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文檔簡介
強直性脊柱炎患者腸道菌群特征與疾病活動度及外周血淋巴細胞亞群的相關(guān)性強直性脊柱炎(AS)是一種以中軸關(guān)節(jié)慢性炎癥為主要特征的風濕免疫性疾病,病變主要累及骶髂關(guān)節(jié)與脊柱[1]。AS病因復(fù)雜,涉及遺傳、感染、環(huán)境、免疫等多個方面[2],其中腸道微生物與AS發(fā)病密切相關(guān)[3]。人類白細胞抗原(HLA)-B27是位于細胞表面的糖蛋白,參與免疫應(yīng)答調(diào)節(jié),絕大多數(shù)AS患者呈HLA-B27陽性,其可通過與腸道菌群相互作用進而誘發(fā)AS[4]。Costello等[5]對腸道菌群16SrRNA基因測序后發(fā)現(xiàn),AS患者回腸中毛螺菌科、韋榮球菌科、普雷沃氏菌科、紫單胞菌科、擬桿菌科的相對豐度升高,瘤胃球菌科、理研菌科的相對豐度降低。Zhou等[3]通過宏基因組學技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),AS患者腸道富集的菌屬主要為擬桿菌、副桿菌、雙歧桿菌、發(fā)酵氨基酸球菌和普雷沃氏菌。Dominguez-Lopez等[6]則發(fā)現(xiàn),HLA-B27陽性AS患者腸道耶爾森氏菌、克雷伯氏菌和沙門氏菌水平增高。上述研究提示,AS患者腸道菌群處于失調(diào)狀態(tài),直接或間接促進AS發(fā)生發(fā)展,但作為免疫性疾病,AS患者中差異表達的菌群與具有免疫調(diào)節(jié)作用的淋巴細胞亞群水平的關(guān)系尚未明確,腸道菌群通過重塑免疫系統(tǒng)影響疾病活動度的機制相關(guān)研究尚無報道。本研究對AS患者與健康人群的16SrRNA基因進行高通量測序,分析AS患者腸道菌群變化,旨在揭示腸道菌群與AS發(fā)病的內(nèi)在聯(lián)系;同時探究腸道菌群與疾病活動度和外周血淋巴細胞亞群的相關(guān)性,以期為臨床診療提供參考。本研究為回顧性分析。研究對象為2019年12月至2020年6月山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院住院治療的AS患者及性別、年齡與之相匹配的健康人群。收集兩組腸道菌群生物信息學分析結(jié)果以及AS患者外周血淋巴細胞亞群和疾病活動度指標。比較兩組腸道菌群差異,并采用Spearman相關(guān)法分析AS患者腸道菌群與疾病活動度、外周血淋巴細胞亞群的相關(guān)性。共入選符合納入和排除標準的AS患者62例(低、高、極高疾病活動度分別為11例、26例、25例),健康人群62名。α多樣性分析顯示,AS患者腸道菌群Chao1指數(shù)和ACE指數(shù)均低于健康人群(P均<0.05);β多樣性分析顯示,兩組菌群結(jié)構(gòu)存在差異(P<0.01)。圖1
AS患者與健康人群腸道菌群α多樣性稀釋曲線圖AS:強直性脊柱炎圖2
AS患者與健康人群腸道菌群多樣性比較A.α多樣性;B.β多樣性AS:同圖1在腸道微生態(tài)構(gòu)成分析中,發(fā)現(xiàn)兩組樣本腸道菌群優(yōu)勢菌門均以厚壁菌門、擬桿菌門、變形菌門為主,但二者在門和屬水平上多種菌群的相對豐度存在差異。在Stamp差異菌群分析中,AS患者在門、屬水平亦顯示出不同于健康人群的特征:在門水平上,AS患者變形菌門、髕骨細菌門等菌群的相對豐度升高(P均<0.05),厚壁菌門、梭桿菌門等菌群的相對豐度降低(P均<0.05);在屬水平上,AS患者大腸桿菌志賀菌屬、克雷伯氏菌屬、腸球菌屬等菌群的相對豐度升高(P均<0.05),普雷沃氏菌屬、糞桿菌屬等菌群的相對豐度降低(P均<0.05)。圖3
基于Stamp分析和t檢驗的AS患者與健康人群腸道菌群差異圖A.門水平;B.屬水平AS:同圖1Spearman相關(guān)性分析表明,AS患者糞桿菌屬、瘤胃球菌屬及克雷伯氏菌屬等菌屬的相對豐度與疾病活動度或其相關(guān)指標呈正相關(guān)(P均<0.05);阿加桿菌屬的相對豐度與T細胞(r=0.302,P=0.017)、CD4+T細胞(r=0.310,P=0.014)、B細胞(r=0.292,P=0.021)、Th2細胞(r=0.429,P<0.001)、Th17細胞(r=0.288,P=0.023)水平,鏈球菌屬的相對豐度與B細胞水平(r=0.270,P=0.034),普雷沃氏菌屬的相對豐度與Th1細胞(r=0.279,P=0.028)、Th17細胞(r=0.262,P=0.040)水平,CAG-352菌屬的相對豐度與Th1細胞水平(r=0.283,P=0.030)均呈正相關(guān);大腸桿菌志賀菌屬的相對豐度與Th2細胞水平(r=-0.261,P=0.040),其他腸桿菌科細菌屬的相對豐度與CD4+T細胞水平(r=-0.255,P=0.046)均呈負相關(guān)。圖4
差異菌群相對豐度與疾病活動度、外周血淋巴細胞亞群的相關(guān)性ESR:紅細胞沉降率;CRP:C反應(yīng)蛋白;ASDAS:強直性脊柱炎疾病活動度評分;*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001AS患者腸道菌群多樣性降低,致病菌表達增多,且與外周血淋巴細胞亞群和疾病活動度具有相關(guān)性,可能參與了AS的發(fā)生與發(fā)展。本研究進一步
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