生化實驗試卷

誠信考試沉著應(yīng)考杜絕違紀(jì)浙江大學(xué)2008–2009學(xué)年夏學(xué)期《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實驗》課程期末考試試卷開課學(xué)院：醫(yī)學(xué)院，考試形式：閉卷，允許帶___________入場考試時間：2009年6月27日,所需時間：60分鐘*理論考試占總成績60％，平時實驗成績占總成績40％。多項選擇題（每個2分，共20分）1.下列方法中哪一種不能將谷氨酸和賴氨酸分開?A．電泳B．陰離子交換層析C．陽離子交換層析D．凝膠過濾2.在什么情況下，一種蛋白質(zhì)在電泳時既不向正級移動，也不向負(fù)極移動，而停留在原點？A．發(fā)生蛋白質(zhì)變性B．電極緩沖液的pH正好與該蛋白質(zhì)的pI相同C．電極緩沖液的pH大于該蛋白質(zhì)的pID．電極緩沖液的pH小于該蛋白質(zhì)的pI3.可用于蛋白質(zhì)分子量測定的方法包括A:SDS－PAGEB:親和色譜C:排阻色譜D:透析4.分離純化中可用于物質(zhì)濃縮的方法包括A.沉淀；B.吸附C.超濾D透析.5.用于分離純化時其方法的原理與被分離物質(zhì)的分子量有關(guān)的是A.SDSB.離子交換色譜C.超濾D抽提6.影響電泳的外界因素有：A.電泳介質(zhì)的pH值B.電場強(qiáng)度C.緩沖溶液的離子強(qiáng)度D.電滲作用7.聚丙烯酰胺凝膠電泳具有下列哪些效應(yīng)：A.濃縮效應(yīng)B電荷效應(yīng)C分子篩效應(yīng)D擴(kuò)散作用8.提取核酸的方法有：A苯酚法B氯仿-異戊醇法CSDS法D核酸酶法9.血清醋酸纖薄膜電泳結(jié)果的條帶包括下列哪些蛋白：A白蛋白Bα2-球蛋白Cγ-球蛋白Dβ-球蛋白10.測定核酸含量的方法有：A定磷法B定糖法C紫外分光光度法D定碳法單選題（每個1分，共20分）紫外法定量檢測核酸選用的波長是A.260nmB.280nmC.254nmD.230nm下列不是用于蛋白質(zhì)定量測定的方法是A.福林－酚法B.考馬斯亮藍(lán)法C.定磷法D.雙縮脲法下列方法與免疫學(xué)原理沒有關(guān)系的是.A.蛋白印跡技術(shù)B.ELISAC.親和色譜D超濾考馬斯亮蘭能與蛋白質(zhì)的哪個區(qū)域相結(jié)合？A疏水區(qū)B親水區(qū)C肽鍵D羧基末端在DNA提取過程中，沉淀DNA用A無水乙醇B乙醚C氯仿D戊醇6．SDS時其遷移速率主要取決于蛋白質(zhì)的A帶電性B相對分子量C分子形狀D生物活性7．聚丙烯酰胺凝膠制備過程中使用的催化劑是ATEMEDBSDSC過硫酸銨DTris-HCl8．脂類薄層層析中使用的顯色劑是A茚三酮B考馬斯亮蘭C磷鎢酸D磷鉬酸9．離子交換層析分離混合氨基酸時，洗脫天冬氨酸用ApH5.0,0.1M檸檬酸緩沖液B0.1MNaOH溶液C2MHCl溶液DpH2.2,0.1M檸檬酸緩沖液10．凝集素的制備過程中，洗脫凝集素用A.NaCl溶液B.葡萄糖溶液C.蒸餾水D.磷酸緩沖液11.下列蛋白質(zhì)通過凝膠過濾層析柱時最先被洗脫的是A．馬肝過氧化氫酶（分子量247,500）B．肌紅蛋白（分子量16,900）C．血清清蛋白（分子量68,500）D．牛-乳球蛋白（分子量35,000）12.有一混合蛋白質(zhì)溶液，各種蛋白質(zhì)的pI分別為4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，電泳時欲使其中四種泳向正極，緩沖液的pH應(yīng)是多少A．4.0B．5.0C．6.0D．713.從組織提取液沉淀活性蛋白而又不使之變性的方法是加入A．硫酸銨B．三氯醋酸C．氯化汞D．1mol/LHCL14.一酶促反應(yīng)，1/V對1/[S]作圖得一直線，在某一抑制劑存在時，得到第二條直線，它在1/[S]軸上與第一條直線相交。這說明：A．該抑制是不可逆抑制B．該抑制屬非競爭性抑制C．S和I（抑制劑）對酶分子的同一部分都有親和力D．如增加[S]，該抑制作用可被解除判斷題（每個1分，共20分）在進(jìn)行大分子分離純化時，雜質(zhì)是含量最高的那些組分，所以要去除。吸附色譜是分離生物大分子常用到的色譜方法。抽提液中加入蔗糖、甘油、巰基乙醇等物質(zhì)是為了改變?nèi)芤旱臉O性。核酸抽提中加入SDS、TritonX-100、Tween40有利于使膜蛋白和脂肪溶解。沉淀法是將所需要的成分沉淀下來從而使其與雜質(zhì)分離。應(yīng)用密度梯度離心技術(shù)可以將粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)彼此分離。超速離心是指離心力達(dá)到100,000g的離心。冷凍及抽真空裝置是每臺離心機(jī)必須具備的。電泳法測定蛋白質(zhì)分子量是一種最準(zhǔn)確的方法。親和色譜法是一種分離效果最好的極為理想的色譜方法。用透析袋進(jìn)行脫鹽處理比用凝膠過濾法快而且樣品損失少。鹽析法最常用的鹽是硫酸銨。雙向凝膠電泳方法是進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究的最理想的技術(shù)。蛋白質(zhì)分離純化中最簡便而且專一的檢測方法是測定UV280。同時采用用SDS和凝膠過濾方法進(jìn)行蛋白質(zhì)分子量測定可以得到可靠結(jié)果。DNP和RNP都能溶于1-2M的NaCl溶液中。用260nm進(jìn)行紫外分光光度測定，可以測出DNA的含量和純度。在紙層析過程中，谷氨酸的遷移速率比丙氨酸快。從酶反應(yīng)的進(jìn)程曲線上，可以求出酶反應(yīng)初速率的時間范圍。一填空題（每格3分，共60分）1、實驗中常用的濃縮方法有：、、等方法2、核酸的含量可用和法來測定。蛋白質(zhì)提取純化中防止變性的基本防范措施是__________________及__________________。3、脂薄層層析中通常用作為支持劑，用_______________作顯色劑4、凝膠層析法基本原理是，紙層析法一般以為固定相，以為流動相5、親和層析是的一種層析術(shù)。固定相由和共價結(jié)合構(gòu)親和層析洗脫方法分和兩種方法。6、電泳是指