CD64在早產(chǎn)兒細(xì)菌性感染中的應(yīng)用

CD64在早產(chǎn)兒細(xì)菌性感染中的應(yīng)用【內(nèi)容摘要】目的：討論中性粒細(xì)胞外表標(biāo)記物cd64在早產(chǎn)兒感染中的診斷價(jià)值。方法：對(duì)新生兒科〔包含nicu〕109例患兒于流式細(xì)胞儀進(jìn)行cd64水平的測定，并與c反應(yīng)蛋白(crp)〔免疫比濁法檢測〕及il6〔雙抗體夾心elisa法檢測〕進(jìn)行比較，分早產(chǎn)兒感染組30例﹑足月兒感染組28例、早產(chǎn)兒非感染組25例和足月兒非感染組26例4組進(jìn)行分析。結(jié)果：早產(chǎn)兒感染組cd64為〔5010.95±3318.01〕分子數(shù)/細(xì)胞；足月兒感染組cd64為〔5193.07±3207.32〕分子數(shù)/細(xì)胞；早產(chǎn)兒非感染組cd64為〔2277.80±914.56〕分子數(shù)/細(xì)胞；足月兒非感染組為〔2174.34±836.00〕。早產(chǎn)兒感染組與早產(chǎn)兒非感染組、足月兒感染組與足月兒非感染組比較cd64水平差別非常顯著〔p＜0.001〕，早產(chǎn)兒感染組與足月兒感染組、早產(chǎn)兒非感染組與足月兒非感染組cd64水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別；cd64診斷早產(chǎn)兒感染的敏感度、特異度均較高〔敏感度76.7%、特異度88%〕，優(yōu)于crp〔敏感度56.7%、特異度62%〕及il6〔敏感度64.3%、特異度84%〕。結(jié)論：新生兒感染時(shí)cd64水平明顯升高，十分對(duì)早產(chǎn)兒感染診斷的敏感性和特異性均高于crp、il6，能夠作為診斷早產(chǎn)兒感染有力的實(shí)驗(yàn)室根據(jù)?！颈疚年P(guān)鍵詞語】cd64早產(chǎn)兒感染c反應(yīng)蛋白白介素6theevaluationofcd64detectionindiagnosingprematurebacterialinfectionxuqianqian,chenlingzhi,xuhaibin,zhangyu,baomanhua.departmentofpediatrics,wenzhouthesecondpeople’shospital,wenzhou325000,china［abstract］objective:toevaluatetheapplicationofanalyzingneutrophilcellsurfacemarkercd64indiagnosisofprematureinfantss:109infantsinpatientinneonataldepartment(includingnicu)wereenrolledinthestudy.cd64wasmeasuredbyfcm,whichwascomparedwithcreactiveprotein(crp)andils:therewasastatisticallysignificantdifferenceinquantitationofcd64onneutrophilcells(p0.001)amongtheinfectedprematureinfants(5010.95±3318.01molecules/cell),infectedfullterminfants(5193.07±3207.32),noninfectedprematureinfants(2277.80±914.56)aswellasfullterminfants(2174.34±836.00).thesensitivity,specificity,predictivevaluesbetweenpositiveandnegativeindividualsforcd64detectionwereveryhigh,betterthanthatforcrp,ilsion:cd64levelsaresignificantlyelevatedinnewbornsinfected,comparedwithcrp,il6assays,thesensitivityandspecificityareallhigher,particularlyforthediagnosisofinfectioninprematureinfants.itcanbeusedforlaboratorydiagnosisofneonatalinfectioneffectively.［keywords］cd64；prematureinfants；infection；crp；il6近年來，早產(chǎn)兒已成為新生兒病房的重要問題。早產(chǎn)兒感染性疾病發(fā)展快、死亡率高，而臨床癥狀表現(xiàn)為不典型性和多樣性，使得早期診治成為改善患兒預(yù)后的關(guān)鍵。但由于免疫未成熟等原因，對(duì)早產(chǎn)兒感染的早期臨床診斷仍缺乏一種可靠精確的檢測手段。為進(jìn)一步提升早產(chǎn)兒感染的早期診斷率，討論一種快速可靠的方法，我們對(duì)臨床疑似早產(chǎn)兒感染的患兒進(jìn)行cd64水平、c反應(yīng)蛋白(crp)及il6的測定，并與足月兒感染病例及早產(chǎn)兒非感染病例進(jìn)行比較分析?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1材料與方法1.1對(duì)象2004年10月～2005年10月本院新生兒科住院的早產(chǎn)兒和足月兒共109例，其中男性63例，女性46例，平均日齡10.55天(0～28天)。109例患兒最后按出院診斷分為4組：早產(chǎn)兒感染組30例，胎齡〔32.80±3.90〕周，體重〔1915±426〕g，日齡〔9.55±6.28〕；早產(chǎn)兒非感染組25例，胎齡〔33.20±2.10〕周，體重〔1967±315〕g，日齡〔8.63±5.72〕；足月兒感染組28例，胎齡〔38.87±1.72〕周，體重〔3221±521〕g，日齡〔16.23±7.82〕；足月兒非感染組26例，胎齡〔39.62±1.59〕周，體重〔3358±415〕g，日齡〔14.88±5.29〕。感染病例(均為細(xì)菌感染)包含敗血癥、感染性肺炎、化膿性腦膜腦炎、腸道感染以及尿路感染等；非感染病例包含單純早產(chǎn)兒、abo溶血病、新生兒濕肺、生理性黃疸及缺氧缺血性腦病等。敗血癥診斷參考2003年昆明會(huì)議〔新生兒敗血癥診療方案〕［1］；其他感染如新生兒肺炎、化膿性腦膜腦炎、細(xì)菌性腸炎、尿路感染等以及非感染性疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)參考第3版〔實(shí)用新生兒學(xué)〕。1.2方法患兒入院48小時(shí)內(nèi)股靜脈處采血進(jìn)行cd64﹑crp、il6和血慣例檢查，并按病情留取血培養(yǎng)、痰培養(yǎng)、臍部分泌物培養(yǎng)等。cd64的檢測方法：全血50μl+20μlcd64pe/cd45percp抗體〔美國bd公司產(chǎn)品〕混勻，暗處放置1小時(shí)后加facs溶血?jiǎng)?ml，暗處放置20分鐘上流式細(xì)胞儀〔bd公司facscalibur〕檢測。crp采取免疫比濁法(beckmancoulter公司生產(chǎn)的immage儀)，結(jié)果為定量指標(biāo)，crp≥8mg/l為陽性，crp＜8mg/l為陰性；il6采取雙抗體夾心elisa法,試劑盒為美國mr公司產(chǎn)品，臨界值為9.7pg/ml。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析cd64計(jì)量資料采取方差分析，數(shù)據(jù)處理采取spss10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件包。其他數(shù)據(jù)〔敏感度、特異度和預(yù)測值〕的統(tǒng)計(jì)處理參考醫(yī)學(xué)科研方法學(xué)［2］。2結(jié)果2.1各組cd64檢測結(jié)果見表1。早產(chǎn)兒感染組患兒cd64為〔5010.95±3318.01〕分子數(shù)/細(xì)胞；足月兒感染組cd64為〔5193.07±3207.32〕分子數(shù)/細(xì)胞；早產(chǎn)兒非感染組cd64為〔2277.80±914.56〕分子數(shù)/細(xì)胞；足月兒非感染組cd64為〔2174.34±836.00〕分子數(shù)/細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)分析示早產(chǎn)兒感染組與早產(chǎn)兒非感染組、足月兒感染組與足月兒非感染組比較差別非常顯著〔f=15.954，f=17.184，p＜0.001〕；早產(chǎn)兒感染組與足月兒感染組、早產(chǎn)兒非感染組與足月兒非感染組比較無顯著差別〔p＞0.05〕。2.2各組crp及il6檢測結(jié)果見表2。2.3cd64、crp及il6診斷新生兒感染的敏感性和特異性本組資料中以roc曲線計(jì)算得出cd64診斷新生兒感染的最佳臨界值為2587分子數(shù)/細(xì)胞。cd64、crp及il6在診斷早產(chǎn)兒感染及足月兒感染中的敏感度〔se〕、特異度〔sp〕、陽性預(yù)測值〔pv+〕和陰性預(yù)測值〔pv-〕見表3。表1cd64檢測結(jié)果〔略〕tab.1theplasmalevelsofcd64note:comparedbetweenthelevelofcd64intermswithinfectionandintermswithoutlevelofcd64inpretermswithoutinfectionandinpretermswithinfection,p0.001;comparedbetweenthelevelofcd64intermswithinfectionandinpretermswithinfection,termswithoutinfectionandpretermswithoutinfection,p0.05.表2crp〔mg/l〕和il6(pg/ml)檢測結(jié)果〔略〕tab.2theplasmalevelsofcrp(mg/l)andil6(pg/ml)表3cd64、crp及il6在診斷早產(chǎn)兒、足月兒感染敏感性和特異性的統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)〔略〕tab.3thecomparisonofsensitivityandspecificityamongcd64,crpandil63討論中性粒細(xì)胞是機(jī)體抵抗感染的重要防御細(xì)胞，在其作用機(jī)制中，它須通過細(xì)胞膜上特殊的受體〔如補(bǔ)體受體，fcγr〕與抗體或補(bǔ)體結(jié)合發(fā)揮成效。當(dāng)前發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞外表可表達(dá)3種fcγr：fcγrⅰ(cd64)、fcγrⅱ(cd32)、fcγrⅲ(cd16)。cd64是igg的fc段受體，是一個(gè)高親和力的受體。cd64能辨別免疫球蛋白的fc片段,其表達(dá)受細(xì)胞因子的調(diào)節(jié),起到了連接體液免疫和細(xì)胞免疫的橋梁作用［3］。cd64在外周血中重要分布于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及樹突細(xì)胞外表，而在中性粒細(xì)胞外表低水平表達(dá)。當(dāng)遭到細(xì)菌細(xì)胞壁的脂多糖(lps)和粒細(xì)胞集落刺激因子(gcsf)、γ干擾素(ifnγ)等因子刺激時(shí)，可使cd64在中性粒細(xì)胞外表大量表達(dá)，不僅增長受體數(shù)目，而且能提升氧化新陳代謝和脫顆粒［4］。fjaertft等［5］研究了足月兒、早產(chǎn)兒、年長兒及成人急性細(xì)菌感染的早期階段中性粒細(xì)胞cd64的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，新生兒細(xì)菌感染組明顯高于非感染組，而且早產(chǎn)兒細(xì)菌感染組中性粒細(xì)胞cd64表達(dá)的水平與足月兒、年長兒及成人之間無差別，健康的早產(chǎn)兒和足月兒中性粒細(xì)胞表達(dá)cd64明顯高于健康成人。有文獻(xiàn)報(bào)道，cd64的表達(dá)與胎齡無關(guān)，早產(chǎn)兒和足月兒非感染狀況cd64表達(dá)無差別，但在感染時(shí)cd64均可明顯增長，說明cd64的表達(dá)是新生兒，尤其是早產(chǎn)兒細(xì)菌感染的一個(gè)標(biāo)記［6］。本研究結(jié)果也顯示，早產(chǎn)兒感染組cd64水平明顯高于早產(chǎn)兒非感染組，足月兒感染組的cd64表達(dá)明顯高于足月兒非感染組。與其他感染指標(biāo)比較，cd64的敏感性和特異性均較高。ng等［7］的研究結(jié)果表示清楚，cd64有很高的敏感性(87%～97%)和特異性(88%～90%)，他們觀察到,cd64的表達(dá)水平在敗血癥發(fā)生后0～24小時(shí)均堅(jiān)持明顯升高，說明了cd64在敗血癥早期的敏感水平。而且allen等［8］以為，非感染性的炎癥反應(yīng)和病毒感染均不會(huì)引起cd64在中性粒細(xì)胞的表達(dá)增長，進(jìn)而說明，cd64的表達(dá)升高在新生兒細(xì)菌感染中具有很高的特異性。本組研究顯示cd64在診斷早產(chǎn)兒感染的敏感度為76.7%﹑特異度為88.0%、陽性預(yù)測值為88.4%、陰性預(yù)測值為75.8%，與足月兒類似，說明cd64是一種高敏感性和高特異性的細(xì)菌感染標(biāo)記物，可作為早產(chǎn)兒感染的早期檢測指標(biāo)，斷定患兒能否存在感染。crp作為感染檢測手段當(dāng)前已較廣泛應(yīng)用于臨床，對(duì)協(xié)助診斷新生兒感染有一定意義，但crp作為一種急性期時(shí)相蛋白在體內(nèi)受影響因素較多，其敏感性和特異性均較低［9］。本組資料顯示，crp診斷早產(chǎn)兒感染和足月兒感染的敏感度、特異度明顯低于cd64。il6是誘導(dǎo)b細(xì)胞分泌免疫球蛋白和t細(xì)胞激活增殖的重要細(xì)胞因子，在新生兒抗細(xì)胞感染中起主要作用。早產(chǎn)兒t細(xì)胞產(chǎn)生il6等細(xì)胞因子的能力明顯低于足月新生兒，而且il6在感染刺激后早期到達(dá)高峰，在循環(huán)中消失很快［10］。有研究顯示il6在新生兒敗血癥到達(dá)高峰濃度為3小時(shí)，在血循環(huán)中消失的時(shí)間為6小時(shí)。因而，il6的診斷價(jià)值受血標(biāo)本收集時(shí)間所限制［11］。本組資料顯示，il6診斷早產(chǎn)兒感染的敏感度、陰性預(yù)測值分別僅為56.7%和63.6%，低于足月兒感染組，而且明顯低于cd64診斷早產(chǎn)兒感染的敏感度和陰性預(yù)測值。綜上所述，crp與il6對(duì)診斷新生兒感染有一定幫助，但cd64水平的測定優(yōu)越性更明顯，尤其對(duì)早產(chǎn)兒感染診斷更有價(jià)值。所以，對(duì)入住新生兒病區(qū)的早產(chǎn)兒主張用cd64水平來判定能否存在細(xì)菌感染，以便盡早應(yīng)用抗生素，提升早產(chǎn)兒的治愈率和生存質(zhì)量?！疽韵聻閰⒖嘉墨I(xiàn)】1會(huì)兒科學(xué)分會(huì)新生兒學(xué)組.新生兒敗血癥診療方案［j］.雜志，2003；41〔12〕：897899.2梁萬年.醫(yī)學(xué)科研方法學(xué)［m］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：287297.3郝玲，李艷芝.cd64和新生兒感染［j］.國外醫(yī)學(xué)·兒科學(xué)分冊，2005；32〔3〕：176178.4okayamay,kirshaumas,metcalfedd.expressionofafunctionalhighaffinityiggreceptor,fcgammari,onhumanmastcells:upregulationbyifngamma［j］.jimmunol,2000；164(8):43324339.5fjaertoftg,hakanssonl,ewalduetal.neutrophilsfromtermandpreternnewborninfantsexpressthehighaffinityfcgammareceptorⅰ〔cd64〕duringbacterialinfections［j］.pediatrres,1999；45(6):871876.6張金萍,陳超,楊毅.新生兒感染時(shí)分子變化及臨床意義［j］.