針對一個細菌菌落或純培養(yǎng)物進行鑒定。生化反應糖發(fā)酵試驗H2S試驗枸櫞鹽利用試驗第十四頁，共五十二頁。靛基質(zhì)試驗第十五頁，共五十二頁。

4.血清學試驗:用已知抗體檢測未知細菌抗原，進行群和型的鑒別。

最簡易的方法有玻片凝集等試驗。

玻片凝集第十六頁，共五十二頁。5.動物實驗常用動物小鼠豚鼠家兔接種途徑皮內(nèi)皮下腹腔靜脈腦內(nèi)鼻腔灌胃

第十七頁，共五十二頁。豚鼠：適用于白喉棒狀桿菌、鉤端螺旋體、結(jié)核分枝桿菌、恙蟲病立克次體等病原體的分離培養(yǎng)或毒力檢測。第十八頁，共五十二頁。

6.藥物敏感試驗方法紙碟法、試管法、小杯法和凹孔法最低抑菌濃度（MIC)最低殺菌濃度(MBC)第十九頁，共五十二頁。（三）病原菌抗原的檢測:用已知抗體檢測未知抗原EIA酶免疫技術(shù)協(xié)同凝集試驗SPAIF免疫熒光技術(shù)CIE對流免疫電泳免疫印跡技術(shù)WB第二十頁，共五十二頁。ELISAdirectindirect第二十一頁，共五十二頁。FluorescenceMicroscopy第二十二頁，共五十二頁。第二十三頁，共五十二頁。（四）檢測病原菌核酸分子生物學技術(shù)molecularbiologicaltechniques1,核酸雜交(nucleotidehybridization)

2,多聚酶鏈反應(polymerasechainreaction:PCR):一種無細胞的分子克隆技術(shù)，能在體外將一個基因或一段DNA序列經(jīng)過多次循環(huán)的DNA復制，在數(shù)小時內(nèi)擴增上百萬倍。既便于基因診斷，又利于研究。3,基因芯片(genechips)第二十四頁，共五十二頁。第二十五頁，共五十二頁。第二十六頁，共五十二頁。PCR儀DNA的PCR擴增產(chǎn)物電泳結(jié)果（EB染色）第二十七頁，共五十二頁?；蛐酒╩icroarraychip）第二十八頁，共五十二頁。二、血清學診斷用已知細菌或其Ag檢測相應的Ab及量的多少，作為某些病原菌感染的輔助診斷急性期和恢復期雙份血清,

若恢復期或一周后血清抗體效價比早期升高≥4倍，有診斷價值。方法：玻片或試管凝集試驗、沉淀試驗、補體結(jié)合試驗和冷凝集試驗。第二十九頁，共五十二頁。細菌感染的實驗診斷方法第三十頁，共五十二頁。獲得性免疫產(chǎn)生的方式主動免疫自然免疫患病、隱性感染人工免疫疫苗、類毒素

被動免疫自然免疫胎盤、初乳人工免疫抗毒素、丙球第三十一頁，共五十二頁。人工免疫基本概念：人工方法給機體接種疫苗、抗血清、淋巴因子等，使機體獲得特異性免疫力。常用方法：包括：人工主動免疫，人工被動免疫，過繼免疫。第三十二頁，共五十二頁。細菌感染的特異性預防

一、人工主動免疫:將疫苗或類毒素接種于人體（一）疫苗:死疫苗.減毒活疫苗.亞單位疫苗.重組載體疫苗.基因工程疫苗.核酸疫苗（二）類毒素

二、人工被動免疫:注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白抗體，或細胞因子等免疫制劑.

抗毒素

血清丙種球蛋白

其他免疫制劑：IFN-γ，CSF等。第三十三頁，共五十二頁。生物制品：用于人工免疫的疫苗、類毒素、免疫血清、細胞制劑以及診斷用品等的生物性制劑。

疫苗：是利用微生物及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒或滅活或基因工程等方法方法制成，用于預防疾病的自動免疫制劑。第三十四頁，共五十二頁。第一代疫苗：活疫苗、死疫苗第二代疫苗：亞單位疫苗、基因工程疫苗第三代疫苗：核酸疫苗第三十五頁，共五十二頁。第三十六頁，共五十二頁。第三十七頁，共五十二頁。第三十八頁，共五十二頁。第三十九頁，共五十二頁。第四十頁，共五十二頁。第四十一頁，共五十二頁。第四十二頁，共五十二頁。區(qū)別點死疫苗活疫苗制劑特點死，強毒株活減毒株接種劑量與特點量較大，2~3次量較小，1次保存及有效期安全性易保存，約1年高不易保存回復突變免疫效果較低，維持數(shù)月~2年較高，維持3~5年甚至更長死疫苗與活疫苗的區(qū)別第四十三頁，共五十二頁。區(qū)別要點人工主動免疫人工被動免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細胞因子等免疫出現(xiàn)時間慢，2-4周快，立即免疫維持時間長，數(shù)年-數(shù)月短，2-3周主要用途預防治療或緊急預防人工主動免疫與人工被動免疫的區(qū)別第四十四頁，共五十二頁。第三節(jié)

細菌感染的治療一、抗菌藥物的種類二、抗菌藥物的主要作用機制第四十五頁，共五十二頁。名詞解釋：

疫苗、第一代疫苗、第二代疫苗、第三代疫苗、生物制品2.標本的采集送檢原則？2.死疫苗與活疫苗的區(qū)別？3.人工主動免疫和人工被動免疫的區(qū)別？

思考題第四十六頁，共五十二頁。http://第四十七頁，共五十二頁。第四十八頁，共五十二頁。第四十九頁，共五十二頁。第五十頁，共五十二頁。Thankyou！第五十一頁，共五十二頁。內(nèi)容梗概第8章:細菌感染的檢查。Diagnosisandcontrolforbacterialinfection。膽囊標本：在外科膽囊摘除手術(shù)中，采集膽囊炎患者的膽囊和膽石標本。暗視野顯微鏡、相差顯微鏡。革蘭染色Gramstain。抗酸染色acid-faststain。2.分離培養(yǎng)(isolationandcultivation):診斷的金標準，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術(shù)。糖發(fā)酵試驗H2S試驗枸櫞鹽利用試驗。皮內(nèi)皮下腹腔靜脈。腦內(nèi)鼻腔灌胃。豚鼠：適用于白喉棒狀桿菌、鉤端螺旋體、結(jié)核分枝桿菌、恙蟲病立克次體等病原體的分離培養(yǎng)或毒力檢測。紙碟法、試管法、小杯法和凹孔法。免疫印跡技術(shù)WB。molecularbiologicaltechniques。2,多聚