乙型肝炎 課件

慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎

主要內(nèi)容

乙型肝炎病毒

熒光定量PCR技術(shù)HBV-DNA與臨床

主要內(nèi)容

乙型肝炎病毒

什么是乙肝？什么是乙肝？乙肝：是指由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳染病。

臨床表現(xiàn)：以疲乏、食欲減退、厭油、肝功能異常為主，部分病例呈現(xiàn)黃疸。

乙肝：是指由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳一、形態(tài)和生物學(xué)特性：

HBV感染者血清中存在三種形式的病毒顆粒：

①大球形顆粒（Dane）：完整的病毒顆粒，含量最少

包膜：HBsAg，糖蛋白，脂質(zhì)

核心：DNA，DNA聚合酶，HBcAg

是病毒復(fù)制的主體。

②小球形顆粒：

僅HBsAg，無核酸，無感染性，含量最多

③管形顆粒：僅HBsAg，無核酸，無感染性

HBV抵抗力很強(qiáng)，在血清中30-32℃可保存6個(gè)月，-20℃可保存15年。

一、形態(tài)和生物學(xué)特性：

HBV感染者血清中存在三種形式的病電鏡下HBV顆粒HBV病毒結(jié)構(gòu)示意圖電鏡下HBV顆粒HBV病毒結(jié)構(gòu)示意圖HBV基因組結(jié)構(gòu)，1979年二、基因組結(jié)構(gòu)和編碼蛋白HBV基因組結(jié)構(gòu)，1979年二、基因組結(jié)構(gòu)和編碼蛋白根據(jù)HBV全基因序列差異≥8%或S區(qū)基因序列差異≥4%，目前HBV分為A-H八個(gè)基因型。各基因型又可分為不同亞型。我國主要是B和C。IFN治療HBV應(yīng)答率：A＞D，B＞C，A、D＞B、C基因型是否影響核苷類似物的療效尚未確定。65℃10h、煮沸10min或高壓蒸氣均可滅活HBV。根據(jù)HBV全基因序列差異≥8%或S區(qū)基因序列差異≥4%，目前三、抗原抗體系統(tǒng)HBsAg是HBV感染的主要標(biāo)志，2-12周出現(xiàn)。只有抗原性，無傳染性。目前感染，患者或病毒攜帶者。抗-HBs保護(hù)性抗體，曾感染或免疫HBeAgHBV復(fù)制及強(qiáng)感染性的指標(biāo)，僅見于HBsAg陽性患者，HBeAg陽性標(biāo)本HBVDNA檢出率90％左右，兩者有著良好的相關(guān)性抗-HBe有一定的保護(hù)作用，感染恢復(fù)期，傳染性低，病情趨于穩(wěn)定，預(yù)后良好抗-HBc非保護(hù)性抗體，曾感染，病情趨于穩(wěn)定。HBcAb-IgM提示HBV處于復(fù)制狀態(tài)HBcAg主要存在于感染的肝細(xì)胞核心，血循環(huán)中游離的極少。與HBVDNA呈正相關(guān)，HBV復(fù)制及強(qiáng)感染性的指標(biāo)。三、抗原抗體系統(tǒng)HBsAg是HBV感染的主要標(biāo)志，2-12周四、分子生物學(xué)標(biāo)記

1.HBV-DNA:主要存在于Dane顆粒中，是病毒復(fù)制和傳染性的直接標(biāo)志。

2.HBV-DNA多聚酶：位于核心部位，血清中HBV-DNA多聚酶活力是判斷病毒復(fù)制、傳染性高低的指標(biāo)之一。

流行病學(xué)流行病學(xué)1.傳染源：急、慢性乙型肝炎患者，病毒攜帶者；

2.傳播途徑：母嬰傳播、血液及血制品傳播、破損的皮膚和黏膜及性接觸傳播，日常工作或生活接觸一般不會傳染HBV；經(jīng)吸血昆蟲傳播未證實(shí)；

3.易感人群：抗HBs陰性者。嬰幼兒是獲得HBV感染的最危險(xiǎn)時(shí)期。

1.傳染源：急、慢性乙型肝炎患者，病毒攜帶者；

2.傳播途徑全球20億曾感染HBV，慢性HBV感染者3.5億我國屬HBV感染高流行區(qū)，一般人群HBsAg陽性率為9.09%，總感染率為57.6%（包括既往感染和現(xiàn)癥感染）。接種與未接種乙型肝炎疫苗人群的HBsAg陽性率分別為4.51%和9.51%。男性高于女性，有家庭聚集現(xiàn)象，嬰幼兒感染多見。全球20億曾感染HBV，慢性HBV感染者3.5億自然史自然史12/11/202215急性

HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失代償期肝硬化

5年病死率70-86%代償期肝硬化

5年病死率14-20%青少年和成人期

5-10%12-25%5年6-15%5年25-30%

嬰幼兒期12/10/202215急性

HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失發(fā)生肝硬化的高危因素包括：病毒載量高、HBeAg持續(xù)陽性、ALT水平高或反復(fù)地波動、嗜酒、合并HCV、HDV或HIV感染等。HBeAg陽性患者的肝硬化發(fā)生率要高于HBeAg陰性者HBV感染是HCC的重要相關(guān)因素。肝硬化患者發(fā)生HCC高危因素包括：男性、年齡、嗜酒、黃曲霉素、合并HCV或HDV感染、持續(xù)肝臟炎癥、持續(xù)HBeAg陽性及HBVDNA持續(xù)高水平等發(fā)生肝硬化的高危因素包括：病毒載量高、HBeAg持續(xù)陽性、A發(fā)病機(jī)制發(fā)病機(jī)制免疫清除期非活動或

低復(fù)制期再活動期不治療

但應(yīng)檢測免疫耐受

需治療

不治療

但應(yīng)檢測

需治療

HBV攜帶者

HBsAg(+)HBeAg(+)/

抗-HBe(-)

HBVDNA+++

ALT–

肝活檢-慢乙肝

HBsAg(+)HBeAg(+)/

抗-HBe(-)

HBVDNA++

ALT/AST+++

肝活檢+++HBeAg(-)慢乙肝

HBeAg(-)/

抗-HBe(+)

HBVDNA+

ALT++

肝活檢++非活動狀態(tài)

HBsAg攜帶者

HBeAg(-)/

抗-HBe(+)

HBVDNA-

ALT/AST-

肝活檢-免疫清除期非活動或

低復(fù)制期再活動期不治療

但應(yīng)檢測免疫耐受乙肝或HBsAg陽性史超過6個(gè)月，現(xiàn)HBsAg和/或HBVDNA仍陽性者，可診斷為慢性HBV感染慢性

乙型肝炎隱匿性

慢性乙肝乙型肝炎

肝硬化

攜帶者

慢性HBV攜帶(耐受)非活動性HBsAg攜帶HBeAg(+)HBeAg(-)慢性

HBV

感染代償期失代償期HBsAg(-)，HBVDNA(+)根據(jù)肝功能損害程度

分為輕度/中度/重度分為活動期/靜止期ALT正常乙肝或HBsAg陽性史超過6個(gè)月，現(xiàn)HBsAg和/或HBV（一）攜帶者大三陽或小三陽，HBVDNA為陽性或陰性，但1年內(nèi)連續(xù)隨訪3次以上

ALT和AST均在正常范圍，肝組織學(xué)檢查無異常（二）慢性乙型肝炎大三陽或小三陽，HBVDNA陽性，血清ALT持續(xù)或反復(fù)升高，或肝組織學(xué)檢查有肝炎病變

（一）攜帶者(三)隱匿性慢性乙型肝炎

-血清HBsAg陰性，但血清和(或)肝組織中HBVDNA

陽性，并有慢性乙型肝炎的臨床表現(xiàn)。患者可伴

有血清抗-HBs、抗-HBe和(或)抗-HBc陽性-另約20%隱匿性慢性乙型肝炎患者除HBVDNA陽性

外，其余HBV血清學(xué)標(biāo)志均為陰性-診斷需排除其他病毒及非病毒因素引起的肝損傷(三)隱匿性慢性乙型肝炎HBsAg和HBeAg均陽性而HBVDNA陰性？●干擾素或拉米夫定等治療后病毒復(fù)制受抑制?！馪CR所用引物相應(yīng)的DNA序列發(fā)生突變，此引物與突變DNA不能配對結(jié)合?！癫《綝NA整合于宿主肝細(xì)胞染色體而血中游離HBVDNA很少或缺乏。HBsAg和HBeAg均陽性而HBVDNA陰性？為什么要檢測HBV-DNA？為什么要檢測HBV-DNA？

“大三陽”、“小三陽”、“攜帶者”等免疫學(xué)指標(biāo)反應(yīng)的是機(jī)體的免疫反應(yīng)狀態(tài)，不能反應(yīng)體內(nèi)病毒復(fù)制水平與感染程度。血清學(xué)指標(biāo)(－)不能排除HBV感染。因此，要準(zhǔn)確知道HBV是否處于復(fù)制狀態(tài)，最準(zhǔn)確的方法還是通過檢測HBVDNA來決定。HBVDNA是HBV本身的遺傳物質(zhì)，是病毒存在和復(fù)制的最可靠、最直接的指標(biāo)，也是患者具有傳染性的標(biāo)志。

“大三陽”、“小三陽”、“攜帶者”等免疫學(xué)指標(biāo)反應(yīng)的是怎樣檢測HBV-DNA？怎樣檢測HBV-DNA？熒光定量PCR技術(shù)熒光定量PCR技術(shù)熒光定量PCR技術(shù)Polymerasechainreaction(PCR)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)。PCR技術(shù)通過兩個(gè)短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱酶（TaqDNA聚合酶）的作用，經(jīng)過高溫變性、低溫退火、適溫延伸三個(gè)步驟在3個(gè)小時(shí)內(nèi)反復(fù)循環(huán)30-40次，把特定的DNA片段擴(kuò)增1000萬倍。每個(gè)PCR體系含4種主要成分：含有待擴(kuò)增序列的DNA模板引物TaqDNA聚合酶脫氧核糖核酸三磷酸（dNTP）熒光定量PCR技術(shù)Polymerasechainreac

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)檢測整個(gè)PCR過程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對PCR終產(chǎn)物的分析，最終實(shí)現(xiàn)對未知的起始模版進(jìn)行定量分析的一種技術(shù)，是迄今對已知基因序列的核酸測定中最靈敏的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)PCR反應(yīng)過程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反應(yīng)組分變性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’PCR反應(yīng)過程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’TaqTaq5’5’重復(fù)退火延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’3’循環(huán)24個(gè)拷貝循環(huán)38個(gè)拷貝5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’TaqMan探針5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反應(yīng)體系變性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’Taql5’3’RQProbe5’3’RQTaqMan探針5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.鏈取代Taq3’QR5’5’3’3’QTaqR5’2.水解3.聚合5’3’QTaqR3’5’4.檢測熒光5’3’3’QTaqR5’l5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.鏈取代T每產(chǎn)生一條DNA鏈，就切斷一條探針每切斷一條探針，就產(chǎn)生一個(gè)熒光信號信號強(qiáng)度與結(jié)合探針的DNA分子數(shù)成正比原理圖每產(chǎn)生一條DNA鏈，就切斷一條探針原理圖血清標(biāo)本采集一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血3-5毫升，注入紅帽無菌管中室溫（22～25oC）放置30～60分鐘血標(biāo)本使用水平離心機(jī)，4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘吸取上層血清，轉(zhuǎn)移至1.5ml滅菌離心管

嚴(yán)禁使用肝素抗凝血標(biāo)本，抑制PCR反應(yīng)血清標(biāo)本采集一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血3-5毫升，注入結(jié)果分析結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)室檢查常用指標(biāo)？實(shí)驗(yàn)室檢查常用指標(biāo)？常用指標(biāo)免疫學(xué)檢查病毒學(xué)檢查肝功能檢查常用指標(biāo)免疫學(xué)檢查指標(biāo)HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc診斷結(jié)果+++大三陽，急性或慢性現(xiàn)癥感染，傳染性強(qiáng)+++小三陽，有無傳染性應(yīng)結(jié)合HBVDNA檢測結(jié)果++HBV感染恢復(fù)期，或S基因突變，++急性肝炎早期，傳染性強(qiáng)++既往感染，有無傳染性需結(jié)合HBVDNA++感染恢復(fù)期，有免疫力，無傳染性++①窗口期，抗-HBs即將出現(xiàn)；②HBV感染已過+①注射疫苗后；②遙遠(yuǎn)的過去有過HBV感染免疫學(xué)檢查-------乙肝五項(xiàng)分析指標(biāo)HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc診斷結(jié)乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA＜103copy/ml)乙肝病毒基因型檢測乙肝病毒基因型變異檢測病毒學(xué)檢查病毒學(xué)檢查肝功能檢查

-

ALT、AST：一般可反映肝細(xì)胞損傷程度，最常用-血清膽紅素(BIL)：通常與肝細(xì)胞壞死程度有關(guān)-凝血酶原時(shí)間(PT)：反映肝臟凝血因子合成功能-膽堿酯酶(ChE)：反映肝臟合成功能，可作參考-白蛋白(ALB)：反映肝臟合成功能，A/G可作參考-甲胎蛋白(AFP)：出現(xiàn)明顯升高往往提示發(fā)生HCC肝功能檢查如何治療？如何治療？目前極少能治愈！是可以治療的！病毒DNA整合于宿主肝細(xì)胞染色體能治愈嗎？能治愈嗎？乙型肝炎課件誰需要治療？不論是大三陽還是小三陽，有以下情況者均需治療：肝功能異常。有明顯的肝炎癥狀：乏力、厭食、黃疸、肝區(qū)隱痛不適等。HBVDNA＞103copy/ml)誰需要治療？抗病毒：目前尚無一種能迅速、直接殺死清除乙肝病毒的藥物，最好的抗病毒藥物療效也僅能達(dá)到50％左右。目前國際醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的治療慢性乙肝有確切療效的抗病毒藥物主要有兩大類：

干擾素：重組人α-1b干擾素、α-2a、

α-2b干擾素等。核苷類似物：拉米夫定、阿德福韋。調(diào)節(jié)免疫保肝降酶抗病毒：目前尚無一種能迅速、直接殺死清除乙肝病毒的藥物，最好乙型肝炎治療原則改善癥狀，恢復(fù)肝功能；抗病毒；抗肝纖維化，延緩肝硬化的發(fā)生；預(yù)防和監(jiān)控肝癌；無癥狀攜帶者無需抗病毒治療。乙型肝炎治療原則改善癥狀，恢復(fù)肝功能；如何預(yù)防？如何預(yù)防？疫苗預(yù)防阻斷母嬰傳播避免醫(yī)源性傳播疫苗預(yù)防乙型肝炎疫苗預(yù)防-自2005年6月，我國新生兒HBV疫苗接種完全免費(fèi)-乙肝疫苗接種對象主要是新生兒，其次為嬰幼兒

和高危人群。全程共3針，按照0、1、6個(gè)月程序-新生兒要求在出生后24hr內(nèi)接種。單用疫苗阻斷

母嬰傳播保護(hù)率87.8%，聯(lián)合HBIG保護(hù)率95-97%-接種后有抗體應(yīng)答者保護(hù)效果一般至少持續(xù)12年乙型肝炎疫苗預(yù)防傳播途徑預(yù)防：大力推廣安全注射(包括針刺的針具)，對牙科器

械、內(nèi)鏡等醫(yī)療器具應(yīng)嚴(yán)格消毒；嚴(yán)格防止醫(yī)源

性傳播；理發(fā)、刮臉、修腳、穿刺和紋身等用具

應(yīng)嚴(yán)格消毒；注意個(gè)人衛(wèi)生，不共用剃須刀和牙

具等用品；進(jìn)行正確性教育；對HBsAg陽性孕婦，

應(yīng)避免羊膜腔穿刺，并縮短分娩時(shí)間，保證胎盤

的完整性，盡量減少新生兒暴露于母血的機(jī)會傳播途徑預(yù)防：意外暴露HBV后預(yù)防-血清學(xué)檢測：立即檢測HBsAg、抗-HBs、ALT等，

并在3和6個(gè)月內(nèi)復(fù)查。-主動和被動免疫：如已接種過乙肝疫苗，且已知

抗-HBs≥10mIU/ml者，可不進(jìn)行特殊處理。如未

接種過疫苗或雖接種過疫苗但抗-HBs＜10mIU/ml

或抗-HBs水平不詳，應(yīng)立即注射HBIG200-400IU，

并同時(shí)在不同部位接種第1針乙肝疫苗20g，于1

和6個(gè)月后分別接種第2針和3針乙肝疫苗各20g。意外暴露HBV后預(yù)防對患者和攜帶者的管理

-對慢性HBV攜帶者及HBV患者，除不能獻(xiàn)血和

國家法律規(guī)定不能從事的特殊職業(yè)(如服兵役等)

以外，可照常生活、學(xué)習(xí)和工作，但要加強(qiáng)隨訪。-乙肝患者和攜帶者的傳染性，主要取決于血液中

HBVDNA水平，與血清ALT/AST或膽紅素水平無關(guān)。對患者和攜帶者的管理關(guān)于乙肝母嬰傳播？關(guān)于乙肝母嬰傳播？乙肝母嬰傳播的三種途徑：（1）宮內(nèi)傳播：是分娩以前在宮內(nèi)通過胎盤等途徑傳播，這種情況較少。（2）產(chǎn)時(shí)傳播：發(fā)生在分娩過程中，由于母親產(chǎn)道的血液、羊水和陰道分泌物中帶有乙肝病毒，會使嬰兒經(jīng)口吞入或通過破損的皮膚黏膜而受傳染，這種情況占絕大多數(shù)。（3）產(chǎn)后傳染：有可能通過哺乳或密切接觸等途徑傳播，這種傳播屬于水平傳播，比較常見。乙肝母嬰傳播的三種途徑：乙肝患者懷孕的時(shí)機(jī)及注意事項(xiàng)：乙肝患者一定要在肝功能正常、HBV-DNA陰性，維持半年以上懷孕。一旦懷孕，應(yīng)終止使用各種具有肝毒性的藥物，定期到醫(yī)院進(jìn)行孕期體檢。合理調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)，主張均衡營養(yǎng)，避免體重增長過快，形成脂肪肝或造成肝臟負(fù)擔(dān)。乙肝患者懷孕的時(shí)機(jī)及注意事項(xiàng)：HBsAg陽性孕婦分娩時(shí)應(yīng)采取的預(yù)防措施：分娩后對胎兒復(fù)蘇動作應(yīng)輕，防止損傷咽黏膜，造成感染。避免嬰兒吞下可被污染的液體。如果孕婦HBsAg陽性，伴有HBeAg者，行剖腹產(chǎn)，避免胎兒經(jīng)產(chǎn)道時(shí)吞入被污染的陰道分泌物。HBsAg陽性孕婦分娩時(shí)應(yīng)采取的預(yù)防措施：HBsAg陽性孕產(chǎn)婦兒童應(yīng)采取預(yù)防措施：乙肝表面抗原陽性孕產(chǎn)婦所生的新生兒，在出生后24小時(shí)內(nèi)注射乙肝免疫球蛋白（100國際單位），并按照國家免疫規(guī)劃要求，完成24小時(shí)內(nèi)及1月齡合6月齡兒童的三次乙肝疫苗接種。等寶寶周歲到醫(yī)院復(fù)查。HBsAg陽性孕產(chǎn)婦兒童應(yīng)采取預(yù)防措施：乙肝媽媽母乳喂養(yǎng)有何禁忌：肝功能正常、HBV-DNA陰性，孩子注射過乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗的情況才可以喂奶。但若嬰兒口腔、咽喉、食道、胃腸粘膜等處有破損、潰瘍或母親乳頭破裂者也應(yīng)該盡可能避免給孩子哺乳。乙肝媽媽母乳喂養(yǎng)有何禁忌：歡迎指正歡迎指正慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎

主要內(nèi)容

乙型肝炎病毒

熒光定量PCR技術(shù)HBV-DNA與臨床

主要內(nèi)容

乙型肝炎病毒

什么是乙肝？什么是乙肝？乙肝：是指由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳染病。

臨床表現(xiàn)：以疲乏、食欲減退、厭油、肝功能異常為主，部分病例呈現(xiàn)黃疸。

乙肝：是指由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳一、形態(tài)和生物學(xué)特性：

HBV感染者血清中存在三種形式的病毒顆粒：

①大球形顆粒（Dane）：完整的病毒顆粒，含量最少

包膜：HBsAg，糖蛋白，脂質(zhì)

核心：DNA，DNA聚合酶，HBcAg

是病毒復(fù)制的主體。

②小球形顆粒：

僅HBsAg，無核酸，無感染性，含量最多

③管形顆粒：僅HBsAg，無核酸，無感染性

HBV抵抗力很強(qiáng)，在血清中30-32℃可保存6個(gè)月，-20℃可保存15年。

一、形態(tài)和生物學(xué)特性：

HBV感染者血清中存在三種形式的病電鏡下HBV顆粒HBV病毒結(jié)構(gòu)示意圖電鏡下HBV顆粒HBV病毒結(jié)構(gòu)示意圖HBV基因組結(jié)構(gòu)，1979年二、基因組結(jié)構(gòu)和編碼蛋白HBV基因組結(jié)構(gòu)，1979年二、基因組結(jié)構(gòu)和編碼蛋白根據(jù)HBV全基因序列差異≥8%或S區(qū)基因序列差異≥4%，目前HBV分為A-H八個(gè)基因型。各基因型又可分為不同亞型。我國主要是B和C。IFN治療HBV應(yīng)答率：A＞D，B＞C，A、D＞B、C基因型是否影響核苷類似物的療效尚未確定。65℃10h、煮沸10min或高壓蒸氣均可滅活HBV。根據(jù)HBV全基因序列差異≥8%或S區(qū)基因序列差異≥4%，目前三、抗原抗體系統(tǒng)HBsAg是HBV感染的主要標(biāo)志，2-12周出現(xiàn)。只有抗原性，無傳染性。目前感染，患者或病毒攜帶者?？?HBs保護(hù)性抗體，曾感染或免疫HBeAgHBV復(fù)制及強(qiáng)感染性的指標(biāo)，僅見于HBsAg陽性患者，HBeAg陽性標(biāo)本HBVDNA檢出率90％左右，兩者有著良好的相關(guān)性抗-HBe有一定的保護(hù)作用，感染恢復(fù)期，傳染性低，病情趨于穩(wěn)定，預(yù)后良好抗-HBc非保護(hù)性抗體，曾感染，病情趨于穩(wěn)定。HBcAb-IgM提示HBV處于復(fù)制狀態(tài)HBcAg主要存在于感染的肝細(xì)胞核心，血循環(huán)中游離的極少。與HBVDNA呈正相關(guān)，HBV復(fù)制及強(qiáng)感染性的指標(biāo)。三、抗原抗體系統(tǒng)HBsAg是HBV感染的主要標(biāo)志，2-12周四、分子生物學(xué)標(biāo)記

1.HBV-DNA:主要存在于Dane顆粒中，是病毒復(fù)制和傳染性的直接標(biāo)志。

2.HBV-DNA多聚酶：位于核心部位，血清中HBV-DNA多聚酶活力是判斷病毒復(fù)制、傳染性高低的指標(biāo)之一。

流行病學(xué)流行病學(xué)1.傳染源：急、慢性乙型肝炎患者，病毒攜帶者；

2.傳播途徑：母嬰傳播、血液及血制品傳播、破損的皮膚和黏膜及性接觸傳播，日常工作或生活接觸一般不會傳染HBV；經(jīng)吸血昆蟲傳播未證實(shí)；

3.易感人群：抗HBs陰性者。嬰幼兒是獲得HBV感染的最危險(xiǎn)時(shí)期。

1.傳染源：急、慢性乙型肝炎患者，病毒攜帶者；

2.傳播途徑全球20億曾感染HBV，慢性HBV感染者3.5億我國屬HBV感染高流行區(qū)，一般人群HBsAg陽性率為9.09%，總感染率為57.6%（包括既往感染和現(xiàn)癥感染）。接種與未接種乙型肝炎疫苗人群的HBsAg陽性率分別為4.51%和9.51%。男性高于女性，有家庭聚集現(xiàn)象，嬰幼兒感染多見。全球20億曾感染HBV，慢性HBV感染者3.5億自然史自然史12/11/202275急性

HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失代償期肝硬化

5年病死率70-86%代償期肝硬化

5年病死率14-20%青少年和成人期

5-10%12-25%5年6-15%5年25-30%

嬰幼兒期12/10/202215急性

HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失發(fā)生肝硬化的高危因素包括：病毒載量高、HBeAg持續(xù)陽性、ALT水平高或反復(fù)地波動、嗜酒、合并HCV、HDV或HIV感染等。HBeAg陽性患者的肝硬化發(fā)生率要高于HBeAg陰性者HBV感染是HCC的重要相關(guān)因素。肝硬化患者發(fā)生HCC高危因素包括：男性、年齡、嗜酒、黃曲霉素、合并HCV或HDV感染、持續(xù)肝臟炎癥、持續(xù)HBeAg陽性及HBVDNA持續(xù)高水平等發(fā)生肝硬化的高危因素包括：病毒載量高、HBeAg持續(xù)陽性、A發(fā)病機(jī)制發(fā)病機(jī)制免疫清除期非活動或

低復(fù)制期再活動期不治療

但應(yīng)檢測免疫耐受

需治療

不治療

但應(yīng)檢測

需治療

HBV攜帶者

HBsAg(+)HBeAg(+)/

抗-HBe(-)

HBVDNA+++

ALT–

肝活檢-慢乙肝

HBsAg(+)HBeAg(+)/

抗-HBe(-)

HBVDNA++

ALT/AST+++

肝活檢+++HBeAg(-)慢乙肝

HBeAg(-)/

抗-HBe(+)

HBVDNA+

ALT++

肝活檢++非活動狀態(tài)

HBsAg攜帶者

HBeAg(-)/

抗-HBe(+)

HBVDNA-

ALT/AST-

肝活檢-免疫清除期非活動或

低復(fù)制期再活動期不治療

但應(yīng)檢測免疫耐受乙肝或HBsAg陽性史超過6個(gè)月，現(xiàn)HBsAg和/或HBVDNA仍陽性者，可診斷為慢性HBV感染慢性

乙型肝炎隱匿性

慢性乙肝乙型肝炎

肝硬化

攜帶者

慢性HBV攜帶(耐受)非活動性HBsAg攜帶HBeAg(+)HBeAg(-)慢性

HBV

感染代償期失代償期HBsAg(-)，HBVDNA(+)根據(jù)肝功能損害程度

分為輕度/中度/重度分為活動期/靜止期ALT正常乙肝或HBsAg陽性史超過6個(gè)月，現(xiàn)HBsAg和/或HBV（一）攜帶者大三陽或小三陽，HBVDNA為陽性或陰性，但1年內(nèi)連續(xù)隨訪3次以上

ALT和AST均在正常范圍，肝組織學(xué)檢查無異常（二）慢性乙型肝炎大三陽或小三陽，HBVDNA陽性，血清ALT持續(xù)或反復(fù)升高，或肝組織學(xué)檢查有肝炎病變

（一）攜帶者(三)隱匿性慢性乙型肝炎

-血清HBsAg陰性，但血清和(或)肝組織中HBVDNA

陽性，并有慢性乙型肝炎的臨床表現(xiàn)?；颊呖砂?/p>

有血清抗-HBs、抗-HBe和(或)抗-HBc陽性-另約20%隱匿性慢性乙型肝炎患者除HBVDNA陽性

外，其余HBV血清學(xué)標(biāo)志均為陰性-診斷需排除其他病毒及非病毒因素引起的肝損傷(三)隱匿性慢性乙型肝炎HBsAg和HBeAg均陽性而HBVDNA陰性？●干擾素或拉米夫定等治療后病毒復(fù)制受抑制?！馪CR所用引物相應(yīng)的DNA序列發(fā)生突變，此引物與突變DNA不能配對結(jié)合?！癫《綝NA整合于宿主肝細(xì)胞染色體而血中游離HBVDNA很少或缺乏。HBsAg和HBeAg均陽性而HBVDNA陰性？為什么要檢測HBV-DNA？為什么要檢測HBV-DNA？

“大三陽”、“小三陽”、“攜帶者”等免疫學(xué)指標(biāo)反應(yīng)的是機(jī)體的免疫反應(yīng)狀態(tài)，不能反應(yīng)體內(nèi)病毒復(fù)制水平與感染程度。血清學(xué)指標(biāo)(－)不能排除HBV感染。因此，要準(zhǔn)確知道HBV是否處于復(fù)制狀態(tài)，最準(zhǔn)確的方法還是通過檢測HBVDNA來決定。HBVDNA是HBV本身的遺傳物質(zhì)，是病毒存在和復(fù)制的最可靠、最直接的指標(biāo)，也是患者具有傳染性的標(biāo)志。

“大三陽”、“小三陽”、“攜帶者”等免疫學(xué)指標(biāo)反應(yīng)的是怎樣檢測HBV-DNA？怎樣檢測HBV-DNA？熒光定量PCR技術(shù)熒光定量PCR技術(shù)熒光定量PCR技術(shù)Polymerasechainreaction(PCR)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)。PCR技術(shù)通過兩個(gè)短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱酶（TaqDNA聚合酶）的作用，經(jīng)過高溫變性、低溫退火、適溫延伸三個(gè)步驟在3個(gè)小時(shí)內(nèi)反復(fù)循環(huán)30-40次，把特定的DNA片段擴(kuò)增1000萬倍。每個(gè)PCR體系含4種主要成分：含有待擴(kuò)增序列的DNA模板引物TaqDNA聚合酶脫氧核糖核酸三磷酸（dNTP）熒光定量PCR技術(shù)Polymerasechainreac

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)檢測整個(gè)PCR過程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對PCR終產(chǎn)物的分析，最終實(shí)現(xiàn)對未知的起始模版進(jìn)行定量分析的一種技術(shù)，是迄今對已知基因序列的核酸測定中最靈敏的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)PCR反應(yīng)過程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反應(yīng)組分變性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’PCR反應(yīng)過程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’TaqTaq5’5’重復(fù)退火延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’3’循環(huán)24個(gè)拷貝循環(huán)38個(gè)拷貝5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’TaqMan探針5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反應(yīng)體系變性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’Taql5’3’RQProbe5’3’RQTaqMan探針5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.鏈取代Taq3’QR5’5’3’3’QTaqR5’2.水解3.聚合5’3’QTaqR3’5’4.檢測熒光5’3’3’QTaqR5’l5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.鏈取代T每產(chǎn)生一條DNA鏈，就切斷一條探針每切斷一條探針，就產(chǎn)生一個(gè)熒光信號信號強(qiáng)度與結(jié)合探針的DNA分子數(shù)成正比原理圖每產(chǎn)生一條DNA鏈，就切斷一條探針原理圖血清標(biāo)本采集一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血3-5毫升，注入紅帽無菌管中室溫（22～25oC）放置30～60分鐘血標(biāo)本使用水平離心機(jī)，4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘吸取上層血清，轉(zhuǎn)移至1.5ml滅菌離心管

嚴(yán)禁使用肝素抗凝血標(biāo)本，抑制PCR反應(yīng)血清標(biāo)本采集一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血3-5毫升，注入結(jié)果分析結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)室檢查常用指標(biāo)？實(shí)驗(yàn)室檢查常用指標(biāo)？常用指標(biāo)免疫學(xué)檢查病毒學(xué)檢查肝功能檢查常用指標(biāo)免疫學(xué)檢查指標(biāo)HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc診斷結(jié)果+++大三陽，急性或慢性現(xiàn)癥感染，傳染性強(qiáng)+++小三陽，有無傳染性應(yīng)結(jié)合HBVDNA檢測結(jié)果++HBV感染恢復(fù)期，或S基因突變，++急性肝炎早期，傳染性強(qiáng)++既往感染，有無傳染性需結(jié)合HBVDNA++感染恢復(fù)期，有免疫力，無傳染性++①窗口期，抗-HBs即將出現(xiàn)；②HBV感染已過+①注射疫苗后；②遙遠(yuǎn)的過去有過HBV感染免疫學(xué)檢查-------乙肝五項(xiàng)分析指標(biāo)HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc診斷結(jié)乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA＜103copy/ml)乙肝病毒基因型檢測乙肝病毒基因型變異檢測病毒學(xué)檢查病毒學(xué)檢查肝功能檢查

-

ALT、AST：一般可反映肝細(xì)胞損傷程度，最常用-血清膽紅素(BIL)：通常與肝細(xì)胞壞死程度有關(guān)-凝血酶原時(shí)間(PT)：反映肝臟凝血因子合成功能-膽堿酯酶(ChE)：反映肝臟合成功能，可作參考-白蛋白(ALB)：反映肝臟合成功能，A/G可作參考-甲胎蛋白(AFP)：出現(xiàn)明顯升高往往提示發(fā)生HCC肝功能檢查如何治療？如何治療？目前極少能治愈！是可以治療的！病毒DNA整合于宿主肝細(xì)胞染色體能治愈嗎？能治愈嗎？乙型肝炎課件誰需要治療？不論是大三陽還是小三陽，有以下情況者均需治療：肝功能異常。有明顯的肝炎癥狀：乏力、厭食、黃疸、肝區(qū)隱痛不適等。HBVDNA＞103copy/ml)誰需要治療？抗病毒：目前尚無一種能迅速、直接殺死清除乙肝病毒的藥物，最好的抗病毒藥物療效也僅能達(dá)到50％左右。目前國際醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的治療慢性乙肝有確切療效的抗病毒藥物主要有兩大類：

干擾素：重組人α-1b干擾素、α-2a、

α-2b干擾素等。核苷類似物：拉米夫定、阿德福韋。調(diào)節(jié)免疫保肝降酶抗病毒：目前尚無一種能迅速、直接殺死清除乙肝病毒的藥物，最好乙型肝炎治療原則改善癥狀，恢復(fù)肝功能；抗病毒；抗肝纖維化，延緩肝硬化的發(fā)生；預(yù)防和監(jiān)控肝癌；無癥狀攜帶者無需抗病毒治療。乙型肝炎治療原則改善癥狀，恢復(fù)肝功能；如何預(yù)防？如何預(yù)