GB《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》培訓(xùn)班

GB-19489–2004-《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》培訓(xùn)班

中國CDC傳染病所

什么是生物危險(xiǎn)生物危險(xiǎn)是指由生物因子形成潛在的危險(xiǎn)，當(dāng)在實(shí)驗(yàn)室中處理致病微生物時(shí)，或處理基因重組過程中產(chǎn)生的可能具有潛在生物危害的新未知基因時(shí)，或在處理致病因子的產(chǎn)物時(shí)，這些病原體有可能對(duì)實(shí)驗(yàn)室的工作人員造成危害。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室硬件條件缺失、管理制度不完善以及不規(guī)范的操作程序，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室致病因子泄漏和逃逸。則可能造成災(zāi)難性的后果。什么是生物安全生物安全是指避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。什么是生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全實(shí)驗(yàn)室是指在研究傳染性疾病或微生物時(shí)能夠避免病原體意外傷害的實(shí)驗(yàn)室氣溶膠感染主要途徑

吸球（即吸管）操作。吸球是微生物學(xué)方面最基本的器具，用吸球操作時(shí)，能導(dǎo)致氣溶膠發(fā)生，例如由吸管中向外排液，用力過猛則會(huì)使液滴飛濺，彈離液體或固體培養(yǎng)基表面，釋放出大量微粒；或者，當(dāng)吸管末端含有物快排盡時(shí)，可能產(chǎn)生氣泡，尤其是富于蛋白性懸液更易形成氣泡，而氣泡破裂就成為氣溶膠。離心沉淀時(shí)，沉淀管裝量太滿，管蓋未蓋或不嚴(yán)，以及離心操作過操作過程中離心管破裂，都可導(dǎo)致氣溶膠散播。

氣溶膠感染主要途徑注射器操作時(shí)，當(dāng)抽吸后或者撥出時(shí)，注射器針頭由于顫動(dòng)而散發(fā)出液體微粒。用接種針去粘沾液體時(shí)，液柱斷裂。鏡檢涂片時(shí)，液絲斷裂。傳染性材料傾注出來。打開培養(yǎng)皿蓋時(shí)，蓋內(nèi)壁往往有傳染性的凝結(jié)水薄膜，因破裂而散播氣溶膠。氣溶膠感染主要途徑開安瓿時(shí)，如瓿內(nèi)為液體，則當(dāng)銼刀銼斷瓿頸后，即可能發(fā)生氣溶膠；如瓿內(nèi)為干燥的活菌或菌種，特別是用真空熔封的，更易產(chǎn)生溶膠。機(jī)械振蕩和超聲振蕩，或者研磨、浸解，撥出研磨柱時(shí)，都可形成氣溶膠。裝有液體容器的破損或液體益出。用超聲波清洗機(jī)清洗污染器具時(shí)，也可能發(fā)生大量氣溶膠。在粗糙的培養(yǎng)基表面涂布菌液時(shí)。高壓滅菌器在滅菌前的排氣。從玻璃或離心管上撥出棉塞時(shí)。處理關(guān)過受感染動(dòng)物的籠子。各種操作的氣溶膠飛散系數(shù)操作飛散系數(shù)超聲波處理5×10-7~9-10-5混合器（開口）1×10-6（開始1min關(guān)閉，然后打開）~2×10-3（從開始即打開）混合器（閉鎖）9×10-9（螺口罩）~2×10-8*（塑料罩）液體下滴2×10-6（90cm高）由吸管混合2×10-6（無吹出）~1×104（有吹出）離心作用產(chǎn)生的飛沫2×10-6瓶子的振蕩7×10-9~2×10-3各種操作的氣溶膠飛散系數(shù)操作飛散系數(shù)干燥后安瓿的開封肉湯2×10-9半血清4×10-9-9從試管上取下棉塞6×10-9~2×10-7白金耳放在火焰上加熱3×10-9~3×10-7把凍結(jié)干燥的粉末狀物倒入別的試管2×10-11各種操作的氣溶膠飛散系數(shù)操作飛散系數(shù)把凍結(jié)干燥的安瓿的斷1、以牛奶肉汁懸浮液作原料時(shí)3×10-92、以加營(yíng)養(yǎng)的肉汁作原料時(shí)3×10-93、以羊的血清作原料時(shí)4×10–104、用浸酒精紗布覆蓋時(shí)05、用干燥滅菌紗布覆蓋時(shí)6×10-11各種操作的的氣溶膠飛飛散系數(shù)操作飛散系數(shù)搗碎器1、開放式2×10-32、運(yùn)動(dòng)中擰緊蓋，停轉(zhuǎn)后1min打開1×10-6

3、用塑料罩罩著進(jìn)行2×10-84、擰緊蓋進(jìn)行9×10-9可能產(chǎn)生危危險(xiǎn)的設(shè)備備和操作方方法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)皮下注射針頭意外的注射．不要修剪針頭·使用針頭可鎖定式注射器以防止針頭和針管的脫肉，或使用針頭或針管為一體的一次性注射器．．運(yùn)用良好的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如：一小心地將液體注入針管以盡可能地減少氣泡或使培養(yǎng)液起泡可能產(chǎn)生危危險(xiǎn)的設(shè)備備和操作方方法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)皮下注射針頭意外的注射一避免用注射罪攪拌傳染性液體；否則，應(yīng)保證針尖在藥管內(nèi)液體表層下，避免用力過度。一當(dāng)從有橡皮塞的瓶子上取下針頭時(shí)，應(yīng)用經(jīng)適當(dāng)?shù)南緞┙萘说拿迗F(tuán)包住針頭和瓶塞．一垂直地將注射器內(nèi)的多余的液體和氣泡排人浸有適當(dāng)?shù)南緞┑拿迗F(tuán)或裝有棉花的小瓶中.可能產(chǎn)生危危險(xiǎn)的設(shè)備備和操作方方法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)皮下注射針頭。處理傳染性物質(zhì)時(shí)，所有的操作應(yīng)在生物安全操作箱內(nèi)進(jìn)行。。給動(dòng)物注射時(shí)應(yīng)對(duì)動(dòng)物加以控制。進(jìn)行鼻口注射時(shí)，使用鈍頭針頭或套管。使用生物安全操作箱。用后進(jìn)行高壓滅菌處理并保證使用正確的廢物處理方法。離心機(jī)會(huì)產(chǎn)生煙霧，噴濺和試管破裂使用封閉式甩桶（安全杯）可能能產(chǎn)產(chǎn)生生危危險(xiǎn)險(xiǎn)的的設(shè)設(shè)備備和和操操作作方方法法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)離心機(jī)會(huì)產(chǎn)生煙霧，噴濺和試管破裂使用封閉式甩桶（安全杯）超速離心機(jī)會(huì)產(chǎn)生霧，噴濺和試管破裂在離心機(jī)和真空泵之間安HEPA過濾器。對(duì)每臺(tái)馬達(dá)的盍?xí)r間進(jìn)行措施以減少機(jī)械故障在生物安全操作箱內(nèi)拆卸甩干桶。可能能產(chǎn)產(chǎn)生生危危險(xiǎn)險(xiǎn)的的設(shè)設(shè)備備和和操操作作方方法法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)厭氧罐爆傳染性物質(zhì)的噴濺確保催化劑周圍的金屬線外殼的完完整烘干箱內(nèi)爆、玻璃碎渣和傳染性物質(zhì)的噴濺放在堅(jiān)固的線圈內(nèi)均化呂，組織碾磨機(jī)產(chǎn)生煙霧和泄漏在生物安全操作箱內(nèi)操作。使用特制的型號(hào)以防止馬達(dá)軸承和0形墊圈的泄漏或使用stomacher.可能能產(chǎn)產(chǎn)生生危危險(xiǎn)險(xiǎn)的的設(shè)設(shè)備備和和操操作作方方法法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)近距離聲波定位器，超聲波清洗器聽力損害和皮膚發(fā)炎確保操作時(shí)保持距離以避免次諧波的危害。戴上保護(hù)手套，防止高頻以及洗滌劑的危害。培養(yǎng)基攪拌器，搖動(dòng)器，產(chǎn)生煙霧溢出和泄漏在生物安全操作箱內(nèi)或特制的嚴(yán)格密封的容器內(nèi)操作。攪拌器用強(qiáng)力帶螺旋塞的培養(yǎng)基玻璃瓶，如果需要，安裝有過濾保護(hù)咀的出口并蓋嚴(yán)?？赡苣墚a(chǎn)產(chǎn)生生危危險(xiǎn)險(xiǎn)的的設(shè)設(shè)備備和和操操作作方方法法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)冷凍箱產(chǎn)生煙霧和直接接觸污染源使用0型連接器，封閉整個(gè)冷凍箱。使用空氣過濾器以保護(hù)真空管。使用有效的消毒方法，如化學(xué)藥劑家用冰箱有易燃物品（如自動(dòng)溫度調(diào)整器，電燈開關(guān)，加熱管等），這些可導(dǎo)致箱內(nèi)儲(chǔ)存的易燃溶劑發(fā)出的蒸汽的燃燒在家用冰箱上放上警告標(biāo)志：“在此冰箱內(nèi)嚴(yán)禁存放易燃溶劑”。在冰箱的外部安裝人工溫度控制器并在冰箱箱體上電線經(jīng)過的位置加以封閉。注意：自動(dòng)除霜不能這樣改造?？赡苣墚a(chǎn)產(chǎn)生生危危險(xiǎn)險(xiǎn)的的設(shè)設(shè)備備和和操操作作方方法法設(shè)備危險(xiǎn)如何防止和減少危險(xiǎn)水浴器具微生物的滋生，某些金屬接觸疊氮化鈉后可產(chǎn)生易爆炸的混合物進(jìn)行定期的洗滌和消毒。不能用疊氮化鈉防止微生物的滋生生物物安安全全實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室微微生生物物操操作作技技術(shù)術(shù)規(guī)規(guī)范范實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室事事故故、、傷傷害害以以及及與與工工作作有有關(guān)關(guān)的的感感染染主主要要是是由由于于人人為為失失誤誤、、不不良良實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)技技術(shù)術(shù)以以及及儀儀器器使使用用不不當(dāng)當(dāng)造造成成的的，，實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室樣樣品品的的收收集集以以及及內(nèi)內(nèi)部部傳傳遞遞和和接接收收不不當(dāng)當(dāng)時(shí)時(shí)，，都都能能夠夠帶帶來來使使相相關(guān)關(guān)人人員員感感染染的的危危險(xiǎn)險(xiǎn)。。應(yīng)應(yīng)建建立立完完善善的的管管理理制制度度與與操操作作細(xì)細(xì)則則，，避避免免或或盡盡量量減減少少這這類類問問題題的的發(fā)發(fā)生生。生物物安安全全實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室微微生生物物操操作作技技術(shù)術(shù)規(guī)規(guī)范范樣品品容容器器樣品品容容器器可可以以是是玻玻璃璃的的，，但但最最好好使使用用塑塑料料制制品品。。樣樣品品容容器器應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)堅(jiān)堅(jiān)固固，，正正確確地地用用蓋蓋子子或或塞塞子子蓋蓋好好后后應(yīng)應(yīng)無無泄泄漏漏。。在在容容器器外外部部不不能能有有殘殘留留物物。。容容器器上上應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)正正確確地地張張貼貼標(biāo)標(biāo)簽簽以以便便于于識(shí)識(shí)別別。。樣樣品品的的要要求求或或說說明明書書不不能能夠夠卷卷在在容容器器外外面面，，而而是是要要分分開開放放置置，，最最好好放放置置在在防防水水的的袋袋子子里里。。樣樣品品在在設(shè)設(shè)施施內(nèi)內(nèi)的的傳傳遞遞為為了了避避免免意意外外泄泄漏漏或或溢溢出出，，應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)使使用用盒盒子子等等二二級(jí)級(jí)容容器器，，并并將將其其固固定定在在架架子子上上使使裝裝有有樣樣品品的的容容器器保保持持直直立立。。二二級(jí)級(jí)容容器器可可以以是是金金屬屬或或塑塑料料制制品品，，應(yīng)應(yīng)該該可可以以耐耐高高壓壓滅滅菌菌或或耐耐受受化化學(xué)學(xué)消消毒毒劑劑的的作作用用。。密密封封口口最最好好有有一一個(gè)個(gè)墊墊圈圈，，要要定定期期清清除除污污染染。。樣品接接收需要接接收大大量樣樣品的的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室應(yīng)應(yīng)當(dāng)指指定專專門的的房間間或空空間。。生物安安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室室微生生物操操作技技術(shù)規(guī)規(guī)范包裝開開啟接收和和打開開樣品品的人人員應(yīng)應(yīng)當(dāng)了了解樣樣品對(duì)對(duì)身體體健康康的潛潛在危危害，，并接接受過過如何何采用用常規(guī)規(guī)預(yù)防防措施施的培培訓(xùn)，，尤其其是處處理破破碎或或泄漏漏的容容器時(shí)時(shí)更應(yīng)應(yīng)如此此。樣樣品要要在生生物安安全柜柜內(nèi)打打開，，并準(zhǔn)準(zhǔn)備好好消毒毒劑。。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范移液管和移移液輔助器器的使用1．應(yīng)使用用移液輔助助器，嚴(yán)禁禁用口吸取取。2．所有移液管管應(yīng)帶有棉棉塞以減少少移液器具具的污染。。3．不能向向含有感染染性物質(zhì)的的溶液中吹吹人氣體。。4．感染性物質(zhì)質(zhì)不能夠用用移液管反反復(fù)吹吸混混合。5．不能將將液體從移移液管內(nèi)用用力吹出。。6．刻度對(duì)對(duì)應(yīng)(Mark——to—mark)移液管不需需要吹出最最后一滴液液體，因此此最好使用用這種移液液管。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范移液管和移移液輔助器器的使用7．污染的的移液管應(yīng)應(yīng)該完全浸浸泡在盛有有適當(dāng)消毒毒液的防碎碎容器中。。移液管應(yīng)應(yīng)當(dāng)在消毒毒劑中浸泡泡18／，，24小時(shí)時(shí)后再進(jìn)行行處理。8．盛放廢廢棄移液管管的容器應(yīng)應(yīng)當(dāng)放在生生物安全柜柜內(nèi)，而不不能放在外外面。9．固定有有皮下注射射針頭的注注射器不能能夠用于移移液。應(yīng)當(dāng)當(dāng)用鈍頭導(dǎo)導(dǎo)管替代針針頭?？梢砸杂霉ぞ叽虼蜷_瓶塞后后再用移液液管取樣，，從而避免免使用注射射器和針頭頭。10．為了了避免感染染性物質(zhì)從從移液管中中意外滴出出而擴(kuò)散，，在工作臺(tái)臺(tái)面應(yīng)當(dāng)放放置一塊浸浸有消毒液液的布或吸吸有消毒液液的紙，使使用后將其其高壓滅菌菌或按感染染性廢物處處理。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范避免感染性性物質(zhì)的擴(kuò)擴(kuò)散1．為了避避免轉(zhuǎn)移物物質(zhì)灑落，，微生物接接種環(huán)的直直徑應(yīng)為2—3mm并完全封閉閉，手柄(shanks)的長(zhǎng)度應(yīng)小小于6cm以減小振動(dòng)動(dòng)。或者采采用一次性性滅菌棉簽簽。2．使用封封閉式微型型電加熱器器消毒接種種環(huán)能夠避避免在本生生燈的明火火上加熱所所引起的感感染性物質(zhì)質(zhì)爆濺。最最好使用不不需要再進(jìn)進(jìn)行消毒的的一次性接接種環(huán)。3．為了避避免產(chǎn)生氣氣泡和氣溶溶膠的擴(kuò)散散，不要在在玻片上進(jìn)進(jìn)行觸酶試試驗(yàn)，而應(yīng)應(yīng)當(dāng)采用試試管、毛細(xì)細(xì)管或蓋玻玻片法。4．準(zhǔn)備高高壓滅菌和和／或處理理的廢棄樣樣品和培養(yǎng)養(yǎng)物應(yīng)當(dāng)放放置在防漏漏的容器內(nèi)內(nèi)，如實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室廢物袋袋。5．在每一一階段工作作結(jié)束后，，必須采用用適當(dāng)?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的的污染。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范生物安全柜柜的使用1．應(yīng)參考考國家標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)和相關(guān)文文獻(xiàn)，介紹紹生物安全全柜的使用用方法和局局限性。并并發(fā)給工作作人員書面面的操作步步驟、安全全或操作手手冊(cè)。應(yīng)明明確注明當(dāng)當(dāng)出現(xiàn)溢出出、破損或或不良操作作時(shí)，安全全柜就不再再能保護(hù)操操作者。2．生物安安全柜必須須運(yùn)行正常常時(shí)才能使使用。3．生物安安全柜在使使用中不能能打開玻璃璃觀察擋板板。4．安全柜柜內(nèi)應(yīng)盡量量少放置器器材或樣品品，不能阻阻礙后部的的氣流循環(huán)環(huán)。樣品在在放人安全全柜內(nèi)的工工作區(qū)前需需要清除表表面污染。。5．安全柜柜內(nèi)不能使使用酒精燈燈，否則燃燃燒產(chǎn)生的的熱量會(huì)干干擾氣流并并可能損壞壞過濾器。。允許使用用微型電加加熱器，但但最好使用用一次性無無菌接種環(huán)環(huán)。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范生物安全柜柜的使用6．所有工工作必須在在工作臺(tái)面面的中后部部進(jìn)行，并并能夠通過過觀察擋板板看到。7．盡量減減少操作者者身后的人人員流動(dòng)。。8．操作者者不應(yīng)反復(fù)復(fù)移出和伸伸進(jìn)手臂以以免干擾氣氣流。9．實(shí)驗(yàn)記記錄、移液液管以及其其他物品不不能夠阻礙礙前面的空空氣格柵，，因?yàn)檫@將將干擾氣體體流動(dòng)，引引起物品的的潛在污染染和操作者者的暴露。。10．工作作完成后以以及每天下下班前，應(yīng)應(yīng)使用適當(dāng)當(dāng)?shù)南緞﹦?duì)生物安安全柜的表表面進(jìn)行擦擦拭。11．工作作開始前和和結(jié)束后，，安全柜的的風(fēng)機(jī)應(yīng)至至少運(yùn)行5分鐘。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范避免感染性性物質(zhì)的注注入1．通過認(rèn)認(rèn)真練習(xí)和和仔細(xì)操作作，可以避避免破碎玻玻璃器皿的的意外刺傷傷。盡可能能用塑料制制品代替玻玻璃制品。。2．皮下注注射針頭、、玻璃吸管管以及破碎碎的玻璃均均可能將感感染性物質(zhì)質(zhì)注入體內(nèi)內(nèi)。3．以下兩兩點(diǎn)可以減減少針刺事事故：(a)注射時(shí)特別別小心(b)減少使用注射射器和針頭；；許多操作可可用帶有鈍頭導(dǎo)管的的注射器替代代。可用一些些簡(jiǎn)單的裝置置來打開瓶塞塞，然后使用用吸管取樣。。4．不要重新新給用過的針針頭戴護(hù)套。。一次性注射器器用完后，不不必將針頭從從注射器上取取下，應(yīng)丟棄棄在防穿透的的帶蓋容器中中。5．應(yīng)當(dāng)用塑塑料吸管代替替玻璃吸管。。生物安全實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室微生物操操作技術(shù)規(guī)范范血清的分離1．只有經(jīng)過過嚴(yán)格培訓(xùn)的的人員才能進(jìn)進(jìn)行這項(xiàng)工作作。2．操作時(shí)應(yīng)應(yīng)戴手套以及及眼睛和黏膜膜的保護(hù)裝置置。3．規(guī)范的實(shí)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)術(shù)可以避免或或盡量減少噴噴濺和氣溶膠膠的產(chǎn)生。血血液和血清應(yīng)應(yīng)當(dāng)小心吸取取，而不能傾傾倒。嚴(yán)禁用用口吸液。4．移液管使使用后應(yīng)完全全浸入次氯酸酸鹽或其他適適當(dāng)?shù)南疽阂褐小Ｒ埔汗芄軕?yīng)在消毒液液中浸泡至少少18小時(shí)，，然后再丟棄棄或滅菌清洗洗后重復(fù)使用用。5．帶有血凝凝塊等的廢棄棄樣品管，在在加蓋后應(yīng)當(dāng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)牡姆缆┤萜鲀?nèi)內(nèi)高壓滅菌和和／或焚燒。。6．為了清清洗噴濺和溢溢出的血樣，，應(yīng)當(dāng)備有每每天新鮮配制制的次氯酸鹽鹽溶液。生物安全實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室微生物操操作技術(shù)規(guī)范范離心機(jī)的使用用1．在使用實(shí)實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)機(jī)時(shí)，儀器良良好的機(jī)械性性能是保障微微生物安全的的前提條件。。2．應(yīng)按照操操作手冊(cè)來操操作離心機(jī)。。3．離心機(jī)放放置的高度應(yīng)應(yīng)當(dāng)使低于平平均身高的工工作人員也能能夠看到離心心機(jī)腔體內(nèi)部部，以正確放放置十字軸和和離心管套。。4．離心管和和盛放離心樣樣品的容器應(yīng)應(yīng)當(dāng)由厚壁玻玻璃制成，或或最好為塑料料制品，并且且在使用前應(yīng)應(yīng)檢查是否破破損。5．用于離心心的試管和樣樣品容器應(yīng)當(dāng)當(dāng)始終牢固蓋蓋緊(最好使使用螺旋蓋)。6．離心管套套的裝載、平平衡、密封和和打開必須在在生物安全柜柜內(nèi)進(jìn)行。生物安全實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室微生物操操作技術(shù)規(guī)范范離心機(jī)的使用用7．離心管套套和十字軸應(yīng)應(yīng)按重量配對(duì)對(duì)，并在裝載載離心管后正正確平衡。8．操作指南南中應(yīng)給出液液面距離心管管邊緣需要留留出的空間大大小。9．空離心管管套應(yīng)當(dāng)用蒸蒸餾水或乙醇醇(異丙醇，，70％)平平衡。鹽溶液液或次氯酸鹽鹽溶液對(duì)金屬屬具有腐蝕作作用，因此不不能使用。10．對(duì)于危危險(xiǎn)度3級(jí)和和4級(jí)的微生生物，必須使使用可封口的的離心離心管管套(安全杯杯)。11．當(dāng)使用用固定角離心心轉(zhuǎn)子時(shí)，必必須小心不能能將離心管裝裝得過滿，否否則會(huì)導(dǎo)致漏漏液。12．應(yīng)當(dāng)每每天檢查離心心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部部位的腔壁是是否被沾染或或弄臟。如污污染明顯，應(yīng)應(yīng)重新評(píng)估離離心操作規(guī)程程。生物安全實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室微生物操操作技術(shù)規(guī)范范離心心機(jī)機(jī)的的使使用用13．．應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)每每天天檢檢查查離離心心轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)子子和和離離心心管管套套是是否否有有腐腐蝕蝕或或細(xì)細(xì)微微裂裂痕痕。。14．．每每次次使使用用后后，，要要清清除除離離心心管管套套、、轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)子子和和離離心心機(jī)機(jī)腔腔的的污污染染。。15．．使使用用后后離離心心管管套套應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)?shù)沟怪弥么娲娣欧攀故蛊狡胶夂庖阂毫髁鞲筛??！?6．．當(dāng)當(dāng)使使用用離離心心機(jī)機(jī)時(shí)時(shí)，，可可能能噴噴射射出出可可在在空空氣氣中中傳傳播播的的感感染染性性顆顆粒粒。。如如果果將將離離心心機(jī)機(jī)放放置置在在傳傳統(tǒng)統(tǒng)的的前前開開式式的的I級(jí)或或ⅡⅡ級(jí)級(jí)生生物物安安全全柜柜內(nèi)內(nèi)，，這這些些粒粒子子由由于于運(yùn)運(yùn)動(dòng)動(dòng)過過快快而而不不能能被被安安全全柜柜內(nèi)內(nèi)的的氣氣流流截截留留。。而而在在ⅢⅢ級(jí)級(jí)生生物物安安全全柜柜內(nèi)內(nèi)封封閉閉離離心心時(shí)時(shí)，，可可以以防防止止生生成成的的氣氣溶溶膠膠廣廣泛泛擴(kuò)擴(kuò)散散。。但但是是，，良良好好的的離離心心操操作作技技術(shù)術(shù)和和牢牢固固加加蓋蓋的的離離心心管管可可以以提提供供足足夠夠的的保保護(hù)護(hù)，，以以防防止止感感染染性性氣氣溶溶膠膠和和可可擴(kuò)擴(kuò)散散粒粒子子的的產(chǎn)產(chǎn)生生。。生物安安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室室微生生物操操作技技術(shù)規(guī)規(guī)范勻漿器器＼搖搖床＼＼攪拌拌器和和超聲聲處理理器的的使用用1．實(shí)實(shí)驗(yàn)室室不能能使用用家用用(廚廚房)勻漿漿器，，因?yàn)闉樗鼈儌兛赡苣苄孤┞┗蜥屷尫艢鈿馊苣z膠。使使用實(shí)實(shí)驗(yàn)室室專用用攪拌拌器和和消化化器(stomacher)更為安安全。。2.蓋子、、杯子子或瓶瓶子應(yīng)應(yīng)當(dāng)保保持正正常狀狀態(tài)，，沒有有裂縫縫或變變形。。蓋子子應(yīng)能能封蓋蓋嚴(yán)密密，襯襯墊也也應(yīng)處處于正正常狀狀態(tài)。。生物安安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室室微生生物操操作技技術(shù)規(guī)規(guī)范3．在在使用用勻漿漿器、、搖床床和超超聲處處理器器時(shí)，，容器器內(nèi)會(huì)會(huì)產(chǎn)生生壓力力，含含有感感染性性物質(zhì)質(zhì)的氣氣溶膠膠就可可能從從蓋子子和容容器間間隙逸逸出。。由于于玻璃璃可能能破碎碎而釋釋放感感染性性物質(zhì)質(zhì)并傷傷害操操作者者，建建議使使用塑塑料容容器，，尤其其是聚聚四氟氟乙烯烯(po1ytetranuoroe-thylene，，PTFE)容器。。4．使使用勻勻漿器器、搖搖床和和超聲聲處理理器時(shí)時(shí)，應(yīng)應(yīng)該用用一個(gè)個(gè)結(jié)實(shí)實(shí)透明明的塑塑料箱箱覆蓋蓋設(shè)備備，并并在用用完后后消毒毒?？煽赡艿牡脑?，，這些些儀器器可在在生物物安全全柜內(nèi)內(nèi)覆蓋蓋塑料料罩進(jìn)進(jìn)行操操作。。5．操操作結(jié)結(jié)束后后，應(yīng)應(yīng)在生生物安安全柜柜內(nèi)打打開容容器。。6．應(yīng)應(yīng)對(duì)使使用超超聲處處理器器的人人員提提供聽聽力保保護(hù)。。生物安安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室室微生生物操操作技技術(shù)規(guī)規(guī)范組織研研磨器器的使使用1．使使用玻玻璃研研磨器器時(shí)應(yīng)應(yīng)戴手手套，，并用用一塊塊具有有吸收收性的的軟物物包住住研磨磨器。。塑料料(聚聚四氟氟乙烯烯)研研磨器器更加加安全全。2．操作和和打開組織織研磨器時(shí)時(shí)應(yīng)當(dāng)在生生物安全柜柜內(nèi)進(jìn)行。。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范冰箱與冷柜柜的維護(hù)和和使用1．冰箱、、低溫冷柜柜和干冰柜柜應(yīng)當(dāng)定期期除霜和清清潔，應(yīng)清清理出所有有在儲(chǔ)存過過程中破碎碎的安瓿和和試管等物物品。清理理時(shí)應(yīng)戴厚厚橡膠手套套并進(jìn)行面面部防護(hù)，，清理后要要對(duì)內(nèi)表面面進(jìn)行消毒毒。2．儲(chǔ)存在在冰箱內(nèi)的的所有容器器應(yīng)當(dāng)清楚楚地標(biāo)明內(nèi)內(nèi)裝物品的的學(xué)名、儲(chǔ)儲(chǔ)存日期和和儲(chǔ)存者的的姓名。未未標(biāo)明的或或廢舊物品品應(yīng)當(dāng)高壓壓滅菌并丟丟棄。3．應(yīng)當(dāng)保保存一份凍凍存物品的的清單。4．除非采采用有效防防爆措施，，否則冰箱箱內(nèi)不能放放置易燃溶溶液并冰箱箱門上應(yīng)明明確標(biāo)示。。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范裝有凍干感感染性物質(zhì)質(zhì)安瓿的開開啟當(dāng)打開裝有有凍干物的的安瓿時(shí)必必須小心，，因?yàn)槠鋬?nèi)內(nèi)部可能處處于負(fù)壓，，瞬間進(jìn)入入的空氣可可能使一些些物質(zhì)擴(kuò)散散進(jìn)入空氣氣。安瓿應(yīng)應(yīng)該在生物物安全柜內(nèi)內(nèi)打開，建建議按下列列步驟打開開安瓿：1．首先清清除安瓿外外表面的污污染。2．如果管管內(nèi)有棉花花或纖維塞塞，可以在在管上靠近近棉花或纖纖維塞的中中部銼一痕痕跡。3．用一團(tuán)團(tuán)酒精浸泡泡的棉花將將安瓿包起起來以保護(hù)護(hù)雙手，然然后手持安安瓿從標(biāo)記記的銼痕處處打開。4．將頂部部小心移去去并按污染染物處理。。5．如果塞塞子仍然在在安瓿上，，用消毒鑷鑷子除去。。6．緩慢向向安瓿中加加入液體來來重懸凍干干物，避免免出現(xiàn)泡沫沫。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范裝有感染性性物質(zhì)安瓿瓿的儲(chǔ)存裝有感染性性物質(zhì)的安安瓿不能浸浸入液氮中中，因?yàn)檫@這樣會(huì)造成成有裂痕或或密封不嚴(yán)嚴(yán)的安瓿在在取出時(shí)破破碎或爆炸炸。如果需需要低溫保保存，安瓿瓿應(yīng)當(dāng)儲(chǔ)存存在液氮上上面的氣相相中。此外外，感染性性物質(zhì)應(yīng)儲(chǔ)儲(chǔ)存在低溫溫冰柜或干干冰中。當(dāng)當(dāng)從冷凍儲(chǔ)儲(chǔ)存器中取取出安瓿時(shí)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室室工作人員員應(yīng)當(dāng)進(jìn)行行眼睛和手手的防護(hù)。。以這種方方式儲(chǔ)存的的安瓿在取取出時(shí)應(yīng)對(duì)對(duì)外表面進(jìn)進(jìn)行消毒。。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范樣品的收集集、標(biāo)記和和運(yùn)輸1．始終遵遵循常規(guī)預(yù)預(yù)防措施；；所有操作作均要戴手手套2．應(yīng)當(dāng)由由受過培訓(xùn)訓(xùn)的人員來來采集病人人或動(dòng)物的的血樣。3．在靜脈脈抽血時(shí)，，應(yīng)當(dāng)使用用一次性的的安全的抽抽真空設(shè)備備取代傳統(tǒng)統(tǒng)的針頭和和注射器，，因?yàn)檫@樣樣可以使血血液直接采采集到帶塞塞的運(yùn)輸管管和／或培培養(yǎng)管中。。用完后自自動(dòng)廢棄針針頭。4．裝有樣樣品的試管管應(yīng)置于適適當(dāng)容器中中運(yùn)至實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室，在實(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部部轉(zhuǎn)運(yùn)也應(yīng)應(yīng)這樣說明明書應(yīng)當(dāng)分分開放置在在防水袋或或信封內(nèi)。。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范玻璃器皿和和“銳器””1．盡可能能用塑料制制品代替玻玻璃制品。。只能用實(shí)實(shí)驗(yàn)室級(jí)別別(硼硅酸酸鹽)的玻玻璃，任何何破碎或有有裂痕的玻玻璃制品均均應(yīng)丟棄。。2．不能將將皮下注射射針作為移移液管使用用。可以使使用鈍頭導(dǎo)導(dǎo)管。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范用于于顯顯微微觀觀察察的的薄薄膜膜和和涂涂片片用于于顯顯微微觀觀察察的的血血液液、、唾唾液液和和糞糞便便樣樣品品在在固固定定和和染染色色時(shí)時(shí)，，并并不不必必殺殺死死涂涂片片上上的的所所有有微微生生物物和和病病毒毒。。應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)用用鑷鑷子子拿拿取取這這些些東東西西，，恰恰當(dāng)當(dāng)儲(chǔ)儲(chǔ)存存，，并并經(jīng)經(jīng)清清除除污污染染和和／／或或高高壓壓滅滅菌菌后后再再丟丟棄棄。。自動(dòng)動(dòng)化化儀儀器器(超超聲聲處處理理器器、、渦渦旋旋混混合合器器)1．．為為了了避避免免液液滴滴和和氣氣溶溶膠膠的的擴(kuò)擴(kuò)散散，，這這些些儀儀器器應(yīng)應(yīng)采采用用封封閉閉型型的的。。2．．排排出出物物應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)收收集集在在封封閉閉的的容容器器內(nèi)內(nèi)進(jìn)進(jìn)一一步步高高壓壓滅滅菌菌和和／／或或廢廢棄棄。。3，，在在每每一一步步完完成成后后應(yīng)應(yīng)根根據(jù)據(jù)操操作作指指南南對(duì)對(duì)儀儀器器進(jìn)進(jìn)行行消消毒毒。。生物物安安全全實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室微微生生物物操操作作技技術(shù)術(shù)規(guī)規(guī)范范組織織1．．組組織織樣樣品品應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)采采用用福福爾爾馬馬林林固固定定。。小小塊塊樣樣品品，，如如針針頭頭活活檢檢樣樣品品，，能能夠夠在在幾幾個(gè)個(gè)小小時(shí)時(shí)內(nèi)內(nèi)固固定定和和消消毒毒，，但但是是較較大大樣樣品品則則可可能能需需要要幾幾天天時(shí)時(shí)間間。。2．．應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)避避免免冰冰凍凍切切片片。。如如果果必必須須進(jìn)進(jìn)行行冰冰凍凍切切片片，，應(yīng)應(yīng)當(dāng)當(dāng)罩罩住住冰冰凍凍機(jī)機(jī)，，操操作作者者要要戴戴安安全全防防護(hù)護(hù)罩罩(面面具具)。。清清除除污污染染時(shí)時(shí)，，儀儀器器的的溫溫度度要要升升至至20~C。。生物物安安全全實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室微微生生物物操操作作技技術(shù)術(shù)規(guī)規(guī)范范生物物安安全全實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室消消毒毒與與滅滅活活消毒毒和和滅滅菌菌的的基基本本常常識(shí)識(shí)對(duì)對(duì)于于實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室生生物物安安全全是是至至關(guān)關(guān)重重要要的的。。生生物物安安全全中中關(guān)關(guān)于于清清除除污污染染的的特特殊殊要要求求要要根根據(jù)據(jù)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)工工作作的的類類型型和和所所操操作作感感染染性性物物質(zhì)質(zhì)的的特特性性來來決決定定。。因因此此，，有有必必要要利利用用已已知知的的普普通通信信息息來來確確立立更更具具體體的的和和標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)化化的的程程序序，，以以滿滿足足某某些些特特殊殊實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室中中各各種種不不同同生生物物危危害害水水平平的的需需求求。。生物物安安全全實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室微微生生物物操操作作技技術(shù)術(shù)規(guī)規(guī)范范清除除局局部部環(huán)環(huán)境境的的污污染染需要要聯(lián)聯(lián)合合應(yīng)應(yīng)用用液液體體和和氣氣體體消消毒毒劑劑來來清清除除實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室空空間間、、用用具具和和設(shè)設(shè)備備的的污污染染。。清清除除表表面面污污染染時(shí)時(shí)可可以以使使用用次次氯氯酸酸鈉鈉(Na0C1)溶液；含含有1％％有效氯氯的溶液液適于普普通的環(huán)環(huán)境衛(wèi)生生設(shè)備，，但是當(dāng)當(dāng)處理高高危環(huán)境境時(shí)，建建議使用用高濃度度(5g／L)溶液。用用于清除除環(huán)境污污染時(shí)，，含有3％過氧氧化氫的的溶液也也可以作作為漂白白劑的代代用品。?？梢酝ㄍㄟ^加熱熱多聚甲甲醛或煮煮沸福爾爾馬林所所產(chǎn)生的的甲醛蒸蒸氣熏蒸蒸來清除除房間和和儀器的的污染。。產(chǎn)生甲甲醛蒸氣氣。前，，房間的的所有開開口(如如門窗等等)都應(yīng)應(yīng)用密封封帶或類類似物加加以密封封。熏蒸蒸應(yīng)當(dāng)在在室溫不不低于21℃且且相對(duì)濕濕度70％的的條件下下進(jìn)行清清除污染染時(shí)氣體體需要與與物體表表面至少少接觸8小時(shí)。。熏蒸后后，該區(qū)區(qū)域必須須徹底通通風(fēng)后才才能允許許人員進(jìn)進(jìn)入。在在通風(fēng)之之前需要要進(jìn)入房房間時(shí)，，必須戴戴適當(dāng)?shù)牡姆蓝久婷婢摺？煽梢圆刹捎脷鈶B(tài)態(tài)的碳酸酸氫銨來來中和甲甲醛。已已有報(bào)道道，可采采用過氧氧化氫溶溶液的氣氣霧熏蒸蒸污染的的空間，，但對(duì)此此還需要要進(jìn)一步步的研究究。注：甲醛醛是一種種危險(xiǎn)和和有刺激激性的氣氣體，并并懷疑有有致癌性性。應(yīng)使使用具有有供氣系系統(tǒng)的全全面罩式式防毒面面具。操操作時(shí)應(yīng)應(yīng)當(dāng)采用用“雙人人”制。。生物安全全實(shí)驗(yàn)室室微生物物操作技技術(shù)規(guī)范范生物安全全柜污染染的清除除清除I級(jí)和Ⅱ級(jí)級(jí)生物安安全柜的的污染時(shí)時(shí)，應(yīng)當(dāng)當(dāng)將適量量的多聚聚甲醛(空氣中中的終濃濃度達(dá)到到0．8％)放放在電熱熱板或電電熱盤上上(在生生物安全全柜外進(jìn)進(jìn)行控制制)。然然后在生生物安全全柜內(nèi)放放置第二二個(gè)放有有比多聚聚甲醛多多10％％的碳碳酸氫銨銨的加熱熱板或盤盤。第二二個(gè)盤上上覆蓋一一個(gè)能夠夠從遠(yuǎn)處處將其移移走的蓋蓋子(如如連接一一個(gè)能夠夠從生物物安全柜柜外拉動(dòng)動(dòng)的繩子子)，從從而盡量量減少對(duì)對(duì)甲醛氣氣體的提提前中和和。如果果相對(duì)濕濕度低于于70％％，在在使用強(qiáng)強(qiáng)力膠帶帶[如““管道密密封膠帶帶”(ducttape)]密封前部部封閉板板前，還還要在安安全柜內(nèi)內(nèi)部放置置一個(gè)開開口的盛盛有熱水水的容器器。如果果前部沒沒有封閉閉板，則則可以用用重型塑塑料布(heavygaugeplastic，，heeting)粘貼覆蓋蓋在前部部以保證證氣體不不會(huì)泄漏漏進(jìn)入房房間。生物安全全實(shí)驗(yàn)室室微生物物操作技技術(shù)規(guī)范范打開多聚聚甲醛盤盤的加熱熱開關(guān)，，1小時(shí)時(shí)后或多多聚甲醛醛完全蒸蒸發(fā)后關(guān)關(guān)閉。讓讓生物安安全柜靜靜置過夜夜。移去去第二個(gè)個(gè)盤子的的蓋后打打開加熱熱開關(guān)，，讓碳酸酸氫銨揮揮發(fā)。然然后，關(guān)關(guān)閉開關(guān)關(guān)并啟動(dòng)動(dòng)安全柜柜讓碳酸酸氫銨氣氣體循環(huán)環(huán)1小時(shí)時(shí)。移去去前封閉閉板(或或塑料布布)后就就可以使使用生物物安全柜柜了。生物安全全實(shí)驗(yàn)室室微生物物操作技技術(shù)規(guī)范范洗手／清清除手部部污染接觸生物物危害性性材料時(shí)時(shí)，必須須戴合適適的手套套。但是是這并不不能代替替實(shí)驗(yàn)室室人員需需要經(jīng)常常地、徹徹底地洗洗手。接接觸過生生物危害害性材料料和動(dòng)物物后、使使用過衛(wèi)衛(wèi)生間后后、離開開實(shí)驗(yàn)室室前以及及吃東西西前都必必須洗手手。生物安全全實(shí)驗(yàn)室室微生物物操作技技術(shù)規(guī)范范大多數(shù)情情況下，，用普通通的肥皂皂和水徹徹底沖洗洗對(duì)于清清除手部部污染就就足夠了了。但在在高度危危險(xiǎn)的情情況下，，建議使使用殺菌菌肥皂。。手要完完全抹上上肥皂，，搓洗至至少10秒鐘，，用干凈凈水沖洗洗后再用用干凈的的紙巾或或毛巾擦擦干(如如果有條條件，也也推薦使使用暖風(fēng)風(fēng)干手器器)。推薦使用用腳控或或肘控的的水龍頭頭。如果果沒有安安裝，應(yīng)應(yīng)使用紙紙巾或毛毛巾關(guān)上上水龍頭頭以防止止再度污污染洗凈凈的手。。如上所所述，如如果沒有有條件徹徹底洗手手或洗手手不方便便，應(yīng)該用酒酒精擦手手來清除除雙手的的輕度污污染生物安全全實(shí)驗(yàn)室室微生物物操作技技術(shù)規(guī)范范加熱滅菌菌和消毒毒加熱是最最常用的的清除病病原體污污染的物物理手段段。“干干”熱沒沒有腐蝕蝕性，可可用來處處理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)器材中中許多可可耐受160~C或更高溫溫度2～～4小時(shí)時(shí)的物品品。燃燒燒或焚化化也是一一種干熱熱方式。。高壓滅滅菌的濕濕熱法則則最為有有效。煮沸并不不一定能能殺死所所有的微微生物或或病原體體，但如如果其他他方法(化學(xué)殺殺菌、清清除污染染、高壓壓滅菌)不可行行或沒有有條件時(shí)時(shí)，也可可以作為為一種最最起碼的的消毒措措施。滅菌后的的物品必必須小心心操作并并保存，，以保證證在使用用之前不不再被污污染。生物安全全實(shí)驗(yàn)室室微生物物操作技技術(shù)規(guī)范范高壓滅菌菌壓力飽和和蒸汽滅滅菌(高高壓滅菌菌)是對(duì)對(duì)實(shí)驗(yàn)材材料進(jìn)行行滅菌時(shí)時(shí)最有效效和最可可靠的方方法。對(duì)對(duì)于大多多數(shù)目的的，下列列組合可可以確保保正確裝裝載的高高壓滅菌菌器的滅滅菌效果果：——134℃、、2、、3分分鐘————126℃℃、10分分鐘——121℃、、15分鐘鐘———115℃、、25分鐘鐘生物安安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室室微生生物操操作技技術(shù)規(guī)規(guī)范高壓滅滅菌器器的裝裝載為了利利于蒸蒸汽的的滲透透和空空氣排排出，，高壓壓滅菌菌物品品應(yīng)松松散包包裝放放置在在滅菌菌器內(nèi)內(nèi)。要要使蒸蒸汽能能夠作作用到到其內(nèi)內(nèi)容物物。通通過高高壓滅滅菌器器內(nèi)的的蒸汽汽，由由下而而上置置換空空氣并并經(jīng)排排氣孔孔排出出。當(dāng)當(dāng)所有有的空空氣排排出后后，關(guān)關(guān)閉排排氣孔孔的閥閥門，，緩慢慢加熱熱使壓壓力和和溫度度上升升到安安全閥閥預(yù)置置的水水平。。此時(shí)時(shí)記為為滅菌菌開始始時(shí)間間。滅滅菌結(jié)結(jié)束后后停止止加熱熱，讓讓溫度度下降降到80℃℃以下下再打打開蓋蓋子。。生物安安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室室微生生物操操作技技術(shù)規(guī)規(guī)范高壓滅滅菌器器使用用注意意事項(xiàng)項(xiàng)下列列規(guī)定定能夠夠減小小操作作壓力力容器器時(shí)會(huì)會(huì)發(fā)生生的危危害：：1．高壓滅滅菌器的操操作和日常常維護(hù)應(yīng)由由受過良好好培訓(xùn)的人人員負(fù)責(zé)。。預(yù)防性的的維護(hù)程序序應(yīng)包括：：由有資質(zhì)質(zhì)人員定期期檢查滅菌菌器內(nèi)部、、門的密封封性以及所所有的儀表表和控制器器。2．應(yīng)使用用飽和蒸汽汽，并且其其中不含腐腐蝕性抑制制劑或其他他化學(xué)試劑劑，這些物物質(zhì)可能污污染正在滅滅菌的物品品。3．所有要要高壓的物物品都應(yīng)放放在空氣能能夠排出并并具有良好好熱滲透性性的容器中中；滅菌器器內(nèi)不能塞塞得過緊，，否則蒸汽汽不能均勻勻作用于裝裝載物。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范4．當(dāng)滅菌菌器內(nèi)部加加壓時(shí)，互互鎖安全裝裝置可以防防止門被打打開，而沒沒有互鎖裝裝置的高壓壓滅菌器，，應(yīng)當(dāng)關(guān)閉閉主蒸汽閥閥并待溫度度下降到80℃以下下時(shí)再打開開門。5．即使溫溫度下降到到80℃以以下，操作作者打開門門時(shí)也應(yīng)當(dāng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)牡氖痔缀兔婷嬲謥磉M(jìn)行行防護(hù)。6．在進(jìn)行行高壓滅菌菌效果的常常規(guī)監(jiān)測(cè)中中，生物指指示劑或或熱電偶計(jì)計(jì)應(yīng)置于每每件高壓滅滅菌物品的的中心。最最好在“最最大”裝載載時(shí)用熱偶偶計(jì)和記錄錄儀進(jìn)行定定時(shí)監(jiān)測(cè)，，以確定滅滅菌程序是是否恰當(dāng)。。7．滅菌器器的過濾器器(如果有有)應(yīng)當(dāng)每每天拆下清清洗。8．應(yīng)當(dāng)注注意保證高高壓滅菌器器的安全閥閥沒有被高高壓滅菌物物品中的紙紙等堵塞。。生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范焚燒在處理那些些經(jīng)過或事事先未經(jīng)清清除污染的的動(dòng)物尸體體以及解剖剖組織或其其他實(shí)驗(yàn)室室廢物時(shí)，，焚燒是一一種有效的的方法。只只有在實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室可以控控制焚燒爐爐，并且能能夠有效地地控制溫度度和配備了了二級(jí)焚燒燒室時(shí)，才才能用焚燒燒代替高壓壓滅菌來處處理感染性性物質(zhì)。焚焚燒也是一一種處理被被朊蛋白污污染物品的的有效方法法生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室微生生物操作技技術(shù)規(guī)范需要焚燒的的材料(即即使事先已已清除污染染)應(yīng)當(dāng)用用袋子運(yùn)送送到焚燒室室，最好使使用塑料袋袋。負(fù)責(zé)焚焚燒的工作作人員應(yīng)當(dāng)當(dāng)接受關(guān)于于如何裝載載和控制溫溫度等的正正確指導(dǎo)。。還需要注注明的是，，焚燒爐的的操作是否否有效主要要取決于對(duì)對(duì)需要處理理的廢物中中物品的正正確混合。。危險(xiǎn)度評(píng)估估危險(xiǎn)評(píng)價(jià)首首先集中在在實(shí)驗(yàn)室相相關(guān)感染的的防御上。。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室室活動(dòng)涉及及傳染或潛潛在傳染因因子時(shí)，對(duì)對(duì)某一個(gè)特特定的操作作程序或?qū)崒?shí)驗(yàn)進(jìn)行危危險(xiǎn)度評(píng)估估，危險(xiǎn)評(píng)評(píng)價(jià)幫助正正確選擇生生物安全水水平(設(shè)施施、設(shè)備和和操作)，，評(píng)估職業(yè)業(yè)性疾病風(fēng)風(fēng)險(xiǎn)、采取取相應(yīng)安全全防護(hù)措施施、減少危危險(xiǎn)性事件件發(fā)生。危險(xiǎn)度評(píng)估估在進(jìn)行危險(xiǎn)險(xiǎn)性的評(píng)估估和選擇安安全防護(hù)措措施時(shí)，應(yīng)應(yīng)充分考慮慮有關(guān)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)以及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的特特點(diǎn)、可能能直接或間間接參與風(fēng)風(fēng)險(xiǎn)的傳染染性病原，，工作人員員的專業(yè)素素養(yǎng)及經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)，實(shí)施項(xiàng)項(xiàng)目的具體體活動(dòng)和程程序等因素素，做出決決策。根據(jù)據(jù)傳染過程程的基本因因素，減少少工作人員員暴露的危危險(xiǎn)和使環(huán)環(huán)境污染降降到最低限限度。危險(xiǎn)度評(píng)估估危險(xiǎn)度評(píng)估估應(yīng)當(dāng)由那那些對(duì)微生生物特性、、設(shè)備和操操作程序、、動(dòng)物模型型、屏障設(shè)設(shè)備和設(shè)施施最為熟悉悉的人員來來進(jìn)行。授授權(quán)的專業(yè)業(yè)人員進(jìn)行行。危險(xiǎn)度度評(píng)估一旦旦進(jìn)行，在在必要時(shí)就就應(yīng)當(dāng)對(duì)它它進(jìn)行常規(guī)規(guī)性的評(píng)估估和修訂，，同時(shí)要考考慮收集與與危險(xiǎn)程度度相關(guān)的新新資料以及及來自科學(xué)學(xué)文獻(xiàn)的其其他相關(guān)的的新信息。。微生物的危危險(xiǎn)評(píng)價(jià)涉涉及范疇1．已知的的傳染微生生物經(jīng)過鑒定的的病原體，，有實(shí)驗(yàn)室室研究、疾疾病監(jiān)測(cè)和和流行病學(xué)學(xué)研究危險(xiǎn)險(xiǎn)評(píng)價(jià)資料料。2．未知傳傳染微生物物對(duì)未知傳染染微生物危危險(xiǎn)評(píng)價(jià)的的需要考慮慮以下方面面：傳染性性、傳播途途經(jīng)、發(fā)病病率和死亡亡率等流行行病學(xué)和病病原血清型型等生物學(xué)學(xué)特性資料料。微生物的危危險(xiǎn)評(píng)價(jià)涉涉及范疇3．基因修修飾微生物物通過基因修修飾技術(shù)獲獲得的具有有新特性的的微生物。。通常通過過受體和供供體的生物物特性和用用量，進(jìn)行行危險(xiǎn)性評(píng)評(píng)價(jià)。修飾飾后是否改改變其毒性性、繁殖能能力、宿主主范圍，與與宿主染色色體整合性性和對(duì)細(xì)胞胞生長(zhǎng)周期期的影響等等。4．未知傳傳染性的生生物材料在缺少資料料證明有或或沒有未知知傳染性微微生物材料料時(shí)應(yīng)該擴(kuò)擴(kuò)展防護(hù)范范圍和提高高防護(hù)級(jí)別別。危險(xiǎn)度評(píng)估估內(nèi)容進(jìn)行微生物物危險(xiǎn)度評(píng)評(píng)估最有用用的工具之之一就是列列出微生物物的危險(xiǎn)度度等級(jí)。然然而對(duì)于一一個(gè)特定的的微生物來來講，在進(jìn)進(jìn)行危險(xiǎn)度度評(píng)估時(shí)僅僅僅參考危危險(xiǎn)度等級(jí)級(jí)的分類是是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠夠的，適當(dāng)當(dāng)時(shí)還應(yīng)考考慮其他一一些因素，，包括：1——微生生物的致病病性和感染染劑量越是發(fā)病率率高、后果果嚴(yán)重的病病原越是危危險(xiǎn)。病原原體的來源源在危險(xiǎn)評(píng)評(píng)價(jià)時(shí)必須須考慮在內(nèi)內(nèi)?！皝碓丛础鄙婕暗降轿⑸飦韥碓吹牡赜蛴?、宿主和和特點(diǎn)。危險(xiǎn)度評(píng)估估內(nèi)容2——暴露露的后果發(fā)生暴露后后對(duì)人員或或環(huán)境可能能的危害后后果3——自然然感染途徑徑傳染性病原原能通過四四種主要的的感染途徑徑而致病。。即攝人、、吸人、黏黏膜接觸以以及腸道外外直接接種種。感染途途徑，可能能與自然患患病的感染染途徑相類類似，也可可能截然不不同。危險(xiǎn)度評(píng)估估內(nèi)容4——實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室操作所所造成的其其他感染途途徑(非消消化道途徑徑、空氣傳傳播、食入入)傳染性病原原可通過天天然的或人人為的方式式從實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物體內(nèi)逸逸散。經(jīng)尿尿液、唾液液和糞便排排出或從皮皮膚損害部部位釋出是是天然逸散散方式的例例子。促使使傳染性病病原從實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)內(nèi)逸散的人人為方式有有很多，用用針頭和注注射器從病病毒血癥動(dòng)動(dòng)物身上抽抽取血樣、、活組織檢檢查或尸體體剖檢操作作者時(shí)被帶帶有污染物物的針頭、、刀刃刺傷傷、割破或或擦傷，以以及被動(dòng)物物咬傷而直直接接種；；照料動(dòng)物物、實(shí)驗(yàn)操操作時(shí)吸人人帶污染物物的氣溶膠膠被濺出的的污染物，，污染的手手和污染的的表面接觸觸操作人員員的眼睛、、鼻腔或口口腔黏膜。。氣溶膠傳傳播的可能能性越大，，危險(xiǎn)性越越高。通過過氣溶膠傳傳播的疾病病最容易發(fā)發(fā)生實(shí)驗(yàn)室室感染。危險(xiǎn)險(xiǎn)度度評(píng)評(píng)估估內(nèi)內(nèi)容容進(jìn)行行微微生生物物危危險(xiǎn)險(xiǎn)度度評(píng)評(píng)估估最最有有用用的的工工具具之之一一就就是是列列出出微微生生物物的的危危險(xiǎn)險(xiǎn)度度等等級(jí)級(jí)。。然然而而對(duì)對(duì)于于一一個(gè)個(gè)特特定定的的微微生生物物來來講講，，在在進(jìn)進(jìn)行行危危險(xiǎn)險(xiǎn)度度評(píng)評(píng)估估時(shí)時(shí)僅僅僅僅參參考考危危險(xiǎn)險(xiǎn)度度等等級(jí)級(jí)的的分分類類是是遠(yuǎn)遠(yuǎn)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不不夠夠的的，，適適當(dāng)當(dāng)時(shí)時(shí)還還應(yīng)應(yīng)考考慮慮其其他他一一些些因因素素，，包包括括：：1——微生物物在環(huán)境中的的穩(wěn)定性不僅考慮微生生物的傳染性性(細(xì)菌芽胞胞)，而且要要考慮其在環(huán)環(huán)境中的存活活力，抗性越越強(qiáng)越危險(xiǎn)。。危險(xiǎn)度評(píng)估內(nèi)內(nèi)容2——所操作作微生物的濃濃度和濃縮樣樣品的體積根據(jù)研究?jī)?nèi)容容，病原體濃濃度決定危險(xiǎn)險(xiǎn)的程度。濃濃度越高越危危險(xiǎn)。3——適宜宿宿主(人或動(dòng)動(dòng)物)的存在在常見的人畜共共患疾病文文獻(xiàn)記載的職職業(yè)性疾病來來源人體患患病的嚴(yán)重程程度，對(duì)疾病病的抵抗力危險(xiǎn)度評(píng)估內(nèi)內(nèi)容4——從動(dòng)物物研究和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室感染報(bào)告告或臨床報(bào)告告中得到的信信息在人體數(shù)據(jù)缺缺乏時(shí)，動(dòng)物物研究數(shù)據(jù)可可對(duì)危險(xiǎn)評(píng)價(jià)價(jià)提供有用的的資料。動(dòng)物物體致病性、、傳染性和傳傳播途徑的信信息可提供有有價(jià)值的提示示。但推論從從一種動(dòng)物到到另一種動(dòng)物物傳染性時(shí)，，必須小心驗(yàn)驗(yàn)證。危險(xiǎn)度評(píng)估內(nèi)內(nèi)容5——計(jì)劃進(jìn)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)室室操作(如濃濃縮、超聲處處理、氣溶膠膠化、離心等等)實(shí)驗(yàn)室操作內(nèi)內(nèi)容與其設(shè)備備相關(guān)操作細(xì)細(xì)則是否可保保證其不泄露露，實(shí)驗(yàn)程序序和操作方法法，操作的性性質(zhì)和作用避避免操作者攝攝人吸人，，直接接種，，割破或擦傷傷，針刺，咬咬傷直接接觸觸可能性。危險(xiǎn)度評(píng)估內(nèi)內(nèi)容6——可能會(huì)會(huì)擴(kuò)大微生物物的宿主范圍圍或改變微生生物對(duì)于已知知有效治療方方案敏感性的的所有基因技技術(shù)對(duì)開展遺傳修修飾微生物方方面的工作進(jìn)進(jìn)行危險(xiǎn)度評(píng)評(píng)估時(shí)，必須須要包括對(duì)其其潛在的危害害程度、后果果的嚴(yán)重性以以及發(fā)生這種種危害的可能能性或頻率大大小，宿主的的易感性，宿宿主菌的致病病性，包括毒毒力、傳染性性、毒素生成成、宿主范范圍的變化；；受體的免疫疫程度以及免免疫系統(tǒng)的狀狀態(tài)；暴露后后果的嚴(yán)重性性；直接由插插入的外源性性基因片段所所產(chǎn)生的危害害當(dāng)插人外源源性基因后的的產(chǎn)物具有有有害生物學(xué)活活性危害性等等方面的評(píng)估估。危險(xiǎn)度評(píng)估內(nèi)內(nèi)容——當(dāng)?shù)厥欠穹窨梢赃M(jìn)行有有效的預(yù)防或或治療干預(yù)預(yù)防和治療的的有效性是應(yīng)應(yīng)該考慮的重重要因素。有有效性越低，，危險(xiǎn)性越大大，反之亦然然。試驗(yàn)室工工作人員，有有無免疫預(yù)防防措施，文獻(xiàn)獻(xiàn)記載的職職業(yè)性疾病，，工作人員的的素養(yǎng)及經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)。危險(xiǎn)度評(píng)估內(nèi)內(nèi)容危險(xiǎn)度評(píng)估時(shí)時(shí)，只有在明明確了上述信信息的基礎(chǔ)上上，才能明確確所計(jì)劃開展展的研究工作作的生物安全全水平級(jí)別，，并選擇合適適的個(gè)體防護(hù)護(hù)裝備。對(duì)于于那些所知甚甚少的樣品當(dāng)當(dāng)了解了足夠夠的信息時(shí)，，才能很好地地進(jìn)行上述危危險(xiǎn)度評(píng)估。。菌（毒）種管管理與監(jiān)督系系統(tǒng)的文件制制定為保證菌（毒毒）種管理體體系能規(guī)范化化制度化正常常運(yùn)作，制定定符合本單位位實(shí)際情況的的菌（毒）種種管理及監(jiān)督督標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)細(xì)則（SOP），是非常必要的的，該（SOP）主要內(nèi)容包括括，菌（毒））種管理與監(jiān)監(jiān)督標(biāo)準(zhǔn)操作作細(xì)總則，其其內(nèi)容包括菌菌（毒）種接接收（分離））標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)細(xì)則（SOP）；種子批制備與與質(zhì)控準(zhǔn)操作作細(xì)則（SOP）；菌（毒）種使使用、保藏、、分發(fā)標(biāo)準(zhǔn)操操作細(xì)則（SOP）；菌（毒）種銷銷毀標(biāo)準(zhǔn)操作作細(xì)則（SOP）；菌（毒）種事事故應(yīng)急處理理標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)細(xì)則（SOP）：菌（毒）種管管理監(jiān)督標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)操作細(xì)則（（SOP）。在各細(xì)則中根根據(jù)其實(shí)際內(nèi)內(nèi)容或?qū)嶒?yàn)，，制定更詳細(xì)細(xì)的各實(shí)驗(yàn)獨(dú)獨(dú)立的操作細(xì)細(xì)則，并制作作對(duì)應(yīng)的規(guī)范范化表格化的的原始記錄。。菌（毒）種管管理與監(jiān)督系系統(tǒng)的文件制制定1.菌（毒））種管理與監(jiān)監(jiān)督標(biāo)準(zhǔn)操作作細(xì)總則總則的內(nèi)容主主要為菌（毒毒）種管理與與監(jiān)督的制定定SOP指導(dǎo)思想、各各SOP形成與批準(zhǔn)程程序、主要內(nèi)內(nèi)容提要、以以及各SOP目錄、實(shí)施與與監(jiān)督部門。。2.菌（毒））種接收（分分離）標(biāo)準(zhǔn)操操作細(xì)則（SOP）菌（毒）種接接收標(biāo)準(zhǔn)操作作細(xì)則（SOP）要求內(nèi)容:接接收(外購、、贈(zèng)送)審批批與接收程序序;對(duì)菌種來來源,背景資資料的要求、、接收樣品的的檢驗(yàn)。菌（毒）種管管理與監(jiān)督系系統(tǒng)的文件制制定要求配套原始始記錄:（1）菌（毒毒）種外購(接受贈(zèng)送)申請(qǐng)表（2）菌種來來源,背景資資料登記記錄錄（3）菌（毒毒）種入庫登登記表（4）外來菌菌種傳代與檢檢驗(yàn)記錄菌（毒）種管管理與監(jiān)督系系統(tǒng)的文件制制定菌（毒）種分分離標(biāo)準(zhǔn)操作作細(xì)則（SOP）取樣程序;對(duì)對(duì)菌種來源,背景資料的的要求、樣品品的分離操作作(如分離過過程較復(fù)雜可可分寫各自獨(dú)獨(dú)立SOP)（1）樣品來源,背背景資料登記記記錄（2）菌(毒毒)種分離記記錄（3）外來菌菌種傳代與檢檢驗(yàn)記錄（4）菌（毒毒）種入庫或或處理登記表表菌（毒）種管管理與監(jiān)督系系統(tǒng)的文件制制定3.菌（毒））種種子批制制備與質(zhì)控標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)則則（SOP）菌（毒）種種種子批制備標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)則則（SOP）內(nèi)容包括原代代主代及工作作種子批制品品過程各工藝藝要求細(xì)則;批準(zhǔn)種子批批發(fā)行使用程程序,各過程程應(yīng)制定相對(duì)對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)原始始記錄.菌（毒）種管管理與監(jiān)督系系統(tǒng)的文件制制定菌（毒）種種種子批質(zhì)控標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)則則（SOP）根據(jù)各菌（毒毒）種不同特特性,制定